TTC在乳及乳制品菌落总数检测中的应用

检测乳及乳制品菌落总数,为达到菌落在培养基中清晰可辨,在平板计数琼脂培养基中添加2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)。以灭菌乳、发酵乳、冰淇淋为样品基质,分别加入适当菌含量的大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、枯草芽胞杆菌工作菌悬液,制备适当浓度的TTC平板计数琼脂,同时以不添加TTC的平板计数琼脂作为对照,对同一样品进行菌落计数并同国标方法结果进行对比。TTC平板计数琼脂终浓度在0.001%~0.002%时能够使菌落显色,且与不添加TTC的对照组对比结果一致。在检测成分复杂的乳及乳制品样品时添加适宜浓度的TTC,有助于菌落的辨认,能够提高检验人员菌落计数的准确性,可用于检测乳及乳制品中菌落总数。     

护手霜中菌落总数测定用培养基的探讨

检测化妆品菌落总数时,为使菌落在培养基中清晰可辨,允许在卵磷脂、吐温80一营养琼脂培养基中添加2,3,5-三苯基氯化四氮唑(以下简称TTC)。文章以护手霜为样品基质,分别加入适当菌含量的大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、酵母工作菌悬液,制备5mg/100mL浓度的TTC卵磷脂、吐温80-营养琼脂,同时以不添加TTC卵磷脂、吐温80一营养琼脂平板进行验证,以营养琼脂培养基作为对照,对菌落计数结果进行对比。结论:添加了5mg/100mLTTC的培养基用于化妆品菌落总数检测时对G+有明显的抑制作用,建议在日常检测过程中需慎重选择。     

3种不同培养基和1种测试片检测水溶性化妆品中菌落总数的结果分析

目的使用t检验法分析3种不同培养基和1种测试片检测水溶性化妆品中菌落总数结果。方法参照《化妆品安全技术规范》(2015年版),使用卵磷脂吐温80营养琼脂、TTC营养琼脂、平板计数琼脂方法进行样品菌落总数检测,然后使用Petrifilm TM菌落测试片检测样品。运用配对t检验法评价4种不同方法对水溶性化妆品中菌落总数计数结果一致性的影响。结果在10~2、10~3 CFU/m L 2种不同浓度,平板计数琼脂法结果波动性最大,无法抑制菌落蔓延,而TTC营养琼脂和菌落测试片相对卵磷脂吐温80营养琼脂,具有抑制菌落蔓延生长、提高计数结果准确性的作用。结论在一定浓度下,可根据实际情况来选择相应培养基检测水溶性化妆品中菌落总数以提高检测效率和质量。     

TP、CAP与TTC对食品微生物菌落总数的测定效果

目的:探析TP、CAP与TTC对食品微生物菌落总数的测定效果。方法:选取2018年4—7月质量技术监督局所采集的110份食品样品作为研究对象,对所有食品样品分别采取测试纸片法(TP)、计数琼脂平板法(CAP)和琼脂倾注平板法(TTC)进行食品微生物菌落总数的测定,比较3种不同检测方法下菌落总数超标样品的检出率。结果:3组不同检测方法检出总菌落数相比较,差异具有统计学意义(P 0.05);其中TCC法检出总菌落数显著高于TP法和CAP法,差异也具有统计学意义(P 0.05)。3种不同检测方法的检出超比率相比较,差异具有统计学意义(P 0.05);其中TCC法的检出超标率显著高于TP法和CAP法,差异也具有统计学意义(P 0.05)。而3种不同检测方法的检出大肠菌落和霉菌的菌落数和检出超比率相比较,差异均具有统计学意义(P 0.05);而TCC法较其他两项指标最高,差异也具有统计学意义(P 0.05)。结论:TP、CAP与TTC 3种技术均能够对食品微生物菌落总数进行测定,其中以TTC技术的检出率更为明显。     

包装内O_2对冷却肉微生物生长的影响

研究了气调包装内不同初始氧浓度对冷却肉微生物生长的影响。来自冷却猪肉的混合微生物群接种于液体培养基中,经不同O2浓度的无CO2气调包装后于3℃下贮藏,测定其中假单胞菌属、肠杆菌科及乳酸菌的生长变化,同时测定样品中菌落总数的变化规律。采用Baranyi模型拟合微生物生长变化数据得到相关动力学参数。结果表明:包装内初始O2浓度在11.0%～79.0%范围内变化时,3种特征微生物生长及菌落总数的变化均不受影响;0.3%～11.0%范围内,初始氧浓度的降低可不同程度上抑制假单胞菌属、肠杆菌科及乳酸菌的生长,且浓度越低,抑制作用越强;同时,低氧浓度也能有效抑制混合菌群菌落总数增长。     

肉品中菌落总数和大肠菌群快速检测试纸片的研究

对肉品中菌落总数和大肠菌群快速检测试纸片进行了研究.选择中速定性滤纸为材料,分别浸入经不同特殊处理(不同浓度的TTC、琼脂、NaCl)的培养基中,40℃下烘干制得试纸片;将所制得的菌悬液涂布于成份不同的试纸片上,于32℃,培养20h(试纸片法),或涂布于平板计数琼脂上,于32℃,培养48h(国标法),然后计数,将二者得到的数据进行比较.结果表明:试纸片法与国标法具有很高的相似性.在100ml培养基中,TTC的浓度为0.02‰时试纸片的显色情况最好,生成的红色菌落数目最多.菌落生长受琼脂浓度的影响,当琼脂的浓度高于或低于0.15%时,细菌生长速度逐渐减慢.NaCl的浓度在0.4%时菌落生长呈现最好势态.     

红四氮唑在海产品菌落总数检验中的初步研究

以红四氮唑作为细菌生长的指示剂,以吞拿鱼为基质,分别对大肠埃希氏菌,金黄色葡萄球菌以及两者的混合菌液进行检测,对TTC是否可以应用于菌落总数的检测进行初步研究。试验结果表明,TTC浓度从0.5mg/100m L-4mg/100m L的四组数据分别与对照组数据的总体均值在95%置信度条件下并无显著性差异。在对样品中含有大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌进行菌落总数检验的初步研究中发现,可以在PCA琼脂中加入低浓度TTC,使细菌菌落着色,能够在一定程度上提高检测结果的准确度,并提高检测效率。     

活性乳酸菌饮料污染菌总数检测方法

在培养基中添加无菌TTC(三苯基四氮唑),最终质量浓度为2.5mg/L,使菌落变红,方便观察计数.发现使用营养琼脂倾注法检验,至10-4稀释度才能消除样品中营养成分的干扰;而采用滤膜法,能有效消除饮料中营养成分的干扰,可以准确、灵敏地检验活性乳酸菌饮料中污染菌数,检测下限达到10mL-1.整个货架期,蜡样芽孢杆菌、大肠埃希氏菌、沙门氏菌等污染菌在活性乳酸菌饮料中可以存活,建立准确简便的活性乳酸菌饮料菌落总数检测方法非常必要.     

食品微生物检验菌落总数测定方法的效果分析

目的:分析研究食品微生物检验菌落总数测定方法的测定效果。方法:选取本疾控中心接收的220份食品样品,对其采取3种方法进行检测,包括平板菌落计数法、TCT培养基法以及菌落总数测定法,对其检验结果进行对比分析。结果:平板菌落计数法的不合格率为9.1%,菌落总数测定法的不合格率为8.2%,TCT培养基法的不合格率为10%,3种检测方法结果之间的差异不具有统计学意义(P0.05)。结论:食品微生物检验采取平板菌落计数法、TCT培养基法以及菌落总数测定法这3种方法均可以取得相对比较高的准确性,可以按照具体情况选择适宜的检验方法。     

茯砖茶中优势微生物在不同培养基的差异性比较

为探究茯砖茶优势微生物在不同适宜生长培养基之间的差异,采用14种不同培养基比较黑茶优势微生物的表面培养特征.针对一种黑茶样品,采用混合培养法定期观察不同时间段优势菌的生长表征.即通过观察记录在不同时期该茶叶中微生物在不同培养基上的分离特征,包括菌落色泽、质地、表面形态及边缘情况等,来比较不同培养基分离“金花”菌的差异性.结果表明,几乎在所选分离培养基上均能用肉眼看到黑茶的优势菌为“金花”菌及其生长状况,但差异性明显.这种差异性主要体现在其出现在各培养基上生长速度有快慢,菌丝体颜色不同,其分泌的色素差异较大.该研究结果表示出冠突散囊菌在不同培养基上的培养特征,为研究者更快地分离出该茶叶中“金花”菌提供了借鉴.     

副溶血性弧菌鉴定能力验证样品的制备

目的 研制适用于副溶血性弧菌(Vibrio Parahaemolyticus,VP)能力验证(PT)项目的VP菌及干扰菌的冷冻干燥样品,建立有效的样品制备与评估流程.方法 通过不同比例混匀的VP和干扰菌拟态弧菌(Vibrio minicus,VM)经冻干后在鉴定培养基上菌落生长优势比,确定制备PT样品的混合菌VP和VM的浓度比例;通过系统抽样和鉴定以评估样品的均一性;通过观察样品在180 d保存期内菌量的变化情况以评估样品的稳定性;根据188间检测实验室反馈的鏊定结果以评估和计算样品的实际合格率.结果 选择5 000:1比例制备的VP和VM混合PT样品能在鉴定培养基有效分离两种菌落;抽检的40份样品均能有效鉴定,显示PT样品具有较好的一致性;通过保存温度和时间的稳定性实验显示,PT样品在36℃下能稳定保存5d,冻干后PT样品于4℃保存180 d后VP菌仍能检出;188家参与实验室检测结果显示,PT样品合格率为97.3％.结论 本研究制备的冻干PT样品及实验流程控制适用于副溶血性弧菌及类似的微生物鉴定能力验证项目.     

一种基于口含烟特性的菌落总数检测方法

目的:为了评价口含烟的细菌污染程度和卫生质量,开发一种口含烟菌落总数的定量检测方法。方法:将口含烟样品与灭菌DE肉汤进行20倍稀释,振荡1 h充分混匀后形成样品液,将口含烟样品液制作成5个不同浓度的10倍递增的样品稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1 mL样品稀释液置于无菌平皿,与营养琼脂培养基充分混合,在(36±1)℃培养箱中培养(48±2)h后取出,对每个平皿中形成的菌落个数进行观察并记录。结果:在样液稀释倍数为20倍、振荡时间为1 h的条件下,回收率为84.1%±5.0%,符合菌落总数检测方法要求,方法可行有效。结论:建立的口含烟菌落总数指标检测方法的前处理操作快速简便、检测灵敏度高,适用于口含烟的微生物检测。     

平板计数法与纸片法检测食品微生物菌落总数的比较分析

食品污染的微生物主要是细菌,通过对食品微生物菌落总数进行检测,能够掌握食品受污染程度。而平板计数法与纸片法均能够对食品微生物菌落总数进行检测,对二者进行比较分析,能够为菌落计数标准方法的调整提供思路。一、实验方法比较准备平板计数琼脂培养基和菌落总数测试片,并准备饼干、蛋糕以及两份质控样品。具体实验如下:1.平板计数法。(1)培养基的配制。     

菌落总数测试卡用凝胶培养基和显色剂的优化

筛选适宜的冷水溶解凝胶,优化凝胶培养基成分和显色剂浓度,制备菌落总数测试卡并与倾注培养法进行菌落总数检测比较。结果显示:卡拉胶和CMC以2∶1的质量比混合、复合凝胶粉和培养基粉以2∶1的质量比混合、TTC实际浓度为0.025mg/mL时,制备的菌落总数测试卡具有较好的检测效果,与倾注法比较无显著差异。说明该方案优化的凝胶与显色剂配方可用于制备菌落总数测试卡。     

国产与进口两种商品化NBB培养基检测啤酒有害菌的效果比较

目的:比较国产和进口NBB培养基对啤酒有害菌的检测效果。方法:将干酪乳杆菌、短乳杆菌、四联球菌、戊糖片球菌、乳酸乳球菌乳脂亚种、植物乳杆菌植物亚种6株乳酸菌接种到NBB-B和NBB-A培养基中,28℃厌氧培养24～72 h,测定OD值,观察培养基变色、菌落生长状态等。同时,用不同浓度麦芽啤酒配制NBB培养基,确定配制培养基用啤酒的最适麦芽度。结果:6株乳酸菌在国产和进口NBB-B培养基中灵敏度和指示特征无明显差异。戊糖片球菌在国产NBB-A培养基培养48 h变色情况略差于进口NBB-A,培养72 h后,与进口NBB-A培养基无差异。通过不同麦芽度比对试验,采用10°P啤酒配制的NBB培养基菌株生长情况最好。结论:国产与进口NBB培养基在灵敏度、指示能力、菌落生长等方面无明显差异,国产NBB培养基可用于国内啤酒生产企业检测啤酒有害菌。     

药品微生物限度检查验证方法在保健品中的应用研究

目的探讨将药品微生物限度验证方法用于保健品的微生物学检查。方法参照中国药典2005年版微生物限度检查方法中常规法、培养基稀释法、薄膜过滤法验证。结果菌落计数项目检查,试验菌回收率:维生素E胶囊上述各方法均达到70%以上;芦荟胶囊培养基稀释法达到70%;大蒜素薄膜过滤法达到70%。控制菌项目检查:检出阳性对照菌,未检出阴性对照菌。结论根据样品的抑菌性,通过方法学验证选择合适的检验方法。     

双层平板直接定性定量法检测海产品中副溶血性弧菌

目的:建立一种直接定量定性检测海产品中副溶血性弧菌的方法。方法:参照国标菌落计数方法,筛选具备计数和显示副溶血性弧菌典型菌落颜色功能的培养基,将人工染菌样品分别置于50、4和-18℃温度下并分别进行测试。结果:在NaCl NA双层平板上副溶血性弧菌菌落呈淡紫色,在人工染菌样品实验中与NaCl NA平板计数无显著差异;NaCl NA双层平板直接定量检测4℃冷藏处理和-18℃冷冻的样品中副溶血性弧菌浓度分别是对照组的68.9%和21.7%。结论:NaCl NA双层平板法具备操作简便、检验周期短、结果稳定、灵敏度高等特点,适合应用于-18~50℃温度环境下放置的海产品中副溶血性弧菌直接定性定量检测,能如实反映样品受污染的情况。     

实时荧光PCR检测熟肉制品中单核细胞增生李斯特氏菌的结果分析与探讨

目的:对实时荧光PCR检测单核细胞增生李斯特氏菌假阳性结果的原因分析探讨。方法:对假阳性的样本进行传统培养法鉴定分析,将鉴定的菌落进行实时荧光PCR检测,同时对样本基质的影响和培养基本底的影响进行实时荧光PCR检测。结果:样本中的可疑菌落、样本的基质、培养基本底对实时荧光PCR检测结果均无假阳性影响。结论:实时荧光PCR检测熟肉制品中单核细胞增生李斯特氏菌的假阳性主要原因可能是样本中存在死亡目的菌基因造成的干扰。     

药品微生物限度检查验证方法在保健品中的应用研究

目的 探讨将药品微生物限度验证方法用于保健品的微生物学检查.方法 参照中国药典2005年版微生物限度检查方法中常规法、培养基稀释法、薄膜过滤法验证.结果 菌落计数项目检查,试验菌回收率:维生素E胶囊上述各方法均达到70%以上;芦荟胶囊培养基稀释法达到70%;大蒜素薄膜过滤法达到70%.控制菌项目检查:检出阳性对照菌,未检出阴性对照菌.结论 根据样品的抑菌性,通过方法学验证选择合适的检验方法.     

肉枣加工过程中细菌群落消长规律

目的:确定导致样品胀袋的关键控制点,加强肉枣加工过程中微生物污染防控。方法:采用微生物传统培养法结合高通量测序手段分析肉枣生产全过程中不同加工工序样品及胀袋样品的微生物变化情况。结果:整体来看,原料中菌落总数较低,其中鸡皮中菌落总数最高达9.10×10⁴ CFU/g,蒸煮后菌落总数下降至30 CFU/g,但真空包装后菌落总数显著上升,说明真空包装工序存在较大污染风险。胀袋样品中微生物增殖明显,菌落总数为1.03×10⁶～3.30×10⁶ CFU/g。肉枣原料中的优势菌属为不动杆菌属(Acinetobacter)、嗜冷杆菌属(Psychrobacter)和假单胞菌属(Pseudomonas)。加工过程中样品的主导菌属为葡萄球菌属(Staphylococcus),灭菌后其相对丰度降至0.02%。而胀袋样品中均以枝芽孢菌属(Virgibacillus)为主,平均相对丰度为99.37%;该属在灌肠工序开始出现,且耐热性较强,灭菌后其相对丰度增加。结论:灌肠和包装工序可能为肉枣加工过程中的关键污染点。