三重四级杆串联质谱法测定乳粉类产品中 5种核苷酸的含量

目的建立超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法测定乳粉类产品中5种核苷酸,包括胞嘧啶核苷酸(cytidine monophosphate,CMP)、尿嘧啶核苷酸(uridine monophosphate,UMP)、腺嘌呤核苷酸(adenosine monophosphate,AMP)、鸟嘌呤核苷酸(guanosinemonophosphate,GMP)、次黄嘌呤核苷酸(inosinemonophosphate,IMP)含量的分析方法。方法样品经温水溶解后,经1%(V:V)甲酸沉淀蛋白离心后,分别通过固相萃取SPE法和超滤离心法有效净化其他干扰成分,从而进行前处理方法评价;采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3(2.1mm×50 mm,1.8μm)为分析柱,0.1%(V:V)甲酸水溶液和乙腈作为流动相,等度洗脱分离。质谱采用正离子模式,多反应监测模式(MRM)进行检测,对纯水配制标准溶液和阴性基质溶液配制标准溶液进行比较,外标法定量分析。结果 5种核苷酸在4.5 min内达到基线分离,AMP、IMP和GMP在10~1000.0 ng/mL浓度范围内线性关系良好,CMP和UMP分别在25~1000 ng/mL和100~1000 ng/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数均在0.9990以上,方法检出限分别为UMP 5 mg/kg、CMP 1 mg/kg、AMP0.5 mg/kg、IMP 0.5 mg/kg、GMP 0.1 mg/kg。在10.0、50.0、100.0mg/kg加标水平下的超滤离心法的平均回收率在73.6%~110.9%之间,相对标准偏差(RSD)为3.56%~15.89%;SPE法的平均回收率在86.4%~109.5%之间,相对标准偏差(RSD)为2.32%~14.45%。结论该方法灵敏度高,可以快速准确鉴别并定量乳粉产品中的核苷酸。     

超高效液相色谱法测定婴幼儿配方奶粉中5种核苷酸

建立并优化了超高效液相色谱检测婴幼儿配方奶粉中5种核苷酸(尿苷酸(UMP)、腺苷酸(AMP)、肌苷酸(IMP)、鸟苷酸(GMP)、胞苷酸(CMP))的方法。样品用水提取后,经乙酸沉淀蛋白质和Oasis HLB固相萃取柱净化,采用Waters BEH Amide(1.7μm,2.1×100 mm)色谱柱分离,以乙腈、10 mmol/L磷酸二氢钠溶液和0.1%(v/v)磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,紫外检测器(波长为254 nm)检测。标准曲线相关系数为0.9995～0.9999;回收率为97.0%～102%之间;6次样品测定5种核苷酸RSD为2.5～4.7%;定量限为1.5～2.0 mg/kg。该方法分离效果好,回收率高,重复性好,可作为婴幼儿配方奶粉中5种核苷酸的有效检测方法。     

高效液相色谱——四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱检测婴幼儿配方奶粉中五种核苷酸的研究

建立高效液相色谱——四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱对婴幼儿配方奶粉中一磷酸胞嘧啶核苷(CMP)、一磷酸脲嘧啶核苷(UMP)、一磷酸腺嘌呤核苷(AMP)、一磷酸鸟嘌呤核苷(GMP)和一磷酸次黄嘌呤核苷(IMP)5种核苷酸的分析检测方法。奶粉样品经过0.1%(v/v)甲酸溶解,快速有效去除奶粉中蛋白质等其他杂质成分,以Agilent ZORBAX SB-Aq(250 mm×4.6 mm×5.0μm)为分析柱,乙腈和0.1%(v/v)甲酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱分离。质谱采用负离子模式,通过高分辨质谱全扫描模式提取目标化合物精确质量数,利用阈值自动触发全扫描二级质谱功能提高了定性的准确性。通过加标验证,该方法的检测低限可达到10.0 mg/kg。5种核苷酸在1.0~50.0μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99。在10.0、50.0、100.0 mg/kg加标水平下,奶粉中5种核苷酸平均回收率为75.7%~101.9%,相对标准偏差(RSD)为4.7%~14.9%。此方法准确灵敏且前处理简单,可以作为婴幼儿配方奶粉中5种核苷酸筛选和确认的检测方法。     

啤酒酵母RNA降解产物5''-核苷酸的高效液相色谱分析

研究了高效液相色谱法同时测定啤酒酵母RNA降解产物4种5'-核苷酸的适宜条件.应用Hypersil ODS2色谱柱,在260nm检测波长下,以0.08mol/LKH2PO4缓冲溶液(pH2.5)作流动相,10min内可完成CMP、UMP、AMP、GMP含量的同时测定,最小检测限分别为0.2mg/L、0.2mg/L、0.1 mg/L和0.3mg/L,平均回收率分别为99.21%、100.39%、100.07%和99.88%,相对标准偏差(RSD)分别为2.27%、2.83%、2.05%和1.85%.     

高效液相色谱法同时测定鸡尾酒中7种合成色素

建立高效液相色谱同时测定鸡尾酒中7种人工合成色素(柠檬黄、胭脂红、苋菜红、亮蓝、诱惑红、日落黄、赤藓红)的方法。方法:利用ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm×5μm)反相色谱柱,流动相为0.02 mol/L乙酸铵-甲醇梯度洗脱,流速0.8 m L/min,柱温35℃,进样量10μL。该方法检出限为0.05~0.1μg/m L,在1.0~50μg/m L范围内线性良好,相关系数R2均大于0.999 88回收率为96.7%~103.3%,RSD为0.61%~1.65%。     

婴幼儿配方乳粉中5种核苷酸的HPLC检测方法

研究了液相色谱法检测婴幼儿配方乳粉中5种核苷酸的液相色谱检测方法。样品经酸沉淀后调节pH值为6.5～7.0,以液相色谱于278 nm,257 nm波长检测。各核苷酸的定量限:胞苷酸CMP为1.6 mg/100 g,尿苷酸UMP为1.7 mg/100 g,鸟苷酸GMP为1.8 mg/100 g,次黄嘌呤核苷酸IMP为1.0 mg/100 g,腺苷酸AMP为2.0 mg/100 g。其样品加标回收率为85%～110%。     

反相高效液相色谱法测定乳制品中核苷酸方法的研究

建立了高效液相色谱法测定乳制品中核苷酸含量的方法。采用紫外检测器，波长为254nm；色谱柱为迪马钻石C18，柱温为25℃，流动相为①0．01mol／L K2HPO4960ml 0．1mol／L K2HPO440mllpH5；测定腺嘌呤核苷(AMP)、鸟嘌呤核苷(GMP)、次黄嘌呤核苷(IMP)。②乙腈：(0．01mol／LKH2PO4 0．005mol／LK2HPO4 1mmol／L四丁基溴化氨，磷酸调pH5．0)=5：95，测定胞嘧啶核苷(CMP)、脲嘧啶核苷(CMP)。流速为1．0ml／min。五种核苷酸组分。标准曲线相关系数r为CMP0．9868；UMP0．9879；GMP0．9792；IMP0．9799；AMP0．9553；回收率为94．6％；8次样品重复测定变异系数为1．79％。     

高效液相色谱法测定凉皮中的脱氢乙酸

目的建立凉皮中脱氢乙酸含量的高效液相色谱测定方法。方法样品用水提取,经过0.45μm微孔过滤膜过滤后进样分析。色谱柱:CNW#174;Athena C18-WP色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:10 mmol/L乙酸铵水溶液(90%),甲醇(10%);洗脱方式:等度;检测器波长:230 nm;流速:1.0 m L/min;柱温:室温;进样量:3.0μL;采用色谱峰保留时间定性,外标法峰面积定量。结果脱氢乙酸平均回收率98.9%~100%,相对标准偏差0.730%~1.810%,在1.0~50.0μg/m L范围内线性良好,相关系数0.9994,定量限10.0 mg/kg。结论该方法具有样品预处理简单,分析速度快,灵敏度高的特点。针对厦门市流通领域中的样品实际检测,发现流动摊贩所售凉皮制品中脱氢乙酸含量多数超过1000 mg/kg的限量规定。     

HPLC-ELSD法测定食品中异麦芽酮糖

建立了一种方便、准确、灵敏的方法以测定食品中异麦芽酮糖含量的高效液相色谱蒸发光散射检测器方法。使用Hypersil APS-2(NH2)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱分离,柱温40℃;以乙腈:水=88:12为流动相,流速1 m L/min;ELSD为检测器,雾化器温度50℃;蒸发器80℃;载气(氮气)流速1.6 L/min。结果:检出限为30μg/m L;在80~1200μg/m L内工作曲线线性良好,相关系数r2=0.9991,回收率85.6%~98.1%,精密度2.78%~2.92%。结果表明此方法前处理简单,易于操作,检测限低,在线性范围内线性良好,相关系数高,测量结果精确度高,是检测食品中异麦芽酮糖的有效方法。     

高效液相色谱法测定香肠中亚硝酸盐含量

建立香肠中亚硝酸盐含量测定的HPLC法。色谱条件:色谱柱:ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,粒径5μm);流动相:乙腈∶磷酸盐(0.03 mo L/L KH2PO4,p H3.3)=10∶90;流速1.0 m L/min;柱温25℃;检测波长220nm。结果表明:采用高效液相色谱法测定香肠中亚硝酸盐含量在0.02~20.00 mg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.999 21,检出限为0.1 mg/kg,样品的加标回收率为88.0%~101.0%,相对标准偏差1.5%~4.8%。该方法准确、灵敏、操作简便,适合于香肠样品中亚硝酸盐含量的测定。     

RP-HPLC同时测定胃苏颗粒中间体中3种黄酮苷的含量

目的建立胃苏颗粒中间体中黄酮类成分柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),色谱柱:Diamonsil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);甲醇-醋酸-水(35:4:61)为流动相,流速1.0 m L/min;检测波长283 nm。结果柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷线性范围分别为1.58~189.55μg/m L(r=1.0000),0.37~44.57μg/m L(r=1.0000)和0.41~48.72μg/m L(r=1.0000);加样回收率在99.42%~108.16%范围内,RSD≤2.0%。结论该方法简便、准确,具有良好的重复性和稳定性,可用于胃苏颗粒中间体中黄酮类成分的含量测定。     

固相萃取-HPLC法同时测定大米中甲萘威和阿特拉津

建立固相萃取-高效液相色谱二极管阵列检测器(DAD)法同时测定大米中甲萘威和阿特拉津的方法。样品经乙腈提取、净化、旋转蒸发和氮吹浓缩后,用甲醇定容至2 mL,通过XDB-C₁₈(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱分离,流动相采用甲醇-水(60︰40,V/V),流速0.4 mL/min,柱温40℃,进样量5μL,在220 nm波长下测定。结果表明,在0~2.0μg/mL范围内,甲萘威和阿特拉津呈现良好线性关系,相关系数(R2)均为1.000,检出限分别为1.0μg/kg和3.0μg/kg。对0.2,0.4和0.8 mg/kg这3种不同浓度下甲萘威和阿特拉津准确度和精密度试验,回收率分别为88.3%~102.2%和87.5%~104.3%,相对标准偏差(RSD,n=6)分别为1.2%~3.3%和2.3%~4.7%。试验方法稳定性好、操作简单、灵敏度高,可满足于大米中甲萘威和阿特拉津测定。     

HPLC法测定食用动物油脂中丙二醛残留量

建立柱前衍生高效液相色谱法测定动物油脂中丙二醛残留量的方法。试样经三氯乙酸混合液提取,与硫代巴比妥酸(TBA)进行衍生化反应后,采用Thermo Syncronis C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.01 mol/L乙酸铵-甲醇(体积比65︰35)为流动相,等度洗脱,二极管阵列检测器检测。结果表明,丙二醛在0.01~2.0μg/mL范围均有良好线性关系,相关系数(r)为0.9999;方法检出限为0.0064 mg/kg;3个不同水平(0.1,0.2和0.6 mg/kg)的加标平均回收率为97.41%~102.25%,RSD值为1.08%~2.15%。方法具有操作简便、灵敏度高、重现性佳等特色,适用于动物油脂中丙二醛残留量检测。     

纳豆芽孢杆菌发酵液中嘌呤碱基的检测

采用反相离子对色谱法对纳豆芽孢杆菌发酵液中的嘌呤碱基进行检测,优化后的检测条件为:色谱柱,Hitachi La Chrom C18(4.6mm×250mm,5μm);紫外检测波长254nm;流动相:甲醇∶四丁基氢氧化氨∶乙酸∶水=10∶1.485∶1.485∶987.03(v/v/v/v);流速:0.7mL/min;柱温:25℃。检测结果表明该方法标准曲线良好:A、G、H、X四种嘌呤碱基的线性范围分别为0.5~20.0、1.0~50.0、1.0~50.0、0.5~20.0mg/L,相关系数均大于0.9991,方法回收率为96.9%~102.4%。基于优化后的检测方法,检测得出纳豆发酵前后发酵液中总嘌呤含量分别为41.33、84.99mg/L,说明嘌呤碱基含量在发酵过程中有所增加。     

UPLC测定豌豆尖中槲皮素和山奈酚的含量

目的:采用超高效液相色谱法(UPLC)测定豌豆尖中类黄酮水解产物槲皮素和山奈酚的含量。方法:采用Waters ACQUITY UPLC BEH Shield RP18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-0.1%冰醋酸水溶液(60:40)为流动相,流速为0.4 m L/min,槲皮素检测波长为371 nm,山奈酚检测波长为366 nm,柱温为30℃,进样量2.0μL。结果:槲皮素和山奈酚在1.5 min时间内达到基线分离,分别在(0.03~0.18)mg/m L、(0.015~0.15)mg/m L范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为101.37%、100.64%,RSD分别为0.84%、0.37%。结论:该方法快速、准确、稳定,可用于豌豆尖中槲皮素和山奈酚的含量测定。     

高效液相色谱法测定饮料中的1-(氨基甲酰甲基)氯化吡啶

建立了高效液相色谱法测定饮料中1-(氨基甲酰甲基)氯化吡啶(1-MNA)的分析方法。采用水溶液直接稀释提取法对样品进行前处理,通过用Venusil HILIC色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)在乙腈和0.02mol/L醋酸铵(v/v,30∶70)流动相体系、1.0 m L/min流速、30℃柱温下进行分离,进而用高效液相色谱仪-二极管阵列检测器在265 nm波长下对目标化合物进行分析。分析结果显示:1-MNA在0.80~100.0μg/m L范围内线性良好,相关系数r=0.9999,其线性回归方程Y=14.61x-2.86,回收率为99.8%~103.8%,精密度为1.50%~4.31%,方法检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0.1 mg/kg和0.4 mg/kg。该方法简便快捷,适用于饮料中1-MNA含量检测。     

反相高效液相色谱法同时测定黄豆酱中的苯甲酸、山梨酸、安赛蜜

建立一种用反相高效液相色谱法同时测定黄豆酱中苯甲酸,山梨酸和安赛蜜的新方法。样品经酸化后,用无水乙醚萃取,并浓缩吹干,再加入碳酸氢钠溶液溶解,样品调p H后,采用C18柱(250mm×4.6mm,5μm)分离,以甲醇(5%)+0.02mo L/L乙酸铵溶液(95%)为流动相,流速1.0m L/min,检测波长214nm(安赛蜜)及230nm(苯甲酸和山梨酸),出峰时间定性,外标法定量。结果表明:该方法的检出限为1mg/kg,线性范围为1~50μg/m L,相关系数分别为:安赛蜜R=0.99995;苯甲酸R=1.00000;山梨酸R=0.99993。回收率分别为:安赛蜜89.4%~94.1%;苯甲酸97.6%~101%;山梨酸89.6%~93.2%。相关标准偏差(RSD)分别为:安赛蜜0.38%~2.32%;苯甲酸0.26%~1.04%;山梨酸0.44%~1.82%。该方法准确方便,灵敏度高,可实现黄豆酱中苯甲酸、山梨酸、安赛蜜的测定。     

反相高效液相色谱法测定牦牛乳中的 B 族维生素含量

建立了同时测定牦牛乳中维生素B_1、B_2、B_3、B_6、B_12的高效液相色谱法,样品经离心脱脂,高氯酸除蛋白后,采用反相色谱柱分离,DAD检测器检测,外标法定量。色谱柱为C_18柱(25 mm×4.6 mm,i.d.5μm),流动相为0.023 mol/L H_3PO_4溶液(pH3.54)和甲醇,采用梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,柱温25℃,检测波长270 nm。结果表明:维生素B_2、B_3在0.1~50.0 mg/L,维生素B_1、B_6、B_12在0.5~250.0 mg/L质量浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数均为0.999。5种B族维生素的平均回收率为90.6%~98.4%,相对标准偏差(RSDs)为2.0%~4.3%,在牦牛乳中的检出限为0.01~0.09 mg/L,定量下限为0.03~0.29 mg/L。本方法样品处理简单,分析速度快,准确度和精密度高,能够满足快速分析需要。     

决明子中8种天然滋味物质的HPLC法同时检测

试验比较不同来源决明子提取物对葡萄糖、果糖、甘露醇、决明子苷、决明子苷Ⅴ、决明子苷Ⅳ、决明子黄素和决明子二醇苯甲酸酯8种天然滋味物质的色谱法检测及决明子来源对其含量的影响。试验采用Waters symmetry C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A相为80%乙腈水溶液(含0.01%三氟乙酸和2.0 mmol/L醋酸铵水溶液);流动相B相为水溶液(含0.01%三氟乙酸和2.0 mmol/L醋酸铵),梯度洗脱,流速为0.8 m L/min,DAD检测波长:254 nm;柱温45℃。检测方法显示:8种天然滋味物质的检测线性范围为0.02~500 mg/L,线性关系良好(r0.997 0);检出限(S/N=3)在0.005~0.02 mg/kg之间;在加标浓度为1.0~50.0 mg/kg条件下,加标回收率(N=9)在86.34%~103.88%之间,检测方法灵敏有效。     

高效液相色谱法同时测定小麦粉及其制品中过氧化苯甲酰和苯甲酸

目的建立同时测定小麦粉及其制品中过氧化苯甲酰和苯甲酸的高效液相色谱检测方法。方法样品中过氧化苯甲酰和苯甲酸用无水乙醇进行提取,采用色谱柱为Symmetry C18(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长235 nm。结果过氧化苯甲酰、苯甲酸与杂质基线分离,过氧化苯甲酰和苯甲酸在0.10~20 mg/L浓度范围内线性良好,相关系数r均在0.999 9以上。过氧化苯甲酰和苯甲酸回收率分别为95.2%~99.5%和95.3%~105%,方法检出限分别为0.10和0.08 mg/kg,定量限分别为0.30和0.24 mg/kg。结论本方法操作简便、灵敏度高、结果准确,适用于小麦粉及其制品中过氧化苯甲酰和苯甲酸同时分析。