固相抗体包被管法TSH免疫放射分析

采用TSH单克隆抗体包被聚苯乙烯试管，并对抗体包被条件进行了研究，建立了TSH免疫放射分析法。结果表明：在2～8℃下过夜包被，抗体浓度为2.1mg/L时，制备的包被管用于TSH免疫放射分析，结合达到最大；不同浓度下包被，包被温度和时间对制备的包被管的影响不同。TSH免疫放射性分析最小检测限为0.05mIU/L；回收率为88.4%～100.0%；批内、批间变异系数分别为7.4%～10.9%和8.7%～10.7%。46例健康人血样测定值为0.3～6.2mIU/L。     

CA125单克隆抗体的制备及其初步应用

利用CA125抗原免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,建立分泌抗CA125抗体的杂交瘤细胞株。将CA125单克隆抗体应用到化学发光免疫分析和免疫放射分析方法中,病理值的测定结果和进口试剂盒测定值相关方程分别为y=0.85x+11.1,r＝0.932和y=0.87x－12.8,r＝0.983;正常血样测量值范围分别为3.3～26.7和1.5～27.0U/mL。CA125单克隆抗体制备的包被板和包被管在37℃下可稳定存放14d,且不影响分析结果。     

固相抗体包被管法TSH免疫放射分析

采用TSH单克隆抗体包被聚苯乙烯试管,并对抗体包被条件进行了研究,建立了TSH免疫放射分析法.结果表明:在2～8℃下过夜包被,抗体浓度为2.1mg/L时,制备的包被管用于TSH免疫放射分析,结合达到最大;不同浓度下包被,包被温度和时间对制备的包被管的影响不同.TSH免疫放射分析最小检测限为0.05mIU/L;回收率为88.4%～100.0%;批内、批间变异系数分别为7.4%～10.9%和8.7%～10.7%.46例健康人血样测定值为0.3～6.2mIU/L.     

磁性纳米微粒的制备方法及其在放射免疫分析中的初步应用

采用化学共沉淀法合成水溶性正癸酸包覆的Fe3O4磁性纳米微粒,并以此为核心物理吸附羊抗兔IgG制备磁性纳米第二抗体,作为磁性分离载体用于放射免疫分析中。用光子相关光谱仪与透射电镜测定了磁性纳米微粒的粒径大小、粒径分布和多分散度等。研究了羊抗兔IgG包被磁性纳米微粒的包被介质的pH、羊抗兔IgG用量和包被时间等制备条件对磁性纳米微粒二抗免疫反应结合能力和非特异结合的影响。结果表明：化学共沉淀法制得的Fe3O4平均粒径约为10-20nm,吸附羊抗兔IgG后其平均粒径为1000nm左右,并可用于放射免疫分析中。提示羊抗兔IgG可通过物理吸附的方法固定在磁性纳米微粒上,其优点是制备方法简便、省时和成本低,在放射免疫分析中具有磁性分离的方便性,具有较大的医学应用价值。     

前列腺酸性磷酸酶(PAP)免疫放射分析试剂盒的研制

采用包被管分离技术，利用两株抗PAP单克隆抗体，双位点夹心免疫 血清中PAP含量。结果表明，该试剂盒分析灵敏度为0.1μg/L；批内变异系数为（8．8－9．6）％；批间变异系数为（7．7－12．3）；回收率为（96．3－105．0）％；标准曲线范围内2．5－200．0μg/L。与DPC公司CAC PAP IRMA试剂盒进行方法学比较，相关系数r=0.909。     

TG Ab酶联免疫分析试剂盒的研制

固相包被TG,TG与辣根过氧化物酶偶联制备TG酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,建立了TG Ah酶联免疫分析(ELISA)试剂盒制备方法。本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异因数<10.0％,批间变异因数<15.0％,特异性鉴定显示与TM无明显交叉反应。正常参考值<50.0IU/mL(n=100)。该方法具有简便、快速和定量准确的特点,适用于临床检测和科研应用。     

催乳素酶促化学发光免疫分析试剂盒的研制

采用两株催乳素(PRL)单克隆抗体,一株包被化学发光板,一株标记辣根过氧化物酶,研制了测定人血清PRL浓度的酶促化学发光免疫分析试剂盒。本试剂盒测定范围50~4 000 mIU/L,灵敏度4.26 mIU/L,批内、批间变异系数分别小于10%、15%,回收率90.3%~100.8%;血清样品倍比稀释后的测定值和稀释度的相关系数为1;本试剂盒正常参考值范围:女性43.2~513.1 mIU/L(n=52),男性54.8~334.3 mIU/L(n=68)。     

白蛋白酶联免疫分析试剂盒的研制

采用竞争性ELISA法检测人尿中白蛋白(Albumin,Alb)的含量。将Alb抗体包被96孔微孔板,Alb与辣根过氧化物酶结合形成酶标记物,建立了白蛋白酶联免疫分析(Alb-ELISA)方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.28 mg/L;批内、批间变异系数分别为2.63%～5.28%和2.40%～4.26%;回收率为95.0%～106.4%;高浓度Alb样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为r=0.997 4。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

滤纸干血-新生儿促甲状腺素酶联免疫分析试剂盒的研制

以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),两株识别人促甲状腺素(hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了滤纸干血-新生儿促甲状腺素生物素-亲合素酶联免疫分析(NeonatalTSH-BA-ELISA)试剂盒的制备方法。本方法的灵敏度为0.5mIU/L,批内变异系数<15%,批间变异系数<20%,回收率为90.1%～103.3%。本方法所制备的试剂盒与NeonatalTSH-IR-MA(磁颗粒法)试剂盒具有良好的相关性,相关方程为y=1.01x+0.34,相关系数为r=0.873。本试剂盒无放射性,操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

癌胚抗原（CEA）酶联免疫分析试剂盒的研制

一株CEA单克隆抗体（McAb）用于固相包被,另一株McAb与辣根过氧化物酶偶联制备抗CEA酶标记物,以四甲基联苯胺（TMB）为底物,采用二步法,建立了CEA酶联免疫分析（ELISA）试剂盒制备方法。 本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异系数<10.0％,批间变异系数<15.0％,回收率为99.4％～108.7％,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应。正常参考值小于10.0μg/L。该方法具有简便、快速和准确的特点,适用于临床检测和科研应用。     

血清游离甲状腺素(FT4)双抗固相放射免疫分析方法的建立

利用双抗固化试管建立了检测血清中游离甲状腺素（ＦＴ４）的固相放射免疫分析方法。游离ＦＴ４和１２５Ｉ标记的ＦＴ４类似物竞争与包被管上的固化抗体结合。检测可以在２ｈ内完成。检测范围为０．１２－７５ｐｍｏｌ／Ｌ。批内、批间平均变异系数分别为１．７％－４．４％和３．２％－９．１％。非特异性结合小于１％。该分析与商品ＦＴ４标记抗体ＲＩＡ分析药盒比较,线性回归斜率为１．０８,截距２．３,相关系数为０．８５。该方法操作简便、重复性好,多项分析指标优于常规的放免分析方法,为一种简便、精密和准确的分析方法。     

癌胚抗原试管固相免疫放射分析

报道以试管为固相载体，通过共价键的联结把两株癌胚抗原单抗结合的试管壁上，并标记另一株单抗，建立了癌胚抗原试管固相免疫放射分析法。该法具有较高的特异性和灵敏度，操作简便，重复性好，与液相放免法对照测定样品，两者结果密切相关。     

糖类抗原CA19-9免疫放射分析法的建立

采用两株CA19-9单克隆抗体,一株用于125I标记、另一株包被于试管作为固相抗体,用血清稀释CA19-9抗原,制备标准品,建立了CA19-9双位点夹心免疫放射分析方法（IRMA）。分析采用两步法,本方法最小检测限为2.0 U/mL,批内、批间变异系数分别为 6.4%~9.5%和6.0%~12.6%,样品添加实验结果显示,回收率为88.1%~106.1%,血清样品倍比稀释后测定,测定值和稀释度的相关系数为0.990。CA19-9浓度至11800 U/mL时测定未见“弯钩”效应。69例健康人血清样品测定值为0.3~29.6 U/mL（ ±s 为7.4±5.8 U/mL）,和法国CIS公司的CA19-9免疫放射分析药盒同时测定84例人血清样品,二者测定值相关方程为y=1.32x-17.6,相关系数r=0.896。相似文献   

磁性颗粒固相分离剂的制备及其在放射免疫分析中的应用

本文研制了一种用于放射免疫测试的磁颗粒固相二抗分离试剂。将粗羊抗兔IgG二抗溶液纯化,采用氨基硅烷化修饰的磁性颗粒选择不同的酸度经戊二醛活化后,在不同的酸度下与纯化的二抗交联。同时进行了未活化磁性颗粒对二抗的吸附实验。放射免疫药盒测试结果为：未活化磁性颗粒固相二抗结合率低且极不稳定;活化后磁性颗粒固相二抗结合率高且稳定性好,并提高了放免药盒的灵敏度,标准曲线的相关性系数达0．9950。在液相分离法与磁性颗粒固相分离法的放射免疫测试比较中,其测得样品浓度的相关性也达到了0．9895。因此该磁性颗粒固相二抗是一个可用于放射免疫测试的通用分离试剂。     

促卵泡激素酶促化学发光免疫分析试剂盒的研制

采用双抗体夹心法建立了测定人血清FSH酶促化学发光免疫分析方法。本方法的测量范围为1．5～100IU／L,灵敏度为0．36IU／L,批内变异系数为1．0％～1．6％,批间变异系数为4．0％～4．6%,回收率为90．6％～117．8％,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数r=0．990。与TSH的交叉率〈0．23％,与LH和HCG的交叉率分别〈0．16％和〈0．27％。与贝克曼化学发光免疫分析方法测定的临床值进行比较,相关性方程为y=0．85x—0．03,相关系数r=0．954。与免疫放射分析试剂盒进行比较,相关性方程为y=0．97x＋5．29,相关系数r=0．965,与放射免疫分析试剂盒,进行比较,相关性方程为y=0．95z-3．82,相关系数r=0．954。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。     

Immunoradiometric assay for carcinoembryonic antigen using avidin—biotin separation technique

A sensitive,specific,noncompetitive,sandwich-type radioimmunoassay for carcinoembryonic antigen(CEA) has been developed in our laboratory,which can be performed conveniently.The assay involves two monoclonal antibodies,selected for high affinity and specificity and also for reaction against antigenic sites on CEA that are distal from each other.One of these antibodies was labeled with ^125I and the other was conjugated covalently to biotin.Polystyrene tubes were conjugated covalently to avidin.These tubes represent a rapid,simple method for separating the CEA-bound antibody from the free antibody.The biotin-antibody-CEA-^125I-labeled antibody complexes bind to the tubes and CEA concentration is driectly related to counts per minute.This assay can detect the CEA at a concentrastion of 0.22μg/L in serum.