山药糖蛋白纯化条件及其理化方法鉴定

采用热水浸提法得到山药糖蛋白粗提物,经过不同洗脱液进行DEAE-52柱层析纯化和Sepha-dexG-75柱层析纯化,得到山药糖蛋白组分CYG-1和CYG-2。其中,DEAE-52柱层析中以NaHCO3作为洗脱液时,只能得到1个CYG组分。I2-KI显色反应、茚三酮反应、斐林试剂反应、硫酸-咔唑反应、以及与FeCl3反应和与CTAB反应、糖肽键特征等理化方法鉴定的结果表明,得到的CYG-1和CYG-2为纯品,属酸性糖蛋白,糖肽键为O-糖肽键。CYG-1和CYG-2分子中蛋白和多糖质量分数分别为20.62%、15.16%和68.56%7、2.31%。     

桔梗糖蛋白超临界辅助提取工艺及对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

确定超临界CO_2萃取辅助超声波提取桔梗糖蛋白的最佳工艺与其对α-葡萄糖苷酶抑制作用。以乙醇为夹带剂,采用超临界CO_2萃取技术辅助超声提取桔梗中的糖蛋白,以得率及其多糖含量为检测指标,对提取工艺进行评价;以PNPG为底物测定对α-葡萄糖苷酶抑制作用。结果表明:超临界CO_2萃取的最佳工艺为:温度45℃,压力25 MPa,乙醇浓度为70%,萃取时间为1.5 h;其平均得率和糖含量分别为27.83%和62.68%,糖蛋白和阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度IC_(50)值分别为0.276 mg/m L和0.321 mg/m L。结果表明:超临界CO_2萃取技术结合超声提取桔梗糖蛋白的方法可行,步骤简单,无污染,桔梗糖蛋白对α-葡萄糖苷酶有较强的抑制作用。     

桔梗糖蛋白超临界辅助提取工艺及对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

确定超临界CO₂萃取辅助超声波提取桔梗糖蛋白的最佳工艺与其对α-葡萄糖苷酶抑制作用。以乙醇为夹带剂,采用超临界CO₂萃取技术辅助超声提取桔梗中的糖蛋白,以得率及其多糖含量为检测指标,对提取工艺进行评价;以PNPG为底物测定对α-葡萄糖苷酶抑制作用。结果表明:超临界CO₂萃取的最佳工艺为:温度45℃,压力25 MPa,乙醇浓度为70%,萃取时间为1.5 h;其平均得率和糖含量分别为27.83%和62.68%,糖蛋白和阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度IC₅₀值分别为0.276 mg/m L和0.321 mg/m L。结果表明:超临界CO₂萃取技术结合超声提取桔梗糖蛋白的方法可行,步骤简单,无污染,桔梗糖蛋白对α-葡萄糖苷酶有较强的抑制作用。      

山药多糖提取工艺的响应面法优化及其功能活性分析

利用Box-Behnken设计-响应面优化山药多糖的提取工艺,初步评价不同产地山药多糖清除1,1-二苯基-^2-三硝基苯肼(DPPH·)能力、羟自由基(OH·)能力和超氧阴离子(O^2-·)能力和α-葡萄糖苷酶抑制活性能力。以超声辅助提取温度、提取时间和料液比为自变量,以山药多糖提取率为因变量,采用响应面分析法优化山药多糖超声辅助提取工艺:提取温度66℃,提取时间26 min,液料比22∶1(mL/g),在此条件下,多糖得率为9.34%。不同产地山药多糖对α-葡萄糖苷酶活性具有抑制作用,并随着多糖浓度的提高其抑制率随之提高。抗氧化活性试验表明山药多糖对DPPH·、OH·和O^2-·具有较显著清除作用,并呈现一定的浓度依赖性。其中4个产地山药多糖中河南怀山药多糖含量最高,对α-葡萄糖苷酶的抑制作用、对DPPH·和OH·自由基的清除能力均最优,预处理河南为山药道地产区质优效佳的传统认知相符。     

四种天然产物对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

研究了苦瓜、绞股蓝、山药、蜂胶提取物等四种天然产物对α-葡萄糖苷酶的体外抑制作用。结果显示,四种天然产物对α-葡萄糖苷酶均有抑制作用,其对α-葡萄糖苷酶半抑制浓度(IC50)分别为59·9、30·7、78·9、13·2mg/mL。本研究为四种天然产物在防治糖尿病及其并发症等方面的应用提供参考,具有较大的理论意义和应用价值。     

四种天然产物对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

研究了苦瓜、绞股蓝、山药、蜂胶提取物等四种天然产物对α-葡萄糖苷酶的体外抑制作用。结果显示,四种天然产物对α-葡萄糖苷酶均有抑制作用,其对α-葡萄糖苷酶半抑制浓度（IC50）分别为59·9、30·7、78·9、13·2mg/mL。本研究为四种天然产物在防治糖尿病及其并发症等方面的应用提供参考,具有较大的理论意义和应用价值。      

微波预处理-超声波辅助提取紫山药多糖及抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

以紫山药粉为原料,对微波预处理-超声波提取紫山药多糖的工艺进行优化,并以α-葡萄糖苷酶抑制模型研究其对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。通过单因素及正交试验确定最佳提取工艺为料液比1∶40(g/mL)、微波功率300 W、微波时间30 s、超声功率270 W、超声时间30 min。在最佳工艺条件下,紫山药多糖平均得率为11.12%。醇沉后的紫山药多糖粉末中多糖的质量分数为45.80%。α-葡萄糖苷酶活性抑制试验中,紫山药多糖表现出明显的抑制作用,对α-葡萄糖苷酶抑制能力较阿卡波糖弱。     

山药多糖对α-葡萄糖苷酶抑制作用动力学研究

以山药为材料,经酶解法提取山药多糖,通过紫外扫描和红外光谱鉴别其组分和结构,以PNPG为底物建立酶—抑制剂体外模型,研究山药多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制能力,采用双倒数作图法确定其抑制类型。结果表明:紫外扫描显示提取组分不含核酸和蛋白质,红外光谱显示提取组分具有多糖特征吸收峰,酶—抑制剂体外模型结果表明提取的山药多糖对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用为竞争性抑制,抑制常数K_i为65.78mg/m L。     

化橘红柚皮苷对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用

为探究化橘红柚皮苷对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用和清除DPPH自由基能力,采用体外α-葡萄糖苷酶抑制模型,测定化橘红柚皮苷对α-葡萄糖苷酶的抑制能力及清除DPPH自由基能力,并分析其对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用类型。结果表明,化橘红柚皮苷对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用优于阿卡波糖,柚皮苷主要以剂量依赖性、时间依赖性的方式抑制α-葡萄糖苷酶的活性,其对α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度(IC_(50))为0.008 mg/mL,阿卡波糖的IC50为0.026 mg/mL,且其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用表现为竞争性、可逆抑制,同时0.08 mg/mL浓度的柚皮苷具有较好的DPPH自由基清除能力。基于化橘红柚皮苷具有一定的抗氧化活性及对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,可将其进一步用于天然抗氧化剂和α-葡萄糖苷酶抑制剂的开发。     

竹叶椒乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及其机理研究

目的:研究竹叶椒乙醇提取物对α-糖苷酶的抑制作用。方法:本实验采用体外抑制模型评价竹叶椒乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶（酵母菌来源、小鼠小肠来源）和α-淀粉酶的抑制活性。并采用Lineweaver-Burk双倒数法研究α-葡萄糖苷酶的动力学性质。结果:竹叶椒乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶（酵母菌来源）的半数抑制浓度（IC50）为（0.660±0.145）mg·m L-1,对小鼠小肠内α-葡萄糖苷酶半数抑制浓度（1.944±0.078）mg·m L-1,α-淀粉酶的半数抑制浓度为（1.185±0.132）mg·m L-1。动力学研究表明,竹叶椒乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用为典型非竞争性抑制。结论:竹叶椒乙醇提取物对α-糖苷酶活性的抑制效果显著,具有很好的开发利用价值。      

药桑叶中活性物质的提取及对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

以药桑叶为实验原料,通过集成提取工艺,获得3 种含量稳定的粗提物成分,研究其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并进行不同粗提物间组合物对α-葡萄糖苷酶抑制活性的研究。采用乙醇提取、柱色谱分离纯化等方法,获得桑叶中具有潜在降血糖活性的黄酮、多糖和生物碱粗提物;利用α-葡萄糖苷酶抑制模型评价3 种粗提物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并进一步采用CompuSyn软件对不同粗提物间的相互作用进行统计学分析。结果表明：桑叶中黄酮、生物碱、多糖粗提物对α-葡萄糖苷酶均具有抑制活性,且生物碱粗提物的抑制活性显著高于阳性对照（阿卡波糖）,多糖粗提物在高质量浓度作用下具有α-葡萄糖苷酶抑制作用,表现为抑制作用与多糖质量浓度成正比;在本实验所使用的质量浓度与剂量配比内3 种粗提物相互组合时,黄酮＋生物碱组合、多糖＋生物碱组合表现为拮抗作用;黄酮＋多糖组合、黄酮＋多糖＋生物碱组合在高质量浓度下对抑制α-葡萄糖苷酶表现为协同作用。     

荔枝壳多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

α-葡萄糖苷酶可水解寡糖的α-1,4糖苷键,抑制其活性可降低餐后血糖水平。通过酶促动力学和荧光猝灭反应研究了荔枝壳游离酚和结合酚对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。结果表明,荔枝壳游离酚和结合酚对α-葡萄糖苷酶活性均具有抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)分别为11μg/mL和112μg/mL;游离酚和结合酚对α-葡萄糖苷酶的抑制作用均为混合型抑制,前者对α-葡萄糖苷酶的荧光猝灭为静态猝灭,后者为静-动态联合猝灭,两者与α-葡萄糖苷酶的结合位点数为1。综上所述,荔枝壳游离酚对α-葡萄糖苷酶具有更强的抑制效果,对降低餐后血糖水平具有积极的作用。     

红松松球鳞片多酚对α淀粉酶和α葡萄糖苷酶的抑制作用

本文研究了红松松球鳞片多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并采用Lineweaver-Burk双倒数法分析了其动力学性质。结果表明,红松松球鳞片多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制作用略弱于阳性对照阿卡波糖,二者的半数抑制浓度分别为713.94μg/m L和623.73μg/m L;对α-淀粉酶的抑制作用明显不及阳性对照阿卡波糖,二者的半数抑制浓度分别为1902.91μg/m L和865.96μg/m L。动力学分析结果显示红松松球鳞片多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用均为非竞争性抑制类型。     

红松松球鳞片多酚对α淀粉酶和α葡萄糖苷酶的抑制作用

本文研究了红松松球鳞片多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并采用Lineweaver-Burk双倒数法分析了其动力学性质。结果表明,红松松球鳞片多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制作用略弱于阳性对照阿卡波糖,二者的半数抑制浓度分别为713.94μg/m L和623.73μg/m L;对α-淀粉酶的抑制作用明显不及阳性对照阿卡波糖,二者的半数抑制浓度分别为1902.91μg/m L和865.96μg/m L。动力学分析结果显示红松松球鳞片多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用均为非竞争性抑制类型。      

竹叶椒对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及机制研究

采用体外抑制模型方法评价竹叶椒生物碱对α-葡萄糖苷酶(酵母菌来源、小鼠小肠来源)抑制作用,并采用Lineweaver-Burk双倒数法分析其抑制α-葡萄糖苷酶活性的机制。结果显示,竹叶椒脂溶性生物碱和水溶性生物碱都对α-葡萄糖苷酶有一定的抑制作用。竹叶椒脂溶性生物碱和水溶性生物碱对酵母来源α-葡萄糖苷酶IC50(半数抑制浓度)分别为(0.73±0.17) mg/mL、(2.74±0.28) mg/mL;脂溶性生物碱对小鼠小肠来源α-葡萄糖苷酶的IC_(50)为(1.94±0.13) mg/mL。动力学研究表明,竹叶椒生物碱提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用类型为典型的非竞争性抑制。竹叶椒生物碱对α-葡萄糖苷酶有较好的抑制作用,为进一步的开发利用提供强有力的理论依据。     

显齿蛇葡萄中黄酮类化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究

目的:研究显齿蛇葡萄醇提物及8种主要黄酮化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。方法:用75%无水乙醇回流提取制备显齿蛇葡萄提取物,对其进行α-葡萄糖苷酶抑制实验。之后选取显齿蛇葡萄中8种主要黄酮化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制效果进行分析。结果:醇提物在(0.1~1.0)mg/mL之间对α-葡萄糖苷酶具有明显的抑制作用,其半抑制浓度(IC50)为0.338mg/mL。8种黄酮化合物均对α-葡萄糖苷酶产生不同程度的抑制作用,其中槲皮素的抑制效果最强,半抑制浓度为0.083 mg/mL,是醇提物的1/4。结论:显齿蛇葡萄醇提物与主要黄酮化合物对α-葡萄糖苷酶具有较明显的抑制作用,为显齿蛇葡萄进一步开发与利用提供了理论基础。     

蜂胶乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

为了研究蜂胶对餐后血糖控制机理,本实验采用体外α-葡萄糖苷酶抑制模型研究蜂胶乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并采用Lineweaver-Burk双倒数法研究其动力学性质。结果表明,蜂胶乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度(IC50)为(0.8260±0.1754)mg/mL,抑制常数(KI)为(0.0265±0.0060)mg/mL。动力学研究表明,蜂胶乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用为典型的非竞争性抑制。     

绞股蓝内生真菌多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

目的:探究绞股蓝内生真菌JY25多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,为绞股蓝内生真菌多糖的应用提供基础数据。方法:确定4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(4-N-trophenyl-α-D-glu-copyranoside,PNPG)比色法检测α-葡萄糖苷酶活力的最佳条件,以阿卡波糖为阳性对照,采用优化后的最佳条件测定JY25多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并确定抑制类型、计算抑制常数;以Caco-2细胞作为体外产α-葡萄糖苷酶模型,测定JY25多糖的抑制效果。结果:反应时间30 min、反应温度44℃、pH 6.8、底物(PNPG)浓度5 mmol/L为PNPG比色法的最佳反应条件。以此优化条件进行比色,当JY25多糖质量浓度为6.15 mg/mL时,对α-葡萄糖苷酶抑制率达到最大(68.21%);JY25多糖的半数抑制浓度(IC_(50))为(2.46±0.42)mg/mL,抑制常数Ki为1.15 mg/mL,JY25多糖为竞争性抑制剂。在JY25多糖质量浓度为10.00 mg/mL时,对培养16 d的Caco-2细胞所产α-葡萄糖苷酶的抑制率达到16.48%。结论:体外实验证实JY25多糖具有竞争性抑制α-葡萄糖苷酶的作用。     

醪糟发酵液对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

通过一系列功能性实验，对醪糟发酵液的抗老年性痴呆、抗氧化、降血压、降血糖等作用进行了初步研究，发现醪糟发酵液抑制血管紧张素转换酶和α-葡萄糖苷酶的作用确切而且明显，具有潜在的降血压和降血糖作用。然后，主要研究了不同产地、不同发酵时间的醪糟发酵液以及它们在不同的稀释度下对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，并排除了乙醇的抑制作用。发酵液经灭活、离心处理，用p-NPG（α-葡萄糖苷对硝幕苯酚）法测定α-葡萄糖苷酶的活性。结果表明，在原浓度下，不同产地的醪糟发酵液对α-葡萄糖苷酶的抑制效果基本相同；在醪糟发酵的过程中，发酵液对α-葡萄糖苷酶的抑制效果保持稳定，均在60％以上，且在发酵的第60-66h内抑制效果最好。此外，不同稀释度下的醪糟发酵液对α-葡萄糖苷酶的抑制效果不同，随着其浓度的增大，醪糟发酵液的抑制效果明显增强。这说明醪糟发酵液埘α-葡萄糖苷酶具有稳定的抑制作用（由于篇幅有限，降血压作用另作介绍）。     

发芽糙米糖蛋白抗炎、降血糖性能分析

糖蛋白具有抗氧化等多种生物活性,在生物体内广泛存在。目前多种来源的天然糖蛋白被提取并应用,而发芽糙米糖蛋白(GBRG)因功能未知而未受到关注。本试验以发芽糙米为原料,超声波辅助提取,离子交换纤维素柱DE-52和葡聚糖凝胶Sepadex G-200纯化并收集不同糖蛋白峰,对各糖蛋白峰进行抗炎、降血糖性能研究。结果表明:经分离纯化得到3种糖蛋白峰,分别命名为WEG、SEG-1和SEG-2,具有典型的糖蛋白结构。3种GBRG在质量浓度0.025～0.2 mg/mL范围时无毒副作用,均可抑制脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7中炎症因子COX-2、iNOS、TNF-α和IL-1β的mRNA相对表达水平,说明GBRG对炎症有较好的抑制作用。3种GBRG可较好地抑制α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶活性,其中SEG-2抑制效果最好,抑制率分别为65.71%,64.5%,半数抑制质量浓度分别为0.46,0.912 mg/mL,弱于阿卡波糖。