母体铅暴露对仔鼠海马组织中P2X7受体表达的影响

为探讨母体铅暴露对其仔一代小鼠的海马组织中P2X7受体蛋白表达的影响,将雌性小鼠自妊娠第1 d起开始经饮水染铅(0.1%、0.5%和1%的浓度溶解在去离子水中,对照组饮蒸馏水)至仔鼠出生后21 d断乳为止。在出生后第21 d,随机抽取各组仔鼠,分别采用石墨炉原子光谱吸收法测定血液和海马组织内铅的含量,免疫组织化学和Western blot检测海马组织中P2X7受体蛋白的表达。各个铅暴露组中血铅水平和海马组织的铅含量要显著高于对照组(P0.05)。与对照组相比,铅暴露组中P2X7受体的表达显著增加(P0.05)。母体铅暴露使铅在仔鼠体内蓄积,提示血铅和海马组织中铅含量的升高,从而引起海马组织中P2X7受体的过量表达,可能会引起海马组织神经元的功能损伤,进而损伤了神经系统,引起神经毒性。     

鱼油对母鼠及仔鼠海马组织部分ASICs亚型受体基因表达的影响

目的:研究鱼油对母鼠以及新生仔鼠海马组织中ASIC1a、ASIC1b、ASIC2a、ASIC2b基因表达的影响。方法:将32只雌雄各半的成年SD大鼠随机分为阴性组与鱼油组,每组16只,雌雄各半。雌鼠受孕后开始饲喂鱼油,并连续饲养60 d,之后采用实时荧光定量PCR技术检测母鼠与仔鼠海马组织中ASIC1a、ASIC1b、ASIC2a、ASIC2b m RNA的表达。结果:与阴性组相比,鱼油组母鼠和仔鼠海马组织中ASIC1a和ASIC1b m RNA的相对表达量显著降低;ASIC2a与ASIC2b m RNA的相对表达量显著增高。结论:孕期添加适当剂量的鱼油,能够降低母鼠和新生仔鼠海马组织中ASIC1a和ASIC1b的基因表达,增加ASIC2a与ASIC2b的表达。     

保健食品促进排铅模型小鼠饮水染铅剂量及检测指标的探讨

为探讨保健食品促进排铅作用动物模型饮水染毒的适宜剂量，给小鼠自由饮用Pb^2 浓度为163．9、546．2、l638．7mg／L的醋酸铅溶液30d，每周记录饮用量，周末称重，估算实际铅摄入剂量。实验末取血、肝、脑、肾、股骨，石墨炉原子吸收分光光度法测定全血和组织铅含量。结果显示，163．9、546．2、l638，7mg Pb^2 ／L剂量组小鼠实际铅摄入剂量分别为27．9、86．6、169．4mg／kg BW，546．2、1638．7mg Pb^2 ／L剂量组小鼠体重增长较对照组显著减少，食物利用率也明显降低；各剂量组小鼠全血、肝、肾、股骨铅及546．2、1638．7mg Pb^2 ／L剂量组小鼠脑铅含量显著升高。建议以546．2mg Pb^2 ／L作为保健食品促进排铅作用饮水染毒的造模剂量；除骨铅外，建议增测肾脏、脑组织内的铅、锌、铜含量及骨骼内的钙含量。     

紫云英苷对LPS诱发的大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)的抗炎作用

本研究探究了紫云英苷对脂多糖(LPS)诱发的大鼠小肠上皮隐窝细胞(Rat intestinal epithelial cells,IEC-6)炎症模型抗炎作用。构建LPS诱发IEC-6细胞炎症模型,采用MTT法、酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量PCR和Western Blot法检测紫云英苷对IEC-6炎症细胞的存活率、相关炎症因子、基因及蛋白表达水平;结果显示,随着紫云英苷浓度的增加,IEC-6细胞的存活率逐渐增加,紫云英苷剂量(50μg/m L、100μg/m L)组存活率为90.68%和95.76%(p0.05或p0.01);酶联免疫吸附试验表明,与LPS组相比,紫云英苷50μg/m L,100μg/m L剂量显著抑制炎症因子,对IL-6炎症因子分泌水平抑制率分别为21.98%(p0.05)和29.05%(p0.01),m RNA表达水平分别降低了34.90%(p0.05)和41.60%(p0.01)。TNF-α炎症因子分泌水平抑制率分别为16.25%(p0.05)和23.37%(p0.01),m RNA表达水平分别降低了34.11%(p0.05)和43.84%(p0.01);蛋白通路方面,100μg/m L的紫云英苷可显著抑制LPS诱导的IEC-6细胞NF-κB通路中P-IKKα/β降低了27.46%(p0.05)、P-IκBα降低了41.52%(p0.05)、P-p65降低了37.78%(p0.01)。本探究为紫云英苷作为一种潜在缓解炎症性肠病药物的开发提供了可靠的依据。     

沉香提取物对PCPA(对氯苯丙氨酸)致失眠大鼠的镇静催眠作用

探究沉香提取物对PCPA(P-chlorophenylalanine,PCPA)致失眠大鼠的镇静催眠作用。选取SD大鼠90只,10只作为空白组,余80只建立失眠大鼠模型,分为模型组、沉香挥发油高剂量组、沉香挥发油低剂量组、沉香醇提物高剂量组、沉香醇提物低剂量组、沉香水提物高剂量组、沉香水提物低剂量组、地西泮组。观察各组下丘脑5羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)含量及GABAAR_(α1)、GABAAR_(γ2)、5-HT_(1A)受体m RNA相对表达量。给药6 d后,挥发油高剂量组、挥发油低剂量组、醇提物高剂量组、醇提物低剂量组下丘脑5-HT含量分别为4.85 ng/m L、4.84 ng/m L、4.81 ng/m L、4.49 ng/m L,GABA含量分别为1.46 ng/m L,1.44 ng/m L,1.41 ng/m L,1.39 ng/m L,高于模型组(p0.05);挥发油高剂量组、挥发油低剂量组、醇提物高剂量组5-HT_(1A)受体m RNA相对表达量为0.81、0.79、0.74,高于模型组(p0.05);GABAAR_(α1 )m RNA相对表达量分别为0.94、0.84、0.85,GABAAR_(γ2) m RNA相对表达量分别为0.74、0.70、0.73,高于模型组(p0.05)。沉香提取物对PCPA致失眠大鼠具有一定镇静催眠作用。     

梓葛冻干粉针对脑微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

探讨梓葛冻干粉针对脑微血管内皮细胞(BMECs)缺氧/复氧损伤的保护作用。取新生10 d的SD大鼠乳鼠,分离、培养脑皮层微血管原代内皮细胞,并利用DMEM无糖培养基、三气培养箱缺氧容器(缺糖缺氧2 h)及5%CO2培养箱复氧培养24 h复制缺氧/复氧模型,MTT法BMECs细胞活力,Western blot法检测MMP-9的蛋白表达。结果显示,与模型组相比,梓葛冻干粉针(49.00、98.00μg·m L~(-1))能促进缺氧/复氧模型中BMECs增殖;梓葛冻干粉针(24.50、49.00、98.00μg·m L~(-1))能显著抑制BMECs细胞中MMP-9蛋白表达升高(p0.05);提示梓葛冻干粉针对脑微血管内皮细胞损伤的保护作用可能与降低MMP-9蛋白表达有关。     

妊娠期大鼠补充苏氨酸锌对仔鼠金属硫蛋白基因MT1表达的影响

为了探讨母体补充苏氨酸锌对子代生长性能、金属硫蛋白（metallothionein,MT1）mRNA表达的影响,实验以苏氨酸锌为受试物,将90 只受孕SD大鼠随机分成5 组,并于妊娠期第6～15天进行灌胃补充不同剂量苏氨酸锌。母鼠分娩后将仔鼠进行常规饲养至1 月龄,测量仔鼠的体质量、身长和尾长,将各组仔鼠断颈处死后取肝脏、肾脏、脾脏和胸骨等组织进行RNA的提取并测定MT1基因相对表达量。结果表明：与空白对照组相比,苏氨酸锌各剂量组仔鼠体质量有显著增加（P＜0.05）。与溶媒对照组和空白对照组相比较,苏氨酸锌各剂量组仔鼠的MT1 mRNA表达量高,且差异显著（P＜0.05）,并且1 000 mg/kg苏氨酸锌处理组各组织中MT1的基因表达量要高于其他组。本结果表明：妊娠期补充苏氨酸锌能显著提高仔鼠MT1 mRNA表达水平,并能在一定程度上增加仔鼠体质量。     

硒蛋白基因W和N与鸡肉品质的相关性研究

目的:研究硒蛋白基因W和N与鸡肌肉品质的相关性。方法:选择1日龄科宝肉公鸡160只,随机分成低硒组和正常组,饲养42d,分别在14,28及42日龄取鸡的肌肉、肾脏、心脏组织和血清,测定GSH-Px和TAOC抗氧化指标,同时检测肌肉的p H值、肌纤维直径、滴水损失、MDA及硒蛋白基因Selw和Seln m RNA表达水平。结果:与正常组相比,低硒组鸡肌肉、肾脏、心脏和血清组织中GSH-Px活力与T-AOC能力显著降低(P0.05);同时缺硒导致肌肉滴水损失增加(P0.05),肌肉的肌纤维直径减少(P0.05),p H值降低,MDA水平升高(P0.05);硒缺乏下调了肌肉硒蛋白基因Selw及Seln m RNA表达水平(P0.05)。结论 :根据相关性分析,肌肉硒蛋白基因Selw及Seln m RNA表达水平与鸡肉p H值及肌纤维直径有很好的相关性(P0.05),而与滴水损失相关性不显著。     

孕鼠补充苏氨酸锌对仔鼠生长及其相关基因表达的影响

为研究母体补充苏氨酸锌对子代生长水平的影响,实验将40只受孕SD大鼠随机分为5组,于孕鼠妊娠期第6~15天分别灌胃补充高、中、低剂量苏氨酸锌(灌胃剂量分别为250、500、1 000 mg/(kg·d)),孕鼠分娩后将仔鼠常规饲养,并测量1月龄仔鼠的生长指标和相关基因的表达。结果表明,苏氨酸锌各剂量组仔鼠体质量与对照组相比有显著提高(P0.05);苏氨酸锌各剂量组与对照组相比较,其组织中锌转运体Zn T1基因的相对表达量都有显著提高(P0.05);苏氨酸锌高剂量组与对照组相比较,其组织中胰岛素样生长因子IGF1基因相对表达量都有显著提高(P0.05);且胰岛素样生长因子受体基因IGF1R的表达与IGF1的表达趋势基本保持一致。实验说明妊娠期补充苏氨酸锌能在一定程度上提升仔鼠的生长性能,能显著提高仔鼠锌转运体Zn T1、胰岛素样生长因子IGF1及其受体IGF1R基因表达水平。     

牛初乳对子代雌鼠子宫结构及雌激素受体表达的影响

目的 研究妊娠期和哺乳期通过SD母鼠暴露于牛初乳及断乳后继续食用牛初乳对成年子代雌鼠子宫发育及雌激素受体(ERα和ERβ3)表达的影响.方法 将母鼠随机分成2组,牛初乳组和空白对照组.牛初乳组母鼠在交配前期、妊娠期和哺乳期食用含有牛初乳的饲料,仔鼠3周断乳后食用对应于母鼠的饲料至成年.空白组母鼠和仔鼠食用普通饲料.仔鼠成年后处死,取其血液,剥离子宫和卵巢称重,检测血清激素,子宫病理学检查;利用免疫组化法检测子鼠子宫内雌激素受体(ERα和ERβ)的表达.结果 牛初乳组子代雌鼠体重、卵巢和子宫脏体比与空白组相比差异无统计学意义(P＞0.05),血清中催乳素(PRL)含量显著高于对照组,差异有统计学意义(p＜0.05),其余激素含量两组间差异无统计学意义(P＞0.05),子宫组织结构无异常表现,子宫内雌激素受体ERα表达量高于空白组,ERβ表达量与空白组相近,但与空白组相比差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 妊娠期和哺乳期暴露于子代的牛初乳不会对子代雌鼠子宫发育和雌激素受体表达产生不利影响.     

两代繁殖实验研究牛初乳粉对大鼠生殖发育的影响

为探讨围产期接受牛初乳粉对子代生殖发育的影响,设计了两代繁殖实验,分析亲代和子代雌雄鼠血清激素水平,生殖器官发育和生殖受孕变化。结果表明:食用含有牛初乳粉的饲料后,亲代和子代雌鼠生殖受孕指标及雄鼠精子密度和活率与空白组相比无显著差异(p>0.05)。亲代和子代雄鼠血清激素水平与空白组相比无显著差异(p>0.05),但亲代雌鼠血清中催乳素和孕酮显著低于空白组(p<0.05),子一代血清中催乳素显著低于空白组(p<0.05)。子二代雌鼠F2a生殖器间距与空白组相比显著降低(p<0.05),子二代F2b的阴道开口时间推迟(p<0.05),不能确定是偶然发生还是受生理影响所致,需要重复实验的验证。      

牡蛎肽对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴调节作用的研究

目的:研究牡蛎肽对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴的调节作用。方法:采用肌肉注射氢化可的松建立肾阳虚大鼠模型,连续灌胃35 d,观察不同剂量牡蛎肽(300、150和75 mg/kg)对模型大鼠的影响,测定血清游离三碘甲状腺原氨酸(T3)、血清游离四碘甲状腺原氨酸(T4)、血清促甲状腺素(TSH)、下丘脑促甲状腺素释放激素(TRH)mRNA表达及甲状腺病理变化。结果:与正常组相比,肾阳虚模型组大鼠的T3、T4、TRH mRNA水平明显极显著降低(p<0.01),TSH水平极显著升高(p<0.01)。肾阳虚模型组动物还表现出甲状腺数量减少、滤泡不清晰及炎性细胞浸润等病理变化。与模型组相比,牡蛎肽组(300和150 mg/kg)动物各激素水平有显著性变化(p<0.05)并趋于正常水平。300 mg/kg剂量牡蛎肽还可明显改善模型动物甲状腺病理变化。结论:牡蛎肽可改善肾阳虚模型大鼠血清激素水平及下丘脑TRH mRNA表达,调节肾阳虚模型大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴。     

抗体芯片技术检测甘薯提取物对结直肠癌荷瘤鼠肝脏免疫细胞因子的影响

目的研究甘薯提取物(sweet potato extract,SPE)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)荷瘤鼠肝脏中多种免疫细胞因子表达水平的影响。方法 20只雄性Balb/c裸鼠分为2组(对照组、SPE组,每组10只)。对照组正常饮食、饮水;SPE组经饮水摄入甘薯提取物(平均摄入量2 g/d);2组均在第5周第1 d腹腔接种人结直肠癌LoVo细胞,第8周末处死所有动物,通过抗体芯片技术检测肝组织中多种免疫细胞因子的表达水平。结果SPE干预使肝组织中c-c基序趋化配体(c-c motif chemokine ligand,CCL)11(P<0.05)、c-x-c基序趋化配体(c-x-c motif chemokine ligand,CXCL)11(P<0.01)、白细胞介素(interleukin,IL)-10(P<0.05)、IL-12(P<0.05)、IL-22(P<0.01)、IL-23(P<0.05)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-3、MMP-9(P<0.01)、双调蛋白和血管生成素样3蛋白表达水平显著降低,巨噬细胞集落刺激因子(macrophage-colony stimulating factor,M-CSF)(P<0.01)和血管生成素样2蛋白(P<0.05)水平升高,粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage-colony stimulating factor,GM-CSF)、γ干扰素(interferonγ,INFγ)、CCL2、CCL3、CCL20、IL-17A、血管生成素样1蛋白无显著改变。结论经口摄入SPE可降低CRC荷瘤鼠肝组织整体炎症反应,调节血管生成及组织重塑因子,有助于恢复肝功能的动态平衡。     

Expression of extracellular matrix metalloproteinase inducer and matrix metalloproteinases during mouse embryonic development

Mouse embryo implantation is a highly invasive and controlled process that involves remodeling and degradation of the extracellular matrix of the uterus. Matrix metalloproteinases (MMPs) are the main proteinases facilitating this process. Extracellular matrix metalloproteinase inducer (EMMPRIN) can stimulate the production of MMPs and is required for successful implantation in the mouse. The aims of the present study were to examine the expression profiles of mRNA and proteins for EMMPRIN and MMPs in the developing mouse embryo in vitro, and to study whether EMMPRIN protein induces the production of MMPs by mouse blastocysts. EMMPRIN mRNA, detected by RT-PCR, was present at all stages of embryo development from the one-cell to the blastocyst outgrowth. EMMPRIN protein, observed by confocal microscopy, was present on the cell surface at the same stages of development as was the mRNA. Of seven MMPs studied, murine collagenase-like A (Mcol-A), murine collagenase-like B (Mcol-B) and gelatinase A (MMP-2) mRNAs were detected only in blastocyst outgrowths by RT-PCR. Gelatinase B (MMP-9) mRNA was detected both in expanded blastocysts and blastocyst outgrowths. MMP-2 and -9 proteins were detected in the cytoplasm of outgrowing trophoblast cells. Collagenase-2 (MMP-8), collagenase-3 (MMP-13), or stromelysin-1 (MMP-3) mRNAs were not present at any stage of pre- or peri-implantation mouse embryo development. Quantitative RT-PCR analyses showed that recombinant EMMPRIN protein did not stimulate MMP-2 or -9 expression by mouse blastocyst outgrowths. These data suggest that EMMPRIN may regulate physiological functions other than MMP production by mouse embryos during implantation.     

黑咖啡提取物对人皮肤成纤维细胞胶原蛋白及衰老相关基因的影响

目的研究黑咖啡提取物对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSF)胶原蛋白合成及衰老相关基因的影响。方法体外培养HSF细胞,通过CCK-8(cell counting kit-8)法筛选黑咖啡提取物安全剂量;实验分为样品组和空白对照组,用ELISA技术检测黑咖啡提取物对细胞中Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,ColⅠ)和基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1, MMP-1)含量的影响,用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)技术检测黑咖啡提取物作用后细胞中ColⅠ和MMP-1 mRNA的表达水平。结果与空白对照组比较,黑咖啡提取物可抑制HSF细胞中MMP-1合成(P0.05),促进ColⅠ合成(P0.05);使ColⅠmRNA表达水平升高(P0.01),而MMP-1 mRNA表达水平降低(P0.01)。结论黑咖啡提取物通过促进ColⅠ和抑制MMP-1表达,对胶原蛋白代谢具有改善和调节作用,可延缓皮肤衰老。     

暂养过程中亚硒酸钠对斑点又尾鮰免疫应激的缓解作用

为阐明暂养过程中亚硒酸钠对斑点叉尾鮰血液指标的影响,本研究将斑点叉尾鮰随机分为4组（每组20条,鱼水比130 g:1 L）,添加亚硒酸钠（Na2SeO3）至水中初始浓度分别为0（对照组）、0.1、0.2、0.5 mg/L,禁食暂养4 d,每天取样检测鮰鱼肝脏代谢、能量代谢、免疫蛋白及氧化应激等相关血清生化指标。结果表明,暂养初期,0.1 mg/L Na2SeO3组血清中谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）指标值显著（p<0.05）低于0.2 mg/L组和0.5 mg/L组。随着暂养天数增加,Na2SeO3组血清ALT活力和AST活力总体呈下降趋势;其中0.1 mg/L Na2SeO3组暂养2 d时,ALT和AST活力跟对照组相比均显著降低（p<0.05）,最大降幅分别达75.39%和170.13%。随暂养时间延长,0.1 mg/L Na2SeO3组MDA浓度大部分显著（p<0.05）低于0.2 mg/L组和0.5 mg/L组;血糖先显著升高（p<0.05）后显著降低（p<0.05）,与对照组趋势相反,延缓了血糖下降速率。以上结果表明,鱼水比130 g:1 L时,Na2SeO3在水中初始浓度0.1 mg/L暂养2 d左右,可缓解斑点叉尾鮰的应激反应、延缓禁食导致的血糖降低过程并提高其抗氧化能力。     

世界人口负增长的趋势展望与影响应对

目的：旨在探讨黄精提取物（Polygonatum sibiricum extract,PSE）对D -半乳糖（D-galactose,D -gal）致衰老小鼠重要脏器的保护作用及其潜在的分子机制。方法：将小鼠随机分为五组（n=10）：对照组、D-gal（500 mg/kg）组、PSE低（0.5 g/kg）、中（1 g/kg）、高（2 g/kg）剂量组。测定小鼠器官指数（胸腺、脾脏、肝脏、肾脏）;测定血清中肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、尿酸（UA）、尿素（UREA）、肌酐（CREA）、尿素肌酐比值（BUN/Scr）、肾小球滤过率（eGFR）活性;HE及Masson染色观察各组小鼠皮肤、肝脏、肾脏、心脏、大脑、肺等器官病理学变化;用Real-time PCR法检测各组小鼠肝脏、肾脏、心脏、大脑等组织中p53、p16、p21、RB、HO-1、Nrf2及Keap1 mRNA的表达水平。结果：与D-gal组相比,PSE各剂量组胸腺、脾脏、肝脏和肾脏指数均升高（P<0.05）;此外,在各治疗组中,PSE降低了（P<0.05）小鼠血清中CK、CK-MB、ALT、AST、ALP、UA、UREA、CREA和BUN/Scr水平,升高了eGFR（P<0.05）水平;HE及Masson染色发现,PSE能减轻D-gal对小鼠重要器官造成的病理损伤;与对照组比较,模型组肝、肾、心、脑中p53、p16、p21、RB、Keap1 mRNA表达升高（P<0.05）,HO-1、Nrf2 mRNA表达降低（P<0.05）,与D-gal组比较,PSE各治疗组小鼠肝脏、肾脏、心脏、大脑组织中p53、p16、p21、RB、Keap1 mRNA降低（P<0.05）,HO-1、Nrf2 mRNA升高（P<0.05）。结论：PSE具有延缓衰老作用,其机制可能与其抑制p53/p21和p16-RB通路以及Keap1/Nrf2/HO-1通路有关。     

岩藻多糖对染铅大鼠体内铅及矿物质元素含量的影响

目的:研究岩藻多糖对铅染毒大鼠体内铅及矿物元素钙、锌、铜、铁含量的影响。方法:灌胃醋酸铅溶液建立铅中毒大鼠模型,将大鼠随机分为6组:空白对照组,模型组,阳性药物组及低、中、高剂量岩藻多糖组(50、100、200 mg/kg),连续灌胃8周后,处死大鼠并测定血液和各脏器中铅及矿物质元素含量。结果:与空白对照组对比,除脑组织外,模型组大鼠血液及各脏器中铅元素含量极显著升高(P<0.01),钙、锌、铁矿物质元素流失严重;与模型组对比,中、高剂量岩藻多糖组大鼠血液、肝脏、肾脏中铅元素含量极显著降低(P<0.01),钙、锌矿物质元素流失率下降;与空白对照组对比,模型组大鼠肾脏中铜元素上升9.14%,差异不显著(P>0.05),铅毒性虽未对大鼠肾铜稳态造成不良影响,但铅暴露后阳性药的摄入使大鼠肾脏中铜元素含量极显著降低(P<0.01),下降54.46%。结论:铅染毒导致大鼠血液及各脏器中钙、锌、铁元素严重流失,而岩藻多糖在排铅的同时能有效改善染铅大鼠体内矿物质元素稳态失衡,且其高剂量对股骨、肝脏具有较好保护效果。