大米肽含量的快速测定方法

为建立大米肽含量的快速测定方法,选择三氯乙酸(TCA)、乙醇作为沉淀剂分级大米肽中高分子质量的蛋白质,研究TCA、乙醇浓度和体积以及温度和时间对沉淀效果的影响。结果表明:TCA沉淀法的较佳条件为TCA质量浓度150g/L、TCA与大米肽体积比3:1、35℃静置10min,测定大米肽含量为(54.2±0.6)%;乙醇沉淀法的较佳条件为乙醇体积分数75%、乙醇与大米肽体积比5:1、25℃静置10min,测定大米肽含量为(50.6±0.1)%;在30℃条件下反应30min显色结果较稳定。乙醇沉淀法与TCA沉淀法相比线性范围广、灵敏度高、重复性好。     

蛋白水解液中多肽含量的测定方法

用10%(W/V)的三氯乙酸沉淀蛋白水解液中的大分子蛋白质,经离心过滤后,在上清液中加入双缩脲试剂,于540nm下测定其OD值,继而在Gly-Gly-Tyr-Arg四肽标准曲线上查出样品中的多肽含量。     

高蛋白肽奶粉的技术与市场前景

对奶粉和营养素的现状及发展趋势,高蛋白肽奶粉的生产技术及市场前景进行阐述。     

高蛋白低聚肽奶粉生产过程中的风味控制

研究了高蛋白低聚肽奶粉的生产过程中的各种因素对产品风味的影响。结果表明,脱酰胺反应会使产品具有氨味和辛辣味;还原处理和加热处理,对脱脂乳粉和乳清浓缩蛋白的酶解速度和水解液风味都无明显影响;不同的酶解顺序对乳蛋白水解液的风味影响显著;用风味剂不能有效地掩盖酶解液的不良风味。因此,工艺过程中酶的种类、水解度的控制以及酶的水解顺序对产品的风味影响很大。     

高蛋白低聚肽奶粉生产用酶的筛选研究

以水解度(DH)、氮溶解指数(NSI)及低聚肽得率为指标,研究各种蛋白酶对乳蛋白的水解情况.结果表明,碱性蛋白酶、复合酶A和Protamex对各种乳蛋白都有较强的水解作用,其他蛋白酶的作用相对较弱.复合酶B和木瓜蛋白酶作用于各种乳蛋白得到的水解液的苦味程度轻微,而其他酶得到的水解液苦味程度较强且有异味.     

大豆肽的快速测定方法

酶法或发酵方法生产的大豆肽分子量在几百到三十几万之间，传统的隆丁分区法测肽含量方法复杂费时，不适于生产中快速检测。用乙醇作为沉淀剂，先将大分子蛋白除去，再用双缩脲法可快速直接地测出产品中肽含量。本文比较了两种方法，结果表明，新方法可以替代传统的隆丁分区法。     

奶粉中低聚果糖质量浓度的测定

为检测奶粉中低聚果糖的质量浓度,建立起奶粉中低聚果糖的正相高效液相色谱法.样品经质量浓度为100g/L硫酸铜和40g/L氢氧化钠去除蛋白,氨基色谱柱分离,示差折光检测器,柱温30℃,流速1 mL/min,流动相为乙腈:水=70∶30(体积比),标准曲线法定量.蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖在质量浓度范围内线性关系良好,添加回收率分别是99.1％,99.7％,95.3％,方法的精密度的相对标准偏差为0.3％,1.1％和0.3％,检出限为2,2,4mg/kg.该方法快速灵敏,简便准确,适用于奶粉中低聚果糖质量浓度的检测.     

高蛋白低聚肽奶粉的毒理学安全性评价

依据食品安全性评价程序,对高蛋白低聚肽奶粉进行了相关的毒理学安全性评价.结果表明,雌、雄小鼠急性经口LD50＞10 g(每千克体重),属实际无毒级.小鼠骨髓微核试验、精子畸形试验结果均呈阴性;30 d喂养试验中,各组大鼠生长发育良好,主要脏器指数、血常规指标及生化指标均在正常值范围内,未见组织病理学改变.     

双缩脲法检测奶粉中总蛋白质快速检测试纸的研制

研制了能够快速测定奶粉中总蛋白质含量的双缩脲检测试纸。将试纸于1.5倍标准双缩脲试剂浓度的溶液中浸泡10min,60℃干燥15min,滴加样品反应10min,放入光电检测仪,在波长560nm下检测。结果表明,本法线性范围为0～20.0mg/mL,检出限为0.85mg/mL,加标回收率为96.84%～99.23%,测定相对误差为1.01%～1.91%。用本法和凯氏定氮法同时对奶粉样品进行检测,经检验二者测定结果之间差异无统计学意义。该法操作简单、检测迅速、准确度和灵敏度高,适合奶粉中总蛋白质的现场快速检测。      

双缩脲法测定乳中酪蛋白含量

双缩脲法测定乳中酪蛋白是作为一种判定牛乳质量的指标.酪蛋白含有肽键,肽键在碱性溶液中可与双缩脲试剂中的铜离子形成紫红色化合物,用光谱测定法,可求得酪蛋白含量.     

4种蛋白质沉淀剂测定乳粉中非蛋白氮含量的效果

目的 通过测定乳粉中非蛋白氮含量,比较四种蛋白质沉淀剂分离蛋白质和非蛋白含氮物质的效果。方法 样品加水溶解后分别用15 % 三氯乙酸溶液、丙酮、20 %乙酸铅溶液和3 % 草酸钾-7 % 磷酸氢二钠溶液、乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液沉淀蛋白质,同时用三聚氰胺做加标回收,过滤后取滤液消化定氮。结果 三氯乙酸沉淀法计算非蛋白氮含量为0.2036%±0.0002%,相对标准偏差在四种方法中最小,为0.1023%,加标回收率为96.07±2.29%;丙酮沉淀法计算非蛋白氮含量为0.0981 %±0.0050 %,加标回收率在四种方法中最低,为50.56 %±7.90 %;乙酸铅沉淀法计算非蛋白氮含量为0.1372 %±0.0012 %,加标量为79.2mg三聚氰胺/10g样品时,乙酸铅沉淀法加标回收率比三氯乙酸沉淀法更稳定,为96.57%±1.07%;乙酸锌沉淀法计算非蛋白氮含量为0.3466 %±0.0100 %,加标回收率为86.81 %±2.87 %。结论 三氯乙酸沉淀法结果准确度和稳定性较其他三种方法更好,但受到加标量的影响。     

高蛋白肽奶粉的制备工艺研究

对高蛋白肽奶粉的制备工艺进行了研究。选用乳清浓缩蛋白为主要配料,用复合酶B生产高蛋白肽乳粉的酶解条件为[S]12.5%、[E]/[S]1%、pH6.38、温度50℃、酶解时间30min。采用110～120℃/15s的杀菌条件,加工过程不会出现料液中的蛋白凝固。产品无明显苦味,而且产品的不溶度指数、蛋白质的质量分数和肽的质量分数分别为0.12%、31.23%和3.08%。     

氨基酸分析仪检测婴幼儿奶粉中牛磺酸含量

目的建立一种氨基酸分析仪测定婴幼儿奶粉中牛磺酸含量的分析方法。方法样品经0.01mol/L盐酸溶液溶解并用106 g/L亚铁氰化钾溶液和219 g/L乙酸锌沉淀蛋白质后10000 r/min离心10 min取出,精密取上清液置20mL量瓶中,用上样溶液(pH2.2)定容后,采用氨基酸分析仪钠系统进行程序洗脱,LCA K06/Na色谱柱进行分离,茚三酮溶液衍生显色,在570nm波长下测得牛磺酸色谱峰,用外标法峰面积定量,保留时间定性。结果牛磺酸在5.544～110.880μg/mL浓度范围内有良好的线性关系(r=1.0000),回收率为101.47%,相对标准偏差为1.6%(n=9)。结论该方法简单、便捷、准确性高,适合于婴幼儿奶粉中牛磺酸的定量分析。     

免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定乳粉中游离叶酸含量

建立了免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定乳粉中游离叶酸的方法。该方法样品处理为样品用磷酸盐缓冲液溶解后,样液通过叶酸免疫亲和柱净化、甲醇洗脱液洗脱、浓缩富集后直接测定。色谱条件为:Waters C18柱（4.6mm×250mm,5μm）,以20mg己烷磺酸钠+10mL冰乙酸+1.3mL三乙胺定容1L,pH3.2):甲醇（80∶20,V/V）作为流动相;流速为1mL/min;检测波长为280nm。标准曲线回归方程y=-185.68+290.29x,相关系数R2=0.9997;回收率为88.2%;RSD为1.99%。本方法检出限为40μg/kg。该法较国标方法具有样品处理简单方便、灵敏度高、重现性好、分析时间短等优点,可以满足调制乳粉及婴幼儿配方乳粉中叶酸含量的测定。      

酶联免疫吸附法测定乳粉中IgG含量

母乳化乳粉中添加保健功能因子人Ig G.用饱和硫酸铵法从健康人血清中制备粗Ig G,经Sephadex G-100柱制备纯Ig G;用纯人Ig G作为抗原,免疫兔子制备兔抗人Ig G抗体.建立乳制品中人Ig G含量酶联免疫吸附测定,最佳包板物浓度为5.25μg/ml,最佳血清效价为11 600,抗血清亲和力为2.40×107,回收率为88%～94%,测定Ig G浓度范围为5.0～160 ng/ml,最小检测限为3.25 ng/ml.     

乳粉中核苷酸的检测方法

建立了用超声波进行提取,采用高效液相色谱仪、紫外检测器方法,检测出乳粉中CMP,UMP,AMP,GMP4种核苷酸的含量。色谱柱为C—18柱,在室温条件下采用磷酸盐缓;中溶液作为流动相,测得的4种核苷酸标准曲线的相关系数均大于0．9995,回收率为在95．7％～106．8％之间,该方法的变异系数为1．61％,满足使用要求。     

高效液相色谱法测定牛奶和奶粉中的脱氢乙酸

目的建立测定牛奶和奶粉中的脱氢乙酸的高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)。方法样品用硫酸铜溶液和氢氧化钠溶液沉淀蛋白,其中的脱氢乙酸用10%的乙醇溶液进行提取,以甲醇+0.02 mol/L的乙酸铵溶液(用氨水调pH=8.0)作为流动相进行梯度洗脱,经Tech Mate C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,在波长292 nm处进行检测。结果此方法的线性范围是1.003~100.336μg/mL,相关系数r=0.9999,以3倍信噪比计算检出限为0.1μg/m L。加标回收率为87.2%~95.3%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.5%~3.9%。结论此方法简便快速,准确可靠,灵敏度高,可用于牛奶和奶粉中脱氢乙酸的检测。     

乳粉中蛋白质含量的示波滴定法

研究了乳粉中蛋白质含量的示波滴定法.样品用H2SO4-Na2SO4-CuSO4消化处理,N以NH+4的形式存在于试液中,用过量四苯硼钠沉淀铵,沉淀过滤,过量的四苯硼钠用氯化四乙基铵标准溶液返滴定,以四苯硼钠切口消失为终点,计算出氮含量,再换算为蛋白质含量.本方法终点变化敏锐,不外加指示剂,与通用的标准分析方法相比较,操作简便、快速,测定结果准确可靠,所用分析试剂无毒.     

高效液相色谱法分析原料乳和奶粉中三聚氰胺

建立了二极管阵列检测器-高效液相色谱测定原料乳及奶粉中三聚氰胺的方法。奶粉样品经三氯乙酸超声提取,乙酸铅沉淀蛋白,三氯甲烷除去脂肪和非极性杂质,PROELUTPXCSPE阳离子交换固相萃取小柱进一步除去样品基质干扰,氨化甲醇洗脱。实验对色谱分离条件进行了优化,三聚氰胺的质量浓度在1.0～100.0μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,回归方程为y=89.763x-113.72,相关系数为R2=0.9988。加标回收率为90.5%～105.0%,相对标准偏差(RSD)小于4.0%。该方法简单、快速,结果准确可靠。