肽钙螯合物的研究进展

利用酪蛋白磷酸肽螯合钙离子的特性,以钙离子浓度为尺度,分级制取不同钙螯合能力的CPPs,同时提高其纯度。以酪蛋白的胰蛋白酶酶解产物为原料,通过逐级增加Ca²⁺添加量,在终浓度为55%（v/v）的乙醇溶液中分级沉淀出三个酪蛋白磷酸肽-钙螯合物级分（CPP1-Ca、CPP2-Ca和CPP3-Ca）,并利用PBS脱钙得到三个级分相应的酪蛋白磷酸肽（CPP1、CPP2和CPP3）。以传统钙乙醇沉淀法得到的肽钙螯合物（CPP-Ca）为对照,分析并对比三个酪蛋白磷酸肽-钙螯合物级分的理化性质以及持钙特性。结果表明,三个酪蛋白磷酸肽-钙螯合物级分中,CPP3-Ca含有最高的纯度和钙螯合量,分别为89.42%和69.59 mg/g,明显高于未分级CPP-Ca的83.77%和55.05 mg/g。氨基酸组成及N/P（摩尔比）分析发现CPP3-Ca含有更高磷酸丝氨酸基团,进而能够结合更多的Ca²⁺。不同酪蛋白磷酸肽级分持钙能力分析结果显示CPP3能够更好地延迟和阻止磷酸钙沉淀的形成,具有更高的持钙能力。同时CPP3-Ca在模拟肠道环境中具有更高的钙溶解度,表明分级后的酪蛋白磷酸肽-钙螯合物的体外生物利用度提高。

     

食源性钙螯合肽的研究概况

食源性螯合肽是本身具有螯合矿物质元素活性,并可提高机体对矿物质元素生物利用度的一类肽。具有钙结合活性的肽可有效地运输钙离子通过肠上皮细胞,被机体利用吸收。文章对近年来国内外文献报道的食源性钙螯合肽的制备、分离纯化、结构特征、生物活性和生物利用度进行梳理总结,以期为补钙产品的研发及资源的高效、高值化、可持续开发利用提供参考。     

大豆肽钙螯合物的制备、稳定性及表征

豆粕通过醇洗、酸沉、水解工艺制备大豆肽,并将大豆肽与钙离子进行螯合反应,制备大豆肽钙螯合物。测定了大豆肽钙螯合物的氨基酸组成及在磷酸盐溶液中、不同pH下的稳定性,并对大豆肽钙螯合物进行DSC、TGA、Zeta电位、XRD分析。结果表明:大豆肽钙螯合物的钙结合量为53. 03 mg/g,与CaCl_2相比,大豆肽钙螯合物具有更高的钙保留率;具有较高钙螯合能力的大豆肽的相对分子质量主要集中在小于1 kDa的范围内;大豆肽与钙离子螯合后,谷氨酸和天冬氨酸含量由34. 33%提高至49. 83%;大豆肽钙螯合物在不同pH条件下均未发生较大程度的解离;大豆肽与钙离子反应后,电负值由-37. 73 mV降到-12. 32 mV;大豆肽钙螯合物在XRD图谱中的衍射峰收窄,峰值由20°偏移至22. 5°,同时在42. 5°出现1个微弱的衍射峰,且氯化钙的特征峰消失,表明大豆肽与钙离子形成了新的化合物;大豆肽钙螯合物具有更好的热稳定性。     

珍珠肽螯合钙的制备与性质表征

为提高珍珠的利用率,生产易被人体高效吸收利用的补钙剂。以珍珠粉为原料制备珍珠肽,并对其进行钙螯合处理。以螯合物得率和螯合物中钙含量为考察指标,确定珍珠肽螯合钙的最佳制备方法。采用紫外-可见吸收光谱分析（UV-vis）、傅里叶红外光谱分析（FTIR）、圆二色谱分析（CD）、X射线衍射分析（XRD）、差示扫描量热分析（DSC）和扫描电镜分析（SEM）等比较螯合前后的变化。结果表明:珍珠粉经过丙酸酸解、重复离心除杂后得到珍珠蛋白。使用地衣芽孢杆菌蛋白酶（Bacillus licheniformis proteinase, BLP）对珍珠蛋白进行酶解得到珍珠肽,最终珍珠肽螯合钙得率为27.24%±1.29%,珍珠肽螯合钙中钙含量为48.75%±1.20%。对此条件下制备的珍珠肽和珍珠肽钙螯合物进行结构分析,发现珍珠肽的氨基和羧基都参加了螯合反应,并且螯合物的二级结构由原来的无序结构向有序、紧密的结构转变,螯合物的结晶度大幅度提高并生成结构更加稳定的新物质,而且有明显的分子聚集现象。     

汉麻肽钙螯合物的制备及其结构表征和稳定性

汉麻籽仁经脱脂、提取汉麻蛋白、酶法水解制备汉麻肽（HPIH）,再与钙螯合制备汉麻肽钙螯合物（HPIH-Ca）。以钙螯合率为指标,采用单因素实验和正交实验优化HPIH-Ca制备工艺条件;运用红外光谱和圆二色谱分析HPIH-Ca的结构,利用扫描电镜表征HPIH-Ca微观结构,通过热处理、pH和体外模拟消化评价HPIH-Ca的稳定性。结果表明：胰酶是最佳水解酶;HPIH-Ca的最佳制备工艺条件为肽钙比2∶ 1（10 mg/mL HPIH溶液与0.05 mol/L无水氯化钙溶液体积比）、pH 8.0、反应温度60 ℃、反应时间45 min,在最佳条件下钙螯合率为47.61 mg/g;Ca2+与汉麻肽主要通过羧基氧原子和氨基氮原子相互作用; Ca2+与HPIH结合后形成了更为有序和紧凑的二级结构;HPIH与Ca2+交联形成结构有序、紧密的呈片状或大颗粒的肽钙螯合物;HPIH-Ca具有一定的耐热性,但在酸性条件下不稳定;体外模拟消化实验结果显示,HPIH-Ca能保持70%以上的持钙率,具有较高的生物利用度。     

食源肽螯合钙的研究进展

钙是人体必需的营养物质,在生命健康中起着重要作用。钙摄入不足常会引发骨质疏松、佝偻病等诸多疾病。近年来随着越来越多的肽螯合钙从食物中制备出来,肽螯合钙稳定性好、生物利用度高等优点备受关注,它也在诸多研究中被视为一类理想的钙源补充剂。本文就食源性肽螯合钙的研究进展进行概述,介绍了肽螯合钙的制备及分离纯化方法,分析了影响其螯合能力的因素,并探讨了其促进钙生物利用度的方式,为肽螯合钙今后在功能性食品上的开发利用提供帮助。     

玉米低聚肽螯合钙的结构表征及其体外稳定性

以玉米低聚肽和氯化钙为原料制备玉米低聚肽螯合钙,通过分析氨基酸组成、电镜扫描、紫外扫描来表征玉米低聚肽螯合钙的结构特征,并分析其体外稳定性。结果表明：玉米低聚肽经过螯合后,结构和形态都发生了改变;有吸收峰且吸收强度有很大的变化;玉米低聚肽螯合钙在20～80℃、非强酸强碱、胃蛋白酶消化作用下,均具有较好的稳定性。     

花生蛋白钙螯合肽的制备、富集及表征

本文对花生蛋白钙螯合肽的制备工艺进行了研究,并对所得水解产物及其钙螯合物进行了表征。结果表明,在6种市售的蛋白酶中,Alcalase 2.4L对花生蛋白的水解能力最强,其与ProteAXH进行分步复合水解可进一步提高水解效果,在最适条件下所得花生肽的钙结合能力达到了84.09 mg/g、蛋白质回收率高达87.89%;采用酸法脱酰胺可显著提高花生肽的钙结合能力,在最适条件下可达到132.04 mg/g;利用大孔树脂DM301对脱酰胺花生肽进行富集可进一步提高其钙结合能力,在最优条件下可高达164.34 mg/g。荧光光谱及圆二色谱分析证实花生肽与钙离子发生了螯合作用,红外光谱分析则表明花生肽主要通过其羧基与钙离子进行结合。因此,花生肽是一种潜在的钙螯合剂,这对于花生蛋白的高值化综合利用具有重要的参考价值。     

酶法制备乳源钙螯合肽及其特性表征

以牛乳酪蛋白为原料,选用胰蛋白酶为水解酶,以钙螯合活性为指标,对底物浓度、加酶量、pH值、温度和酶解时间5个因素进行单因素试验和正交试验。采用高效凝胶过滤色谱法测定钙螯合肽的分子量分布,同时通过氨基酸自动分析法、紫外-可见光谱和红外光谱法来表征最优酶解条件下的钙螯合肽和钙肽螯合物的结构特性。试验结果表明:底物浓度7%,加酶量0.8%,pH8.7,温度53℃,时间3 h,为最优酶解条件,其钙螯合活性为46.78μg/mL。在此条件下获得的钙螯合肽中,分子量在3 kDa以下的肽组分占92.11%;氨基酸分析表明,谷氨酸、丝氨酸和天冬氨酸这几种具有较强螯合活性的氨基酸的含量明显增加;由紫外光谱和红外光谱的结果可得,钙螯合肽的结构在螯合前后发生了明显的变化,其主要结合位点是-NH2、-COOH。     

食源性功能肽的研究进展

海洋多肽是生物多肽的重要来源之一,海洋来源多肽种类多并且易于被金属离子修饰,因此海洋来源的肽制备金属离子螯合肽有着天然优势,有望成为未来金属螯合肽研究热点。本文综述了海洋来源金属螯合肽的螯合机理,对单齿螯合模式、双齿螯合模式以及 α 螯合模式三种螯合模式进行了说明。同时归纳总结了肽的大小、肽的氨基酸种类和位置以及一些特殊的基团和残基等因素对螯合效果的影响。列举了海洋来源金属螯合肽的制备及纯化方法,分析了不同方法的优缺点。此外,总结了金属螯合肽促进金属离子吸收、抑菌和抗氧化等生物活性,可为金属离子螯合肽制备、功能活性分析及螯合机理研究提供参考。

     

花生肽亚铁螯合物的制备工艺优化及结构特性研究

研究超声波辅助条件下花生肽亚铁螯合物的制备工艺及其结构特性。方法 采用超声波辅助双酶酶解,考察肽铁质量比、pH、螯合温度和时间对螯合率的影响,并采用紫外、红外、荧光光谱及扫描电镜分析花生肽螯合前后空间结构及表观形态变化。结果 超声条件下碱性酶与风味酶复配能显著提高花生肽的亚铁离子螯合率;得到螯合率最佳的反应条件为肽铁质量比3.2:1,pH为7.9,温度38 ℃,时间30 min,亚铁螯合率可达67.5%;光谱分析表明,花生肽段所含的氨基与羧基参与螯合反应,使其空间结构发生改变;扫描电镜结果显示花生肽由平滑的片状结构转变为密集的球状结构。结论 得到了花生肽亚铁螯合物的最优制备工艺并确定其螯合位点,本研究不仅能提高花生粕的经济价值,还有利于促进新型铁制剂的开发。     

糖基化肽的制备、结构表征及生物活性研究进展

肽的结构和功能易受温度、pH值和离子强度改变等环境因素的影响,而糖基团可与肽的氨基酸侧链基团形成共价键进而发生结构修饰,糖基化修饰能有效提高肽分子的稳定性和生物活性。文章综述了糖基化肽的制备方法与结构表征策略,重点阐述了糖基化肽生理活性影响的最新研究进展;并分析了糖基化修饰肽所面临的挑战及未来研究方向。     

钙结合卵黄高磷蛋白磷酸肽的制备及其肽钙螯合物的结构表征

以鸡蛋蛋黄为原料制备卵黄高磷蛋白磷酸肽（phosvitin phosphopeptide,PPP）,并与钙离子螯合制备肽钙补充剂。通过高温高压处理卵黄高磷蛋白,先用胰蛋白酶酶解,以水解度和肽钙结合率为指标,进一步优化碱性蛋白酶的酶解条件以制备PPP。PPP与钙螯合获得螯合物PPP-Ca,通过紫外光谱、红外光谱分析、圆二色谱分析、扫描电镜和Zeta电位分析表征PPP-Ca的结构特性。结果表明最佳酶解条件为加酶量5%、酶解90 min、pH 9.0、温度40℃,在此最优条件下水解度为（25.45±0.17）%,肽钙结合率为（93.41±1.10）%。结构表征发现PPP-Ca主要通过羧基、氨基和磷酸基团相互作用结合,PPP和钙离子结合后其结构变得紧密有序,且有聚集现象。     

麦胚多肽-钙螯合物制备工艺优化及其结构表征

为减少小麦胚芽的资源浪费,提高其附加值,同时解决居民缺钙的问题,对麦胚多肽与钙离子螯合的工艺进行研究。以小麦胚芽为原料,以螯合率为考察指标,设计单因素试验和正交试验,考察温度、麦胚多肽与钙离子物质的量比、时间、pH值对螯合率影响。结果表明,在温度65℃、麦胚多肽与钙离子物质的量比3∶1、时间60 min、pH 9.5的条件下,螯合率达到最大,为86.21%。对最佳条件下制备的麦胚多肽-钙螯合物进行结构分析,红外光谱表明麦胚多肽的氨基和羧基都参与了螯合反应;圆二色谱表明螯合物的二级结构由原来的无序结构向有序、紧密的结构转变;扫描电子显微镜表明螯合物的分子有明显的聚集现象。     

大豆分离蛋白肽钙螯合物的制备及表征

研究了酶解时间和酸法脱酰胺改性对脱植酸大豆分离蛋白肽钙离子螯合能力的影响,并对螯合物的结构特性及营养特性进行表征。结果表明:酶解240 min的肽有较好的钙结合量(57.85mg/g),螯合物得率为28.43%,脱酰胺后钙结合量和螯合物得率分别增加到75.37 mg/g、34.55%;氨基酸分析结果表明酸性氨基酸是参与螯合物形成的重要氨基酸;相对分子质量分布实验结果说明钙离子更倾向于结合相对分子质量大于等于1 000的肽段,螯合物得率高,但相对分子质量小于等于500的肽段是获得更高钙结合量螯合物的重要肽源;红外光谱分析表明钙结合后引起肽段结构的变化,肽链羧基中的O及氨基中的N是主要配位原子;体外消化吸收模拟实验制备的肽钙螯合物有较好的胃胰酶耐受性,经消化后肽段相对分子质量几乎没有变化,钙保留率稳定在87%左右,生物利用率达81.81%。     

大黄鱼蛋白肽-钙螯合物的制备及性质研究

目的 制备大黄鱼蛋白肽-钙螯合物,并研究其结构性质。方法 以大黄鱼鱼糜为原料,通过胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶进行酶解制备多肽,将肽与钙进行螯合,探究大黄鱼蛋白肽及其肽-钙螯合物的性质功能。结果 3种酶解肽中,胰酶肽钙螯合含量最高,胰酶肽的粒径最小,肽-钙螯合物相比于肽的粒径都有所减小,说明肽-钙螯合物是一种致密的纳米颗粒并呈现出折叠多孔的网络结构。这些变化可归因于肽和钙离子之间的相互作用。紫外吸收光谱、荧光光谱、红外图谱和圆二色光谱的结果表明大黄鱼蛋白肽与钙离子螯合,生成了新的肽-钙螯合物。结论 3种酶解肽中,胰蛋白酶水解物的钙离子结合能力在3种蛋白酶获得的水解物中最高。因此,在本研究中胰蛋白酶被认为是制备大黄鱼蛋白水解物钙离子结合活性肽的最优酶制剂,为大黄鱼的高值化利用和新型钙制剂的开发提供了理论依据和实验参考。     

生物活性肽的制备及分离纯化方法研究进展

目前,含有生物活性肽的功能性制剂越来越受关注。生物活性肽作为多种食物蛋白的水解产物,是当前功能食品和膳食补充剂等领域的研究热点。生物活性肽是指一类对机体的功能或状况具有积极作用,并可能最终影响人体健康的特殊蛋白质片段,具有免疫调节、抗菌、抗氧化、降血压、抗衰老、抗肿瘤等多种生物学功能。因具有安全性高、来源丰富、生理功效明显和易于消化吸收等优点,生物活性肽在功能性食品成分和配料领域具有广阔应用前景。本文重点综述了生物活性肽的制备及分离纯化方法,并对其发展前景进行了展望。      

肽-金属离子螯合物的研究进展

肽-金属离子螯合物是一种由肽类物质与金属离子发生螯合反应后生成的具有环状结构的化合物,其具有多种特殊的生物活性。本文综述了目前国内外对肽-金属离子螯合物的制备工艺、螯合反应机理、螯合物的生物活性及其构效关系的研究现状,并对肽-金属离子螯合物的发展前景进行了展望。     

肽-金属离子螯合物的研究进展

肽-金属离子螯合物是一种由肽类物质与金属离子发生螯合反应后生成的具有环状结构的化合物,其具有多种特殊的生物活性。本文综述了目前国内外对肽-金属离子螯合物的制备工艺、螯合反应机理、螯合物的生物活性及其构效关系的研究现状,并对肽-金属离子螯合物的发展前景进行了展望。      

水产蛋白源螯合肽的研究进展

饮食中矿物质元素缺乏可引起多种疾病,造成严重的机体功能失调,营养专家建议人们在日常食用具有促进矿物质元素吸收功能的食品。从健康及饮食偏好角度考虑,食源性矿物质元素补充剂更易被人们所接受,成为近年研究的热点。食源性螯合肽是潜在的能够促进矿物质元素生物利用度的功能成分,具有良好的开发应用前景。随着我国水产加工业的快速发展,每年都会有大量加工副产物被丢弃。从这些加工副产物中制备水产蛋白源螯合肽,不仅能够推进水产加工的高值化利用,还可为食源性矿物质元素补充剂的开发提供新途径,具有重要的社会和经济效益。本文系统收集目前国内外相关研究报道,对水产蛋白源螯合肽的酶解制备、分离纯化、构效关系及生物活性进行了概述。