乳清蛋白酶解制备ACE抑制肽的研究

采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶水解乳清蛋白制备ACE抑制肽，通过体外检测法测定其ACE抑制率。结果表明，碱性蛋白酶水解物的ACE抑制率最大。采用三因素二次通用旋转设计对碱性蛋白酶水解乳清蛋白的水解条件进行优化。研究了底物浓度、温度和酶与底物的质量比对ACE抑制率的影响，建立了回归方程，分析了各因素对ACE抑制率的影响．确定了最优的水解条件。     

乳清蛋白酶解ACE抑制肽分离纯化技术的研究

采用6000 u的超滤膜对乳清蛋白水解物中的ACE抑制肽进行了初步分离,确定了超滤的条件,并测定超滤前后水解物的ACE抑制率,结果表明通过超滤可以富积乳清蛋白水解物中的ACE抑制肽.采用阳离子交换树脂对水解物进行脱盐,通过测定水解物的氮回收率、脱盐率以及ACE抑制率,表明采用阳离子交换树脂脱盐率可以达到80%以上,氮的回收率达到90%以上,而水解物经过阳离子交换树脂基本上对其ACE抑制率没有影响.     

瑞士乳杆菌发酵法制备乳清蛋白源性ACE抑制肽的研究

利用益生菌发酵法制备ACE抑制肽（AngiotensinI-Converting Enzyme（ACE）inhibitory peptides）已成为近年来研究的新热点,对于功能性食品的开发具有十分重要的意义.本文以瑞士乳杆菌（Lactobacillus helveticus）为发酵菌种,研究了其水解乳清蛋白的能力及发酵产物的ACE抑制活性.研究发现发酵产品在瑞士乳杆菌对数生长期收获时为最佳,16h收获时ACE抑制率达到44.17%,活菌数为10^7CFU/ml.发酵产品超滤结果显示,用10000D分子量膜超滤后,其ACE抑制活性比未超滤前提高2.5倍,IC50达到19.63 g/ml.最后对发酵产品进行喷雾干燥和冷冻干燥,发现这两种干燥方法对产品ACE抑制活性没有影响,冷冻干燥的方法产率比较高,可达到106.08g/L,且IC50为50.28μg/ml.     

复合酶解乳清蛋白制备降血压肽的研究

采用碱性蛋白酶、胰蛋白酶水解乳清蛋白制备ACE抑制肽,通过体外检测法测定其ACE抑制率。通过正交试验,得出最优水解条件,即碱性蛋白酶和胰蛋白酶[E1/E2]之比为5:4,温度为45℃,pH值为8.0,时间为150min,水解度11.92%的条件下,乳清蛋白肽对ACE的抑制能力最强,达到60.19%。     

酶解乳清浓缩蛋白WPC80制备乳清肽的研究

用乳清浓缩蛋白WPC80 为原料,在复合酶A 的作用下,研究乳清肽的制备工艺。复合酶A 的反应条件为[S]12g/100mL、温度50℃、[E]/[S]3%、pH9.0。选用截留分子质量10kD 的磺化聚砜膜,常温并在工作压差0.25MPa 下对水解液进行超滤处理后,选用树脂HZ00x 对水解液进行脱苦,得到的处理液无明显的苦涩味,只有轻微的蛋腥味,最后肽得率36.54%。产品中肽的分子质量分布以二、三和四肽为主,分别占峰面积的27.45%、34.88% 和26.65%。     

乳清分离蛋白酶解制备抗氧化和ACE抑制活性产物

以乳清分离蛋白为原料,通过对肽浓度、游离氨基酸含量及水解度的研究,探讨了碱性蛋白酶Alkaline、中性蛋白酶NPU、肽酶AX和风味蛋白酶Flavourzyme对乳清蛋白酶解的影响。在优化碱性蛋白酶Alkaline水解条件的基础上,考察了中性蛋白酶NPU、风味酶Flavourzyme添加时间,获得了复合酶分步酶解工艺:酶解温度55℃,加入1.5% Alkaline([E/S]),维持pH8.5酶解10 min,待pH7.2时加入1% NPU([E/S]),酶解240 min,加入1% Flavourzyme([E/S])继续酶解20 min。在此条件下,肽浓度达到60 g/L以上,游离氨基酸含量为4348 mg/kg。获得的酶解产物基本无苦味。酶解物分子量主要分布在<1 kDa(69.62%)。酶解产物具有ABTS自由基清除和ACE抑制活性,IC₅₀值分别为1.02(0.377 μmol Trolox当量/mg)和1.38 mg/mL。综上,采用复合酶酶解乳清分离蛋白可获得具有抗氧化活性和ACE抑制活性产物,为乳清酶解物在功能食品或保健品领域的运用提供科学参考。     

乳清蛋白功能活性的研究

乳清蛋白是牛乳乳清中存在的一类蛋白质,其必需氨基酸种类齐全、数量充足且比例适当,是一种营养价值较高的优质蛋白,在维持机体肠道、肌肉组织的健康和补充体内的谷胱甘肽数量、抗氧化等方面有重要作用。乳清蛋白中还含有β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、血清白蛋白、免疫球蛋白、乳铁传递蛋白以及乳过氧物酶等多种生物活性蛋白。这些物质参与构成机体非特异性防御屏障,在抗菌、抗病毒、免疫调节等方面也发挥积极作用。     

分步酶解制备乳清蛋白源ACE抑制肽的工艺研究

以云南乳饼加工副产物—乳清水中获得的乳清蛋白粉为原料,采用分步酶解技术获得ACE抑制肽。通过酶的选择、单因素和响应面优化实验,选取了碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶为适宜用酶,确定了最佳酶解工艺条件为酶解温度50℃,酶解时间3 h:2 h,料液比1:35(g/mL),此时酶解产物的ACE率达到88%。本研究可为后续相关功能性食品开发提供借鉴。     

膜分离大豆乳清蛋白的研究

对膜分离大豆乳清蛋白进行了探讨,讨论了截留分子量、压力、温度、pH值对超滤的影响。结果表明:采用截留分子量10000的膜超滤,超滤压力0·2MPa,超滤温度40~50℃,超滤pH值7·5,蛋白质的截留率达90%以上,总糖透过率为80%以上。     

乳清蛋白Maillard反应产物对Caco-2细胞抗增殖抑制的影响

利用Caco-2细胞培养技术,结合MTT检测法,研究乳清分离蛋白(WPI)和还原糖(核糖、半乳糖以及乳糖)的美拉德(Maillard)反应产物对Caco-2细胞生长抑制的影响,以判断乳清蛋白Maillard反应产物的毒理学特性.结果表明,加热处理时间为0,2和4h的乳清蛋白Maillard反应产物,在作用Caco-2细胞质量浓度在0.01～2 g/L范围内,随着Maillard反应产物浓度的增加,Caco-2细胞存活率降低.在相同的作用质量浓度条件下,不同加热处理时间的乳清蛋白Maillard反应产物对Caco-2细胞存活率影响差异显著,即加热处理时间越长的乳清蛋白Maillard反应产物,对Caco-2细胞抑制作用越大.加热处理时间为4h的WPI、WPI-核糖、WPI-半乳糖和WPI-乳糖的Maillard反应产物对Caco-2细胞存活率分别为68.7％,87.5％,86.8％和70.9％,这说明乳清蛋白Maillard反应产物对Caco-2细胞生长具有微弱抑制作用,可作为功能性基料,在食品工业中广泛应用.     

大豆乳清蛋白饮料的研制

研究以生产大豆分离蛋白过程中排放的大豆乳清水为原料,经抽滤、脱色、脱味、脱盐处理后得到富含大豆乳清蛋白的澄清液,然后通过单因素及正交实验确定最佳配方及生产工艺.研制出风味独特、口味清新的大豆乳清蛋白的饮料产品.     

乳清分离蛋白成膜工艺的研究

以乳清分离蛋白(WPI)为主料,通过添加甘油(增塑剂)和半胱氨酸(还原剂),制备乳清分离蛋白膜.同时,对其制备工艺与性能进行了详细分析与测定,从而确定了成膜最佳工艺为:乳清分离蛋白含量为8%,增塑剂添加量为4%.还原剂的添加量为0.6mmol/L.在此工艺条件下测定乳清分离蛋白膜性能:厚度0.101±0.013mm,透明度0.055±0.005.抗拉强度1165.2±20.8g.断裂伸长率70.06%±1.62%,透H2O性17.13±0.63g/m2·h,透O2性3.60±0.08g/m2·d,透CO2性445.56±5.26g/m2·d.     

乳清蛋白的酶法改性研究

采用碱性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶在各自的最适条件下对乳清蛋白粉进行水解,通过HPLC方法测定酶解产物中α-乳白蛋白（α—La）和β-乳球蛋白（β—Lg）的含量。结果表明,碱性蛋白酶对其水解最快,其次为木瓜蛋白酶,而在胃蛋白酶和胰蛋白酶作用下则不易酶解,而且发现α-La比β—Lg更容易水解。     

乳清蛋白粉营养成分分析研究

目的分析不同批次乳清蛋白粉蛋白、脂肪、乳糖、维生素、矿物质及其他功能性营养素的含量及波动情况。方法依照国标方法对乳清蛋白粉营养成分进行检测,并对检测数据进行汇总,分析不同批次间乳清蛋白粉营养素指标的波动范围及相对标准偏差。结果不同批次间乳清蛋白粉营养素波动不大,部分维生素(维生素B12、叶酸、泛酸、维生素C)、矿物质(锌、镁)、功能性营养成分(α-亚麻酸、胆碱、左旋肉碱)相对标准偏差在15%以上,波动较大。结论乳清蛋白粉营养成分含量整体比较稳定。     

乳清多肽的分离纯化及体外抗氧化活性研究

采用乳酸菌发酵乳清制备乳清多肽,利用超滤和凝胶Sephadex G-25分离纯化乳清多肽,并研究了超滤后乳清多肽对羟自由基、氧自由基和DPPH自由基的清除作用。结果表明,超滤后乳清多肽主要包含两个级分,分子量分别为2 031 u和328 u,对羟自由基、氧自由基和DPPH自由基具有清除作用。     

乳清蛋白酶解的工艺条件研究

利用二次旋转回归试验设计较系统地研究了乳清蛋白在碱性蛋白酶催化下的水解作用，得到了在一定的条件变化范围内乳清蛋白水解物的水解度变化规律。建立的回归模型所得结果与实际结果相符，所以该模型可用于对水解度的预测；二次旋转回归设计还可对于乳清蛋白的限制水解进行优化条件选择。     

乳清蛋白糖基化反应特性及抗氧化性的研究

通过干热糖基化反应,选择7种不同的糖基配体,研究乳清蛋白不同糖基复合物的反应特性及抗氧化特性.结果表明,在干热糖基化反应前后,7种糖类与乳清蛋白复合物在420 nm和294nm处的吸光值差异显著(P<0.05);除乳清蛋白-蔗糖复合物外,其他6种乳清蛋白糖基复合物的游离氨基酸含量均显著降低(P<0.05).除了乳清蛋白-阿拉伯胶和乳清蛋白-蔗糖复合物外,其他乳清蛋白糖基化复合物的还原能力和DPPH自由基清除能力都有所提高.乳清蛋白-乳糖复合物的抗氧化能力提高最大,而且具有比Vc和BHA更高的还原能力.     

高效液相色谱法测定乳清蛋白主要成分的研究

建立了测定乳清蛋白中α-La和β-Lg含量的高效液相色谱分析方法,采用Kromasil C8色谱柱(5μm,250mm×4.6mm),流动相A为0.1%的三氟乙酸-水溶液,流动相B为0.09%的三氟乙酸-乙腈溶液梯度洗脱,流速为0.8mL/min,二极管阵列检测器,检测波长215nm,柱温30℃。外标法定量,α-La和β-Lg两种组分线性关系良好,相关系数分别为0.9998和0.9984,检测限为3μg/mL、10μg/mL。     

限制性酶解乳清蛋白功能性质研究

探究乳清蛋白在碱性蛋白酶限制性水解下功能性质变化。以乳清蛋白的溶解性,乳化性、乳化稳定性,起泡性、起泡稳定性为考察指标,确定乳清蛋白的等电点及分析不同水解度下乳清蛋白功能性质在p H调控下的变化。结果表明:乳清蛋白的等电点为4.8。乳清蛋白进行限制性酶解后功能性质有了很大提高,其中溶解性在DH14、p H10下达到最大值,较原蛋白提高了14.55%;起泡性在DH14、p H4下达到最大值,较原蛋白提高了107.5%;起泡稳定性在DH4、p H4下达到最大值,比原蛋白提高了8.66%;乳化性在DH14、p H12下达到最大值,比原蛋白提高了56.1%;乳化稳定性DH4、p H12下达到最大值,比原蛋白提高了50.42%。