模拟酶解大豆7S、11S蛋白及其抗氧化活性的研究

以"活性肽搜寻与蛋白模拟水解系统"为工具,选择碱性蛋白酶和中性蛋白酶对大豆7S、11S蛋白进行模拟水解,得到不同水平的抗氧化肽肽段,以重均分子量为手段,评价理论模拟与实验水解的相关性;以还原力、清除二苯代苦味酰基苯肼(DPPH·)自由基能力比较以上蛋白酶水解物的抗氧化活性.结果表明:模拟与实验水解得到的分子量分布在比例以及重均分子量方面有显著相关性(P<0.01);四种酶解产物均具有一定的抗氧化活性,其中,以7S蛋白的碱性蛋白酶产物表现出最高的还原力和DPPH·清除能力(P<0.05).     

不同分子质量米糠多肽的抗氧化活性

采用截留分子质量为10000、3000D超滤膜对碱性蛋白酶水解米糠蛋白的水解液进行分离,获得不同分子质量(Mw)的米糠多肽混合物组分,以6种抗氧化活性指标对米糠多肽混合物组分的抗氧化活性进行评价。结果表明:米糠多肽的抗氧化活性与蛋白分子质量大小密切相关。Mw>10kD的米糠多肽对.OH的清除能力最强,属于活性氧自由基清除的抗氧化机制;Mw3～10kD的米糠多肽对Fe3+螯合能力最强,属于金属离子螯合的抗氧化机制;Mw<3kD的米糠多肽对O-2.的清除能力、DPPH自由基的清除能力、ABTS+.清除能力和Fe3+还原能力最强,属于电子转移(SET)的抗氧化机制。不同分子质量的米糠多肽抗氧化活性随多肽质量浓度的增加而增加。     

酶法水解脱脂米糠蛋白抗氧化性质研究

以脱脂米糠为原料,采用碱性蛋白酶、酸性蛋白酶和中性蛋白酶酶解制备米糠蛋白,并将制备酶解液与抗坏血酸在超氧阴离子自由基(O2-.)清除率、羟自由基(.OH)清除率、H2O2清除能力及还原能力等方面进行比较,研究米糠蛋白抗氧化活性。结果表明,米糠蛋白具有较强抗氧化活性,虽效果不如抗坏血酸;但对超氧阴离子自由基(O2-.)(最高为98.41%)、羟自由基(.OH)(最高达97.04%)及H2O2均有不同程度清除作用,并具有一定还原能力;且抗氧化能力与添加量存在一定量效关系,其中还出现有促氧化特殊现象。     

双酶法制得米糠蛋白肽抗氧化组分的分离纯化

利用双酶法水解制得了米糠蛋白。以制得的具有生物活性的米糠蛋白多肽混合液为原料,分离纯化得到了米糠蛋白抗氧化肽,为米糠及其蛋白的深加工奠定理论基础。利用木瓜蛋白酶和风味蛋白酶双酶水解制备米糠蛋白肽。以DPPH·,·OH清除率为主要指标,采用不同截留分子量(1.0×10~4和3×10~3 Da)的超滤膜对米糠蛋白肽进行初步分离,获得3种不同分子质量组分,再利用SP-Sephadex C-25离子交换色谱和Sephadex G-25凝胶色谱,逐步分离纯化出单一的抗氧化肽段。采用RP-HPLC证明了分离肽段的均一性,同时分析检测出该肽段的氨基酸组成,明确肽段抗氧化活性与其氨基酸组成的关系:它是由13种氨基酸组成,其中Glu和Asp摩尔分数分别为21.46%和15.57%,还有7种人体必需氨基酸,占米糠蛋白抗氧化肽氨基酸总含量的39.2%。     

马铃薯块茎提取物抗氧化活性研究

以马铃薯块茎为原料,分别以60%乙醇、95%乙醇、蒸馏水、乙酸乙酯为溶剂进行提取.通过过氧化值、清除OH自由基能力、清除O2-·自由基能力及还原能力四种抗氧化体系的测定,比较四种不同提取物的抗氧化性.结果表明,不同提取物在四个体系中都具有一定的抗氧化性质,抗氧化能力的大小顺序为:60%乙醇提取物＞蒸馏水提取物＞95%乙醇提取物＞乙酸乙酯提取物,结果表明,马铃薯块茎提取物中含有酚类及鞣质、多糖类、黄酮类化合物、植物甾醇等活性成分.     

黑胡椒提取物的抗氧化活性研究

研究了黑胡椒提取物的抗氧化活性。分别采用60%乙醇、蒸馏水、正丁醇、乙酸乙酯提取黑胡椒中的抗氧化活性物质,以Vc为阳性对照,通过体外对羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)、亚硝酸盐(NO_2~-)的清除作用及还原能力的测定,评价其抗氧化性能。结果表明:在不同的抗氧化体系中,四种黑胡椒提取物在不同的均具有一定的抗氧化活性且与提取物的质量浓度呈明显的量效关系。60%乙醇提取物在对·OH和O_2~-·清除中表现出较好的抗氧化活性,乙酸乙酯提取物在对NO_2~-清除中表现出较好的抗氧化活性,60%乙醇提取物和正丁醇提取物在还原能力测定中表现出较好的抗氧化活性,且其抗氧化活性均强于同浓度的阳性对照品Vc。     

两种蛋白酶水解油松花粉蛋白的比较

本文研究了碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解油松花粉蛋白的工艺条件,对两种蛋白酶水解得到的肽进行了氮溶指数,清除·OH自由基和抗氧化能力方面进行了比较分析.其中,碱性蛋白酶水解得到的肽,其氮溶指数较高;木瓜蛋白酶水解得到肽,其清除·OH自由基和抗氧化能力较强.     

黑豆多肽的制备及其对乙醇脱氢酶活性的 影响研究

目的制备黑豆多肽,研究其对乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)活性的影响。方法采用碱性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解法制备黑豆多肽。用截留分子量分别为5000、3500、2000、1000 Da的透析袋将黑豆多肽分离成4个相对分子量的肽段,对不同相对分子量的黑豆多肽进行抗氧化能力以及体外醒酒活性实验。结果黑豆多肽在碱性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解后的水解度达35.64%。不同分子量的黑豆多肽均具有对乙醇脱氢酶的激活作用和对羟自由基(·OH)的清除能力,且都随着黑豆多肽相对分子质量的减小而增强。相对分子质量在1000 Da以下的黑豆多肽对乙醇脱氢酶的激活率和羟自由基(·OH)的清除能力最强,分别达22.43%和24.39%。结论黑豆多肽具有较强的乙醇脱氢酶激活率,并且与黑豆蛋白质和其他来源的多肽相比,相对分子质量在500~2000 Da的黑豆多肽中亮氨酸和丙氨酸的含量较多,因此推测黑豆多肽具有较好的醒酒效果。     

酱油渣蛋白水解产物抗氧化性研究

比较六种不同的蛋白酶对酱油渣中蛋白的水解效果,筛选出最适合生产抗氧化肽的Alcalase+中性蛋白酶反应体系,在加酶量6000 U/g、pH=8、60℃、水解2h得到产物具有最好的抗氧化活性.从羟基自由基(OH·)清除能力、超氧阴离子自由基(O2-)清除能力、DPPH清除能力研究水解产物的抗氧化活性.10 mg/mL水...     

苹果皮不同溶剂提取物抗氧化活性研究

研究苹果皮不同溶剂提取物的抗氧化活性。依次用蒸馏水、60%乙醇、无水乙醇、乙酸乙酯提取苹果皮中的活性物质,用Folin-Ciocalteu法测定提取物中总酚含量,并以Vc为阳性对照,通过测定对羟自由基(.OH)、超氧阴离子自由基(O2-.)、亚硝酸盐(NO2-)的清除作用及总还原力,比较评价4种提取物的抗氧化活性。苹果皮60%乙醇提取物总酚含量显著高于其他提取物;在不同的抗氧化体系中,苹果皮的4种不同溶剂提取物均具有不同程度的抗氧化活性且与质量浓度呈明显的量效关系,60%乙醇提取物的抗氧化活性始终最强,其清除.OH和O2-.活性弱于Vc,而清除NO2-活性和还原能力较强且高于Vc。苹果皮抗氧化活性物质主要是60%乙醇提取物。     

乌骨鸡活性肽组成成分及体外抗氧化活性研究

本实验对乌骨鸡活性肽的蛋白质含量、多肽含量、游离氨基酸含量和多肽的分子量分布进行了研究,并通过测定乌骨鸡活性肽对Fenton反应产生的羟自由基、邻苯三酚自氧化产生的超氧阴离子的清除率,考察乌骨鸡活性肽的体外抗氧化能力。乌骨鸡活性肽组成分析表明:活性肽中蛋白质含量为90.53%,其中主要成分为小分子多肽(51.46%)和氨基酸(36.17%)。乌骨鸡活性肽分子量分布的凝胶色谱法测定结果显示其分子量集中在1900Da以下,其中小肽所占相对比例较大。体外抗氧化实验结果表明:乌骨鸡活性肽具有较强的清除羟自由基的能力,其清除率与浓度呈剂量关系;并能明显降低邻苯三酚自氧化速率,抑制率与浓度呈正相关,但与肌肽比较,乌骨鸡活性肽的体外抗氧化能力相对要弱。     

复合蛋白酶水解玉米谷蛋白产物的抗氧化活性研究

以玉米谷蛋白为原料,利用复合蛋白酶对其进行限制水解,探讨不同水解时间所获得的谷蛋白酶解物的分子量分布和抗氧化活性。结果表明:不同水解时间获得的酶解物分子量分布差异较大。水解时间为120min的酶解物中,分子量分布为6 511.51~307.32Da的肽段占94.36%,此时获得的酶解物的抗氧化活性最高,其对DPPH自由基、O-2·、·OH的清除率分别为58.86%,82.64%,37.21%;还原力为0.236;与亚铁离子的螯合能力为29.92%。     

大豆生理活性肽的研究(Ⅱ)--抗氧化性和ACE抑制活性的初步研究

采用AS1.398和Alcalase两种蛋白酶,制备了水解度为10%～24%的大豆多肽,对其抗氧化性、ACE抑制活性和相对分子质量的分布进行了研究,结果表明采用AS1.398酶水解的DH为12%的产品抗氧化活性最高,添加量为6 mg/mL时使亚油酸的氧化诱导期延长2.92倍,其相对分子质量分布在1 000以上的组分较多;采用Alcalase酶水解的DH为14%的大豆多肽产品,ACE抑制活性最高,IC50为0.144 mg/mL,其相对分子质量分布大多在200～600之间.     

多宝鱼不同水解物肽段组成及体外抗氧化活性比较

为研究熟化、模拟消化和酶解对多宝鱼肉水解物抗氧化活性的影响,本研究分别采用碱性蛋白酶和胃蛋白酶-胰蛋白酶水解多宝鱼生肉和熟肉,制备生肉碱性蛋白酶水解物、熟肉碱性蛋白酶水解物、生肉体外模拟消化产物和熟肉模拟消化产物,并评价其水解度、相对分子质量分布、氨基酸组成、肽段组成和体外抗氧化活性的差异。结果表明:生肉碱性蛋白酶水解物的水解度最高,为20.18%;4种水解物的分子质量分布差异明显,共有肽段仅有1条,但氨基酸组成没有显著性差异;碱性蛋白酶水解物以肽段小于1000 Da的组分为主,2～4肽的含量达64.57%～51.73%,而模拟消化产物中1000～3000 Da的组分占比超过50%,以多肽(>10)为主,熟化过程会减少小肽(<6)的比例;体外抗氧化活性分析显示,碱性蛋白酶水解物的抗氧化活性均高于模拟消化样品,熟化会降低生肉碱性蛋白酶水解物的抗氧化能力,生肉碱性蛋白酶水解物具有最高的超氧阴离子和羟基自由基清除能力,以及最佳的铁离子还原能力。因此,碱性蛋白酶是优于模拟消化的多宝鱼蛋白水解方式,鱼肉的熟化总体上会降低水解物的抗氧化能力。     

克氏螯虾虾头Protamex蛋白酶水解产物的抗氧化活性和功能性质研究

使用Protamex蛋白酶对克氏螯虾虾头蛋白进行水解,以制备抗氧化活性肽。结果表明:虾头蛋白肽的还原力、Fe2+螯合力和DPPH自由基清除能力与蛋白肽的浓度之间存在量效关系,均随着肽浓度的增大而增大。通过对蛋白肽的分子量分布进行研究发现,95.14%的多肽的分子量小于1000Da。同时测定了酶解产物的功能特性,结果表明pH对虾头蛋白水解物的溶解性、起泡性和乳化性具有显著影响。     

Reducing,Radical Scavenging,and Chelation Properties of Fermented Soy Protein Meal Hydrolysate by Lactobacillus plantarum LP6

Fermented soybean protein meal hydrolysate (FSPMH) was fractionated by gel filtration on Sephadex G-15. The fractions obtained were subjected to various antioxidant assays, amino acid and molecular weight determinations. Among the seven fractions, the highest antioxidant activity was found in fraction F2, with significant differences (P < 0.01) 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, hydroxyl radicals (^.OH) scavenging and Cu²⁺ chelating activity. Fraction F2 exhibited scavenging of DPPH (59.43%), ^.OH (72.80%) and 44.47% Cu²⁺ chelating activity. All other fractions showed variable activities in different assays. Amino acid analyses of F2 fraction with the strongest antioxidant activity also had the highest percentage of related antioxidative amino acids content (Histidine 3.46, Serine 5.78, Valine 4.08 and Lysine 11.49 g/100 g protein) compared with other six fractions. The molecular weight distribution of F2 was found to vary from 170 to 1500 Da.     

Antioxidant activity of bigeye tuna (Thunnus obesus) head protein hydrolysate prepared with Alcalase

The antioxidant activities of tuna head protein hydrolysate (THPH) prepared with Alcalase were evaluated. THPH showed evident radical scavenging activity in a dose‐dependent manner with the IC₅₀ values for 1,1‐diphenyl‐2‐pycrylhydrazyl (DPPH), superoxide and hydroxyl radicals being 1.34, 1.20 and 2.84 mg mL^?1, respectively, and its reducing power was 0.948 at 12.5 mg mL^?1. THPH showed good inhibitory activity in soybean oil peroxidation after accelerated oxidation at 60 °C, and the oils with 0.01%, 0.05% and 0.1% THPH had significantly (P < 0.05) lower peroxide values than the control, after storage at 60 °C. Moreover, the inhibited oxidation effect of 0.1% THPH was similar to that of 0.01% butylated hydroxytoluene (BHT). The molecular weight distribution of THPH revealed that 70.5% of the total amount was peptides with molecular weight lower than 5000 Da, composing mostly of low molecular weight peptides located at 1020–2585 Da (30.78%) and 241–1020 Da (37.15%).     

鸡肉蛋白酶解条件及产物降解规律

采用木瓜蛋白酶水解鸡肉蛋白,通过单因素实验和正交实验确定水解鸡肉蛋白的最适条件,并在此水解条件下酶解24 h,研究水解过程中酶解液中游离氨基酸含量和肽分子质量分布的变化规律。结果表明,最佳的酶解条件为:温度45℃,pH6.5,酶用量6.0%,固液比1∶2,水解时间6 h;酶解产物中游离氨基酸种类齐全且含量较高,水解过程中,游离氨基酸总量变化呈增长的趋势,16 h后变化不大;酶解液的肽分子质量都集中在3 000Da以下,酶解过程中大分子质量肽不断减少,小分子质量肽不断增加;酶解24 h后,分子质量小于1 000 Da的小分子肽和氨基酸含量可达97.19%。     

不同蛋白酶对小麦蛋白酶解物抗氧化活性的影响

小麦蛋白是小麦淀粉加工的副产物,酶解是提高小麦蛋白溶解性和功能性的有效方式,而酶解用酶种类可能对酶解产物的功能性如抗氧化活性有一定影响。采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶6种常用的蛋白酶分别对小麦蛋白进行酶解,并对酶解4 h后酶解物的多肽得率、分子质量分布、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除率、羟自由基(·OH)清除率等反映水解程度和抗氧化能力的主要指标进行评价。结果表明,风味蛋白酶酶解物中多肽得率最高,达91.44%,且分子质量小于3 000 D的多肽含量达76.9%;酶解物质量浓度为3 mg/m L时,木瓜蛋白酶酶解物对DPPH自由基清除作用最好,清除率为65.12%(P0.01),其次是风味蛋白酶(58.43%)和碱性蛋白酶(55.29%);碱性蛋白酶酶解物对O_2~-·清除率效果最好,清除率为58.68%(P0.01),其次是风味蛋白酶(49.25%);碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解物对·OH清除效果最佳,清除率分别为59.23%和58.16%。结果说明,蛋白酶种类对小麦蛋白酶解物抗氧化活性影响显著,风味蛋白酶对提高蛋白水解程度和生成小分子质量多肽的作用明显,而碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶对提高酶解产物抗氧化活性效果较好。