鱼鳞鱼皮制备胶原蛋白肽研究进展

鱼类加工副产物——鱼鳞鱼皮富含胶原蛋白肽,其来源丰富、价格低廉、加工简单,是鱼源肽加工企业的首选原料。该文对鱼鳞鱼皮制备胶原蛋白肽的提取方法、分离过程、鉴定及功能方面的研究进展进行综述,并对以鱼鳞鱼皮为主要原料制备美白保湿肽的发展前景进行展望,为其进一步的高值化利用提供参考。     

淡水鱼鳞水解胶原蛋白的酶法制备

对几种常见淡水鱼鳞的基本成分和氨基酸组成进行测定,研究酶解鱼鳞制备水解胶原蛋白的工艺,并采取正交试验时水解条件进行优化.结果表明:淡水鱼鳞主要由蛋白质和灰分组成,粗蛋白含量高达55%以上;氨基酸组成显示淡水鱼鳞羟脯氨酸含量丰富,是制备水解胶原蛋白的良好原料.正交实验结果表明:55℃、E/S为3%、酶解2 h、底物浓度100 g/L时水解效果最好,此时,水解产物分子量较小,且分布集中.     

酶解鱼皮胶原蛋白制备抗氧化肽工艺研究

酶解鱼皮胶原蛋白制备小分子量的肽。分别研究酶用量、酶解时间、酶解温度及pH值对酶解产物分子量的影响。研究结果确定了最适酶解工艺:木瓜蛋白酶用量0.75‰(m/m),时间2h,温度50℃,pH为6。抗氧化活性试验表明,小分子量胶原蛋白清除自由基能力从原胶原蛋白的26%提高到74%。     

草鱼鳞和草鱼皮胶原蛋白性质及自聚集行为对比研究

以草鱼为原料,采取酸-酶结合法提取鱼鳞及鱼皮中胶原蛋白,经紫外光谱(ultraviolet spectrum,UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、傅里叶变换红外光谱(fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)以及差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)对比其结构性质,采用浊度实验、聚集程度实验和扫描电镜(scanning electronic microscopy,SEM)比较2种胶原蛋白的体外自聚集行为。结果表明,提取的2种胶原蛋白均具有2条α链,为典型I型胶原蛋白,并保持了良好的三螺旋结构,鱼鳞、鱼皮的变性温度分别为34.99℃和39.75℃。在30℃的中性盐溶液条件下,2种胶原蛋白均可产生自聚集行为且鱼皮、鱼鳞胶原蛋白的聚集程度分别为28%和27.33%。经SEM观察到2种来源胶原蛋白均能自聚集形成交织状纤维,其中鱼鳞胶原蛋白的网状纤维结构更加明显并具有胶原原纤维的周期性横纹D带,而鱼皮胶原蛋白自聚集的胶原纤维结构有一定坍塌且无D带。     

草鱼鱼鳞胶原蛋白肽的制备及分析

草鱼鱼鳞为淡水产品副产物。我们用木瓜蛋白酶水解草鱼鱼鳞并优化酶解条件,运用Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳和凝胶渗透色谱确定所得胶原蛋白肽的分子量,并分析了其中的氨基酸组成。结果表明,最佳酶解条件为:酶解温度60℃、酶添加量8%(质量分数)、酶解时间2 h、pH 5.0、料液比1∶30(g/mL)。所得的胶原蛋白肽分子量小于500 u,其中主要含有甘氨酸、丙氨酸、羟脯氨酸、精氨酸和天冬氨酸。     

草鱼鱼鳞胶原蛋白提取及活性肽制备研究

以草鱼鱼鳞为原材料,探讨其胶原蛋白酸-酶组合提取工艺,并进一步研究相应抗氧化活性肽和血管紧张素转换酶抑制(ACEI)活性肽的制备方法。结果表明,草鱼鱼鳞胶原蛋白提取的最优工艺为:乙酸浓度0.3 mol/L、乙酸提取固液比1∶15(g/m L)条件下低温下提取24 h;离心后剩余残渣再按1∶10(g/m L)的比例浸入浓度为2%的胃蛋白酶溶液中低温下提取48 h;在该条件下鱼鳞胶原蛋白提取得率可达49.58%。以草鱼胶原蛋白粗提液为原料,制备抗氧化活性肽的最优工艺为:控制胶原蛋白浓度12.5 mg/m L,按10∶1(体积比)的比例加入浓度为4%的木瓜蛋白酶,60℃下酶解75 min,所得酶解液对ABTS~+自由基的抑制率可达45.7%;制备ACEI活性肽的最优工艺为:控制胶原蛋白浓度20 mg/m L,pH值调节为4.0,每10 m L加入6 000 U的酸性蛋白酶,37℃酶解3 h,所得酶解液对血管紧张素转换酶(ACE)的抑制活性可达98.8%。本研究结果,有望为水产品加工副产物的资源化利用提供参考。     

鲢鱼鱼鳞胶原蛋白肽抗氧化作用研究

研究鲢鱼鱼鳞胶原蛋白肽-SCSCP-的抗氧化活性. 依次采用截留分子量为5, 3, 1ku的超滤膜对鲢鱼鱼鳞胶原蛋白肽进行分离分级,通过6种体外抗氧化指标评价各超滤组分抗氧化活性的强弱,分子量小于1ku的SCSCP-IV体外抗氧化活性最强-P＜005- ;氨基酸组成分析表明,SCSCP-IV中总疏水性氨基酸和精氨酸含量均较高,推测可能与其较高的抗氧化活性有关;建立高脂动物模型,考察SCSCP-IV在大鼠体内的抗氧化作用,结果显示SCSCP-IV能显著提高大鼠血清中抗氧化酶超氧化物歧化酶与谷胱甘肽过氧化物酶活力以及降低丙二醛含量-P＜0 05- ,表明SCSCP-IV在大鼠体内具有较好的抗氧化作用;结果表明SCSCP在体外和体内均具有良好的抗氧化活性.     

淡水鱼皮鱼鳞胶原蛋白粉的成分比较

对淡水鱼皮、鱼鳞胶原蛋白粉的成分进行了分析比较:两者的氨基酸总量、蛋白质、酸溶蛋白、多肽、游离氨基酸含量基本接近,鱼鳞胶原蛋白粉的羟脯氨酸含量、矿物质含量高于鱼皮胶原蛋白粉。      

超声波辅助酶法水解鱼鳞胶原蛋白的工艺研究

采用超声波辅助木瓜蛋白酶水解鱼鳞胶原蛋白。研究超声波功率和作用时间对酶解反应的影响,应用正交设计优化酶解工艺条件。结果表明,最佳酶解工艺条件为:酶用量4 g/L、温度55℃、pH 5.5,在超声波功率为500 W、作用20 min后,继续酶解5 h。在此条件下,鱼鳞胶原蛋白的水解度为25.6%。与常规酶解方法比较,常规酶解8 h水解度为16.6%。说明超声波对木瓜蛋白酶水解鱼鳞胶原蛋白有促进作用。     

微生物制剂发酵法脱除鱼鳞胶原蛋白肽腥味工艺研究

该试验以主要腥味物质氧化三甲胺（TMAO）的去除率和蛋白损失率为检测指标,探讨了甜酒曲、乳酸菌及酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）3种微生物制剂对鱼鳞胶原蛋白肽的去腥工艺。结果表明,甜酒曲的去腥效果最佳,在甜酒曲接种量为0.06%、去腥时间为40 min、初始pH为4.0、去腥温度为28 ℃的条件下,氧化三甲胺去除率可达95.85%,蛋白质损失率为5.95%。     

罗非鱼皮胶原蛋白肽制备的工艺优化

以罗非鱼鱼皮为原料,研究利用酶法制备胶原蛋白肽制品。测定了罗非鱼皮的基木组成成分,利用低温连续相变萃取技术进行脱脂处理;以水解度、水解产物分子量和感官评定为指标,研究蛋白酶种类对酶解的影响;以水解度为指标,研究酶解条件对水解度的影响,并采用响应面试验对鱼皮胶原肽制备工艺进行优化;用凝胶过滤色谱法测定酶解液分子质量分布。结果表明:采用碱性蛋白酶水解鱼皮效果最好,酶解的最佳工艺条件为:时间7 h、加酶量7%、温度60℃、pH值10.38,在此条件下碱性蛋白酶水解罗非鱼皮的水解度最高可达23.01%。由本法所得胶原肽是以分子质量180~1000 u之间的寡肽(约2~8个氨基酸残基)为主的物质,具有较好的生理活性,可作为功能因子广泛应用于保健食品、化妆品、医药等各个行业当中。     

利用猪副产物酶法制备胶原多肽

近年科学研究发现,人体摄取蛋白质经酶消化后,并非主要以氨基酸形式吸收,而以肽的形式吸收;一些肽不仅能提供人体生长发育所需营养物质,同时还具有多种生理功能。猪副产物中含有丰富的胶原蛋白,利用蛋白酶水解胶原蛋白生产胶原多肽,对促进猪副产物的精深加工发展具有积极作用。本文介绍目前酶法制备胶原多肽研究进展,讨论影响酶解效果的因素,阐述了胶原多肽生理功能及发展前景。     

酶法制备鱿鱼皮胶原蛋白肽工艺的条件优化

研究了鱿鱼皮胶原蛋白肽的酶解加工工艺条件。在单因素试验基础上,通过正交试验的方法对碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶及风味蛋白酶制备鱿鱼皮胶原蛋白肽工艺进行优化。优化的提取工艺条件如下:先用0.3%蛋白酶在p H10.5、温度47.5℃条件下水解4 h,再用0.4%木瓜蛋白酶复合风味蛋白酶按1∶2(质量比)的比例在p H 7.5、温度50℃的条件下继续水解4.5 h,结果酶解液的水解度可达28.89%、DPPH·清除率为88.24%,多肽转化率为49.74%,同时84.56%的胶原蛋白肽分子量分布介于180 Da~2 000 Da之间。在优化的酶解条件下,可以得到较好品质的胶原蛋白肽产品。     

长鳍金枪鱼鱼皮胶原蛋白肽制备工艺的研究

以长鳍金枪鱼鱼皮为原料,采用碱热复合酶三步水解法制备胶原蛋白多肽。以水解度、氮回收率和水解产物分子量为指标,通过单因素和多因素正交设计试验,确定最佳酶解条件。结果表明:碱处理为第一步,鱼皮经过0.1 mol/L Ca(OH)_2反复清洗数次,最后清水冲洗干净;热处理为第二步,鱼皮于水浴锅中90℃处理30 min;酶解为第三步,梯度加入碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味酶,酶解的最佳工艺条件为:复合酶料比1∶200(g/g),料水比1∶2.5(g/m L),酶解温度55℃,p H为9.0~6.5,酶解总时间为4 h,水解度平均能达到30%,酶解液脱色的最佳条件为,活性炭添加量2%,自然pH,温度70℃,时间30 min,经过浓缩喷雾干燥后的胶原蛋白粉末经过HPLC分析,得到分子量在3 kD以下的多肽占到85%以上。     

木瓜蛋白酶水解猪皮制备胶原多肽的研究

以新鲜猪皮为原料,利用木瓜蛋白酶水解法制备胶原多肽,并对影响木瓜蛋白酶水解过程的各个因素进行研究.通过对猪皮水解度的测定,确定木瓜蛋白酶水解猪皮制备胶原多肽的最适pH为5,最适温度为60℃,最适酶量为0.9%,最适底物浓度为30%,水解时间3h.在此水解条件下,水解度达到14.91%.     

超声辅助酶解制备草鱼鳞胶原肽及其理化特性评价

以草鱼鳞为原料,基于研究室原有工艺条件,在酶解过程中施加超声,研究超声功率（0?600 W）和超声时间（0?40 min）对胶原肽得率及理化特性的影响。结果表明,超声对产物得率影响显著。单酶酶解使用碱性蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶。超声条件增加,水解度和氮收率先升高后降低;在碱性蛋白酶酶解时施加300 W、20 min超声,水解度从5.37%升到7.27%;分步酶解使用碱性蛋白酶和风味酶,在每步酶解各施加300 W、10 min超声时,水解度从9.26%升到11.05%。超声对产物分子量和氨基酸含量有一定影响,产物分子量集中在500 u~1 ku,单酶酶解胶原肽在该段分布从24.26%升至33.99%,分步酶解胶原肽在该段分布从31.99%升至39.28%;单酶酶解氨基酸含量从66.30 g/100 g升至73.75 g/100 g;分步酶解从66.05 g/100 g升至70.70 g/100 g。超声对产物乳化性、起泡性和泡沫稳定性影响显著。综上,单酶酶解最佳工艺为碱性蛋白酶酶解中施加300 W、20 min超声;分步酶解最佳工艺为在每步酶解中各施加功率300 W、时间10 min的超声。     

酶解鱼鳞胶制备小分子多肽的研究

以鱼鳞为原料采用蛋白酶酶解，确定制备小分子多肽的最佳工艺条件。发现用混合蛋白酶进行阶段酶解效果最好；对两种脱苦、脱腥的方法进行了比较，发现用复配脱色剂比用活性碳优越；发现超滤分离技术和反渗透膜分离技术对水解液有纯化、浓缩作用；最后经微胶囊化包埋喷雾干燥等技术得到的粉末制品含有较多的小分子多肽，是医药和食品的良好中间体产品。     

猪皮胶原蛋白酶解及其酶解产物的抗氧化活性

以新鲜猪皮为原料,利用Alcalase水解胶原蛋白,并对影响Alcalase水解过程的各个因素进行研究,通过对水解度和超氧阴离子自由基(O2－ ·)清除率的测定,确定Alcalase水解猪皮胶原蛋白的最适条件;研究在最适条件下制备的不同质量浓度的猪皮胶原蛋白酶解液对DPPH自由基和O2－ ·的清除效果。结果表明：Alcalase水解猪皮胶原蛋白的最适条件为：pH7.5、温度55℃、酶与底物比6000U/g、底物质量浓度40mg/mL,水解时间4h;在此水解条件下,水解度达到9.55%,O2－ ·清除率达到60.11%;在相应质量浓度10～50mg/mL范围内,猪皮胶原蛋白酶解液的DPPH自由基最大清除率为95.06%,IC50为3.89mg/mL;O2－ ·最大清除率为65.89%,IC50为16.43mg/mL。猪皮胶原蛋白酶解液具有较强的自由基清除能力。     

鲢鱼皮、鱼鳞胶原的制备及理化特性的研究

从鲢鱼皮、鱼鳞中分别提取并纯化酸溶性和酶溶性胶原,得到四种不同的胶原,并分析四种胶原在分子组成、空间结构、热稳定性等方面的异同,为基于淡水鱼来源的胶原材料的构建提供理论依据。研究发现,四种胶原的紫外图谱、红外图谱和圆二色谱图相似,即空间结构类似,均具有天然的三股螺旋的空间构象,符合典型的Ⅰ型胶原的特点;四种胶原的氨基酸组成和比例接近;酸溶性胶原(ASC)的分子结构中二聚体β链含量多,且α1链和α3链的分子量相同,酶溶性胶原(PSC)的分子结构中二聚体β链含量少,三条α链区分明显,且鱼皮PSC和鱼鳞PSC的α链分子量分布不同;ASC溶液的粘度大于PSC,鱼皮ASC溶液的粘度大于鱼鳞ASC;四种鲢鱼胶原的热变性温度不同,即用不同方法从不同部位提取的胶原热稳定性有差异。     

云南鲷鱼骨胶原蛋白的制备及其理化性质

以云南鲷鱼骨为原料,采用低温酸法提取制备鱼骨中的酸溶性胶原蛋白（acid-soluble collagen,ASC）, 并对ASC的氨基酸组成、亚基组成、红外吸收、紫外吸收、热稳定性、X射线衍射、微观结构、多肽片段以及溶解 性进行了全面的分析。氨基酸组成表明ASC主要含甘氨酸、脯氨酸和丙氨酸,而酪氨酸、蛋氨酸和半胱氨酸含量 较低;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示ASC为Ⅰ型胶原蛋白;ASC在230 nm波长处有最大紫外吸收 峰;傅里叶变换红外光谱和X射线衍射图谱表明ASC分子排列紧凑,保持了其原有的三螺旋结构;差示扫描量热分 析结果显示ASC的变性温度分别为86.5 ℃和226.2 ℃,有较好的热稳定性;扫描电子显微镜显示ASC分子分布均匀、 表面光滑呈三维立体结构;多肽片段分析结果显示鱼骨胶原的氨基酸构成主要为Gly-X-Y,符合胶原蛋白的一级结构 的特点;在pH值小于4的条件下,ASC溶解度较高,当NaCl质量分数大于4%时,ASC溶解度剧烈下降。