壳聚糖固定瑞士乳杆菌蛋白酶的条件研究

以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂,采用交联-吸附法对瑞士乳杆菌蛋白酶的固定化条件进行研究。在单因素试验基础上,以固定化酶活力为主要指标,研究凝结液、壳聚糖质量浓度、酶用量、交联时间、戊二醛质量浓度对瑞士乳杆菌蛋白酶固定化的影响。运用响应面对固定化条件进行优化,确定瑞士乳杆菌蛋白酶的最优固定条件：凝结液为4g/100mL NaOH-甲醇(体积比3:1)、壳聚糖质量浓度2.89g/100mL、酶用量2.95mg、交联时间1h、戊二醛质量浓度0.40g/100mL,此时固定化酶活力为28.67U。     

瑞士乳杆菌发酵乳制备ACE 抑制肽的条件优化

本研究以脱脂乳为主要原料,对瑞士乳杆菌发酵产生血管紧张素转化酶(angiotensin I-converting enzyme,ACE)抑制肽工艺条件进行研究。通过单因素试验和响应面试验设计,确定瑞士乳杆菌发酵脱脂乳生产ACE 抑制肽的最佳工艺条件为：脱脂乳浓度9.67%(m/V)、底物灭菌时间30min、接种量3%(V/V),温度38.82℃、发酵时间6.26h,测得ACE 抑制率为92.26%。研究结果证实利用发酵法生产乳源ACE 抑制活性肽对控制高血压具有重要意义。     

利用富硒菌体制备富硒酸乳

以Lyofast LH 13瑞士乳杆菌和Lyofast LB 8保加利亚乳杆菌为原料菌,研究复合菌体富硒条件。在单因素试验基础上,利用响应面得出,最优富硒条件为:Lyofast LH 13瑞士乳杆菌和Lyofast LB 8保加利亚乳杆菌接种复合比例1∶1,加硒质量浓度10μg/mL,接种量5%,复合菌体培养后25 h后加入硒溶液,培养时间60 h。在该最优条件下,复合菌体含硒量554μg/g。硒转化率为55.4%。利用富硒的复合菌种发酵剂发酵的酸乳在贮藏期内有机硒含量达27.7μg/kg,具有较高的硒含量,且在贮藏期中,各项理化指标均处于较优水平。     

瑞士乳杆菌发酵乳清蛋白制备ACE抑制肽的条件优化

对瑞士乳杆菌发酵乳清蛋白产生血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽的发酵条件进行探讨。通过单因素分析和响应面试验设计,确定发酵乳清蛋白制备ACE抑制肽的最佳工艺条件：发酵时间为17.52h,发酵温度为37.07℃,乳清质量浓度为114.1g/L,其ACE抑制率可达89.337%。     

瑞士乳杆菌ND01(L.helveticus ND01)发酵乳中ACE抑制活性和γ-氨基丁酸的研究

从81株分离自新疆地区传统酸马奶中的乳杆菌中筛选到瑞士乳杆菌(L. helveticus)ND01.以该菌发酵1l%脱脂乳,测定其不同发酵时间的ACE抑制活性、游离氨基氮、γ-氨基丁酸(GABA)、pH值、OD值和滴定酸度.测定结果表明:37℃发酵24 h,发酵乳的ACE抑制活性最大值为67.18%;发酵至30h,γ-氨基丁酸的最大含量为165.11 mg/L;该菌株在pH 3.50条件下生长特性良好,具有较强的蛋白分解能力,为开发降血压乳制品提供可行性.     

瑞士乳杆菌发酵牛乳产生抗ACE活性条件的优化

本实验探讨了发酵条件对瑞士乳杆菌发酵牛乳产生抗ACE活性的影响。在单因素试验的基础上,进行正交试验,得出能产生较高抗ACE活性的最佳工艺条件是:发酵温度为37℃,发酵时间为12h,无脂乳固形物浓度12%(W/V)。     

混菌固定化对生物合成共轭亚油酸的影响

海藻酸钠为固定材料,研究了嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌先混菌后固定化对生物合成共轭亚油酸的影响.试验结果表明,最佳固定化条件为:海藻酸钠3.5%,氯化钙2.5%,菌种(嗜酸乳杆菌∶嗜热链球菌=1∶1,La:St=1∶1)包埋量40%,胶粒直径3mm,固定化时间1h;最佳发酵条件:培养温度37℃,发酵时间24h.在此条件下CLA积累量可达118.91μg/mL.固定化后菌种活力得到保持持久且可重复利用.     

瑞士乳杆菌TUST005发酵乳ACE抑制活性的研究

通过正交试验确定瑞士乳杆菌TUST005制备具有抑制血管紧张素转换酶(ACE)发酵乳的最佳工艺条件.脱脂复原乳浓度为13%,经灭菌后,接种3%(体积百分数)的发酵剂,在不同的温度和时间组合下培养,超滤发酵乳的乳清,测定滤液的ACE抑制活性.42℃,6h发酵乳样品ACE抑制活性最高,为35.71%.4℃下后发酵3d的抑制活性最佳,为45.91%.     

米糠蛋白源ACE抑制肽的酶解制备及活性研究

目的：开发米糠新产品。方法：以ACE抑制率为指标,通过单因素和响应面试验对米糠蛋白进行酶解工艺优化研究,并对最优酶解物活性肽进行超滤分离、活性评价和氨基酸组成分析。结果：米糠蛋白最优酶解工艺条件为：pH 7.2,底物质量浓度8.2 g/100 mL,酶解温度46 ℃,酶解时间3 h,酶添加量0.3 g/100 g米糠蛋白,在此条件下所得酶解物ACE抑制率为(73.15±0.64)%,而且酶解物含有丰富的疏水性氨基酸(23.09 g/100 g);活性分析表明,分子量＜3 kDa活性肽组分在同质量浓度(1.0 mg/mL)下ACE抑制活性[(81.68±1.08)%]优于分子量＞3 kDa活性肽组分[(58.65±2.21)%]和酶解物[(72.64±1.61)%]。结论：米糠蛋白酶解物具有显著的ACE抑制活性,活性肽组分的分子量对ACE抑制活性具有显著影响。     

产共轭亚油酸瑞士乳杆菌L7固定化条件的研究

对瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus) L7发酵生产c9,t11-CLA的固定化条件进行研究。应用响应面法对细菌固定化的条件进行优化,得到的优化条件为：海藻酸钠质量浓度1.78g/100mL、氯化钙质量浓度3.13g/100mL、固定化时间60.30min,利用在此条件下制备所得的固定化胶珠发酵,c9,t11-CLA的产量达到561μg/mL。固定化细胞重复利用5次后活力没有明显变化,c9,t11-CLA产量保持在549μg/mL。电镜观察发现,固定化胶珠表面及内部为错综复杂的网状通道结构,能够很好的满足物质的传递。结果表明菌体细胞经海藻酸钠固定,可以有效提高菌体的重复利用率,从而降低c9,t11-CLA的生产成本。     

固定化Amycolatopsis sp.ST2710分段发酵无锡他汀

用海藻酸钠对Amycolatopsis sp.ST2710细胞进行固定化处理。以固定化细胞的机械强度以及分段发酵无锡他汀的转化率为指标,考察了海藻酸钠浓度、CaCl2浓度、固定化时间和包埋菌体量对固定化细胞分段发酵无锡他汀的影响,得到最佳的固定化条件为:海藻酸钠浓度20 g/L、CaCl2浓度10 g/L、固定化时间1 h、包埋菌体量2 mL菌悬液/10 mL凝胶。对固定化细胞分段发酵无锡他汀的特点进行了研究,结果显示:Amycolatopsissp.ST2710经过固定化处理后,大幅度提升了其对底物洛伐他汀的耐受性,显著降低了对发酵培养基中的淀粉需求量,可重复利用。当发酵两阶段pH分别为7.5和5.5、发酵时间分别为48 h和10 h、洛伐他汀添加量3 g/L、转化培养基中淀粉浓度15 g/L时,中间产物Ⅰ对洛伐他汀转化率为64%,无锡他汀对中间产物Ⅰ的转化率为75%。连续发酵5批后,产物转化率仍能维持较高的水平。     

固定化乳酸菌发酵草莓酸奶工艺研究

研究用海藻酸钠包埋乳酸菌发酵草莓酸奶工艺.研究结果表明固定化乳酸菌发酵草莓酸奶的最佳工艺条件为:海藻酸钠溶液浓度为1.5%,含菌种脱脂乳用量为6mL/100mL海藻酸钠溶液,胶珠的添加量为100mL海藻酸钠溶液/100 mL草莓奶液,胶珠直径为2 mm～3 mm,培养温度为40℃,白砂糖添加量为10%,草莓浆添加量15%.连续发酵结果表明固定化乳酸菌发酵草莓酸奶可连续使用10次.     

Production and transepithelial transportation of angiotensin-I-converting enzyme (ACE)-inhibitory peptides from whey protein hydrolyzed by immobilized Lactobacillus helveticus proteinase

Lactobacillus helveticus LB 10 proteinases immobilized with sodium alginate were used to hydrolyze whey protein to produce angiotensin-I-converting enzyme (ACE)-inhibitory peptides. The generated hydrolysates were tested for ACE-inhibitory activity and for their ability to be transported across Caco-2 cell monolayers. Using a response surface method, we determined that a proteinase concentration of 7.55 mg/mL, sodium alginate concentration of 2.03 g/100 mL, and glutaraldehyde concentration of 0.39% were found to be the optimal immobilization conditions. Compared with free proteinase, the immobilized proteinase had significantly higher pH, thermal and storage stability, and reusability. Whey protein hydrolysates were fractionated by gel filtration chromatography and ACE-inhibitory peptide mixtures were transported across Caco-2 cell monolayers in a human intestinal-absorption model. The di- and tripeptides KA, EN, DIS, EVD, LF, AIV, and VFK (half-maximal inhibitory concentrations (mean ± standard deviation) of 1.24 ± 0.01, 1.43 ± 0.04, 1.59 ± 0.27, 1.32 ± 0.05, 1.60 ± 0.39, 2.66 ± 0.02, and 1.76 ± 0.09 mmol/L, respectively) were detected on the basolateral side of the Caco-2 cell monolayer using ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry. These results highlight that ACE-inhibitory peptides are present on the basolateral side of the Caco-2 cell model after transportation of whey protein hydrolysate across the Caco-2 cell membrane.     

包埋-交联磷脂酶A1聚集体的制备及酶学性质

为得到可重复使用且活力较高的固定化磷脂酶A1,采用包埋-交联酶聚集体的方法对磷脂酶A1进行固定,对固定化条件和部分酶学特性进行优化和研究,确定最佳条件为:酶液质量浓度0.06g/mL、沉淀剂饱和度80%、沉淀pH6、沉淀时间35min、戊二醛体积分数0.4%、交联时间6.5h、海藻酸钠质量分数2%、Ca2+浓度0.25mol/L。得到包埋-交联磷脂酶聚集体A1的酶活回收率为80.2%。固定化酶热稳定性增强,重复使用7次相对酶活力保留在6 5%以上。     

固定化酸性蛋白酶载体的选择及其性质

选用海藻酸钠（sodium alginate,SA）分别与3 种天然高分子材料制作复合凝胶载体,以酶活回收率为评价指标,采用单因素试验和正交试验确定最佳载体材料及最佳固定化条件。结果表明,SA-黄原胶复合凝胶为最佳载体,其最佳工艺条件为：SA与黄原胶质量比例为6∶1,CaCl2质量浓度为5.0 g/100 mL,固定化时间为2.5 h,在此条件下固定化酶活回收率为74.12%。对固定化酸性蛋白酶酶学性质进行研究,结果表明,其最适pH值为3.0、最适反应温度为45 ℃,均与游离酶相同,热稳定性优于游离酶,动力学参数Km值高于游离酶,操作半衰期为17.28 d。     

响应面法优化柠檬苦素降解酶的固定工艺

目的 采用响应面法优化柠檬苦素降解酶的固定工艺。方法 采用海藻酸钠-聚乙烯醇固定柠檬苦素降解酶,通过单因素和响应面实验对固定化条件进行优化,确定最佳的工艺参数。结果 优化后的工艺参数为：以聚乙烯醇(0.2 g/100 mL)-海藻酸钠(5.0 g/100 mL)为载体,戊二醛（2 mL/100 mL）为交联剂,采用包埋法固定柠檬苦素降解酶,其中粗酶液浓度0.06 mg/mL、CaCl2浓度6 mg/mL、固定化时间22 h。此条件下的柠檬苦素降解率为(97.87±0.32)%。结论 经优化后的工艺生产出的酶降解率高并且易于分离,具有很好的实际应用价值。     

Effect of microencapsulation on survival of Lactobacillus plantarum in simulated gastrointestinal conditions, refrigeration, and yogurt

In the present research the survival of free and microencapsulated cells of a new strain of Lactobacillus plantarum BL011 under stress conditions was tested in sodium alginate or pectin, coated with sodium alginate or chitosan. Results for the simulated gastrointestinal medium (SGT) showed no change in viability of cells in relation to the control. However, the simulated gastric medium (GM) drastically reduced the viability under the tested conditions, with no significant differences between free and immobilized cells. Under refrigerated storage viability of immobilized cells were greatly enhanced compared to the free microorganisms, and the treatments showing the lowest loss of viability were those of 4% (w/v) pectin, 3% (w/v) sodium alginate coated with chitosan and a mixture of 2% (w/v) sodium alginate and 2% (w/v) pectin, respectively. Loss of viability of immobilized L. plantarum in 3% alginate coated with chitosan in yogurt was of 0.55 log cycles during 38 days of storage. The results of this study suggest the efficiency of immobilization techniques to increase the survival of lactobacilli in yogurt under refrigerated storage.     

海藻酸钠与羧甲基纤维素钠固定化高温碱性脂肪酶

以海藻酸钠和羧甲基纤维素钠为复合载体,研究包埋法固定化毕赤酵母高温碱性脂肪酶。通过单因素试验考察了不同载体、载体浓度、酶与载体配比等因子对脂肪酶固定化的影响,并采用正交试验对脂肪酶固定化条件进行了优化。结果表明,包埋法固定化脂肪酶的最优条件为海藻酸钠含量1.0%、羧甲基纤维素钠含量0.25%、加酶量50 U/(g载体)、CaCl2浓度0.4 mol/L,固定化时间40 min。在最优固定化条件下,固定化脂肪酶酶活收率达99.50%。