柱前衍生化高效液相色谱法分析发菜胞外多糖的单糖组成

采用水溶醇沉法提取发菜多糖,通过三氟乙酸（TFA）将其水解成单糖,经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）衍生化后,利用RP-HPLC分析其单糖组成。结果表明,发菜胞外多糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖组成,其摩尔比为0.71∶0.37∶0.44∶1.53∶1.03∶0.40。该方法具有操作简便、快捷,重现性良好等特点,可用于发菜胞外多糖中单糖组成的定性和定量分析。      

柱前衍生化HPLC法分析真菌多糖的单糖组成

通过柱前衍生化HPLC法分析了6种真菌多糖的单糖组成。将6种真菌的胞外粗多糖及其菌体用1mol/L的硫酸水解成单糖,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化,利用高效液相色谱法检测各单糖。结果表明,灵芝、树舌类真菌胞外多糖的产率均较高,胞外多糖产率在0.0921～0.1528g/100mL之间。胞外多糖主要以甘露糖为主,其次含有葡萄糖和半乳糖,并且一般含有少量的阿拉伯糖。胞内多糖中葡萄糖含量最高,其次含有甘露糖和半乳糖,个别菌种还含有少量的阿拉伯糖和葡萄糖醛酸。而虫草胞外多糖的组成依次为半乳糖、葡萄糖、甘露糖和葡萄糖醛酸,胞内多糖同样是主要含有葡萄糖,其次含有甘露糖、半乳糖和葡萄糖醛酸。     

柱前衍生化HPLC法分析枸杞多糖中单糖组成

利用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化高效液相色谱（high?performance?liquid?chromatography,HPLC）法,建立6?种常见单糖的色谱分离条件,并用于10?种不同产地的自制枸杞多糖的单糖组成分析和8?种市售枸杞多糖的分析鉴定。该HPLC方法简便、灵敏度高、重复性好,可用于枸杞多糖的组分分析和质量控制。对自制枸杞多糖的单糖组成分析结果表明,自制枸杞多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖及阿拉伯糖6?种单糖组成,平均物质的量比为1.00∶1.38∶0.63∶92.37∶1.18∶3.55。对市售枸杞多糖的分析鉴定结果表明,其中6?种枸杞多糖的含量在正常范围内,另外2?种多糖含量高于均值,其中葡萄糖相对物质的量比为自制枸杞多糖的2～3?倍。     

PMP柱前衍生HPLC法测定八月瓜果皮多糖中单糖组成

为建立同时测定八月瓜果皮中6 种单糖组分的色谱分离方法,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP） 柱前衍生和高效液相色谱法测定八月瓜果皮中6 种单糖组分。色谱柱为SHIMADZU-C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈（A）-0.05 mol/L 甲酸铵溶液（B）梯度洗脱（0～10 min：18% A;10～20 min：18%～20% A;20～40 min：20%～23% A;40～60 min：23% A）,柱温30 ℃,流速1 mL/min,检测波长245 nm。结果表明,所建立的PMP-HPLC 柱前衍生化法可准确地测定八月瓜果皮中的D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖和D-阿拉伯糖含量,6 种单糖成分在各自质量浓度范围内线性关系良好（R2≥0.998 3）,加样回收率为92.58%～100.02%。10 批八月瓜果皮样品中均检出6 种单糖,D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖和D-阿拉伯糖平均物质的量比为1.18 ∶1.00 ∶23.25 ∶11.73 ∶3.51 ∶5.88,其中D-半乳糖醛酸含量为51.84～212.84 mg/g,D-葡萄糖含量为22.44～73.23 mg/g,D-阿拉伯糖含量为6.14～60.01 mg/g,是八月瓜果皮中的单糖主要成分。该试验所建立的方法操作简便、重复性好和准确度高,适用于八月瓜果皮多糖中单糖成分的分析。     

石莼多糖的单糖组成成分分析

目的:建立测定分析石莼多糖的单糖组成方法。方法:超声辅助提取石莼多糖,三氟乙酸(TFA)水解多糖,采用薄层色谱法(TLC)和1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)柱前衍生化高效液相色谱法(HPLC)测定单糖组成。结果:TLC法推断石莼多糖的单糖组成为甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和木糖。PMP-HPLC法表明石莼多糖含有甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和木糖,其摩尔比为:0.08∶0.08∶1.00∶0.97∶0.04∶0.68。结论:TLC法可以对多糖的单糖组成进行定性,但难以进行定量测定。PMP-HPLC法,操作简便,灵敏度高,分离效果好,可用于测定石莼多糖中单糖的组成定性、定量测定。     

石莼多糖的单糖组成成分分析

目的:建立测定分析石莼多糖的单糖组成方法。方法:超声辅助提取石莼多糖,三氟乙酸（TFA）水解多糖,采用薄层色谱法（TLC）和1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮（PMP）柱前衍生化高效液相色谱法（HPLC）测定单糖组成。结果:TLC法推断石莼多糖的单糖组成为甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和木糖。PMP-HPLC法表明石莼多糖含有甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和木糖,其摩尔比为:0.08∶0.08∶1.00∶0.97∶0.04∶0.68。结论:TLC法可以对多糖的单糖组成进行定性,但难以进行定量测定。PMP-HPLC法,操作简便,灵敏度高,分离效果好,可用于测定石莼多糖中单糖的组成定性、定量测定。      

苦荞多糖的分离纯化及单糖组成测定

采用水提醇沉法获得苦荞多糖,经离子交换柱分离,高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)纯度鉴定并测定多糖的相对分子质量。硫酸水解后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生水解后的单糖,衍生物采用反相高效液相色谱法测定单糖组成。结果表明：苦荞经水提醇沉,用Sevag 法脱蛋白后,获得苦荞多糖(TBP);DEAE-纤维素柱层析获得3个苦荞多糖组分TBP-1、TBP-2和TBP-3,相对分子质量分别为144544、445656和636795。柱前衍生液相色谱分析可知：TBP-1、TBP-2是由葡萄糖组成的均一多糖;TBP-3由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成的杂多糖,其物质的量比为4.32:2.41:1.00:39.8:9.64:2.02。     

TLC快速分析多糖的单糖组成

本文采用薄层色谱法分析多糖的单糖组成。从斑点分离度、清晰度、有无拖尾现象及展层时间等方面综合评价展层效果。通过实验确定了适合的展开剂为展开系统(乙酸乙脂:吡啶:无水乙醇:水=8:1:1:2)、合适的显色剂为苯胺-二苯胺磷酸显色剂。通过此体系确定了单糖的Rf值,可用于快速分析水解多糖的单糖组分。     

葛仙米多糖的单糖组成分析

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法及HPLC-质谱联用法测定葛仙米多糖的单糖组成,两种方法测定结果相互吻合。同时采用HPLC法测定了相关单糖的标准曲线,相关系数达到0.995以上,经计算,葛仙米多糖的单糖组成物质的量比甘露糖∶葡萄糖醛酸∶葡萄糖∶半乳糖∶阿拉伯糖为1∶1.12∶3.24∶1.72∶1.21。     

柱前衍生化法分析木槿花多糖中单糖组成

通过柱前衍生化-HPLC法对木槿花多糖中的单糖组成进行分析,并建立木糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸5种单糖的含量测定方法。对液相色谱条件、多糖水解条件、衍生化条件进行考察优化,通过比较单糖衍生物的峰面积,确定木槿花多糖水解产物单糖的含量测定方法。结果表明,液相色谱条件为C18色谱柱、30℃柱温、流动相0.1 moL/L乙酸铵溶液-乙腈(80+20, V/V)。水解条件为1 mol/L盐酸溶液、110℃水解温度、60 min水解时间。衍生化条件为70℃衍生化温度、90 min衍生化时间。该方法操作简单,重复性高,可用于测定木槿花多糖中单糖含量。     

灵硒康口服液中灵芝的鉴别及其灵芝多糖中单糖组成的测定

目的鉴别灵硒康口服液中的灵芝成分及测定灵芝多糖中单糖的组成。方法样品经沉淀、离心、固相萃取(solid-phase extraction, SPE)小柱分离、富集和纯化处理。使用福林酚试剂法、薄层色谱法(thin-layer chromatography, TLC)及高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)鉴别和测定灵硒康口服液中灵芝及灵芝多糖中单糖的组成。结果福林酚试剂法鉴别了灵芝中水溶性蛋白质。样品及对照药材显蓝色,阴性不显色。薄层色谱法鉴别了灵芝中水溶性糖。样品及对照药材在相同的位置上有2个斑点, 1个橘黄色,1个蓝紫色,阴性不显色。以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)试剂柱前衍生化、LichrospherC_(18)柱,紫外检测,等度或梯度洗脱的高效液相色谱法测定灵芝多糖中4种单糖。其中等度洗脱含量(mg/100 mL)分别为:甘露糖1.78,葡萄糖124.45,半乳糖3.86,木糖2.68。梯度洗脱分别为:甘露糖1.63,葡萄糖128.65,半乳糖3.52,木糖2.53。两者测定结果基本相同。结论上述鉴别和含量测定方法专属性强、重现性好、灵敏度高,可管控产品质量。     

三种色谱法分析鲍鱼生殖腺多糖的单糖组成

为了选择一种准确有效的方法测定鲍鱼生殖腺多糖(AGP-32)的单糖组成。采用薄层色谱法、气相色谱法和高效液相色谱法对AGP-32的单糖组成进行测定。结果表明:高效液相色谱法较其它色谱方法具有分离效果好,并可同时检测中性糖、糖醛酸和氨基糖等特点,并利用该法得到单糖组成的摩尔比为Man∶Rha∶GlcA∶GalA∶Glc∶Gal∶Xyl∶Fuc=0.79∶2.05∶1.6∶0.58∶0.09∶4.91∶0.11∶0.34。说明高效液相色谱法较其它色谱法更加适合于鲍鱼生殖腺多糖这类复杂样品的单糖组成分析。     

兴化香葱加工废弃物葱白多糖的单糖组成分析

文章采用柱前衍生化高效液相色谱(HPLC)法测定兴化香葱加工废弃物葱白多糖的单糖组成及摩尔比。采用Eclipse XDB-C18柱,以0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.7)-乙腈(体积比为83∶17)为流动相,DAD二极管阵列检测器检测,检测波长为254 nm。柱前衍生剂为1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)。结果表明葱白多糖主要由甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、阿拉伯糖(Ara)组成,它们的摩尔比约为0.10∶3.15∶2.26∶0.51。柱前衍生化HPLC分析葱白多糖中的单糖组成方法简便、快速、准确。     

胶质芽孢杆菌胞外多糖单糖组成的研究

目的对胶质芽孢杆菌PM13菌株的胞外多糖的单糖组成进行研究。方法取培养48 h的斜面菌体,用10倍体积的蒸馏水稀释,稀释液6000 r/min离心30 min后除去沉淀,上清液加4倍体积的95%的乙醇进行沉淀,并于6000 r/min离心30 min得沉淀物,沉淀物烘干得到多糖样品。采用苯酚-硫酸法测定多糖样品中含糖量。采用气相色谱法分析其单糖组成,色谱条件为:进样口温度为250℃,分流比为40:1,FID检测器温度为250℃,VF-5HT熔融石英毛细柱,柱温为160℃,8℃/min升至200℃,200℃保持5 min,载气为高纯氮气,1.6mL/min。结果 PM13菌株胞外多糖的含糖量为90.98%,其单糖组成为葡萄糖、半乳糖、甘露糖和木糖,比例为5.57:3.08:4.04:1。结论本文建立了用气相色谱法检测胶质芽孢杆菌PM13菌株胞外多糖的单糖组成的方法,确定了胶质芽孢杆菌胞外多糖的单糖组成及相应比例。     

超高效液相色谱法检测香菇菌多糖片单糖组分

目的建立一种柱前衍生-超高效液相色谱法(ultra performance liquid chromatography,UPLC)检测香菇菌多糖片中单糖组成的分析方法。方法为排除香菇菌多糖片中辅料干扰,采用UPLC对香菇菌多糖原料中单糖组分进行定性分析,确定原料中的单糖组成。对超高效液相色谱法进行优化及方法学考察,以香菇菌多糖原料中主要单糖组成为依据对香菇菌多糖片单糖组成进行分析,确定香菇菌多糖片的单糖组成及摩尔比例。结果香菇菌多糖片的主要糖单元为甘露糖、葡萄糖和半乳糖,摩尔比为:4.6:4.28:6.375,方法学验证结果表明该单糖组成测定方法的精密度良好,样品中所测单糖的加样回收率为96.6%~103.8%,相对标准偏差在2.0%~2.6%之间,各单糖标准曲线线性相关系数大于0.999,线性关系良好。结论此方法快速、高效、准确,并为香菇菌多糖片的质量控制提供了保障。     

PMP柱前衍生化HPLC法测定黄秋葵多糖的单糖组成

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮为柱前衍生化试剂,结合反相高效液相色谱法,建立同时测定黄秋葵多糖中8?种单糖组分的方法。采用InfinityLab Poroahell C18色谱柱为固定相,流动相为磷酸盐缓冲液（0.1?mol/L,pH?6.85）-乙腈（82∶18,V/V）,流速为1.0?mL/min,柱温25?℃,紫外检测器,波长250?nm。各单糖组分的线性范围较宽,相关系数均大于0.999,检出限为0.13～0.45?mg/kg,定量限为0.43～1.49?mg/kg,相对标准偏差小于5%,加标回收率为94.51%～106.44%。方法灵敏度高、准确性好、实用可靠,适用于黄秋葵多糖的单糖组分分析。同时测定从黄秋葵中顺序提取的热水浸提物（hot buffer soluble solution,HBSS）、螯合剂浸提物（chelating agent soluble solution,CHSS）和碱提物（dilute alkaline soluble solution,DASS）的单糖组成,确定其单糖组分的物质的量比。HBSS中,甘露糖∶鼠李糖∶葡萄糖醛酸∶半乳糖醛酸∶葡萄糖∶半乳糖∶阿拉伯糖=0.1∶7.0∶0.4∶5.8∶0.9∶14.6∶1.5;CHSS中,鼠李糖∶半乳糖醛酸∶半乳糖∶阿拉伯糖=4.7∶61.8∶9.6∶5.3;DASS中,甘露糖∶鼠李糖∶半乳糖醛酸∶葡萄糖∶半乳糖∶阿拉伯糖=9.5∶5.4∶1.3∶10.8∶2.4∶7.6。     

真菌寡聚糖单糖组成(HPLC)分析及诱导抗病活性初步研究

采用高效液相色谱法（HPLC）法对5种用1-笨基2-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）衍生后的单糖，进行了分离分析，并采用该方法对两种真菌源寡聚糖的单糖组成进行了分析。同时初步研究了真菌源寡聚糖的诱抗活性。结果表明两种真菌源寡聚糖均有诱抗活性，葡萄友霉寡聚糖（寡聚糖Ⅱ）的诱抗活性高于葡萄链格孢寡聚糖（寡聚糖Ⅰ）的诱抗活性；用高效液相色谱法（HPLC）对单糖衍生物实现了良好的分离，且该方法可作为实际样品中痕量单糖分析的常规方法；两种寡聚糖中均含有果糖，D-甘露糖，葡萄糖，D-半乳糖和D-阿拉伯糖五种单糖，寡聚糖Ⅰ中该5种单糖的摩尔比为3：5：10：4：1，寡聚糖Ⅱ中该5种单糖的摩尔比为1：5：3：2：2。     

茄枝多糖的分离纯化及成分分析

研究茄枝多糖的提取工艺和主要单糖组分。通过水提工艺,比较三氯乙酸（trichloroacetic acid,TCA）、Sevag、TCA与木瓜蛋白酶结合、Sevag与木瓜蛋白酶结合4 种脱除蛋白方法,使用DEAE-D22纤维素柱与SephadexG-100柱层析精制获得茄枝多糖ESP1-1,并对其进行薄层色谱（thin layer chromatography,TLC）、高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）检测与组分分析。木瓜蛋白酶与TCA法结合脱除蛋白效果最佳,蛋白清除率达到93%,多糖损失率为45.3%;TLC、HPLC检测与分析证明ESP1-1具有多糖的理化性质,主要由甘露糖、葡萄糖、果糖、木糖4 种单糖组成。研究结果可为茄枝多糖的开发应用提供理论支持。