促卵泡激素酶促化学发光免疫分析试剂盒的研制

采用双抗体夹心法建立了测定人血清FSH酶促化学发光免疫分析方法。本方法的测量范围为1．5～100IU／L,灵敏度为0．36IU／L,批内变异系数为1．0％～1．6％,批间变异系数为4．0％～4．6%,回收率为90．6％～117．8％,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数r=0．990。与TSH的交叉率〈0．23％,与LH和HCG的交叉率分别〈0．16％和〈0．27％。与贝克曼化学发光免疫分析方法测定的临床值进行比较,相关性方程为y=0．85x—0．03,相关系数r=0．954。与免疫放射分析试剂盒进行比较,相关性方程为y=0．97x＋5．29,相关系数r=0．965,与放射免疫分析试剂盒,进行比较,相关性方程为y=0．95z-3．82,相关系数r=0．954。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。     

促卯泡激素酶促化学发光免疫分析试剂盒的研制

促卵泡激素（FSH）是由脑垂体前叶嗜碱性细胞合成和分泌的一种糖蛋白类促性腺激素。人血清中FSH水平的检测对原发性闭经、原发性性腺功能低下、更年期综合症、多囊卵巢综合征、不孕症、性早熟以及对预测排卵期的诊断和治疗具有重要的临床意义。     

前列腺抗原酶促化学发光免疫分析方法学的建立

应用鲁米诺-过氧化氢发光体系建立定量测定血清前列腺特异性抗原含量的酶促化学发光免疫分析方法。该方法测量范围为1.5～80μg/L,灵敏度为0.12μg/L,批内变异＜5%,批间变异＜15%。回收率为83.8%～118.7%,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.999。本方法与免疫放射分析方法的相关方程y=1.07x+0.68,相关系数r=0.97。     

氯霉素酶促化学发光免疫分析方法的建立

采用化学发光免疫分析(CLIA)技术检测动物性食品中的氯霉素(CAP)残留量。将兔抗氯霉素多抗吸附在聚苯乙烯微孔板上制成固相抗体,在氯霉素上连接辣根过氧化物酶(HRP)制成标记物,鲁米诺体系作为发光底物,建立了氯霉素酶促化学发光免疫分析方法。方法学分析灵敏度为0.05 ng/ml,批内变异系数小于8%,批间变异系数小于20%,以牛奶为样品的分析回收率为87%～100%,稀释实验相关系数为0.999,检测线性范围为0.1～10 ng/ml。     

人促甲状腺激素酶促化学发光免疫分析方法的建立

采用双抗体夹心法建立了定量检测人血清中促甲状腺激素含量的酶促化学发光免疫分析方法,其中,1株抗TSH抗体包被96孔微孔板,另1株与辣根过氧化物酶结合形成酶标记物,鲁米诺-过氧化氢作为发光底物。该方法测量范围为0.1～100 mIU/L,分析灵敏度为0.04 mIU/L,批内、批间变异系数分别为3.98%～6.48%和4.61%～13.1%,回收率为95.8%～117.4%,高浓度TSH样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数大于0.99。与LH的交叉率＜1.62%,与FSH和HCG的交叉率分别＜0.05%和＜0.02%。与罗氏化学发光免疫分析方法测定的临床值进行比较,相关性方程为y＝1.10x-0.207,相关系数r＝0.969。与免疫放射分析试剂盒进行比较,相关性方程为y＝1.00x+0.191,相关系数r＝0.965。本方法操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

游离前列腺特异性抗原酶促化学发光免疫分析方法学的建立

采用双抗体夹心法建立了定量测定血清游离前列腺特异性抗原含量的酶促化学发光免疫分析方法,其中,1株抗总前列腺特异性抗原的单克隆抗体作为包被抗体,另1株抗游离前列腺特异性抗原的单克隆抗体作为标记抗体.总测量范围为0.2～10 ng/mL,灵敏度为0.01 ng/mL,批内变异<10%,批间变异<20%.本方法与Monobind游离前列腺特异性抗原化学发光测定试剂盒比对的相关方程为y＝0.72x-0.22,相关系数r＝0.90.     

CA50酶促化学发光免疫分析方法的建立

将同一株CA50单克隆抗体用于固相包被，辣根过氧化物酶偶联制备酶标记物，以鲁米诺为发光底物，采用一步法，建立了CA50酶促化学发光免疫分析法。对各种分析进行优化，确定了分析方法。     

促黄体生成激素酶促化学发光免疫分析方法的建立

采用双抗体夹心一步检测法和鲁米诺-过氧化氢发光体系建立了血清促黄体生成激素(LH)的酶促化学发光免疫分析方法。结果显示,本方法测量范围为1.5~200 IU/L,灵敏度为0.08 IU/L,批内变异系数9%,批间变异系数11%,回收率为96.3%~112.1%,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数r=0.995。与进口酶促化学发光免疫分析试剂盒测定的临床值进行比较,线性相关方程为y=0.967x+0.0689,相关系数r=0.975,相关性良好。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。     

胰岛素酶促化学发光免疫分析方法的建立

胰岛素是由胰腺β细胞分泌的蛋白类激素，由2条氨基酸肽链组成，A链有21个氨基酸，B链有30个氨基酸，相对分子质量为5700，是调节糖代谢的重要物质。在临床诊断中，血液中胰岛素含量的测定对于了解糖尿病的发生、发展、预测糖尿病的预后，制定适当的治疗方案非常重要。     

铁蛋白时间分辨荧光免疫试剂盒的研制

铁蛋白是人体内第二个含铁量最丰富的含铁蛋白。铁蛋白所含铁可因机体的需要而被动员和利用。人体血清中含有微量铁蛋白,它反映肝脏贮铁量,体内贮铁总量和机体营养状态,是检测缺铁及铁负荷过多疾病的有效指标。检测血清中铁蛋白有利于诊断缺铁性贫血,血清铁蛋白也是肿瘤标志物之一。铁蛋白与其他有关检测配合,可提高恶性肿瘤的检出率。采用双抗夹心二步法检测血清中铁蛋白的浓度,是将一株抗体包被于微孔板上,另一株配对抗体与DTTA- Eu连接作为示踪剂,标准品或样品中铁蛋白先与固相抗体反应,再加入示踪剂。增强液将铕离子解离到液相,与增强液中组分形成高效荧光螯合物。荧光强度与血清中铁蛋白浓度成正比。试剂盒的测量范围为2～1 000 ng/mL;灵敏度<0.05 ng/mL;批间、批内变异系数均<5%;其测量结果与Wallac试剂盒的测量结果有较好的相关性,相关系数r=0.96。     

CA125单克隆抗体的制备及其初步应用

利用CA125抗原免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,建立分泌抗CA125抗体的杂交瘤细胞株。将CA125单克隆抗体应用到化学发光免疫分析和免疫放射分析方法中,病理值的测定结果和进口试剂盒测定值相关方程分别为y=0.85x+11.1,r＝0.932和y=0.87x－12.8,r＝0.983;正常血样测量值范围分别为3.3～26.7和1.5～27.0U/mL。CA125单克隆抗体制备的包被板和包被管在37℃下可稳定存放14d,且不影响分析结果。     

氯霉素酶联免疫分析方法的建立

以兔抗氯霉素多抗为包被抗体,氯霉素（CAP）辣根过氧化物酶连接物为标记物,四甲基联苯胺（TMB）为显色底物,建立了氯霉素直接竞争酶联免疫分析（CAP-EIA）方法.本方法灵敏度为0.046 μg /L,批内变异系数＜10%,批间变异系数＜24%,回收率62%～145%.用牛奶样品预处理所得上清液为稀释液做得稀释实验,相关方程为y=3.988x-0.234, 相关系数为0.999.标准曲线范围为0.1～10 μg /L.     

大鼠白蛋白酶联免疫分析试剂盒的研制

采用大鼠白蛋白免疫绵羊制得羊抗大鼠白蛋白抗血清,建立了大鼠白蛋白酶联免疫分析方法。本方法的测量范围为1～50mg／L,灵敏度为0．42mg／L,回收率为85．0％～106．0％,批内、批间变异系数分别〈8．9％和％12．8％,高浓度大鼠尿样系列倍比稀释后测定,实测值和计算值呈线形相关,相关系数r=0．999。本方法学与放射免疫分析（RIA）方法学的相关性方程为Y=0．92x＋0．08,r=0．976,两种方法的相关性良好。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求,大鼠白蛋白酶联免疫试剂盒的研制为肾病药物的开发及肾损伤的研究提供了方便。     

Development of Immunoradiometric Assay Kit for Insulin

The detection of insulin level in blood is important to the assessment of β-cells＇ function, the therapy plan of diabetes mellitus and the diagnosis of insulinoma. Insulin is the first human hormone to be determined by radioimmunoassay （Yallow and Berdon, 1959）. Despite the enormous improvements and developments in immunoassay in the subsequent years, RIA still plays an important role in China. Due to interfere of breakdown products of insulin, the immunoradiometric assay using two monoclonal antibodies has a higher specificity than RIA.     

C-反应蛋白放射免疫分析试剂盒的研制

C-反应蛋白是动脉粥样硬化血栓形成的生物标志物.定期检测血液中C-反应蛋白含量的变化对预测心血管疾病的发生和发展有重要意义.本研究开发的C-反应蛋白放射免疫分析试剂盒的测量范围为1～50 mg/L,灵敏度为0.30 mg/L,回收率为91.7%～114.0%,批内、批间平均变异系数分别为3.4%和6.3%;高浓度血样系列倍比稀释后测定,实测值和计算值呈线性相关,相关系数＞0.990.这将为检测心血管疾病的发生、治疗及预后提供方便.