市售鸡肉及内脏中磺胺耐药菌污染特征

为评价抗生素耐药基因通过市售鸡肉产品进行迁移的风险,从上海5个大型超市和综合市场采集的9个鸡肉样品和4个内脏样品中分离对磺胺甲噁唑/甲氧苄啶不敏感的细菌(Sul/Trir),研究其耐药特征,并用Southern杂交对耐药基因进行定位。结果表明,所有样品均分离到了Sul/Trir菌,菌落数为2.0×102~1.0×107 CFU/g,占总可培养菌的1.42%~82.00%。297株Sul/Trir菌的多重耐药现象普遍,耐药基因sul1、sul2、tetA、tetB、tetC、tetE、tetG、tetL、tetM和intI的检出率分别为11.33%、32.81%、6.64%、12.89%、2.73%、6.25%、9.38%、18.75%、39.84%和28.52%。耐药基因的寄主菌包括Escherichia sp.、Pedobacter sp.、Staphylococcus sp.、Enterococcus sp.、Sphingobacterium sp.和Acinetobacter sp.等,大多数的磺胺最小抑菌浓度大于512 μg/mL,其中一株葡萄球菌的质粒上有sul2基因。综上,耐药菌和耐药基因可能通过市售鸡肉及内脏产品进行迁移。     

市售鸡肉中沙门菌分离株多重耐药谱测定

为了解我国市售鸡肉中沙门菌多重耐药状况及耐药程度,对国家食源性疾病监测网从市售鸡肉中分离到的51株沙门菌进行耐药检测,并对多重耐药谱进行分析。利用NccLs(National Committee of Clinical Labaratory Standard)推荐的纸片法进行耐药检测,51株分离菌株全部对至少3种以上的抗生素耐药,属多重耐药株,耐5种抗生素的9株(17.6％),耐6～9种抗生素的12株(23．5％),耐10种以上抗生素的9株(17．6％)。51株沙门菌对万古霉素、红霉素、苯唑西林都具有耐药性(100％),对其它抗生素的耐药情况是：萘啶酮酸(52.9％)、磺胺(35．3％)、链霉素(33．3％)、四环素(29.4％)、氨苄青霉素(23．5％)、羧苄西林(21.6％)、阿莫西林(19．6％)、吡拉西林(19．6％)、美唑西林(17．6％)、强力霉素(17．6％)、氯霉素(13．7)和头孢噻吩(9．8％)。有3株菌对庆大霉素耐药,有2株菌对丁胺卡那霉素和甲氧苄胺嘧啶耐药,有1株菌对复方新诺明耐药。分离出1株耐15种抗生素的鼠伤寒沙门菌,其耐药谱与超级耐药鼠伤寒沙门菌DTl04的耐药谱类似。从8省市市售鸡肉中分离的51株沙门菌均为多重耐药株,提示我国畜牧养殖业在使用抗生素方面存在严重问题,应加强对饲料添加剂使用的安全性管理,合理使用抗生素。     

北京市批发市场鸡肉中沙门菌血清型和耐药特征研究

目的 了解北京市批发市场零售鸡肉中沙门菌分离株的血清型分布和耐药性特征。方法 针对2014—2015年北京市丰台区3个大型批发市场零售鸡肉中分离的135株沙门菌,使用Luminex血清分型试剂盒和传统血清凝集方法进行血清学鉴定,按照Enterobase数据库推荐条件进行多位点序列分型,采用药敏鉴定板测定菌株对12类25种抗菌药物的敏感性,使用PCR方法检测10种可移动黏菌素耐药基因（mcr）和3种NDM型碳青霉烯酶基因（blaNDM）的携带情况。结果135株沙门菌共检出6种血清群,D1和B为主要血清群;20种血清型,Enteritidis、Indiana和Thompson为优势血清型,占比分别为50.4%、15.6%和8.1%;21种ST型,血清型与ST型具有较好对应。91.9%的菌株为耐药株,菌株对萘啶酸、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦和四环素4种药物耐药率最高,多重耐药菌株占全部菌株的71.1%,最高可对10类18种抗菌药物耐药;对8类及以上药物耐药的17株菌株中,16株为Indiana血清型;不同包装方式、不同季节和不同批发市场来源菌株,高重耐药菌株占比具有一定差别。所有菌株均为mc...     

市售鸡肉与鸡蛋中四环素类抗生素残留调查与膳食暴露风险评估

目的 了解杭州地区市售鸡肉与鸡蛋中四环素类抗生素残留的污染状况,探讨其污染来源,评价其膳食安全性。方法 2021年在杭州市随机抽取66份鸡肉样品和71份鸡蛋样品,采用液相色谱-质谱/质谱法监测四环素类抗生素（四环素、土霉素、金霉素和强力霉素）,采用食品安全指数来评估样品中四环素类抗生素的残留风险。结果 鸡肉中检出强力霉素与土霉素,检出率分别为45.4%和1.52%,四环素与金霉素均未检出,无超标样品;鸡蛋中强力霉素检出率与超标率均为1.41%,其余项目均未检出;鸡肉与鸡蛋中四种四环素的食品安全指数远<1,说明其污染程度对食品安全影响很小。结论 杭州地区市售鸡肉和鸡蛋中存在一定的四环素类抗生素残留,但污染程度较轻,鸡肉与鸡蛋的安全状态均为可接受。     

杨凌及周边地区零售分割鸡肉中沙门菌污染状况及耐药和分型特征研究

目的研究陕西杨凌及周边地区零售分割鸡肉中沙门菌的污染状况及其药敏性、血清型和基于脉冲场凝胶电泳(PFGE)的基因型,为预警食源性沙门菌疾病暴发提供数据基础。方法采用GB 4789.4—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》对陕西杨凌及周边地区采集的188份零售分割鸡肉中沙门菌进行分离和鉴定,并进行血清学分型。采用PFGE方法确定沙门菌DNA酶切电泳图谱,使用BioNumerics软件聚类分析电泳结果,确定沙门菌基因型。结果 188份零售分割鸡肉中共有34份(18.1%)样品检出沙门菌,农贸市场样品沙门菌检出率(24.6%,29/118)高于超市(7.1%,5/70)。鸡腿、鸡爪、鸡脖和鸡肝样品中沙门菌检出率高于鸡肠和鸡胗。34株沙门菌中共检出10种血清型,其中科瓦利斯沙门菌最为流行,高于德尔卑沙门菌和鼠伤寒沙门菌等,差异有统计学意义(P0.05)。分离株均对磺胺异噁唑、氯霉素、头孢噻呋和环丙沙星耐药,对甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、萘啶酮酸、四环素、链霉素、氨苄西林和阿莫西林/克拉维酸的耐药率均在50%以上。34株沙门菌PFGE分型后可被分为11个簇,同一血清型菌株基本聚于同一大簇,同一时间、从相同市场采集的不同样品,其分离株PFGE型相似度均较高,表明分割鸡肉在加工或销售过程可能存在交叉污染。农贸市场分离菌株基因型多样性比较丰富。结论杨凌及周边地区零售分割鸡肉存在沙门菌污染,沙门菌血清型和基因型多样化,耐药菌株比例较高。     

中国鸡肉沙门菌厨房内交叉污染模型初探

目的探索适用于我国食品微生物风险评估的鸡肉沙门菌厨房内交叉污染模型。方法开展我国部分居民厨房内鸡肉烹调加工行为调查,构建厨房内交叉污染的矩阵模型和简化模型。结果我国居民报告的案板生熟分开率为31.2%(78/250);矩阵模型中影响交叉污染发生的因素(Spearman相关系数)为加工凉菜先于加工鸡肉(0.925)、加工前鸡肉中沙门菌污染量(0.135)、更换案板(0.106)、洗手方式(-0.088)和洗案板方式(-0.064);矩阵模型与简化模型推算的凉菜中沙门菌的污染量和发病风险相近,影响交叉污染的关键因素相同;矩阵模型和简化模型推算的交叉污染后沙门菌的平均转移率分别是0.35%(95%CI:0.32~0.38)和0.18%(95%CI:0.16~0.20)。结论本研究构建的模型适用于我国厨房内鸡肉沙门菌交叉污染研究。     

广州市售鱼、虾、蛤蚌中四环素耐药菌及四环素耐药基因的研究

本文以广州市大型超市的鱼、虾、蛤蚌为研究对象,研究其四环素耐药菌的分布及四环素耐药基因的携带情况。采用平板涂布法分离四环素耐药菌并统计菌落数,计数结果在102~106 CFU/g之间,其中鱼肠中四环素耐药菌的数量达106 CFU/g。通过PCR对样本总DNA中四环素耐药基因的携带情况进行检测,发现每个样本均携带多个(3~7个)四环素耐药基因。9种四环素耐药基因中,tet(E)的检出率最高6.3%,其次分别为tet(S)(5.1%),tet(M)(3.1%),tet(C)(1.7%)和tet(G)(0.9%)。Southern杂交试验表明四环素抗性菌株Aeromonas spp.和Escherichia coli携带的耐药基因tet(E)存在于质粒上;在无四环素选择压力下对上述两种菌株进行连续传代,其耐药质粒仍稳定存在于菌株中。本研究表明广州市售鱼、虾、蛤蚌中分离得到的细菌对四环素耐药情况较为严重,应得到相关监管部门以及消费者的足够重视。     

济南市零售鸡肉中沙门菌污染状况及可移动黏菌素耐药基因分析

目的 了解2020—2021年济南市零售鸡肉中沙门菌的污染状况,并探究可移动黏菌素耐药基因（mcr）的携带情况。方法 2020年12月至2021年11月在济南市采集零售鸡肉样品260份,依据GB 4789.4—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》对样品中的沙门菌进行分离鉴定,通过聚合酶链式反应（PCR）对分离株进行血清型鉴定和mcr基因筛选,使用微量肉汤法对mcr基因阳性株开展抗生素敏感性试验。结果 260份零售鸡肉样品中共检出阳性样品61份,污染率为23.46%(61/260),秋季污染率最高可达53.33%(32/60);共分离出沙门菌103株,56株为肠炎沙门菌,占比54.37%(56/103)。2株不同产地鸡翅样品来源的印第安纳沙门菌分离株检测出mcr-1基因,阳性率为1.94%(2/103)。2株mcr-1基因阳性印第安纳沙门菌分离株均为多重耐药株,其中1株可对碳青霉烯类和多黏菌素类在内的全部12类测试抗生素同时耐药。结论 2020—2021年济南市零售鸡肉中的沙门菌污染较为严重,秋季采集样品的污染率较高,肠炎沙门菌为优势血清型,检出携带mcr-1基因;同...     

江苏省鸡肉产品中弯曲菌耐药特征及Ⅰ型整合子分析

为探讨鸡肉产品中弯曲菌的耐药特征,本研究以2016~2017年分离于江苏省市售鸡肉中弯曲菌分离株为研究对象,采用K-B纸片扩散法测定分离株对9大类21种抗生素的敏感性,同时应用PCR法检测Ⅰ型整合子的整合酶基因、3’-CS以及可变区耐药基因。研究显示:弯曲菌分离株对环丙沙星、头孢噻肟、氧氟沙星、卡那霉素、氨苄西林耐药率较高,分别为83.16%、80.0%、68.0%、65.0%和64.2%。47.3%(45/95)的菌株为Ⅰ型整合酶基因阳性,10株分离株具有3’-CS端,其中5株分离株为可变区阳性,其耐药基因盒为aad A1。结论:鸡肉产品中分离到的弯曲菌多重耐药现象严重,整合子介导的多重耐药在江苏地区并不是主导的耐药机制,但其携带的耐药基因可在不同细菌间传递从而通过食物链传递给人类,应严格监测鸡肉产品中弯曲菌的耐药特征及Ⅰ型整合子的流行情况。     

2002年北京市市售鲜鸡蛋和生鸡肉的沙门菌污染情况调查

为了了解北京市市售鲜鸡蛋、生鸡肉的沙门菌污染情况,并为建立食物污染及中毒的预警系统提供数据基础,2002年7、8和9月从北京市四个区的集贸市场、超市、商场和街边小商店共采集鲜鸡蛋100件,生鸡肉100件,进行了沙门菌的定性、定量检测及血清分型。结果表明鲜鸡蛋蛋液中未检出沙门菌,生鸡肉的沙门菌阳性检出率为30%,沙门菌在生鸡肉中的污染情况与销售温度有关。因此,控制沙门菌的污染来源和生鸡肉销售的温度条件是控制沙门菌污染的手段之一。然而,还需要进一步研究的是鲜鸡蛋外源性污染情况的调查;销售温度与污染情况之间相关性的进一步证实。     

鸡肉中四环素类抗生素兽药残留量检测

为了快速准确检测鸡肉中四环素类抗生素兽药残留量,本文通过鸡肉中四环素类抗生素残留的提取、净化和液相色谱及液质联用法对其进行检测。该液质联用法灵敏度高、准确可靠,前处理快捷简便,重现性好。     

石家庄市肉鸡屠宰和市售环节弯曲菌污染状况及耐药分析

目的了解石家庄市肉鸡屠宰和市售环节中弯曲菌的污染状况及对12种抗生素的耐药谱和耐药特征。方法采集屠宰前肉鸡肛拭子、鸡酮体涂抹拭子标本和市售鸡肉、鸡肝脏样品,参照GB 4789.9—2014《食品安全国家标准食品微生物学检验空肠弯曲菌检验》和多重聚合酶链式反应(PCR)方法进行弯曲菌的分离和鉴定,用K-B纸片法对分离弯曲菌进行6类12种抗生素药敏测定。结果在439份标本/样品中共有17份检出弯曲菌,总检出率为3.9%(17/439)。空肠弯曲菌对萘啶酸、左氧氟沙星、环丙沙星和四环素的耐药率均为85.7%(6/7),对庆大霉素、链霉素、丁胺卡那、阿奇霉素、氟苯尼考全部敏感。结肠弯曲菌除对阿奇霉素、多西环素、氟苯尼考的耐药率小于50.0%外,对环丙沙星、左氧氟沙星、萘啶酸、庆大霉素、丁胺卡那、四环素、链霉素、克林霉素的耐药率均高于80.0%。17株弯曲菌多重耐药率为70.6%(12/17),呈11种耐药谱型,市售环节分离株耐药谱型多于屠宰环节分离株,并具有各自不同的优势耐药谱型。结论石家庄市肉鸡屠宰和市售环节均有一定程度的弯曲菌污染,分离株多重耐药情况严重,呈多种耐药谱型。     

鸡肉中四环素残留量检测及健康风险评估

目的针对近年来市场上抗生素鸡肉事件的频繁发生,提出一种可以快速、准确地检测出鸡肉中四环素残留量的模型,并对其进行健康风险评估。方法首先,利用近红外光谱仪采集肉鸡的光谱信息,通过多元散射校正法进行预处理。接着,使用区间偏最小二乘回归分析方法来建立预测模型,对四环素进行定量分析。然后,根据人体摄入四环素残留量数据计算出膳食的暴露量,从而引入食品安全指数指标,对鸡肉进行健康风险评估。最后,利用SOM人工神经网络对其实用性加以验证。结果风险评估数学模型结合国家标准将鸡肉带来的风险分为:高、中、低3类,等级划分达到95.5%的正确率。结论本实验研究方法可以应用到其他相关的农产品检测和食品检测中,以保障食品安全。     

北京市售鸡肉和猪肉中大肠杆菌污染情况及耐药特征分析

目的 分析北京市售生鸡肉和生猪肉中大肠杆菌的污染情况以及耐药表型及耐药基因型。方法 从北京市辖6个区的大型超市和农贸市场随机采集259份生鲜肉类样品（鸡肉168份、猪肉91份）,增菌后分离大肠杆菌,并使用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱和16 s rRNA测序对分离菌株进行鉴定。对分离菌株进行药物敏感性测定和全基因组测序,对耐药基因和耐药表型进行比较分析。结果 从259份样品中分离出169株大肠杆菌,检出率为65.25%,其中鸡肉和猪肉中大肠杆菌的检出率分别为77.38%和42.86%。药敏试验结果表明大肠杆菌对甲氧苄氨嘧啶-磺胺甲恶唑（鸡肉83.33%,猪肉91.67%）高度耐药,其次是多西环素（鸡肉32.35%,猪肉38.89%）,同时,它们对庆大霉素、妥布霉素、头孢噻肟、黏菌素等药物都呈现出了不同程度的耐药性。耐药基因分析发现β-内酰胺类基因ampC1与ampC2携带水平最高,检出率分别为93.10%、98.28%,另外也检测到ESBL、NDM-1、mcr-1等重要耐药基因,其中bla_TEM-1D和blaCTX-M_-9是主要存在的ESBL耐药基因。结论 目前北京市售鸡肉存在较为严重的大肠杆菌污染,分离菌株呈现复杂的耐药表型并携带多样的耐药基因,应加强对生鲜肉类样品的微生物污染和细菌耐药性控制,尤其是产ESBL耐药大肠杆菌,为预防控制由其引起的食源性疾病提供科学依据。     

生猪肉加工厂食品接触面四环素耐药菌及其耐药基因的分布

耐药菌的传播会对食品安全与人类健康造成严重威胁。本研究通过对某大型生猪肉加工厂食品接触面污染微生物四环素耐药情况进行分析,探讨其对生猪肉制品质量与安全的潜在危害。从生猪加工厂食品接触面共采集样品100份,共分离到168株细菌。通过药敏试验,发现60.7%的污染细菌对四环素具有耐药性,包括85.7%的假单胞菌属、85.7%的葡萄球菌属、86.7%的沙雷氏菌属、80%的乳球菌属、80%的大肠杆菌、60.0%的不动杆菌属和55.0%的气单胞菌属。通过对分离株进行15种四环素耐药基因的筛查,发现生猪肉加工厂设备食品接触面存在9种四环素耐药基因,包括tet L、tet A、tet B、tet C、tet E、tet M、tet S、tet K和tet X,其检出率分别为7.7%、6.0%、4.8%、4.8%、3.6%、3.6%、3.6%、1.2%和0.6%。本研究结果表明,生猪肉加工厂食品接触面四环素耐药菌污染严重,可能交叉污染生猪肉制品,其携带的四环素耐药基因可能向不同细菌种属间转移,进而由食物链向人类传播,对人类健康造成潜在的威胁。     

3种培养基对鸡肉产品中两类耐药菌培养的影响

目的:评估不同培养基对鸡肉产品表面四环素耐药(T^r)菌和磺胺耐药(S^r)菌菌群的培养效果差异。方法:基于高通量测序技术,分析分别在脑心浸液肉汤(BHI)、胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)和平板计数琼脂(PCA)3种培养基上培养获得的冷鲜鸡和鸡肉熟食表面T^r菌和S^r菌的菌群结构及丰度。结果:在冷鲜鸡表面鉴定到的101个属的耐药细菌中,仅在BHI、TSA和PCA培养基上获得培养的特有T^r菌属各有30,5,3个,特有S^r菌属各有9,8,14个;在鸡肉熟食样品表面鉴定到的50个属的耐药菌中,3种培养基上的特有T^r菌属分别为3,2,1个,特有S^r菌属分别为1,6,0个。耐药菌属丰度差异的Metastat分析结果表明,BHI和TSA对耐药菌群的结构影响具有较高的相似性,冷鲜鸡表面4种T^r菌(气单胞菌属Aeromonas spp.、水栖菌属Enhydrobacter spp.、乳杆菌属Lactobacillus...     

食源性单核细胞增生李斯特菌四环素、红霉素耐药基因研究

研究了食源性单核细胞增生李斯特菌四环素、红霉素耐药基因的分布状况及和耐药表型的关系。采用微量肉汤稀释法对2005~2007年河北省疾病预防控制中心分离到的食源性单核细胞增生李斯特菌株进行四环素、红霉素药敏实验;应用PCR方法对实验菌株进行四环素耐药基因tet(M)、tet(S)、tet(L)、tet(K)、tet(B)、及与tet(M)基因关系密切的转座子Tn916、红霉素核糖体甲基化酶基因ermB、ermC、及与ermB基因关系密切的转座子Tn917检测,对阳性样本序列进行鉴定分析;应用血清学分型、脉冲场凝胶电泳(PFGE)、及脂肪酸聚类分析方法分析四环素耐药菌株之间的相关性,确定基因型和多态性。结果表明,91株单核细胞增生李斯特菌四环素敏感77株、耐药14株;红霉素敏感89株、耐药2株,其中包含1株菌同时交叉耐药四环素和红霉素;14株四环素耐药株中含tet(M)基因的13株,在13株tet(M)基因阳性菌中,tet(M)位于Tn916转座子上的9株;1株同时交叉耐药四环素、红霉素菌同时携带tet(S)、ermB基因;ermC基因、转座子Tn917均为阴性;四环素、红霉素敏感株中未检测到上述任何耐药基因。14株四环素耐药菌株血清型分布以1/2a型为主(n=12),部分菌株PFGE、脂肪酸分型完全一致。食源性单核细胞增生李斯特菌获得tet(M)基因是耐四环素的主要机制之一,具有水平传播耐药基因能力的接合型转座子Tn916与该菌四环素耐药播散有直接关系;ermB基因介导的核糖体靶位点改变存在食源性单核细胞增生李斯特菌红霉素耐药株中;PFGE基因型结合脂肪酸聚类分析能够用来分析菌株之间的相关性。     

市售食品中丙烯酰胺污染现状风险分析

目的:研究各类食品中丙烯酰胺的污染状况,把控潜在的食品安全风险.方法:实验室靶向性采集610份可能含有丙烯酰胺的食品样品,涉及糕点、饼干、薯类食品、膨化食品等8类食品,依据GB 5009.204-2014《食品安全国家标准食品中丙烯酰胺的测定》进行检验.结果:有73个样品检出丙烯酰胺,检出率达12.0％,其中薯类食品、...     

零售生鸡肉中沙门菌污染对居民健康影响的暴露评估

目的评估零售生鸡肉中沙门菌污染的健康风险及其潜在的干预措施。方法利用零售生鸡肉中沙门菌定量监测数据以及零售和家庭生鸡肉储存加工专项调查结果,采用Monte Carlo概率评估方法,估计我国居民通过厨房内交叉污染发生鸡源性沙门菌食物中毒的风险,并评价潜在的干预措施效果。结果本研究构建了从零售到餐桌的生鸡肉-沙门菌交叉污染模型,模型估计生鸡肉经过零售储存、抵达居民家里和经过家庭储存后其沙门菌浓度(lg MPN/g)从零售前的-0.017,分别增长到2.163、2.241和3.028,估计我国居民每餐发生鸡源性沙门菌食物中毒的风险为0.171(95%置信区间:0.000~0.767),其中零售阶段生鸡肉的储存方式是影响发病风险的最重要因素(回归系数=0.72),情景分析提示,如果零售阶段采用冷冻或者冷藏储存,我国居民每餐发病风险可以降为0.031(95%置信区间:0.000~0.522)。结论我国居民鸡源性沙门菌食物中毒的风险较高,应当加强零售环节生鸡肉的冷链管理。     

市售生鲜鸡肉5 种主要食源性致病菌污染检测及分布概率评估

采用聚合酶链式反应技术对上海市52 个市场的208 份鸡腿、鸡爪、鸡翅、鸡胗、鸡胸肉中出血性大肠杆菌O157∶H7、沙门氏菌、志贺氏菌、单增李斯特菌、阪崎肠杆菌5 种食源性致病菌进行快速检测,以了解不同鸡肉食用部位各种致病菌的分布规律,并根据β概率分布确立最具代表性的部位作为评估靶点。结果显示：在208 份样品中,大肠杆菌O157∶H7和沙门氏菌未检出;阪崎肠杆菌在鸡翅中检出1 株;志贺氏菌检出2 株,分布于鸡翅、鸡胗;单增李斯特菌检出11 株,检出率达5.29%,且在鸡翅中检出率最高（4 株）,鸡腿（3 株）、鸡爪（3 株）部位检出率相当,鸡胗检出率最低（1 株）。