金枪鱼胰脏酶解多肽对db/db糖尿病小鼠肾脏的保护作用

目的:研究金枪鱼胰脏酶解多肽对db/db糖尿病小鼠体质量、血清胰岛素、糖化血红蛋白、血脂的影响,为进一步开发金枪鱼胰脏、研制新型保健型食品提供理论依据。方法:雄性Db/m小鼠为空白对照组,雄性db/db小鼠30只,分为模型对照组、阳性药组(甲基巴多索隆9.75 mg/(kg·d))、实验组,实验组灌胃金枪鱼胰脏酶解多肽(50 mg/(kg·d))。10周后测定各组小鼠体质量、血清胰岛素、糖化血红蛋白、血脂水平等指标。利用基因芯片技术,比较不同组间肾脏基因的表达水平。结果:与模型对照组相比,实验组能显著降低糖尿病小鼠的体质量、血清胰岛素、糖基化血红蛋白水平;降低总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平,升高高密度脂蛋白胆固醇水平。并且,与模型对照组的差异表达比较,实验组基因表达水平有显著改变,获得差异基因678个,其中161个上调,517个下调。结论:金枪鱼胰脏酶解多肽可以改善db/db糖尿病小鼠的体质量、血清胰岛素、糖化血红蛋白、血脂水平,其作用效应可能与其下调醛固酮合成相关基因CYP11B1的表达水平有关。     

金枪鱼胰脏酶解液对糖尿病大鼠血糖和血脂的作用

目的:研究黄鳍金枪鱼胰脏酶解液控制链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠血糖和血脂异常的作用,为进一步开发利用金枪鱼胰脏,研制新型辅助降血糖保健食品提供理论依据。方法:用STZ制备糖尿病大鼠模型后分组,给予不同剂量的酶解液,35d后测定各组大鼠空腹血糖、糖化血清蛋白、口服糖耐量及血脂生化指标。结果:与模型组相比,低、中、高剂量组黄鳍金枪鱼胰脏酶解液均能显著地降低糖尿病大鼠的空腹血糖、糖化血清蛋白,改善糖耐量水平;降低总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白胆固醇水平,升高高密度脂蛋白胆固醇。结论:黄鳍金枪鱼胰脏酶解液可改善糖尿病大鼠血糖、血脂,促进糖代谢和脂代谢的良性循环。     

仿刺参胶原蛋白多肽对Ⅱ型糖尿病小鼠肾脏的保护机制

目的:研究仿刺参胶原蛋白多肽对db/db糖尿病小鼠的保护机制。方法:通过仿刺参多肽分组喂养糖尿病小鼠,测定小鼠血清中TC、TG、LDL-C和HDL-C含量及胰岛素浓度。采用双向电泳研究小鼠的肾脏蛋白,通过差异蛋白筛选,GO功能注释,代谢通路等分析确定仿刺参多肽对糖尿病小鼠肾脏的保护机制。生化指标显示:仿刺参多肽可以降低血清中TC、TG、LDL-C的含量和胰岛素浓度,提高HDL-C水平。双向结果表明:相对于模型组,试验组共检测出上调蛋白81个,下调蛋白51个。GO结果显示:差异蛋白的功能主要集中在蛋白转运和信号传导过程。KEGG分析发现,差异蛋白主要富集在代谢途径、胰岛素抵抗和胰岛素信号传导过程。结论:喂养仿刺参多肽的小鼠体内视黄醇结合蛋白4的表达下调,血糖水平下降,胰岛素信号通路恢复正常,可以有效缓解糖尿病的症状。     

利用基因芯片技术解析海地瓜酶解液对糖尿病小鼠糖脂代谢的调控

目的：研究海地瓜酶解液对db/db糖尿病小鼠血糖和血脂的调节作用,为进一步开发海地瓜提供理论依 据。方法：以db/db糖尿病小鼠为模型,正常进食10 周,分别给予海地瓜酶解液,定期测定各组小鼠的尿糖、空腹 血糖、糖化血红蛋白、血清胰岛素以及血脂水平。利用基因芯片技术,比较不同组别间肾脏基因的表达水平。并通 过实时荧光定量聚合酶链式反应技术验证基因表达情况。结果：与模型对照组相比,各给药组均能显著降低糖尿病 小鼠的尿糖、空腹血糖、糖化血清蛋白、糖化血红蛋白水平（P＜0.05）,改善糖耐量水平;显著降低总胆固醇、 低密度脂蛋白胆固醇水平（P＜0.05）,升高高密度脂蛋白胆固醇水平。通过基因芯片技术,获得81 个差异基因, 其中54 个上调基因,27 个下调基因。实时荧光定量聚合酶链式反应结果显示,选取的基因均与基因芯片表达水平 一致。结论：海地瓜酶解液均可显著改善db/db糖尿病小鼠的糖代谢与脂代谢（P＜0.05）,它的作用效应可能与 slc2A4基因的表达水平有关。     

金枪鱼红肉酶解液对小鼠抗疲劳和调节肠道菌群效果的研究

以金枪鱼红肉酶解液为研究对象,研究其在抗疲劳、抗氧化和肠道菌群调节方面的作用。本研究首先制备金枪鱼红肉酶解液,通过MALDI-TOF/TOF对多肽组成和丰度进行鉴定;随后对小鼠进行连续8周灌胃,评价其抗疲劳、抗氧化及对肠道菌群调节的能力。结果表明,金枪鱼红肉酶解液中富含与抗疲劳作用密切相关的精氨酸和亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸三种支链氨基酸。与对照组相比,酶解液分别延长了雌雄小鼠72.8%和70.8%的转棒时间。同时,雄性处理组血清中抗疲劳参数指标磷酸肌酸激(CK)酶活和乳酸(LD)含量分别降低12.1%和18.7%,乳酸脱氢酶(LDH)酶活增加29.8%;抗氧化参数指标GSH-Px和SOD分别增加38.4%和13.9%,MDA含量降低48.6%;而在雌性处理组中,CK酶活和LD含量分别降低3.7%和12.4%,LDH酶活增加13%,GSH-Px和SOD分别增加4.99%和1.74%,MDA含量降低39.6%,肝脏中各项指标的变化趋势与血清中一致。此外,酶解液降低了雌性小鼠肠道菌群物种丰富度和多样性,而只降低了雄性小鼠的菌群丰富度;拟杆菌门和厚壁菌门丰度在雌雄小鼠中呈现相反的变化趋势;乳酸菌、乳杆菌和短链脂肪酸产生菌等益生菌丰度上升;雌雄小鼠间仅存在3个共有关键OTUs。     

金枪鱼粉的酶解工艺及其酶解产物功能活性研究

为了对金枪鱼粉进行深加工开发,本文研究金枪鱼粉的酶解工艺,并对其酶解液进行功效性评价。以水解度为指标筛选酶制剂,运用响应面试验优化酶解工艺参数,并对酶解液的总还原力、自由基清除率、酪氨酸酶抑制率、以及对大肠杆菌的抗菌性进行测试。结果表明以碱性蛋白酶酶解金枪鱼粉的最佳条件为料液比1:5(g:mL)、加酶量1×10⁴ U·g^-1、温度55℃、时间8 h、pH10.5,在此条件下水解度为29.20%±0.08%、氨基酸态氮含量为7.57 mg·mL^-1。酶解液对羟自由基有较好的清除率,且清除率随氨基态氮浓度增加而增强;当氨基态氮浓度为7.57 mg·mL^-1时,酶解液的总还原力与0.4 mg·mL^-1维生素C接近;酶解液对酪氨酸酶的抑制作用随氨基态氮浓度增加其抑制作用增强,且IC₅₀=3.44 mg·mL^-1。酶解液对大肠杆菌也有一定的抑制作用。本研究结果为金枪鱼粉的高值化开发提供了实验基础。     

植物乳杆菌发酵对金枪鱼碎肉酶解液挥发性物质的影响

金枪鱼主要用于生鱼片、鱼柳、鱼排和各类鱼罐头等产品的加工,加工过程中会产生下脚料,这些下脚料腥味较重,风味不佳,多被加工成饲料处理,经济价值较低。鉴于此,本实验研究植物乳杆菌发酵对金枪鱼碎肉风味的改善作用,利用电子鼻和气质联用（GC-MS）分别检测了金枪鱼碎肉酶解液未发酵以及发酵不同时间的风味变化情况。结果发现,植物乳杆菌发酵金枪鱼碎肉酶解液中呈腥味的乙醛未发酵时含量为11.51%,发酵72 h后含量低至检测限下;呋喃类低阈值且具有良好风味的化合物未发酵时含量为0.68%,发酵48 h达到最大含量5.31%。研究结果为金枪鱼下脚料的综合利用以及高值化利用提供了理论基础。      

金枪鱼碎肉酶解液对巴马香猪肉风味和滋味的作用

以金枪鱼碎肉酶解液作为添加剂喂养巴马香猪,研究其对猪肉风味和滋味的影响。运用电子鼻与气相色谱-质谱(GC-MS)测定巴马香猪肉风味,运用电子舌和高效液相色谱(HPLC)测定其滋味。结果显示:GC-MS测得实验组的醛类总的相对百分含量为65.63%,比对照组高出20.44%,使猪肉具有明显的清香、果香和油脂香气味;电子舌与HPLC测定出实验组鲜味氨基酸和甜味氨基酸的质量分数为38.39%和27.04%,比对照组高5.76 %和1.8%,味道阀值比对照组高2.09和0.45,实验组苦味氨基酸比对照组少3.05%,味道阀值相差较小。本研究表明金枪鱼碎肉酶解液喂养巴马香猪对肉质的风味和滋味有很好的改善作用,能明显的增加肉的鲜味和甜味。     

菊粉酶解及其酶解液对实验性糖尿病动物血糖影响的研究

以10％菊粉提取液为原料,在固定化酶与底物体积比为1：5、pH45、温度50℃、搅拌速度148r／min的条件下,用固定化菊粉酶酸解3h,转化率可达87％。酶解产物中,果糖占76％,葡萄糖占13％,低聚果糖占11％。此酶解液用于实验性糖尿病大鼠试验,证明血糖基本保持不变,而对照组大鼠的血糖升高30％左右。且酶解液中所含的低聚果糖又是对健康有益的双歧杆菌生长因子。故此酶解液可望开发为适合糖尿病患者饮用的产品。     

石榴皮多酚对糖尿病小鼠肾脏抗氧化防御功能的影响

探究石榴皮多酚对实验性糖尿病小鼠辅助调节血糖功能及肾脏抗氧化能力的影响。用低、中、高剂量的石榴皮多酚灌胃糖尿病小鼠6周后,观察其血糖、体重变化和肾脏的抗氧化能力变化。结果表明:石榴皮多酚能有效的降低糖尿病小鼠的血糖浓度,体重相比无统计学意义;石榴皮多酚组小鼠与糖尿病组比较,MDA含量、NO含量和GSH-Px水平降低,CAT和GSH含量增加,且均具有统计学差异（p<0.05或p<0.01）,表明石榴皮多酚能提高糖尿病小鼠肾脏抗氧化酶的活性,减少糖尿病小鼠肾脏组织的氧化应激;而石榴皮多酚组小鼠与糖尿病组比较,NOS含量、SOD含量和GST含量的差异均无统计学意义（p>0.05）。石榴皮多酚具有辅助调节糖尿病小鼠血糖功能和减少其肾脏组织的氧化应激,增强肾脏的抗氧化能力。      

基于GC-MS和电子鼻技术的金枪鱼胰脏酶解气味解析

目的：对不同蛋白酶水解金枪鱼胰脏的风味物质比较分析,为金枪鱼胰脏深加工提供参考。方法：以不加蛋白酶作对照,不同蛋白酶水解金枪鱼胰脏,利用电子鼻和顶空固相微萃取（headspace solid phasemicroextraction,HS-SPME）与气相色谱-质谱（gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS）联用仪,对酶解液气味的响应值进行载荷分析、主成分分析和成分的定性定量分析。结果：电子鼻测得不加酶组与菠萝蛋白酶、动物蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶组间气味存在明显差异。HS-SPME-GCMS法分别检测出45、54、54、34、46、43、53 种和50 种挥发性成分,主要为烃类、醇类、醛类、酮类、呋喃类等化合物。增香的丁香醛、β-紫罗兰酮和2-乙基呋喃均在动物蛋白酶组中相对含量最高。腥味物质在木瓜蛋白酶组、风味蛋白酶组和胰蛋白酶组中相对含量较低。结论：动物蛋白酶组能明显增加怡人香味,而木瓜蛋白酶组、风味蛋白酶组和胰蛋白酶组对腥味有较好的改善作用。     

金枪鱼蒸煮液酶解工艺优化及风味海鲜调味汁的制备

以金枪鱼蒸煮液作为原料,制备风味海鲜调味汁。本实验以水解度为指标,从中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰酶中筛选得到最佳酶,在单因素实验基础上,通过响应面优化酶解工艺条件,利用正交实验L₉(3⁴)研究不同酵母添加量、发酵温度、发酵时间对腥味值的影响,并确定最适杀菌条件。结果表明,以木瓜蛋白酶酶解金枪鱼蒸煮液,最佳酶解条件为:酶解时间4 h,酶解温度56 ℃,酶添加量300 U/g;酶解液经过添加酵母0.75%,在35 ℃下发酵60 min,去腥效果较佳;最佳杀菌条件为:90 ℃下灭菌30 min。研制出的金枪鱼调味汁呈黄棕色、鱼香味浓郁,氨基酸态氮含量0.68 g/100 mL,可以充分开发利用,是一种很有发展前景的天然调味品。     

美拉德反应对金枪鱼红肉酶解液挥发性物质和游离氨基酸的影响

为了高值化利用金枪鱼红肉这一蛋白质资源,利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)和高效液相色谱(HPLC),研究美拉德反应对金枪鱼红肉酶解液挥发性物质和游离氨基酸的影响。GC-MS结果表明,金枪鱼红肉酶解液中共检测出19种挥发性化合物,其中未加热的酶解液中有10种,而经过不同时间(30、60和90 min)加热的酶解液中,分别检测出12种、15种和15种,其中呋喃类物质的含量随反应时间延长显著增加。HPLC分析表明,随着加热时间的增加,酶解液中呈味氨基酸总量均上升,但是鲜味和甜味氨基酸的比例呈下降趋势,苦味氨基酸则呈上升趋势。表明,美拉德反应赋予酶解液更加丰富的风味的同时,却使其呈现更多的苦味。     

黄鳍金枪鱼头蛋白酶解液及其分级组分对小鼠免疫功能的影响

研究黄鳍金枪鱼头蛋白酶解液(EPTH)及其截留相对分子质量(MWCO)10 000和5 000超滤膜的分级组分Ⅰ(10 000)、组分Ⅱ(5 000～10 000)与组分Ⅲ(<5 000)对小鼠免疫功能的影响.采用灌胃给药,每天1次,分别于第14、19、32及35天测定有关免疫功能指标.结果表明:组分Ⅱ显著提高小鼠胸腺指数、脾脏指数、廓清指数,显著促进小鼠脾细胞抗体形成功能,提高骨髓细胞DNA含量,对小鼠淋巴细胞转化能力无显著影响;EPTH显著提高小鼠骨髓细胞DNA含量;组分Ⅰ、组分Ⅲ显著提高小鼠脾脏指数.组分Ⅱ富集了更多的免疫活性物质,具有增强小鼠免疫功能的作用.     

热处理对酶解蛋黄液功能特性和热稳定性的影响

胰蛋白酶改性是制备功能性蛋黄液的一个有效方法,而巴氏杀菌热处理是保证液态蛋微生物安全的必要手段。本文研究了不同热处理温度(60,64,68,72℃,4 min)对胰蛋白酶改性蛋黄液的功能特性及热稳定性的影响。结果表明,同等热处理条件下,胰蛋白酶改性蛋黄液的乳化活性和乳化稳定性、蛋白质溶解度、持水性、持油性、起泡性和泡沫稳定性均显著高于未改性组(P 0.05);随着处理温度的升高,改性组和未改性组的乳化活性、蛋白质溶解度、起泡性等功能特性均呈显著下降趋势(P 0.05)。SDS-PAGE结果显示:酶解处理可明显改变蛋黄液蛋白质分子质量分布,较高温度热处理(68℃和72℃)使蛋白质发生明显聚集。FTIR结果证实胰蛋白酶处理与热处理对蛋黄-OH官能团影响较明显。     

不同酶解条件对蛋清蛋白液功能性质的影响

主要研究酶种类、酶用量、底物浓度、酶解时间对蛋清蛋白液起泡性能和乳化性能的影响。实验结果表明:酶解对蛋清蛋白液的起泡性能和乳化性能有一定影响,碱性蛋白酶是蛋清蛋白水解的最适酶,在酶解温度45℃~50℃,pH6~8.5的条件下,其较适酶解条件为酶用量4%,底物浓度5%,酶解时间6 h。     

谷朊粉酶解物对小鼠免疫功能的影响

研究了酶解谷朊粉小肽对小鼠免疫功能的影响.空白组饲粮中不添加谷朊粉或谷朊粉酶解物,对照组饲粮中添加未酶解的谷朊粉1 000 mg/(kg饲粮·d);Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组为试验组,饲粮中分别添加酶解谷朊粉500、750和1 000 mg/(kg饲粮·d),饲喂28 d后进行免疫指标测定.结果表明:Ⅳ组与其它各组相比,小鼠的SOD、GSH-PX、GLU、GPT、IgG、IgM、IL-2和IGF-I均提高显著,但IgA降低显著.添加酶解谷朊粉750 mg/(kg饲粮·d)对提高小鼠的免疫功能效果最佳.     

豆渣RNA及其酶解物对小鼠免疫功能的影响

以脏器指数、迟发性变态反应、脾淋巴细胞增殖反应、抗体生成细胞及巨噬细胞吞噬指数等为检测指标,研究豆渣RNA和豆渣RNA酶解物对小鼠的细胞免疫、体液免疫及非特异性免疫功能的影响,并比较二者免疫调节作用的差异。结果表明,豆渣RNA及其酶解物均能显著增加小鼠脾脏重量,促进脾淋巴细胞增殖能力,提高抗体生成细胞水平,说明豆渣RNA及其酶解物可通过促进机体的细胞免疫和体液免疫而发挥免疫调节作用。其中,豆渣RNA酶解物高剂量组(10.0mg/mL)的效果明显优于豆渣RNA组。      

酶解鸡蛋清寡肽混合物对小鼠体外免疫功能的影响

考察了用Alcalase（AL）、Flourezyme（FL）、木瓜蛋白酶（PA）、胃蛋白酶（PE）和胰蛋白酶（TR）酶解鸡蛋清制得的5种酶解鸡蛋清寡肽混合物（MOEE）对小鼠体外免疫功能的影响．采用体外培养，细胞吞噬试验和细胞增殖试验，观察同一MOEE不同剂量以及同一剂量不同MOEE对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和脾细胞增殖能力的影响,结果发现，所有MOEE均能显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01）提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，促进小鼠脾淋巴细胞增殖，且表现出一定的剂量效应关系．其中，1．0mg／mL不同MOEE促进巨噬细胞吞噬能力（PI）大小顺序为：FL1-5〉PA1-55〉TR1-55〉AL1-5〉PE1-5〉对照；促脾淋巴细胞增殖能力（SI）大小顺序为：FL1-5〉AL1-5〉PA1-5〉TR1-5〉PE1-5〉对照（无丝裂原），FL1-5〉PA1-5〉TR1-5〉AL1-5〉PE1-5〉对照（LPS刺激），FL1-5〉TR1-55〉PE1-5〉PA1-5〉AL1-5〉对照（ConA刺激）．结果表明，所有MOEE都具有免疫增强活性，且以FL1-5的活性最强．     

茯苓多糖对Ⅱ型糖尿病小鼠降糖作用研究

为探讨茯苓多糖(WRP)对糖尿病的治疗作用,采用Ⅱ型糖尿病(NIDDM)小鼠模型,灌胃不同剂量的茯苓多糖28 d,然后测定小鼠血糖、血清胰岛素、胰高血糖素、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等生化指标,并进行口服糖耐量(OGTT)试验。结果表明WRP能有效地降低血糖、血清胰岛素、胰高血糖素、TC、TG和LDL-C水平,增加HDL-C水平;能提高NIDDM小鼠葡萄糖耐受力,改善糖耐量的异常。WRP对NIDDM小鼠具有降糖作用,且能一定程度上改善糖尿病引起脂代谢紊乱情况。