金线莲多糖对小鼠脾淋巴细胞体外增殖、细胞周期及分泌IL-2、IFN-γ的影响

目的:观察金线莲多糖(ARP)对小鼠脾淋巴细胞体外增殖,细胞周期及分泌IL-2、IFN-γ的影响。方法:MTT法检测ARP单独及协同Con A、LPS对小鼠脾淋巴细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期;ELISA法检测细胞因子IL-2和IFN-γ的含量。结果:在试验浓度范围,ARP对小鼠脾淋巴细胞没有毒性作用,与空白对照组相比,OD值明显升高(P0.05),在一定范围内呈量-效关系;ARP与Con A或LPS共同作用小鼠脾淋巴细胞时,其OD值明显高于Con A、LPS单独刺激组(P0.05);与空白对照组相比,ARP组G_0/G_1期淋巴细胞百分率降低(P0.01),S期、G2/M期淋巴细胞百分率升高(P0.01);ARP组IL-2、IFN-γ分泌量明显高于空白对照组(P0.05)。结论:ARP可促进小鼠脾淋巴细胞增殖并与Con A、LPS具有协同作用。其作用机制可能与促使小鼠脾淋巴细胞通过G_1期限制点,加速G_0/G_1期向S期,S期向G2/M期转化进入细胞增殖周期,并且可能与其促进IL-2、IFN-γ的分泌有关。     

副干酪乳杆菌VL8胞外多糖协同ConA对小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响

本研究以前期从viili中分离得到的一株副干酪乳杆菌VL8为基础,对其胞外多糖（VL8-EPS）的免疫活性进行了初步探究。首先分离制备小鼠脾淋巴细胞,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测不同浓度的VL8-EPS对小鼠脾淋巴细胞增殖及在其与有丝分裂原共同作用下对小鼠脾淋巴细胞的增殖作用;双抗体夹心酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测细胞因子白介素-2（IL-2）、干扰素-γ（IFN-γ）、白介素-6（IL-6）的含量。结果表明,VL8-EPS在浓度12.5⁸00μg/m L范围内,能显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖;VL8-EPS协同刀豆蛋白（Con A）也显著地增强了脾淋巴细胞的增殖作用,且诱导效果高于单独施用VL8-EPS;并能显著促进协同Con A诱导的细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-6的分泌水平。综上,VL8-EPS显著地促进了脾淋巴细胞的增殖,并对Con A诱导的脾淋巴细胞的增殖有协同促进作用,还通过促进细胞因子的分泌发挥了免疫增强作用,说明VL8-EPS在一定程度上对免疫机制进行了调控。      

南瓜多糖对2型糖尿病大鼠PDX-1mRNA表达的影响

目的：研究南瓜多糖对2型糖尿病（2-diabetes mellitus,2-DM）大鼠胰腺一十二指肠同源盒（PDX-1）基因表达的影响。方法：将Wistar大鼠随机分为5组,A：正常对照组;B：模型组;C、D、E：南瓜多糖高、中、低剂量治疗组。8周后,半定量RT-PCR检测PDX．1mRNA的表达水平。结果：与A组大鼠相比,2-DM模型组大鼠PDX．1mRNA基因表达减少（P〈O．01）;与B组相比,南瓜多糖治疗组大鼠PDX-lmRNA基因表达增加（P〈0．05）。结论：南瓜多糖能上调2-DM大鼠PDX-1基因的表达。     

菜籽多糖WPS-1对小鼠脾淋巴细胞的免疫作用

采用尼龙毛柱法从脾淋巴细胞分离T、B淋巴细胞。通过MTT法检测,WPS-1对T淋巴细胞具有明显的增殖活性,并表现出明显的剂量-效果关系,增殖的最佳浓度为40μg/mL,并且WPS-1比APS-2作用效果更好。采用半定量RT-PCR进一步研究WPS-1对T淋巴细胞分泌的细胞因子白细胞介素2（IL-2）、IL-4、IL-6、干扰素γ（IFN-γ）mRNA表达的影响。首先研究了各细胞因子mRNA随WPS-1作用时间的变化,WPS-1促进IL-2、IL-4、IL-6mRNA表达最佳作用时间都为24h,而促进IFN-γmRNA表达的最佳作用时间为12h。采用各细胞因子mRNA表达的最佳作用时间,进一步考察WPS-1浓度的影响,得到其对促进IL-2、IL-6、IFN-γmRNA表达的最佳浓度都为40μg/mL,而对IL-4则为20μg/mL。WPS-1可能对淋巴细胞的免疫功能具有调节作用。     

菜籽多糖WPS-1对小鼠脾淋巴细胞的免疫作用

采用尼龙毛柱法从脾淋巴细胞分离T、B淋巴细胞。通过MTT法检测,WPS-1对T淋巴细胞具有明显的增殖活性,并表现出明显的剂量-效果关系,增殖的最佳浓度为40μg/mL,并且WPS-1比APS-2作用效果更好。采用半定量RT-PCR进一步研究WPS-1对T淋巴细胞分泌的细胞因子白细胞介素2（IL-2）、IL-4、IL-6、干扰素γ（IFN-γ）mRNA表达的影响。首先研究了各细胞因子mRNA随WPS-1作用时间的变化,WPS-1促进IL-2、IL-4、IL-6mRNA表达最佳作用时间都为24h,而促进IFN-γmRNA表达的最佳作用时间为12h。采用各细胞因子mRNA表达的最佳作用时间,进一步考察WPS-1浓度的影响,得到其对促进IL-2、IL-6、IFN-γmRNA表达的最佳浓度都为40μg/mL,而对IL-4则为20μg/mL。WPS-1可能对淋巴细胞的免疫功能具有调节作用。      

姬松茸多糖对大鼠脾脏细胞因子mRNA表达的影响

研究姬松茸多糖对大鼠脾脏细胞因子mRNA表达的影响,探讨姬松茸多糖对大鼠的免疫调节机理。选用45日龄SD大鼠,随机分为2组,每组8只,雌雄各半,分别为对照组、多糖组。多糖组,每天每只100mg/kg多糖灌胃;对照组,灌等量的生理盐水。饲养60d后,采集脾脏,采用荧光定量RT-PCR法分析其细胞因子IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γmRNA的相对表达量,结果表明:与对照组相比,多糖组脾脏IL-1β、TNF-αmRNA的表达量分别上升14.3%、17.2%,差异显著(P<0.05);IL-2、IL-6、IFN-γmRNA的表达量分别上升31.0%、72.6%、20.5%,差异极显著(P<0.01)。说明姬松茸多糖可增加大鼠脾脏细胞因子的表达量,进而提高免疫作用。     

甘草多糖对腹腔巨噬细胞分泌TNF-α及mRNA表达的影响

研究了甘草多糖(GP)对巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌及mRNA表达的影响.结果表明:GP能剂量依赖性地增加活化的巨噬细胞TNF-α的分泌量,当GP的添加量为200μg/mL时,TNF-a的分泌量和TNF-α mRNA表达达到峰值.在GP添加量为100μg/mL,培养时间为12 h时,TNF-α的分泌量和TNF-α mRNA表达量最大.     

黑灵芝多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响

目的：研究黑灵芝多糖(PSG-1)对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响。方法：采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测PSG-1 在不同质量浓度、不同时间对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,检测不同质量浓度PSG-1 单独作用及其与丝裂原共同作用对小鼠T、B 淋巴细胞增殖作用的影响;用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定白介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果：PSG-1 在20～160μg/mL 质量浓度范围能显著促进脾细胞的增殖,且48h 效果最佳;PSG-1 能显著增强刀豆蛋白A (Con A)诱导的T 淋巴细胞和脂多糖(LPS)诱导的B 淋巴细胞的增殖作用;并且能显著诱导脾淋巴细胞分泌IL-2 和TNF- α。结论：PSG-1 能有效的促进脾淋巴细胞的增殖,并与Con A、LPS 对T、B 淋巴细胞的增殖有协同刺激作用,还可以通过IL-2 和TNF-α发挥免疫增强作用。     

硒化乳酸菌胞外多糖对体外培养小鼠脾淋巴细胞分泌NO、IL-4及IL-12的影响

目的:研究硒化乳酸菌胞外多糖对体外培养小鼠脾淋巴细胞分泌NO,IL-4及IL-12的影响。方法:分离制备了小鼠脾淋巴细胞,用Griess法检测NO含量,双抗体夹心酶联免疫法检测IL-4和IL-12含量。结果:当多糖质量浓度为400μg/mL时,硒化EPS对ConA刺激的T淋巴细胞NO分泌量高于EPS。培养4 h后上清液中NO浓度显著升高,培养8 h达到最高。硒化EPS可抑制小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4,400μg/mL硒化EPS对于ConA刺激的小鼠T淋巴细胞IL-12生成量影响最为显著。结论:硒化EPS在一定程度上影响小鼠脾淋巴细胞免疫功能,这可能是其免疫调控机理之一。     

甘草多糖对小鼠腹腔巨噬细胞NO、iNOS及iNOS mRNA表达的影响

通过研究甘草多糖(GP)对小鼠腹腔巨噬细胞NO、iNOS 的生成及iNOS mRNA 表达的影响,结果表明：GP 能剂量依赖性地增加活化的巨噬细胞中NO 的生成量及iNOS 的活性,当GP 的添加浓度为400μg/ml 时,NO、iNOS 的分泌量和iNOS mRNA 表达达到最大。固定GP 添加量为100μg/ml,培养时间在48h 时,NO、iNOS 的分泌量和iNOS mRNA 表达量最大。这表明GP 刺激巨噬细胞NO 合成的调节可发生在iNOS 的转录水平,从而刺激巨噬细胞NO 大量合成与释放,GP 的免疫调节作用和抗肿瘤作用机制可能与GP 刺激巨噬细胞iNOS 从头合成从而增加NO 生成有关。     

阿里红多糖组分对小鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响

目的研究阿里红多糖组分FOPS-a、FOPS-b对小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节功能的影响。方法实验方法选用CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂检测不同质量浓度阿里红多糖组分对小鼠脾脏淋巴细胞增殖率的影响;Griess法测定阿里红多糖组分对NO的释放量的影响;ELISA试剂盒测定阿里红多糖组分对IL-2、IL-4、INF-γ和IGg释放能力的影响。结果一定质量浓度的阿里红多糖组分能促进淋巴细胞的增殖活性,刺激淋巴细胞释放NO,并促进淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、INF-γ和IGg。结论阿里红多糖组分在体外具有一定的免疫活性,能增强小鼠脾脏淋巴细胞免疫功能。     

不同来源Lfcin对小鼠脾淋巴细胞增殖及分泌细胞因子影响的对比研究

本文以牛乳铁蛋白素Lfcin B和人乳铁蛋白素Lfcin H为研究对象,研究其对小鼠脾淋巴细胞增殖及分泌细胞因子的影响并比较两者的差异及相关性。采用CCK-8法检测不同浓度的Lfcin单独作用对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响及不同质量浓度Lfcin与丝裂原共同作用对小鼠T、B淋巴细胞增殖作用的影响;ELISA法测定IL-2、IL-4和TNF-α的含量。结果显示:Lfcin B和Lfcin H能显著促进脾淋巴细胞增殖及增强Con A诱导的T淋巴细胞的增殖和LPS诱导的B淋巴细胞的增殖,并且能显著促进脾淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、TNF-α(P0.01)。研究结果表明:Lfcin能有效的促进脾淋巴细胞的增殖,并与Con A、LPS对T、B淋巴细胞的增殖有协同刺激作用,其机制可能是通过促进细胞因子的分泌发挥免疫增强作用。     

青钱柳多糖对高脂血症小鼠脂代谢及PPARγ、ATGL基因mRNA表达的影响

目的:研究青钱柳多糖对高脂血症小鼠肝脏及脂肪基因表达的影响。方法:用青钱柳多糖对高脂血症小鼠进行干预后,测定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量,以此评定其降血脂功能;采用RT-PCR法测定肝脏和脂肪组织中PPARγ、ATGL m RNA表达水平,从分子水平探讨青钱柳多糖的降血脂机制。结果:青钱柳多糖能显著降低肝脏和脂肪组织中TC、TG、HDL-C、LDL-C的活性;同时可显著增强肝脏和脂肪组织中PPARγ、ATGL的表达量。结论:青钱柳多糖各剂量组、辛伐他汀及辛伐他汀+多糖中剂量组能够降低血清TC、TG、LDL-C值(P0.05或P0.01),提高HDL-C值(P0.01);且其各剂量组均可显著或极显著提高PPARγ、ATGL m RNA表达量(P0.05或P0.01),表明青钱柳多糖具有显著的降血脂和提高PPARγ、ATGL m RNA表达水平的作用。     

桑叶多糖对2型糖尿病大鼠GLUT4mRNA表达的影响

目的：探讨桑叶多糖（MulberryLeavesPolysaccharides,MLP）对2型糖尿病（2-DM）大鼠脂肪组织葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）基因表达的影响。方法：将Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、桑叶多糖高、中、低剂量治疗组。用药12周后,RT-PCR检测GLUT4mRNA基因表达水平。结果：桑叶多糖高、中、低剂量治疗组GLUT4mRNA表达高于模型组。结论：桑叶多糖可上调2型糖尿病大鼠GLUT4mRNA表达,从而实现其降血糖作用。     

鸡枞菌多糖对急性酒精肝损伤小鼠超微病理结构及ADH2、ALDH2 mRNA表达的影响

目的：从小鼠肝脏超微病理结构及酒精代谢相关酶乙醇脱氢酶2（alcohol dehydrogenase 2,ADH2）、乙醛脱氢酶2（aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2）的mRNA表达方面研究鸡枞菌多糖（refined polysaccharidesfrom Termitomyces albuminosus,RPTA）对酒精所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法：小鼠被随机分为空白对照组、模型对照组、药物对照组（联苯双酯组,150 mg/（kg·d））、RPTA各剂量组（100、200、400 mg/（kg·d））,连续灌胃30 d,空白对照组灌胃等量生理盐水。第31天,给予50%乙醇（12 mL/kg）建立动物急性肝损伤模型。12 h后处死,取小鼠肝脏分别观察肝组织超微结构变化,并采用荧光实时定量聚合酶链式反应（real time polymerase chain reaction,real time-PCR）法检测肝脏ADH2和ALDH2的mRNA表达。结果：超微结构观察结果表明,模型对照组小鼠肝脏细胞内可见大量脂滴,细胞核呈不规则形态,局部核膜凹陷严重,线粒体严重变形,线粒体嵴模糊,内质网严重肿胀,核糖体脱落;而RPTA小鼠肝细胞内上述病变有所改善,尤以高剂量组最佳。Real time-PCR结果表明,与空白对照组相比,模型对照组ADH2和ALDH2的mRNA表达量降低,而RPTA组随着剂量的增加ADH2和ALDH2 mRNA的表达逐渐升高。结论：RPTA可以上调ADH2和ALDH2 mRNA的表达,具有改善小鼠酒精性肝损伤状况的作用。     

维药阿里红多糖对运动疲劳小鼠Th1/Th2平衡及Foxp3 Scurfin蛋白表达调控研究

目的研究维药阿里红多糖对运动疲劳小鼠Th1/Th2平衡、Foxp3 mRNA及Foxp3 Scurfin蛋白表达调控作用。方法采用递增负荷运动制备小鼠运动疲劳模型,给予不同浓度阿里红多糖,观察阿里红多糖对各组小鼠Th1/Th2平衡及Foxp3 Scurfin蛋白表达的影响。结果阿里红多糖可有效调节运动疲劳小鼠血清Th1/Th2相关细胞因子水平,维持T淋巴细胞免疫平衡,显著提高运动疲劳小鼠脾脏Foxp 3 mRNA表达量及Foxp3 Scurfin蛋白表达水平。结论维药阿里红多糖多糖有显著的抗疲劳、增强免疫作用。     

茯苓多糖对2型糖尿病小鼠肾组织抗氧化能力及Bax、Bcl-2蛋白表达影响

研究探讨茯苓多糖(WRP)对2型糖尿病(NIDDM)小鼠肾组织抗氧化能力及Bax、Bcl-2蛋白表达影响。采用高糖高脂饲料+小剂量链脲佐菌素(STZ)方式诱导NIDDM动物模型,然后将动物分成正常对照组、模型对照组、WRP灌胃组、罗格列酮灌胃组,药物连续灌胃42 d,检测小鼠肾组织抗氧化能力以及Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果表明,WRP能使NIDDM小鼠肾组织中超氧化物岐化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平明显升高,丙二醛的水平明显降低;即WRP能增强机体肾脏的抗氧化性,降低脂质过氧化,保护自由基介导的氧化损伤,减轻糖尿病对肾脏的损害。WRP能抑制NIDDM小鼠肾组织中Bax基因过多表达;使糖尿病状态下肾组织细胞凋亡趋势受到抑制,对糖尿病肾病具有一定预防作用。     

长根菇多糖对小鼠肠道菌群及分泌型IgA的影响

为了研究长根菇多糖对小鼠的肠道菌群及肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(secretory immunoglobulin A,SIg A)的影响,选取18~22g健康清洁级雄性昆明小鼠进行肠道菌群和SIg A的检测。利用盐酸林可霉素灌胃建立肠道微生态失调小鼠模型。60只小鼠随机分为五组,正常对照组、自然恢复组、低剂量多糖组(75mg/kg·bw)、中剂量多糖组(150mg/kg·bw)和高剂量多糖组(300mg/kg·bw)。灌胃14d后分别进行肠道双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、肠球菌检测和肠黏膜SIg A测定。结果显示,与空白对照组比较,其余各组均有双歧杆菌、乳酸杆菌、SIg A减少以及大肠杆菌、肠球菌增多的现象;与自然恢复组比较,多糖组上述指标得到明显改善,差异显著(p<0.05)。结果表明,长根菇多糖对肠道菌群失调小鼠的肠道菌群具有调整作用并能提高肠黏膜SIg A含量。      

蚕卵粉对糖尿病小鼠超氧化物歧化酶和其mRNA表达的影响

本实验通过小鼠模型,研究了蚕卵粉对诱导型糖尿病小鼠的血糖、SOD酶和SOD基因mRNA表达的影响。结果显示,喂食含5%蚕卵粉饲料的糖尿病小鼠的血糖显著降低,蚕卵粉对正常小鼠的血糖值没有影响。蚕卵粉对由于高血糖引起的超氧化物歧化酶(SOD)活性降低具有明显保护作用,可以有效地增强糖尿病小鼠的SOD酶活性。RT-PCR和Northern Blotting结果显示,蚕卵粉可以加强糖尿病小鼠地超氧化物歧化酶基因(SOD)的mRNA的表达水平。上述结果进一步研究蚕卵粉的生理功能及其利用提供理论依据。     

白藜芦醇对小鼠脾淋巴细胞免疫调节活性的影响

研究了白藜芦醇(Res)对小鼠脾淋巴细胞免疫调节活性的影响。无菌分离小鼠脾,制备淋巴细胞,并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入刀豆蛋白A(Con A)、脂多糖(LPS)以及5、10、20、40μg/m L不同浓度的Res,经过不同时间培养后,采用MTT法检测淋巴细胞的增殖,ELISA法检测淋巴细胞分泌IL-4和IL-12的水平,流式细胞仪检测淋巴细胞的细胞周期和细胞膜表面标志。结果表明:Res能够促进小鼠脾淋巴细胞增殖,能与Con A协同促进小鼠脾淋巴细胞增殖,不能与LPS协同促进小鼠脾淋巴细胞增殖;能增强IL-4和IL-12的分泌;能提高小鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+的比值;能提高脾淋巴细胞周期中细胞进入S期细胞的百分率。综上,Res能增强小鼠脾淋巴细胞的免疫调节活性。