远东拟沙丁鱼抗氧化肽的分离纯化及结构解析

通过动物蛋白酶和风味酶联合水解,采用超滤等膜分离技术制备远东拟沙丁鱼蛋白多肽,得到不同分子质量区间的多肽样品F1(100～3000 u)、F2(3000～10000 u)和F3(大于10000 u).以DPPH、ABTS和羟基自由基清除能力为检测指标,测定各组分的抗氧化活性,结果显示:组分F1的抗氧化活性最强.进一步对...     

玉米蛋白水解物对Caco-2细胞的抗氧化作用研究

试验以挤压膨化蒸煮后的玉米蛋白粉为原料,经双酶(复合蛋白酶-碱性蛋白酶)顺次水解后,得到抗氧化活性良好的玉米蛋白水解物;模拟体外胃肠消化情况,分析其经胃蛋白酶和胰蛋白酶作用后消化液的抗氧化活性变化。结果表明,经胃肠消化后,抗氧化活性明显增强,亚铁离子螯合能力提高81.52%,·DPPH自由基清除率提高12.63%;将玉米蛋白水解物直接作用Caco-2细胞,通过200μmol/L H_2O_2作用细胞4 h,研究作用后细胞内的ROS含量。试验结果表明, Caco-2细胞经玉米蛋白水解物作用150 min后,细胞内活性氧含量均降低,当玉米蛋白水解物蛋白浓度为5μg/mL时,细胞内ROS荧光值从32 235降低到11 168.5,明显清除了细胞内ROS含量。     

泥鳅蛋白多肽的抗氧化活性

为进一步促进泥鳅蛋白及其加工食品的开发,通过体内以及体外抗氧化实验,对泥鳅蛋白多肽抗氧化能力进行了研究.实验表明,泥鳅蛋白多肽在体外具有一定的抗氧化能力.体内抗氧化实验中,多肽高剂量组中血清、肝脏、心脏的SOD活性与模型对照组相比分别提升36.6％、28.1％、22.3％,GSH-Px活性分别提升43.2％、132.2...     

远东拟沙丁鱼蛋白多肽(Sardinops sagaxp olypeptide)的制备及其对酪氨酸酶的抑制作用

以远东拟沙丁鱼为原料,采用动物蛋白水解酶和风味酶联合水解,通过膜分离等工序制备远东拟沙丁鱼蛋白多肽(Sardinops sagax Polypeptide/SSP),测定其分子量的分布,以生化水平上对酪氨酸酶的抑制率、细胞水平上对小鼠B16细胞中酪氨酸酶活性及黑色素含量的抑制率为检测指标,研究SSP对酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响。结果显示:SSP的重均分子量为1664 u,其分子量区间主要为500~3000 u;无论是在生化水平还是细胞水平上,SSP对酪氨酸酶都具有一定的抑制作用,且SSP还能在一定程度上抑制细胞中黑色素的合成,这一结果表明了SSP具有一定的美白功能,有望作为无毒副作用的天然酪氨酸酶抑制剂,在医药、食品、化妆品等行业具有广泛的应用前景。     

远东拟沙丁鱼蛋白多肽(Sardinops sagaxp olypeptide)的制备及其对酪氨酸酶的抑制作用

以远东拟沙丁鱼为原料,采用动物蛋白水解酶和风味酶联合水解,通过膜分离等工序制备远东拟沙丁鱼蛋白多肽(Sardinops sagax Polypeptide/SSP),测定其分子量的分布,以生化水平上对酪氨酸酶的抑制率、细胞水平上对小鼠B16细胞中酪氨酸酶活性及黑色素含量的抑制率为检测指标,研究SSP对酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响。结果显示:SSP的重均分子量为1664 u,其分子量区间主要为500~3000 u;无论是在生化水平还是细胞水平上,SSP对酪氨酸酶都具有一定的抑制作用,且SSP还能在一定程度上抑制细胞中黑色素的合成,这一结果表明了SSP具有一定的美白功能,有望作为无毒副作用的天然酪氨酸酶抑制剂,在医药、食品、化妆品等行业具有广泛的应用前景。      

洋葱蛋白及多肽体外抗氧化活性研究

目的:测定洋葱蛋白及多肽的体外抗氧化性。方法:以Vc为对照品,采用普鲁士蓝法、邻二氮菲-Fe~(2+)氧化法、邻苯三酚自氧化法、DPPH法分别测定洋葱多肽与蛋白的总还原能力和对·OH、O_2~-·、DPPH·3种自由基的清除能力。结果:相同浓度的洋葱多肽总还原能力稍强于洋葱蛋白,并在0.032 g/m L时达到对照品Vc总还原能力的58%以上;浓度为0.24 g/m L时洋葱蛋白和多肽的O_2~-·清除率分别为53%和63%;浓度大于0.24 g/m L时,洋葱多肽及蛋白的DPPH·清除率分别为57%和42%;浓度高于0.032 g/m L时,洋葱蛋白的·OH清除效果稍高于多肽,达到Vc对·OH的清除率的50%以上。结论:洋葱蛋白及多肽均具有一定体外抗氧化能力,且洋葱多肽的总还原能力、对O_2~-·和DPPH·的清除能力强于洋葱蛋白,较高浓度时洋葱蛋白对·OH的清除能力则强于多肽。     

鸭蛋清蛋白多肽体外抗氧化活性的研究

对经     

鸭蛋清蛋白多肽体外抗氧化活性的研究

对经"蛋清水解专用蛋白酶-碱性蛋白酶"和"碱性蛋白酶-胰蛋白酶"双酶分步酶解鸭蛋清蛋白得到的多肽的抗氧化活性进行了研究。结果表明,当"蛋清水解专用蛋白酶-碱性蛋白酶"酶解蛋清蛋白的水解度为21%时,多肽的抗氧化活性最高,其对二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)的清除率和对大豆卵磷脂过氧化作用的抑制率分别为75.76%、84.17%、72.73%和47.59%;当"碱性蛋白酶-胰蛋白酶"酶解蛋清蛋白的水解度为15%时,多肽的抗氧化活性最高,其对DPPH·、·OH、O2-·的清除率和对大豆卵磷脂过氧化作用的抑制率分别为75.15%、93.84%、58%和40.51%。产物肽的分子量均分布在小于5300D的范围内。     

远东拟沙丁鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备及其降尿酸活性的研究

为了从远东拟沙丁鱼肉酶解物中制备黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase, XO)抑制肽并研究其降尿酸活性,该研究以远东拟沙丁鱼肉为原料,XO抑制率为考察指标,采用碱性蛋白酶水解远东拟沙丁鱼肉,产生的酶解物通过超滤与凝胶色谱、反相高效液相色谱(reversed phase high performance liquid chromatography, RP-HPLC)分离纯化,从中分离出2个XO抑制肽,它们的氨基酸序列采用超高效液相四级杆飞行时间串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography quadrupole time of flight tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)鉴定为苯丙氨酸-亮氨酸-精氨酸(Phe-Leu-Arg, FLR)与精氨酸-脯氨酸-赖氨酸(Arg-Pro-Lys, RPK)。采用腺苷及XO联合诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2)构建高尿酸细胞模型,对2个肽的降尿酸功效进行评价,结果显示FLR、RPK具有显著降尿酸作用。     

南瓜籽仁蛋白多肽的酶法制备和抗氧化活性研究

以酸溶性氮得率为评价指标,用木瓜蛋白酶制备南瓜籽仁蛋白多肽。通过正交实验优化酶解条件,确定其最佳酶解工艺为:底物浓度1%、加酶量4%、酶解温度60℃、酶解时间4h,经验证实验所得南瓜籽多肽酶解液的酸溶性氮得率为43.52%±0.39%,其多肽的抗氧化活性可达到VC的20%以上。     

卵白蛋白多肽的酶解制备及抗氧化活性研究

以DPPH自由基清除率和水解度为指标,采用碱性蛋白酶酶解卵白蛋白制备抗氧化活性肽,考察底物质量分数、酶解时间、加酶量、温度等因素对制备的影响。正交实验结果表明,碱性蛋白酶的最佳水解条件为:底物质量分数4%、酶解时间6h、加酶量5500U/g,温度65℃,此条件下DPPH自由基清除率达到96.92%、水解度为57.14%。酶解时间对DPPH自由基清除率的影响最大,而底物质量分数对水解度的影响最大。     

南瓜籽仁蛋白多肽的酶法制备和抗氧化活性研究

以酸溶性氮得率为评价指标,用木瓜蛋白酶制备南瓜籽仁蛋白多肽。通过正交实验优化酶解条件,确定其最佳酶解工艺为:底物浓度1%、加酶量4%、酶解温度60℃、酶解时间4h,经验证实验所得南瓜籽多肽酶解液的酸溶性氮得率为43.52%±0.39%,其多肽的抗氧化活性可达到VC的20%以上。      

核桃多肽体外抗氧化活性研究

以提取油脂后的核桃渣为原料分离出核桃蛋白,利用酸性、碱性、中性3种蛋白酶复合酶解核桃蛋白,制备水解度高的核桃多肽。通过测定核桃多肽的总还原能力、超氧阴离子自由基(O2-·)清除能力、羟自由基(·OH)清除能力、二苯代苦味酰基自由基(DPPH)清除能力,研究核桃多肽的抗氧化活性大小。结果表明,3种酶协同对核桃蛋白进行水解,水解度可达到45.58%,核桃多肽有一定的体外抗氧化活性,其总还原能力、对羟基自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基清除率与质量浓度呈量效关系。     

卵白蛋白多肽的酶解制备及抗氧化活性研究

以DPPH自由基清除率和水解度为指标,采用碱性蛋白酶酶解卵白蛋白制备抗氧化活性肽,考察底物质量分数、酶解时间、加酶量、温度等因素对制备的影响。正交实验结果表明,碱性蛋白酶的最佳水解条件为:底物质量分数4%、酶解时间6h、加酶量5500U/g,温度65℃,此条件下DPPH自由基清除率达到96.92%、水解度为57.14%。酶解时间对DPPH自由基清除率的影响最大,而底物质量分数对水解度的影响最大。      

大鲵多肽体外抗氧化活性研究

通过4种体外抗氧化评价方法(DPPH·清除能力、ABTS~+·清除能力、·OH清除能力、过氧化氢清除能力)综合评价大鲵多肽的抗氧化能力,在此基础上,采用超滤技术对大鲵肌肉酶解液进行分离纯化,比较各组分清除DPPH·和·OH的能力,最后分析比较大鲵肌肉、酶解物及超滤组分ADPP-Ⅰ中氨基酸成分。结果:大鲵多肽在不同的体外抗氧化模型中均具有良好的抗氧化能力;4个超滤组分ADPP-Ⅳ、ADPP-Ⅲ、ADPP-Ⅱ和ADPP-Ⅰ的比例分别为17.85%、10.02%、64.92%和7.21%,ADPP-Ⅰ清除DPPH·和·OH的能力最强,达85.83%,较超滤前提高了23.09%;对氨基酸组成进行分析,发现ADPP-Ⅰ中的疏水性氨基酸含量由酶解物的35.59%增加到41.69%,芳香族氨基酸含量由酶解物的6.42%增加到8.30%。结论:大鲵多肽具有良好的抗氧化能力,超滤组分ADPP-Ⅰ中的疏水性氨基酸和芳香族氨基酸含量均相应地提高,在一定程度上有利于大鲵多肽抗氧化活性的提高。     

花生多肽的体外抗氧化活性研究

通过对红细胞溶血、肝脏与肝线粒体中的脂质过氧化以及肝线粒体肿胀度的测定,结果发现花生多肽能够有效地抑制由羟自由基引起的脂质过氧化,保护生物膜,减少红细胞溶血,减轻肝线粒体肿胀程度,提示花生多肽具有很强的抗氧化能力.     

复合酶法制备小麦面筋蛋白多肽及其抗氧化活性研究

以小麦面筋蛋白粉为原料,采用复合酶法制备小麦面筋蛋白多肽,以小麦面筋蛋白酶解液的水解度(DH)、DPPH·清除率及Fe3+还原力为指标,对酶比例(碱性蛋白酶∶小麦蛋白水解专用酶)、反应时间、反应温度及反应pH四种因素各取3个水平,进行L9(34)正交试验,确定最优的制备工艺条件。最优工艺条件如下:酶比例为2∶1,反应时间为2 h,反应温度为50℃,反应pH 8.5。在此优化条件下进行验证实验,测得酶解液的DH为29.9%,DPPH·清除率为89.9%,Fe3+还原力为0.150。     

珍珠贝多肽体外抗氧化活性的研究

以Vc为对照品,测定珍珠贝多肽对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基和ABTS自由基的清除能力,研究珍珠贝多肽的体外抗氧化活性。结果表明:珍珠贝多肽对4种自由基均具有较强的清除作用,且清除率都随着质量浓度的增大而显著增加(p0.05),剂量效应关系明显;珍珠贝多肽对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基和ABTS自由基的IC50分别为3.23、2.23、9.74、0.25 g/L。珍珠贝多肽具备较高的抗氧化能力,为其抗氧化活性肽的开发利用提供理论依据。     

苹果多酚对Caco-2细胞和LDL抗氧化作用的研究

采用细胞氧化损伤模型和Cu~(2+)诱导的低密度脂蛋白(LDL)氧化修饰模型来评价不同品种中苹果多酚的抗氧化作用。结果表明H_2O_2浓度为10 mmol/L时对细胞模型损伤程度比较适中。富士中苹果多酚对损伤的Caco-2细胞的保护作用最强,其中富士、国光、金冠和王林处理后细胞产MDA量分别是对照的20%、33%、40%和60%;苹果多酚对LDL的氧化修饰具有显著的抑制作用,除了王林多酚外,富士、国光和金冠均能极显著地延长LDL氧化的延滞时间,其中富士苹果多酚的作用最强是对照延滞阶段时间的7倍,国光和金冠苹果次之分别是对照延滞时间的4倍和3倍。