正交试验优化黄河鲤鱼鳞酶促溶性胶原蛋白提取工艺

为提高黄河鲤鱼鳞胶原蛋白提取率,在4 ℃条件下,采用胃蛋白酶和0.5 mol/L乙酸溶液对其提取工艺进行研究,在单因素试验的基础上,采用正交试验设计方法探索了提取时间、加酶量和料液比3 个因素对黄河鲤鱼鳞酶促溶性胶原蛋白（pepsin soluble collagen,PSC）提取率的影响。结果表明,黄河鲤鱼鳞PSC的最适提取工艺参数为提取时间60 h、加酶量40 kU/g和料液比1∶10（g/mL）,在此条件下,PSC提取率达到（17.7±0.7）%。所提取的产品与酸溶性胶原蛋白（acid soluble collagen,ASC）有相似的电泳性质和氨基酸组成,表明其可能与ASC具有相似的分子结构。     

草鱼鱼鳞胶原蛋白酸酶分步提取工艺研究

为实现鱼鳞胶原蛋白的高效提取,在优化脱钙、混酸法和酶法提取工艺基础上,对鱼鳞胶原蛋白的酸酶进行分步提取。研究发现,鱼鳞最佳脱钙工艺为料液比8:100(g/mL),盐酸浓度1.0 mol/L,反应时间1.0 h,反应温度20℃;混合酸法提取鱼鳞胶原蛋白的最佳条件为醋酸料液比1:12(g/mL),柠檬酸料液比1:10(g/mL),乳酸料液比1:12(g/mL),即混合酸料液比为1:34(g/mL),其中,0.8 mol/L柠檬酸、1 mol/L乳酸、0.8 mol/L醋酸的体积比为6:5:6,提取时间2 d,胶原蛋白的提取率为48.14%;最佳酶法提取条件为胃蛋白酶用量450 U/g,提取温度30℃,提取时间72 h,该条件下提取率为45.26%。酸酶耦合法优于单一方法或同种方法两次提取的效果,可实现酸溶性和酶溶性胶原蛋白的连续提取,先酸后酶法胶原蛋白的提取率达84.61%,SDS-PAGE凝胶电泳发现其为Ⅰ型胶原蛋。     

金鲳鱼鱼皮酶溶性胶原蛋白的提取工艺优化及基本特性

为提高金鲳鱼加工副产物——鱼皮的利用率,本研究在前期单因素实验的基础上,以加酶量、液料比和提取时间三个单因素建立模型,采用响应面法Box-Behnken设计实验,优化了胃蛋白酶法提取金鲳鱼鱼皮酶溶性胶原蛋白(PSC)的提取工艺,并与酸溶性胶原蛋白(ASC)进行聚丙烯酰胺凝胶电泳、傅里叶变换红外光谱和差示扫描量热仪等基本理化特性的对比研究。结果表明,金鲳鱼鱼皮胶原蛋白的最佳提取工艺为:加酶量1.5%、液料比23∶1 m L/g、酶解时间27.5 h。此条件下通过实验验证得出,金鲳鱼鱼皮胶原蛋白实际提取率为64.68%,与响应面模型理论预测值65.17%基本一致;此外,本实验提取的PSC有较高热变性温度(30.44℃),与金鲳鱼皮ASC有相似的电泳性质和红外峰型,初步鉴定为I型胶原蛋白。该实验为金鲳鱼鱼皮酶溶性胶原的提取提供了理论参考。     

鮟鱇鱼皮胶原蛋白酶提取最优工艺研究与结构表征

为了研究提取鮟鱇鱼皮胶原蛋白的最优工艺,以鮟鱇鱼皮为研究对象,通过选取液料比、加酶量和酶解时间3个变量进行单因素试验,再根据Box-Behnken中心组合试验设计原理,在单因素基础上采用三因素三水平响应面分析法(RSM),制备胃蛋白酶酶促溶性胶原蛋白(PSC)并对其进行理化性质分析。结果表明：鮟鱇鱼皮胶原蛋白最优提取工艺条件是4℃、液料比18:1、加酶量3%、提取时间48h,此条件下鮟鱇鱼皮胶原蛋白提取率为2.11%;氨基酸分析得鱼皮中Arg和Tyr含量分别为16%和18%;差示扫描量热仪(DSC)测定PSC的热收缩温度为48.9℃;SDS-PAGE电泳显示胶原蛋白基本保留了三股螺旋结构;电子显微镜(SEM)扫描显示PSC呈多孔网状结构。     

草鱼鱼鳞中活性胶原蛋白提取工艺及参数优化

以草鱼鱼鳞为原料,在低于蛋白变性温度的条件下提取酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),并对鱼鳞原料的前处理方法、胶原蛋白提取工艺进行优化。结果表明,在鱼鳞原料的前处理工艺中,以0.1mol/L 的Na2CO3 溶液为试剂脱除原料中杂蛋白的最佳工艺条件为室温、料液比1:40(g/mL),300r/min 搅拌处理3 次,每次6h;以0.3mol/L 的EDTA 为试剂脱除原料中矿物质杂质的最佳工艺条件为室温、料液比1:60,搅拌处理3 次,每次12h;ASC 的最佳提取工艺条件为：提取温度不高于25℃,料液比1:60,醋酸浓度0.8mol/L,提取3 次,每次24h;PSC 的最佳提取工艺条件为：胃蛋白酶用量为鱼鳞原料质量的3.0%、醋酸浓度0.8mol/L、料液比1:30、提取温度4 ℃、提取2 次,每次24h。     

不同方法提取红鳍笛鲷鱼鳞胶原蛋白的结构和理化特性研究

为探明不同提取方法对红鳍笛鲷(Lutjanus erythropterus)鱼鳞胶原蛋白理化特性的影响,以红鳍笛鲷为原料,分别提取酸溶性胶原蛋白(acid soluble collagen, ASC)、酶溶性胶原蛋白(pepsin soluble collagen, PSC)及热水溶性胶原蛋白(hot water soluble collagen, HSC),对比分析3种胶原蛋白提取率、得率及纯度的差异,并测定其氨基酸组成、分子质量、二级结构、Zeta电位、溶解性以及微观结构等理化特性。结果表明,热水法提取率最高,为45.25%,其次为胃蛋白酶法;HSC、ASC、PSC的亚氨酸含量分别为18.28%、17.54%和18.30%。HSC、ASC和PSC均为I型胶原蛋白,包含两条α链(α1和α2),ASC比PSC的β链含量高,HSC、PSC的γ带消失;ASC、PSC具有相似的红外光谱,且保留了完整的三螺旋结构,HSC的三螺旋结构被破坏;HSC、ASC、PSC的净电荷零点为5～6;ASC、PSC在pH 5～11中溶解度较低;扫描电镜显示,ASC呈无序纤维状结构,PSC呈致密多孔网状结构,HS...     

酸法和酶法提取草鱼鱼鳞胶原蛋白的特性分析

以草鱼鱼鳞为原料,分别采用酸法和酶法提取胶原蛋白并进行理化性质分析。通过氨基酸组成、紫外光谱、傅里叶红外光谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、变性温度,对胶原蛋白进行比较。结果表明,2种方法的提取物均为典型的胶原蛋白,在波长230 nm左右出现最大紫外吸收峰;红外光谱及SDS-PAGE凝胶电泳显示提取的ASC和PSC主体结构一致,属于Ⅰ型胶原蛋白,胃蛋白酶不会破坏胶蛋白三螺旋构象,酸溶胶原蛋白和酶溶胶原蛋白的热变性分别为30.16℃和30.63℃。综合来看2种方法所提胶原蛋白在理化特性上并无太大差别,可以利用胃蛋白酶处理有效提高胶原蛋白的提取率。     

草鱼皮酸溶性和酶溶性胶原蛋白的提取及性质

本文研究了从草鱼皮中提取酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC)及其部分性质。草鱼皮中ASC和PSC的提取得率以干基计分别为8.0%和18.6%;对草鱼皮ASC和PSC的紫外光谱分析,最大吸收峰都接近223nm;SDS-PAGE电泳图谱显示草鱼皮胶原蛋白是由两条不同的α链组成,分子量都在100kDa以上,与猪皮I型胶原蛋白相似;草鱼皮ASC和PSC热变性温度分别为33.8、34.5℃,只比猪皮的热变性温度(37℃)低3℃左右。结果表明草鱼皮胶原蛋白在功能食品、医药、化妆品、制药等方面有潜在的应用。     

鲢鱼鳞胶原蛋白的制备及性质研究

采用胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶3种蛋白酶对鱼鳞中的胶原蛋白进行初步提取,选取效果最好的酶用正交实验优化胶原蛋白制备工艺。结果表明,用胃蛋白酶提取鱼鳞胶原蛋白效果最佳,最佳工艺条件为:40℃、48h、酶量4%、pH2,提取率为56.8%。经SDS-PAGE分析,所提取胶原蛋白分子量主要分布在30.0～94.0ku之间。氨基酸组成分析表明,鲢鱼鳞酶解蛋白液中甘氨酸(Gly)含量最高,脯氨酸(Pro)和谷氨酸(Glu)含量次之,而半胱氨酸(Cys)与酪氨酸(Tye)含量较低,符合I型胶原蛋白的组成特征。鱼鳞胶原蛋白随温度的升高黏度下降,乳化性次于对照的I型胶原蛋白。     

鲢鱼鱼鳞酶溶性胶原蛋白提取工艺的优化

采用中心组合试验设计对鲢鱼鱼鳞酶溶性胶原蛋白的提取工艺条件进行优化,得到酶溶性胶原蛋白提取率随液料比、胃蛋白酶添加量和提取时间变化的动态数学模型。根据模型所得最优提取条件为:液料比18.0(mL/g),胃蛋白酶添加量25.51 U/mg,提取时间61.9 h。在该条件下模型预测值为3.98%,胶原蛋白实际提取率为(4.02±0.11)%,两者差异不显著(P0.05),表明模型预测效果良好,可用于预测胶原蛋白在提取过程中的动态变化。     

鲟鱼皮胶原蛋白的理化特性研究

本文以俄罗斯鲟鱼皮为原料,采用酸法和酶法提取胶原蛋白,研究了酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶促溶性胶原蛋白(PSC)的蛋白类型、结构、热变性温度和溶解度等理化性质,并与牛跟腱I型胶原蛋白(BATC)进行比较。SDS-PAGE电泳图显示ASC和PSC均包含了两条α链(α1链和α2链),为I型胶原蛋白;傅立叶红外光谱图表明提取的2种胶原蛋白均保存了完整的三螺旋结构,但ASC的有序度相对较高;ASC和PSC的热变性温度分别为32.48℃和32.68℃,低于BATC;在酸性pH条件下(pH 1~4),ASC和PSC溶解度较高,当Na Cl浓度大于2%时,PSC的溶解度较高;扫描电镜显示2种胶原蛋白均为网状结构,ASC的孔径较均匀,且孔径较小。上述结果表明提取方法不同,导致2种胶原蛋白的理化性质具有一定的差异,但都具有较好的热稳定性、溶解性,能形成较好的网状结构,有潜力的作为胶原蛋白的替代来源。     

酸提和酶解两步法连续提取鳙鱼鱼鳞胶原蛋白工艺研究

采用柠檬酸提和木瓜蛋白酶解两步法从鳙鱼鱼鳞中连续提取胶原蛋白。采取正交实验方法对两步法工艺条件进行了优化,并与单一酸提和酶解工艺进行了比较。对酸提、酶解和酸提+酶解两步法制备的胶原蛋白样品进行了紫外和红外表征。结果表明,两步法中酸提最佳工艺条件为提取时间24 h、液固比15 mL/g、酸浓度0.5 mol/L、提取温度28℃,提取率9.25%;酶解最佳工艺条件为提取时间36 h、液固比20 mL/g、酶浓度2.0%、提取温度28℃,提取率56.23%。两步法总提取率65.48%,分别是单一酸提和酶解提取率的7.1倍和2.1倍。两步法胶原蛋白样品的紫外和红外谱图上的吸收峰位置与单一酸提和酶解的十分相似,均符合Ⅰ型胶原蛋白的基本特征。鱼鳞经一步酸提后发生溶胀,部分胶原交联键被打开,有利于下步酶解过程中酶分子与底物接触几率的提高,从而大幅度提高胶原蛋白的提取率,使酶解(两步法)的提取率(56.23%)比单一酶解法的提取率(31.20%)提高了80%,是一种高效的鱼鳞胶原蛋白的提取方法。     

鲽鱼骨胶原蛋白的结构及流变学特性

采用酸法和酶法从鲽鱼骨中提取制备得到酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),对ASC与PSC进行紫外吸收(UV)、红外吸收(FTIR)、亚基组成(SDS-PAGE)、热稳定性(DSC)、微观结构(SEM)以及流变学特性(DHR)分析。UV显示:ASC与PSC分别在227 nm与226 nm处有最大紫外吸收峰。FTIR图谱表明:ASC与PSC保持了三螺旋结构。SDS-PAGE电泳图表明:ASC与PSC是Ⅰ型胶原蛋白。DSC测定ASC与PSC的热变性温度分别为52.24℃与49.65℃。SEM显示:ASC与PSC呈现交织状纤维网状结构。DHR表明:1%的ASC溶液或PSC溶液在振荡频率0.1~10 Hz范围主要表现为弹性且具有较高的凝胶稳定性。     

超声波对鲟鱼皮酸溶性胶原蛋白提取及理化特性的影响

以鲟鱼皮为原料，研究超声波辅助酸提取对鲟鱼皮酸溶性胶原蛋白提取率和理化特性的影响。结果显示，超声波辅助酸法制备的胶原蛋白(UASC)提取率(27.527%±0.65%，干重)明显高于常规酸提法制备的胶原蛋白(ASC)提取率(7.330%±0.42%，干重)。SDS-PAGE和紫外-可见光谱显示ASC和UASC均为I型胶原蛋白；傅里叶变换红外光谱、酰胺I带的光谱拟合分析以及X射线衍射分析结果显示ASC和UASC均保持较完整的三螺旋结构，UASC的结构稳定性高于ASC；胶原蛋白黏度分析和差示扫描量热分析结果显示UASC的热稳定性高于ASC；扫描电镜结果显示ASC和UASC微观结构均呈现多孔结构。结论:超声波辅助酸提取法可有效提高鲟鱼皮胶原蛋白的提取率，超声波对鲟鱼皮胶原蛋白结构没有造成破坏，反而提高了其结构稳定性和热稳定性。本研究结果对超声波辅助用于鲟鱼皮胶原蛋白的提取提供了理论参考。     

鲢鱼皮胶原蛋白的提取及性质分析

通过热水浸提,醋酸酸提及胃蛋白酶促提从鲢鱼皮中提取得到水溶性胶原蛋白(RSC),酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),并分析其部分性质。鲢鱼皮中RSC,ASC和PSC的得率以湿基计分别为13.2%,11.8%和13.6%;RSC,ASC和PSC的紫外光谱分析表明,其最大吸收峰都接近231 nm,但在280 nm处的吸收很小;傅立叶变换红外光谱结果表明鲢鱼皮胶原蛋白具有特殊的三螺旋结构;SDS-PAGE电泳图谱显示鲢鱼皮胶原蛋白有两条α链(α1和α2)和β链,表明该胶原为典型的I型胶原蛋白;鲢鱼皮RSC,ASC和PSC热变性温度分别为27.1℃,31.3℃和30.5℃。这些结果为进一步研究提供了理论依据。     

中华鳖裙边胶原蛋白的提取、鉴定及其理化性质

为增加中华鳖产品附加值,开发新型胶原蛋白资源,该研究以中华鳖裙边为原料,采用不同提取方式,分别提取酸溶性胶原蛋白(acid-soluble collagen,ASC)和胃蛋白酶可溶性胶原蛋白(pepsin-soluble collagen,PSC),并对2种胶原蛋白结构和理化性质进行分析。利用扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)、圆二色光谱(circular dichroism specturm,CD)对胶原蛋白的结构进行分析,采用SDS-PAGE凝胶电泳、肽指纹质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight,MALDI-TOF)和氨基酸分析仪对ASC和PSC进行蛋白质和氨基酸比较分析,利用差示量热扫描(differential calorimetry scanning,DSC)对胶原蛋白进行热稳定性分析。结果表明,ASC和PSC的得率分别为26. 79%和37. 50%; PSC与ASC相比存在更完整的三级螺旋结构; ASC和PSC均为I型胶原蛋白,且具有较高的亚氨基酸和精氨酸含量; ASC和PSC的热变性温度分别为38. 39和38. 11℃,高于常见的猪皮和鱼皮胶原蛋白,具有较好的热稳定性。该研究为深入研究和开发中华鳖的裙边资源提供了理论依据。     

骆驼掌胶原蛋白提取工艺优化与性能分析

本文以骆驼掌为原料,以提取时间、加酶量、乙酸浓度、料液比为实验因素,通过正交试验优化胃蛋白酶提取骆驼掌胶原蛋白工艺,并对所提骆驼掌胶原蛋白进行性能分析。结果表明,骆驼掌胶原蛋白的最佳提取工艺为提取时间48 h、胃蛋白酶加酶量4%、乙酸浓度0.50 mol/L、料液比1:15 g/mL,此条件下提取率为30.33%±0.19%。紫外光谱和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表明,所提胶原蛋白符合I型胶原特征,保持了胶原蛋白的三螺旋结构。与牛蹄胶原蛋白性质比较,发现骆驼掌胶原蛋白的吸湿性和保湿性优于牛蹄胶原蛋白,吸油性弱于后者。     

响应面优化草鱼鱼鳔酶溶胶原蛋白的提取工艺

为提高草鱼下脚料鱼鳔中胶原蛋白的提取率,采用响应面法优化胃蛋白酶提取草鱼鱼鳔胶原蛋白。探讨加酶量、提取时间和液料比3个因素对提取率的影响;在单因素试验的基础上进行响应面优化试验。结果表明：胃蛋白酶提取草鱼鱼鳔胶原蛋白的最佳工艺条件为加酶量40mg/g、提取时间48h、液料比80:1(mL/g),在此工艺条件下胶原蛋白实际提取率为17.82%,与模型预测值(18.04%)接近。方差分析显示,模型可靠,3个因素均对草鱼鱼鳔胶原蛋白的提取率影响显著。     

草鱼鱼鳞胶原蛋白的提取及其理化性质研究

以草鱼鱼鳞为原料,在低于蛋白变性温度的条件下提取酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),并对其理化性质进行系统测定。实验结果表明,ASC 和PSC 的热变性温度分别为30～35℃和28～35℃; PSC 在溶解性能、乳化性能和乳化稳定性方面优于ASC,而在溶液黏度、吸水性能、吸油性能、起泡性以及泡沫稳定性方面,ASC 明显好于PSC。     

酶法提取鱼鳞胶原蛋白的工艺优化

应用木瓜蛋白酶作生物催化剂,进行酶法提取鳙鱼鱼鳞胶原蛋白的工艺优化研究。设计和进行以胶原蛋白提取率为目标值,液固比、提取时间、酶浓度和提取温度为考察因素的正交试验。通过对试验结果的直观分析和因素水平趋势分析,确定了各考察因素的最优值分别为36 h、20∶1(V∶m)、2.5%和28℃,该条件下,胶原蛋白提取率达到11.64%。通过对试验结果的方差分析判断出各因素的影响均为不显著,但对提取率影响程度的相对大小顺序为提取时间、提取温度、酶浓度和液固比。所制备的产品经红外光谱表征基本符合I型胶原蛋白的特征。