干酪乳杆菌LZ183E高密度培养条件优化

为提高干酪乳杆菌LZ183E在发酵培养液中的菌体密度,首先通过在不同温度下培养菌株,测定48 h内菌液的OD600 nm值并作出生长曲线,得到菌株最适培养温度为37 ℃、接种时间为16 h及收获时间30 h。随后通过单因素试验和正交试验优化,探究不同碳源、氮源、生长因子、初始pH值以及接种量对菌株LZ183E活菌数和OD600 nm值的影响。结果表明,菌株LZ183E的最佳培养条件为葡萄糖25 g/L、酵母膏20 g/L、南瓜汁24 g/L、初始pH 6.5以及接种量2%。此优化条件下,干酪乳杆菌LZ183E的活菌数对数值达到了9.20±0.04,满足高密度培养要求,并且比原始MRS培养基活菌数对数值（8.12±0.06）高出一个数量级,为干酪乳杆菌LZ183E的冻干保护提供了足够的活菌数。     

干酪乳杆菌高浓度培养的初步研究

通过选择不同中和剂调酸、补料培养等方法研究了干酪乳杆菌的高浓度培养条件.结果表明初始培养基不调酸,在培养过程中,采用饱和Ca(0H)2作为中和剂,通过调酸碱控制pH值在6.3～6.6之间,不进行补料培养,干酪乳杆菌菌数达到109/mL,可用于菌粉的干剂制造中.     

干酪乳杆菌浓缩发酵剂乳清增菌培养基的优化

利用乳清为基本培养基原料培养干酪乳杆菌(Lactobacillus caseiSTL3102),用于生产浓缩发酵剂.采用Plackett-Burman设计对影响L.casei STL3102菌体生长的培养基成分进行了评价,从7个相关的培养基营养因子中筛选,确定了乳清、牛肉膏和酵母粉为关键影响因子.采用响应曲面法对影响菌体增殖的关键因子最佳水平进行了优化.通过建立的二次模型方程得到最优培养基组成为,乳清59.43g/L、牛肉膏8.44g/L、酵母粉8.85g/L,初始pH值为7.0.通过验证试验证实了模型的预测值与实际值之间吻合较好.不同缓冲盐对菌体增殖影响的实验结果表明,磷酸氢二钾对菌体的增殖较好,确立了培养基缓冲盐成分为磷酸氢二钾3.48g/L.采用优化后的乳清培养基,3%接种量,35℃培养16h,活菌数达3.31×109cfu/mL.     

干酪乳杆菌增殖培养基的优化研究

为了提高干酪乳杆菌培养液单位体积的菌数,以MRS肉汤培养基为基础培养基,采用单因素试验和Box-Benhnken试验优化增殖培养基组成。单因素试验结果表明:干酪乳杆菌培养基的最佳碳源为葡萄糖和乳糖质量比为1∶1的混合糖,最佳氮源为酵母提取粉,最佳生长因子为黄豆浆。响应面试验得到最佳添加量为混合糖3.77%,酵母提取粉1.49%,黄豆浆3.96%。在该增殖培养基中培养24h得到培养基活菌数为2.81×1012 CFU/mL,比优化前提高了8.21倍。     

大豆乳清中分离干酪乳杆菌GJ00412的种子培养基优化

从大豆乳清中分离得到一株菌GJ00412,经16SrRNA基因测序、比对,初步鉴定为干酪乳杆菌,为降低种子培养基成本并提高其生物量,以便进一步应用,在传统乳酸杆菌(MRS)培养基基础上,采用响应面法对培养基组分进行优化。首先通过Plackett-Burman实验设计,从葡萄糖、大豆蛋白胨、酵母浸粉、胰蛋白胨、MgSO4、MnSO4、吐温80、p H等因素中,筛选出葡萄糖、酵母浸粉、MgSO4,吐温80和pH等5个对菌体生物量有显著影响的因子。采用响应面实验设计对上述5个因素进一步优化。优化后的培养基组成(w/v)如下:2.5%葡萄糖,1.8%大豆蛋白胨,0.4%酵母浸粉,0.08%MgSO4,0.04%MnSO4,0.08%吐温80,pH7.17。优化后的培养基与MRS培养基相比,降低成本,生物量无显著差异。     

植物乳杆菌ZJ316培养基优化和高密度培养的研究

针对植物乳杆菌ZJ316,通过单因素和响应面试验设计法,对其培养基配方进行优化。同时,对植物乳杆菌ZJ316高密度培养条件、菌体收集条件和分批补料方法进行研究。结果表明,植物乳杆菌ZJ316优化培养基(质量分数)为:葡萄糖2.71%,酵母粉0.45%,牛肉膏0.6%。最佳培养条件为:培养基初始pH 6,接种量4%,摇床转速80 r/min,培养温度35℃。在离心条件为4 000 r/min,20 min时,植物乳杆菌菌体成活率达到最大值为81.09%。此外,采用间歇补料的方法,为增大菌体数可适当添加氮源,菌体数可达9.28×109CFU/mL。     

碱性中和与补料分批高密度培养保加利亚乳杆菌的研究

本实验采用葡萄糖反馈抑制补料、调节发酵液pH 值、碱性中和与补料分批复合培养等方法对保加利亚乳杆菌高密度培养进行研究。研究表明,碱性中和与补料分批复合培养条件为：保加利亚乳杆菌培养18h 和26h 时,向培养液补加碳氮比为0.67 的补料液5ml,并且每隔1.5h 调节pH 值至6.5,培养36h,培养液中保加利亚乳杆菌菌体浓度最高达9.02 × 1011CFU/ml,菌体干重达14.266g/L。     

瑞士乳杆菌与干酪乳杆菌在不同原料中的发酵特性研究

研究了瑞士乳杆菌和干酪乳杆菌单独与组合,以及与嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌组合在纯牛乳、纯豆乳和混合乳中发酵12h后pH值和酸度值变化,以此来说明它们在3种原料中的生长情况.结果表明,瑞士乳杆菌在纯牛乳和混合乳中产酸能力很强,在纯豆乳中产酸能力不够强,生长不够好;干酪乳杆菌在纯豆乳中生长产酸能力比瑞士乳杆菌强;研究还得出瑞士乳杆菌和干酪乳杆菌组合,以及他们分别与嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌组合在纯豆乳生长产酸能力相当.     

保加利亚乳杆菌高密度培养的初步研究

对培养保加利亚乳杆菌的基础培养基进行优选,确定为基础MRS培养基.然后优化培养条件发酵时间为12h,起始pH为6.4,发酵温度为37℃.培养基MRS培养基 7.5%番茄汁 12%麦芽汁 5%海带汁 2%乳清.通过正交试验证明,保加利亚乳杆菌菌体浓度可达到1.0×1012 cfu/mL.     

一株发酵乳杆菌的筛选鉴定及其高密度培养的研究

自黑龙江鹤岗自制酸菜汁中分离得到两株乳杆菌,经16SrDNA序列分析鉴定均为发酵乳杆菌并命名为发酵乳杆菌L1和L3,其中L1具有良好的耐酸和耐胆盐能力。用改良MRS培养基对发酵乳杆菌L17L发酵罐的高密度培养进行了研究,通过补碱和补糖有效克服了发酵过程中产酸和碳源短缺对菌体生长的抑制,最高菌浓可达10.19lgCFU/mL,较分批培养有显著提高,为发酵乳杆菌的工业化生产奠定了一定的基础。      

乳酸杆菌半连续式高密度培养的研究

研究了乳酸杆菌的半连续高密度培养,探讨更换新鲜培养基对菌体浓度、解除代谢产物抑制等的影响,结果表明,经3次培养后菌体浓度达到9.3×1012cfu/mL。并对3次培养过程进行动力学分析,设计了培养-分离耦合生物反应器,用于恒浊连续高密度培养。     

植物乳杆菌高密度培养通气条件的研究

为研究通气条件对植物乳杆菌高密度生理活性、高密度培养及存活率的影响,在FUS-50-L (A)发酵罐中,分别采用4种通气策略进行发酵培养.结果表明,当通入空气时,植物乳杆菌生长速率较小,而通入氮气时,菌体的生理活性、比生长速率、营养物质消耗速率和细胞存活率最高,最大活菌数可达到1.8× 1010CFU/mL.说明植物乳杆菌在微量氧气短暂存在时能存活,欲实现发植物乳杆菌的高密度培养,必须通过通入氮气等惰性气体来保持发酵过程的厌氧状态.     

响应面法优化嗜酸乳杆菌乳清培养基

筛选嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus La-1)低成本培养基并用响应面法进行优化。从玉米粉培养基、酵母浸出液培养基、乳清粉培养基、麦芽汁培养基中筛选嗜酸乳杆菌基础培养基。利用Plackett-Burman设计确定重要因子,最陡爬坡试验确定因素水平,最后用响应面法优化最佳培养基配方。优化得到乳清培养基为乳清粉12.99%(w/v)、葡萄糖2.75%(w/v)、NH4H2PO4 0.52%(w/v)。采用优化的培养基,以4%接种量接种La-1菌种子液,37℃培养22h,菌体密度为1.93×109 cfu/mL。     

降胆固醇干酪乳杆菌WB生长培养基的筛选

降胆固醇干酪乳杆菌WB在不同种类选择性培养基上生长培养后,比较活菌菌落数、菌落及溶钙圈大小。结果显示:MRS培养基最适合降胆固醇乳酸菌WB的培养,活菌数最多、菌落及溶钙圈最大。厌氧培养后效果更佳。     

Stress Responses in Probiotic Lactobacillus casei

Survival in harsh environments is critical to both the industrial performance of lactic acid bacteria (LAB) and their competitiveness in complex microbial ecologies. Among the LAB, members of the Lactobacillus casei group have industrial applications as acid-producing starter cultures for milk fermentations and as specialty cultures for the intensification and acceleration of flavor development in certain bacterial-ripened cheese varieties. They are amongst the most common organisms in the gastrointestinal (GI) tract of humans and other animals, and have the potential to function as probiotics. Whether used in industrial or probiotic applications, environmental stresses will affect the physiological status and properties of cells, including altering their functionality and biochemistry. Understanding the mechanisms of how LAB cope with different environments is of great biotechnological importance, from both a fundamental and applied perspective: hence, interaction between these strains and their environment has gained increased interest in recent years. This paper presents an overview of the important features of stress responses in Lb. casei, and related proteomic or gene expression patterns that may improve their use as starter cultures and probiotics.     

干酪乳杆菌LC2W合成胞外多糖培养基成分的优化

研究了不同培养基对干酪乳杆菌LC2W胞外多糖产量的影响，并研究了以脱脂乳为基础培养基，添加不同碳源、氮源和其他盐类对LC2W胞外多糖产量的影响。结果表明，不同培养基对LC2W胞外多糖产量影响较大，其中PTYG和脱脂乳培养基胞外多糖产量较高；以脱脂乳培养基为基础培养基，添加质量分数1．0％大豆蛋白胨、1．5％葡萄糖、0．1％的K2HPO4可以提高胞外多糖产量28.75％。     

两株干酪乳杆菌的安全性评价

干酪乳杆菌X-29和X-15是两株分离于黄酒浸米浆水中的乳酸菌,这两株菌均具有高的水解淀粉活性。本实验主要是评价这两株菌的安全性,为其应用于发酵米制品提供安全性保障。通过急性毒性实验、耐药性实验、有害代谢产物和溶血实验,确定这两株菌株是否具备安全性。结果表明该两株菌株不会引起急性毒性和易位现象;不产生有害代谢产物;对大部分常见抗生素没有耐药性;不会产生溶血现象。通过对这两株菌的安全性评价可知干酪乳杆菌X-29和X-15是安全的。