短小杆菌酶促合成二肽甜味剂Aspartame

研究多种因素对短小杆菌酶催化Ｌ－天冬氨酸（Ｌ－Ａｓｐ）和Ｌ－苯丙氨酸甲酯（Ｌ－ＰｈｅＯＭｅ）合成二肽甜味剂Ａｓｐａｒｔａｍｅ能力的影响。结果表明，反应最适ｐＨ为６．０，最适温度为４０℃，反应１０ｈ，催化能力为０．４７５ｇＡＰＭ／ｇ菌体，产率８０．５％，收率８１．０５％。     

短小芽孢杆菌改善烟叶品质的研究

从烤烟叶面上分离筛选得到一株短小芽孢杆菌Van35(Bacillus pumilus Van35),将其菌剂喷施于烟丝,在45℃,60%温湿度条件下发酵21d.测定了烟丝的总糖、还原糖、钾、纤维素、蛋白质、总氮和烟碱含量.结果表明,处理后的烟丝中总糖、还原糖和钾含量升高, 纤维素、蛋白质、总氮和烟碱含量均有所下降.菌剂Van35处理后,烟叶的糖氮比、糖碱比和氮碱比均有提高,化学成分比例更加协调.利用短小芽孢杆菌Van35处理后的烟叶样品, 具有明显提调烟香、细腻醇和烟气、降低刺激性、掩盖杂气和改善卷烟吸味的效果.     

Food poisoning potential of Bacillus cereus strains from Norwegian dairies

Characteristics concerning diarrhoeal potential were investigated in B. cereus dairy strains. The thirty-nine strains, isolated from whipping cream, were tested for cytotoxicity after culturing at human body temperature as well as 25 degrees C and 32 degrees C. At 37 degrees C, none of the strains were highly cytotoxic. This observation suggests that those strains should be considered to pose a minor risk with regard to diarrhoeal food poisoning. However, some strains were moderately or highly cytotoxic when grown at 25 degrees C and 32 degrees C. While the majority of the strains were able to grow at refrigeration temperatures, only four B. weihenstephanensis strains were identified among them when subjected to discriminative PCR assays and growth temperatures which delimit this species.     

一起由细菌混合感染引起的旅行团食物中毒案例分析

快速、准确地检测引起群体性食物中毒的有毒物质及其含量,为食物中毒应急处置提供科学依据。方法 根据食品安全事故流行病学调查技术指南及WS/T 82—1996、WS/T 81—1996诊断标准,采用常规方法及多重实时荧光PCR技术对送检的30份样品进行检测。结果 分别在送检的1份呕吐物中检出蜡样芽胞杆菌肠毒素,3份腹泻物中检出副溶血性弧菌,2份餐余食物中检出蜡样芽胞杆菌,1份餐余食物中检出副溶血性弧菌。结论 本次食源性疾病事件由蜡样芽胞杆菌及其肠毒素、副溶血性弧菌混合感染引起。     

短小芽孢杆菌热稳定环糊精葡萄糖基转移酶粗酶酶学特性研究

从土壤分离物中筛选到一株环糊精葡萄糖基转移酶(cyclodextrin glucanotransferase,CGTase)产生菌CGT01.16SrDNA序列分析表明该菌与短小芽孢杆菌(Bacillus pumnilus)的同源性为99%.同时根据其生理生化特征,该菌株被鉴定为短小芽孢杆菌(B.pumilus).命名为B.pumilus.CGT01菌株.产生CGTase的最适初始pH为6.5,最适培养温度为37℃.菌株所产CGlke的最适pH值和最适反应温度分别为pH 6.5和60℃,并有较高的热稳定性.60℃条件下保温,酶活基本稳定,半衰期为35 min.酶液中添加1 mmol/L Ca2+能明显提高CGTase的稳定性,60 ℃保温1 h后,剩余酶活仍达80%以上.SDS-PAGE检测表明酶的分子量约为78 ku左右.经高效液相色谱分析表明,CGTase作用于可溶性淀粉后的主要产物为葡萄糖、麦芽糖和β-环糊精,没有检出α和γ型环糊精产物,因此所产环糊精为单一类型,不同于同种属的其他菌株所产CGTase.     

短小芽孢杆菌固态发酵生产木聚糖酶的培养条件优化

采用单因素试验和正交试验的方法研究了短小芽孢杆菌固态发酵生产木聚糖酶的培养条件,确定了利用麸皮作为在主要基质进行固态发酵生产木聚糖酶的适宜条件：pH9、温度35℃、料液比1：2、接种量10％。在500mL三角瓶中固态培养72h左右,木聚糖酶的活力可达4915U／g干曲。     

Bacillus pumilus WL-11蛋白酶对其木聚糖酶合成的影响

研究了不同的营养条件下短小芽孢杆菌WL-11产蛋白酶和木聚糖酶的情况。结果表明,碳源对WL-11木聚糖酶的合成具有诱导或抑制作用,对其蛋白酶的合成影响并不显著;氮源对WL-11木聚糖酶的合成不具有直接的调节作用,而可能通过调节其蛋白酶的合成量来间接影响其木聚糖酶的合成,且两者的合成量之间存在一定的正相关。     

应用响应面法优化木聚糖酶的双水相萃取条件

采用响应面分析法优化短小芽孢杆菌木聚糖酶在PEG2000/K2HPO4双水相体系中的萃取条件。确定最佳萃取条件为NaCl 6%、PEG 2000 18%、K2HPO4 10%。在最佳萃取条件下得木聚糖酶分配系数为3.38,蛋白分配系数为0.13,纯化倍数为7.93,回收率为84.24%。考察了萃取酶液的部分酶学性质,其最适温度为50℃,最适pH为7.0。     

Bacillus pumilus WL-11产生木聚糖酶的生物机制

木聚糖酶是木聚糖降解酶系中起主要作用的酶,微生物来源的木聚糖酶多数是诱导产生的。研究了不同底物对Bacillus pumilus WL-11产生木聚糖酶的影响,并对以木糖作唯一碳源培养菌体在衰亡期时发酵液中木聚糖酶酶活的升高现象进行了研究。结果表明,由Bacillus pumilus WL-11 产生的木聚糖酶是诱导产生的,在所试验的碳源中,木聚糖为唯一碳源时产酶最高;木糖在低浓度时对WL-11产酶的诱导作用高于其在高浓度时的诱导作用;在细胞衰亡期细胞破碎其细胞内部的组成型酶释放到发酵液中,导致发酵液中酶活升高。     

Food poisoning by clenbuterol in Portugal.

This paper describes the occurrence of four cases of acute food poisoning, involving a total of 50 people, due to the ingestion of lamb and bovine meat containing residues of clenbuterol. Symptoms shown by the intoxicated people may be generally described as gross tremors of the extremities, tachycardia, nausea, headaches and dizziness. Analytical methodology developed for the determination of clenbuterol in meat, liver and blood samples is described. Procedures are described which should be followed when the described symptoms are evident in a group of people who have ingested contaminated meat, and particularly liver of ruminants.     

降解大豆胰蛋白酶抑制剂的短小芽孢杆菌菌株及其胞外蛋白的鉴定

本研究以大豆胰蛋白酶抑制剂为唯一碳源,从豆类内部筛选获得3株具有降解大豆胰蛋白酶抑制剂的细菌。通过对菌株的16Sr DNA基因的分析,3株细菌分别被鉴定为枯草芽孢杆菌LZ013-1、短小芽孢杆菌LZ013-2和类芽孢杆菌LZ013-3。进一步研究发现LZ013-2菌株的上清液具有高效降解大豆胰蛋白酶抑制剂的活性,2h可将胰蛋白酶抑制剂抑制率降低73.60%。将LZ013-1和LZ013-2菌株应用于豆粕发酵中,两株芽孢杆菌均能高效降解胰蛋白酶抑制剂。原始豆粕的胰蛋白酶抑制剂活性为22.26 mg/g,经过LZ013-1和LZ013-2菌株的液态发酵后分别降低为0.50 mg/g和0.63 mg/g,经过固态发酵后分别降低为1.06 mg/g和1.03 mg/g。通过硫酸铵分级沉淀和凝胶柱层析,分离LZ013-2菌株发酵上清液中具有降解活性的蛋白质,并采用质谱鉴定分离得到的蛋白质,筛选并鉴定出2种活性蛋白,分别为肽酶S8(Uniprot ID:A0A2T0DB16)和肽酶M84(Uniprot ID:A8FIH7)。     

菊苣根短小芽孢杆菌发酵提取物的挥发性成分分析

采用同时蒸馏萃取-气相色谱-质谱联用法(simultaneous distillation extraction-gas chromatography-mass spectrometry,SDE/GC-MS)对菊苣根短小芽孢杆菌发酵提取物的挥发性成分进行分析,并使用峰面积归一化法计算各成分相对百分含量。空白菊苣根中有37种成分,发酵后的菊苣根中有30种成分。空白菊苣根和发酵后的菊苣根中有18种相同成分。菊苣根在发酵过程中新产生12种主要致香成分,有16种致香成分含量增加,同时有多种具有刺激气味的成分转化为其他成分,这是发酵菊苣根香气独特而浓郁的主要原因。卷烟加香试验表明,两种菊苣根提取物添加到卷烟中后抽吸品质均有所改善,烟气饱满度、厚实度均增加,香气透发飘逸感增强,且花香和焦甜香香韵感明显,总体表现发酵后的菊苣根提取物优于空白菊苣根,添加比例以0.05%最佳。     

脂肪酸Bacillus pumilus羟基化调控基因fadD-like的克隆与序列分析

利用短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)的ω-1-羟基脂肪酸高产突变菌株M-F641、M-F81、M-F8272及B.pumilus20075的总DNA为模板,通过Primer Premier5.0软件设计引物,对决定长链脂肪酸无效降解途径中的关键酶基因fadD-like基因进行克隆,得到4条长约1 720 bp的fadD-like基因全序列;利用MEGA3.1、DNAStar等软件进行序列分析结合脂酰辅酶A合成酶系统进化分析,结果表明其与fadD基因具有较高的相似性,克隆得到的核苷酸为编码脂酰辅酶A合成酶的fadD基因序列;研究结果为长链脂肪酸高效转化生产ω-1-羟基脂肪酸提供基础。     

富硒短小芽孢杆菌D1-019的筛选与鉴定

将无机硒耐受性筛选和“红硒法”筛选相结合,经过4 轮筛选,从前期分离的119 株来源于鸭食的菌株中,筛选到1 株富硒菌株D1-019。基于菌落形态观察、革兰氏染色、16S rDNA序列分析和系统发育树分析,D1-019菌株被鉴定为益生菌短小芽孢杆菌。采用正交试验设计方法,获得的最佳富硒条件为培养基初始pH 5,30 ℃培养48 h,培养6 h时加入质量浓度为20 μg/mL的亚硒酸钠。在该富硒条件下,短小芽孢杆菌D1-019对培养基中亚硒酸钠的转化率为100%,菌体有机硒含量为（1 327±113）mg/kg,优于已报道富硒微生物。结果表明,短小芽孢杆菌D1-019有潜力开发成为一个可应用于食品领域的新富硒益生菌源。     

短小芽孢杆菌AR03对烟草黑胫病菌的拮抗活性及其田间防效

为测定短小芽孢杆菌AR03对烟草黑胫病菌的拮抗作用及其发酵菌剂的田间防效,通过对峙培养法、固态发酵及田间小区试验的方法发现,AR03菌体和发酵液对烟草黑胫病菌具有很强的拮抗活性,而其除菌上清无拮抗活性,初步说明AR03分泌的抗菌物为胞内物质。AR03经固态发酵后的活菌数为3.82×1011cfu/g。该菌剂的田间小区试验结果显示,对混合有青枯病发生的烟草黑胫病的防治效果明显好于对照药剂,且与72%甲霜灵•锰锌可湿性粉剂协同防治效果最好。因此,AR03对烟草黑胫病和青枯病具有可持续控病作用,是一株极具开发潜力的生防菌株。      

羟基脂肪酸生产菌Bacillus pumilus对油酸的代谢特性和产物分析

一株具有转化油酸羟基化的微生物Bacillus pum ilus BD-12(记作BP BD-12),在摇瓶条件下分批深层培养,研究了菌株在以胰蛋白胨为主要氮源、葡萄糖为基本碳源的条件下对油酸(OA)的代谢特性,并对转化OA生成羟基脂肪酸的规律及产物进行了分析测定。结果表明:在只有葡萄糖作碳源条件下,细胞生长良好,且无羟基脂肪酸生成,OA对菌株BP BD-12细胞生长有抑制作用;用40 h细胞菌龄添加OA条件下其转化产物为ω-1、ω-2和ω-3-羟基脂肪酸,其转化率和羟基脂肪酸得率最大值分别达到63%和12.3%;通过气质联用方法对产物组分分析,其ω-1-羟基脂肪酸占总羟基脂肪酸的70%,细胞培养过程中未有其它羟基脂肪酸检出。因此,菌株BP BD-12是一株较理想的ω-1-羟基脂肪酸工业化生产菌株。     

Bacillus cereus food poisoning and its toxins

The genus Bacillus includes members that demonstrate a wide range of diversity from physiology and ecological niche to DNA sequence and gene regulation. The species of most interest tend to be known for their pathogenicity and are closely linked genetically. Bacillus anthracis causes anthrax, and Bacillus thuringiensis is widely used for its insecticidal properties but has also been associated with foodborne disease. Bacillus cereus causes two types of food poisoning, the emetic and diarrheal syndromes, and a variety of local and systemic infections. Although in this review we provide information on the genus and a variety of species, the primary focus is on the B. cereus strains and toxins that are involved in foodborne illness. B. cereus produces a large number of potential virulence factors, but for the majority of these factors their roles in specific infections have not been established. To date, only cereulide and the tripartite hemolysin BL have been identified specifically as emetic and diarrheal toxins, respectively. Nonhemolytic enterotoxin, a homolog of hemolysin BL, also has been associated with the diarrheal syndrome. Recent findings regarding these and other putative enterotoxins are discussed.