紫小麦麸皮抗氧化肽提取条件优化研究

采用酶法制备紫小麦麸皮抗氧化肽,在单因素实验的基础上,以水解度、肽得率、总抗氧化活性为指标,采用正交法优化紫小麦麸皮抗氧化肽的最佳制备工艺。结果表明:碱性蛋白酶较适宜制备紫小麦麸皮抗氧化肽;最佳提取条件为水解时间2 h、水解温度50℃、pH9、酶添加量14000U/g;在该条件下紫小麦麸皮蛋白的水解度为10.57%,肽得率为51.17%,制备的抗氧化肽的总抗氧化活性为7.98μmol/g。     

酶法水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺优化

本文研究了酶法水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,通过水解度与羟自由基(·OH)清除率来综合评价水解产物的抗氧化能力。以·OH清除率为指标,从碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶5种蛋白酶中筛选最适酶。在单因素实验研究酶浓度、底物浓度与水解时间对酶解产物·OH清除率和水解度影响的基础上,通过L_9(4~3)正交实验对水解工艺进行优化。结果得出,碱性蛋白酶活力高于其他4种蛋白酶,能使蛋白质充分水解,正交实验各因素对水解产物·OH清除率的影响程度依次为底物浓度酶浓度水解时间。其中,碱性蛋白酶的最佳水解工艺条件为:底物浓度3.0%、酶浓度3500 U/g、p H9.0、温度55℃、水解时间3.5 h。在此条件下,水解产物的·OH清除率可达82.7%,水解度为23.1%。碱性蛋白酶水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺可行,为滑菇蛋白高附加值产品的开发提供技术参考。     

扁杏仁抗氧化肽的制取工艺研究

研究了扁杏仁抗氧化肽的酶解制备工艺及其体外抗氧化活性。以羟基自由基的清除率和水解度为考察指标,用响应面分析法研究酶用量、底物浓度、温度和p H对扁杏仁抗氧化活性肽酶解工艺的影响。得出优化后的酶解条件为:碱性蛋白酶-风味蛋白酶的复合酶用量6725 U/g(碱性蛋白酶为3645 U/g,风味蛋白酶为2690 U/g)、底物质量分数为3%、温度60℃、p H8.28,在该条件下制备的扁杏仁抗氧化活性肽对羟基自由基的清除率和水解度分别为84.18%和20.87%。     

复合蛋白酶水解谷朊粉制备生物活性肽的研究

以谷朊粉为原料,用复合蛋白酶水解,制备生物活性肽,并对其水解工艺进行优化。以水解度、肽含量和还原力为响应值设计了4因素(酶浓度、时间、温度、pH值)3水平的响应面实验,通过响应面实验得到最佳水解条件为:时间3h、pH7.3、温度54℃、酶浓度[E/S]是35mg/g和谷朊粉浓度3%,此时水解度为7.5%,还原力达到最大值0.573,肽含量为0.148mg/mL。结果表明,谷朊粉的水解物———小麦肽具有抗氧化能力。     

Box-Benhnken响应面优化巴旦杏抗氧化肽的制备工艺

本文研究了以巴旦杏粕蛋白为实验原料,通过Box-Benhnken响应面优化巴旦杏粕蛋白抗氧化肽的酶法制备工艺。以酶解产物的水解度及DPPH?清除率为评价标准从碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶中挑选最优水解酶,考察酶的添加量、pH值、酶解时间及酶解温度对酶解产物DPPH?清除率的影响。在单因素试验基础上,采用四因素三水平响应面法确定巴旦杏抗氧化肽酶法制备工艺。结果表明：碱性蛋白酶较适合制备巴旦杏抗氧化肽,其最佳酶解工艺条件为：酶解时pH为9.1,酶添加量为10000 U/g,酶解温度为58 ℃,酶解时间为4 h,此时酶解物的DPPH?清除率为74.45%。该条件适于制备的巴旦杏抗氧化肽,通过对巴旦杏抗氧化肽制备工艺的优化可为抗氧化肽的开发与应用提供理论借鉴。     

澳洲坚果蛋白酶解工艺及抗氧化性研究

为了制备澳洲坚果蛋白肽,以澳洲坚果残渣提取蛋白为原料,选用碱性蛋白酶,采用正交实验的方法,优化澳洲坚果蛋白质的酶解工艺参数,并初步研究了酶解液的抗氧化能力。结果表明:pH9、加酶量0.8%、底物质量浓度30g/L、水解时间2.5h,其水解率为48.7%,羟基自由基、超氧自由基的清除率分别为55.4%、68.4%。     

复合蛋白酶水解螺旋藻制备多肽的工艺优化

螺旋藻富含优质蛋白质,为有效利用这一蛋白质资源,试验探究了复合蛋白酶水解螺旋藻制备多肽的工艺路线。通过单一酶解及复合酶解试验考察了不同蛋白酶对螺旋藻水解效果的差异,以及不同蛋白酶对螺旋藻水解作用的协同效果,由此筛选出适合螺旋藻水解的最佳蛋白酶为:由碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶按酶活比2∶1∶1的比例构成的复合蛋白酶。采用单因素及响应面试验对复合蛋白酶水解螺旋藻的工艺条件进行了优化,得到螺旋藻酶解的最适工艺条件为:螺旋藻浓度50 g/L,pH 9.0,加酶量6 000 U/g蛋白,温度52℃,酶解时间6.2 h。在优化的工艺条件下,水解螺旋藻的多肽得率可以达到(77.82±1.21)%。多肽的氨基酸组成分析结果显示,酶解制备得到的多肽基本上保持了原螺旋藻蛋白的氨基酸组成,氨基酸组成齐全,必需氨基酸占到氨基酸总量的43%以上,具有很高的营养价值。研究结果表明,复合蛋白酶水解螺旋藻制备多肽的工艺路线具有可行性。     

香菇肽提取优化及其体外抗氧化醒酒活性

为探索香菇肽的提取工艺及其体外醒酒活性,深入开发利用香菇的营养功能价值,通过比较香菇不同部位干粉的总抗氧化能力,同时分别采用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、复合蛋白酶等蛋白酶水解香菇伞粉、足粉、全粉,以水解度和DPPH自由基清除率为指标,选取效果最佳的酶与底物组合,用正交方法分析最佳水解条件。将水解后的多肽进行超滤,选择活性最高肽段,并对此肽段进行体外抗氧化试验,针对其乙醇脱氢酶(ADH)、乙醛脱氢酶(ALDH)的体外激活作用进行研究。结果表明,香菇足柄干粉的总抗氧化能力虽稍次于香菇全粉,但复合蛋白酶水解后的DPPH自由基清除率最高;选用复合蛋白酶水解香菇足柄蛋白的最佳条件为:酶量0.2%,水解温度50℃,水解时间3 h,初始p H 6.0,此酶解条件下氨基含量为29.23%;其中分子质量为5~10ku的肽段具有最高体外抗氧化活性与体外醒酒活性,此肽段清除DPPH自由基能力IC50为0.152 mg/m L,清除·OH能力的IC50为0.190 mg/m L;30 mg/m L香菇肽样品(5~10 ku)对ADH的激活率为(94.58±0.74)%,当其质量浓度为180 mg/m L时对ALDH激活率为(70.69±1.25)%。本研究结果表明香菇肽具有良好的醒酒应用前景。     

微波酸处理对骨胶原蛋白酶解效果的影响研究

以骨胶原蛋白为原料,采用微波酸处理辅助酶解制备胶原蛋白肽,以水解度及抗氧化能力为指标确定最佳水解条件。通过比较实验确定最佳微波酸处理条件为:微波功率510W作用270s;通过对酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及碱性蛋白酶水解结果比较,确定中性蛋白酶水解产物的水解度及ABTS、DPPH自由基清除率最高;通过单因素实验及正交实验优化中性酶最佳酶解条件为:酶与底物比10%,底物浓度4%,反应温度55℃,pH7.0。结果表明,与单独酶解相比,微波酸处理能够使骨胶原蛋白酶解时间缩短1/2,水解度上升3.2%,产物的ABTS、DPPH自由基清除率分别提高8.7%和3.1%。     

两步水解法制备玉米抗氧化活性肽及产物的稳定性

采用麦芽粉和碱性蛋白酶Alcalase对玉米醇溶蛋白进行两步水解制备玉米肽,以水解度、可溶性蛋白含量和抗氧化活性为指标,对第二步Alcalase的酶解条件进行优化,以确定制备玉米抗氧化肽的最适条件。另外,对玉米抗氧化肽的稳定性进行了研究。结果表明：制备玉米抗氧化肽的最适条件为：第一步麦芽粉水解,在底物浓度10%、pH5.5、温度50 ℃、酶底比30%条件下水解3 h;第二步Alcalase酶解,在底物浓度10%、pH8.5、温度60 ℃、酶底比0.75%条件下水解6 h。在此条件下,水解度、可溶性蛋白含量、羟基自由基清除率及亚铁离子螯合率分别为24.53%、33.43 mg/mL、30.59%、38.32%,分子量主要分布在300-6500 u（92.51%）范围内。玉米抗氧化肽具有热及贮藏稳定性,在中性和碱性条件下稳定,但不耐受酸性条件（pH3-5）。     

金枪鱼红肉抗氧化肽制备及功能性肽饮料配方优化

目的 制备金枪鱼红肉抗氧化肽,并以此抗氧化肽为原料开发一款功能性肽饮料。方法 以金枪鱼红肉为原料,选用复合蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和胰蛋白酶5种蛋白酶对其进行水解,以水解度为指标筛选适合的蛋白酶,对水解度最高的酶解产物进行抗氧化活性分析,并使用还原糖、柠檬酸、乙基麦芽酚、β-环状糊精对金枪鱼酶解液进行风味调配,并通过正交优化其配方。结果 复合蛋白酶酶解物的水解度最高为16.73%,酶解液具有良好的抗氧化活性。通过正交实验获得的金枪鱼肽饮料最佳配方为还原糖添加量10%、柠檬酸添加量0.6%、β-环状糊精添加量0.5 mg/mL、乙基麦芽酚添加量0.06%,该饮料理化指标和微生物指标符合国家标准,饮料总氨基酸含量为5.264 g/100 g,必需氨基酸/总氨基酸和必需氨基酸/非必需氨基酸均接近蛋白质理想模式,抗氧化氨基酸占总氨基酸含量的50.03%,表明产品具有良好的抗氧化能力。结论 本研究通过复合蛋白酶酶解获得了金枪鱼红肉抗氧化肽,并以此为原料开发了一款抗氧化功能肽饮料,可为金枪鱼红肉功能肽的制备及功能肽产品的开发提供参考。     

大豆蛋白酶解产物抗氧化活性与水解度相关性研究

利用碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解大豆分离蛋白,研究了底物浓度、加酶量、p H、温度因素对酶解液水解度和还原力的影响,并在此基础上用响应面分析法优化酶水解条件。以还原力为主要指标考察酶解产物的抗氧化活性,通过水解度与还原力的比较,得到Alcalase 2.4L碱性蛋白酶酶解大豆分离蛋白产物的抗氧化活性与水解度之间没有直接线性关系。在实验得到的最佳条件下制备的大豆肽抗氧化活性良好,具有良好的应用前景。     

酶解虾壳蛋白制备ACE 抑制剂的工艺优化

以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明：碱性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度60℃、pH9.5、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量4000U/g、酶解时间2.5h,在此条件下ACE抑制率最高,为67.70%,水解度为69.79%;中性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度50℃、pH7.0、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量2000U/g、酶解时间2h,在此条件下ACE抑制率最高,为84.04%,水解度为26.76%。提示中性蛋白酶酶解能够产生更多的ACE抑制肽,是酶解虾壳蛋白制备ACE抑制肽的较优酶。     

酶法水解鸭肉蛋白制备鸭肉肽

采用碱性蛋白酶水解鸭肉蛋白制备鸭肉肽,通过响应面分析方法时水解条件进行优化,得到较佳的水解工艺为:酶解温度54.7℃,酶用量2.03%,底物浓度3.78%,pH9.86,时间为120min.在此条件下,碱性蛋白酶的水解度为29.6%,水解液中鸭肉肤含量为43.7%,氨基酸含量为25.79 g/L,其中必需氨基酸为10.53 g/L.     

双酶法制备豌豆肽及其抗氧化活性

研究豌豆蛋白双酶水解的最佳工艺条件及产物的抗氧化活性。以豌豆蛋白粉为原料,通过单因素试验和正交试验优化出双酶分段水解豌豆蛋白的工艺条件,并初步研究豌豆肽的抗氧化活性。结果表明,双酶法制备豌豆肽的最佳工艺条件为:底物浓度10%,复合蛋白酶加酶量3.0%,pH 9.0,温度55℃,酶解3.5 h;用碱性蛋白酶酶解,加酶量3.0%,pH 9.5,温度50℃,酶解4.0 h。由此酶解得到水解物的水解度为39.61%。水解液蛋白浓度0.125 mg/mL时,其对Fe2+螯合能力为83.22%。试验表明和单酶水解相比,双酶水解工艺可提高豌豆蛋白的水解度和抗氧化活性。     

酶法水解麦胚蛋白及其产物的抗氧化活性研究

选择碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶5种蛋白酶对麦胚蛋白进行水解,并考察其水解产物的抗氧化活性。结果表明,中性蛋白酶为制备麦胚抗氧化肽的最适蛋白酶,其最佳水解条件为:底物质量分数4%,酶添加量6 000U/g,酶解温度50℃,pH值7.5,水解至270min时抗氧化活性最大。     

酶法制备汉麻籽蛋白抗氧化肽

采用不同蛋白酶酶解汉麻籽蛋白,确定Alcalase 2.4L碱性蛋白酶是酶解汉麻籽蛋白制备抗氧化肽的优良酶源。通过单因素和响应面回归分析,得到Alcalase 2.4L碱性蛋白酶酶解汉麻籽蛋白的优化条件为:底物浓度50 mg/mL、水解时间2 h、温度50℃、加酶量2.2%、pH 9.4。优化酶解条件下,水解度约为20%,10 mg/ mL酶解产物的DPPH自由基清除率为82.65%,显示出较好的抗氧化活性。     

响应面法优化坛紫菜抗氧化肽酶法制备工艺

以坛紫菜为原料,通过酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶和纤维素酶酶解制备活性肽,以DPPH自由基清除率和多肽得率为评价指标,研究坛紫菜水解肽的抗氧化能力。结果表明:5种酶的酶解产物都具有抗氧化能力,中性蛋白酶酶解产物DPPH自由基清除率最高,选择它为最佳工具酶。通过单因素和响应面试验优化酶解工艺,得到最佳酶解工艺:酶解时间3.6 h、酶解温度47℃、酶用量16362 U/g、底物浓度3.0%、pH7.0。此条件下制备得到的水解肽具有较强抗氧化能力,DPPH自由基清除率可达(91.83±0.81)%。     

豌豆蛋白水解物的分离及其抗氧化活性的研究

将豌豆蛋白用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、碱性蛋白酶水解0.5～6 h,用pH-Stat法测定其水解度;测定水解物的还原能力、清除自由基能力来分析豌豆蛋白水解物的抗氧化作用模式。将4 h的豌豆蛋白碱性蛋白酶水解产物采用葡聚糖凝胶G-25分离豌豆肽,测定各片段的抗氧化活性,以确定豌豆抗氧化肽的分子量。结果得出豌豆蛋白水解产物的自由基清除能力、还原能力都是随着水解时间的延长而增大。底物浓度为7%、水解4 h的豌豆蛋白水解产物与其它水解条件下的水解产物相比,具有较高的抗氧化活性。采用G-25分离豌豆肽的结果表明,抗氧化活性较高的豌豆肽的平均分子量约640Da左右,其抗氧化能力是豌豆肽原液的2倍。     

酶解荠蓝籽蛋白制备抗氧化肽工艺的优化

为制备荠蓝籽抗氧化肽,以荠蓝籽分离蛋白为原料,碱性蛋白酶Alealase 2.4L为水解酶,综合研究了酶解pH、温度、加酶量、底物浓度和时问等因素对荠蓝蛋白的水解度及产物还原能力的影响,并采用二次通用旋转组合设计实验优化水解条件.结果表明,制备荠蓝籽抗氧化肽的最佳酶解条件为:pH8.44,温度48.95℃,加酶量1198.96U/g蛋白,底物浓度1:20,时间3.5h.该务件下的酶解产物具有较强的还原能力,酶解液浓度为2.997mg/mL,其还原能力与0.326mg/mL的Vc相当.