Analysis of free amino acids in green coffee beans

For the determination of free amino acids in green coffee beans, 9-fluorenylmethylchloroformate was applied successfully as the precolumn derivatization agent. The separation of the 27 free amino acids of green coffee as yet identified or quantitatively determined is almost complete. The paper describes in detail the conditions of extraction, derivatization and resolution and presents reproducible data of standard curves and of quantitative results. It has been demonstrated that by applying the extraction procedure described, 99.8% of the free amino acids detectable by this method are extracted. On principle, Arabica and Robusta coffees contain the same main and minor amino acids. It was possible for the first time to determine the free amino acids ornithine, -alanine and pipecolic acid quantitatively in Arabica and Robusta coffees as well as hydroxyproline in Arabica coffees.

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Bestimmung freier Aminosäuren in grünen Kaffeebohnen. I. Bestimmung der Aminosäuren nach Vorsäulen-Derivatisierung mit 9-Fluorenylmethyloxycarbonylchlorid

Zusammenfassung Zur Bestimmung freier Aminosäuren in Rohkaffees wurde 9-Fluorenylmethyloxycarbonylchlorid als Vorsäulenderivatisierungsreagenz erfolgreich eingesetzt. Die Trennung der 27 in Rohkaffee bisher identifizierten bzw. quantitativ bestimmten freien Aminosäuren gelang weitestgehend vollständig. Extraktions-, Derivatisierungs- und Trennbedingungen sind detailliert beschrieben, Eichung sowie Ergebnisse der quantitativen Aminosäurenanalytik wurden statistisch abgesichert. Es konnte gezeigt werden, daß durch Anwendung des beschriebenen Extraktionsverfahrens 99,8% der mittels dieser Methode erfaßbaren freien Aminosäuren aus Rohkaffees extrahiert werden. Arabica- und Robusta-Rohkaffees weisen prinzipiell gleiche Haupt- und Minoraminosäuren auf. Erstmals wurden die freien Aminosäuren Ornithin, -Alanin und Pipecolinsäure in Arabica- und Robusta-Rohkaffees sowie Hydroxyprolin in Arabica-Rohkaffees quantitativ bestimmt.

     

Free and total amino acids in the non-protein fraction of an artisan blue cheese during ripening

Summary Changes in the free amino acid content and total amino acid content of the fraction soluble in 5% phosphotungstic acid from three batches of blue cheeses were studied by HPLC over the ripening period. The correlation coefficients between the free and total amino acids and ripening time were positive and higher than 0.85 for most amino acids. Non-protein amino acids showed the lowest correlations with ripening. Principal component analysis performed on the data showed ripening time to be the main cause of variation between the samples analyzed, explaining 60% of the variance; differences between batches were the second most important source of variation (15%). The ripening stage can be approximately estimated from the concentration of certain amino acids.

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Freie und gesamte Aminosäuren in der Nicht-Protein-Fraktion eines Blaukäses während der Reifung

Zusammenfassung Während des Reifungsprozesses bei drei Partien Blauschimmelkäse wurde der Verlauf des Gehaltes an freien und gesamten Aminosäuren der in 5% iger Phosphorwolframsäure löslichen Fraktion mittels HPLC beobachtet. Die Korrelationskoeffizienten zwischen dem Gehalt an freien und Gesamt-Aminosäuren während der Reifungszeit waren positiv und größer als 0,85 für die meisten Aminosäuren. Ein geringerer Korrelationsgrad im Verlauf der Reifung war bei den Nicht-Protein-Aminosäuren zu beobachten. Die Anwendung der Faktor-Analyse wies darauf hin, daß die Reifung die wichtigste Ursache der Unterschiede zwischen den analytischen Proben war (60% der Varianz) und die zweite Ursache für die Varianz (15%) der Unterschied zwischen den Partien. Der Reifungsgrad kann in etwa aus der Konzentration bestimmter Aminosäuren geschätzt werden.

     

Anwendung der Ionenaustauschchromatographie von Aminosauren zur Qualit?tsbeurteilung von Fisch

Zusammenfassung I Die vom Verfasser [1] mitgeteilten Grenzwerte der rel. Anteile der mengemäßig wichtigsten Aminosäuren der Gruppe der freien Aminosäuren wurden unter Verwendung besonders bezüglich ihres Frischegrades ausgesuchter Ware erneut ermittelt und dabei deutlich engere Grenzen erhalten. 2. Eine Anwendung der bei Kabeljau gewonnenen Grenzwerte auf andere Fische ist nicht möglich, wie eine Untersuchung am Rotbarsch zeigee. Die relative Zusammensetzung der Gruppe der freien Aminosäuren weisen erhebliche Unterschiede auf. 3. Am Rotbarsch durchgeführte Versuche zur Ermittlung der Änderungen der einzelnen Aminosäuren bei der Lagerung (Tiefkühlung, Eislagerung) zeigen bei Kreatinin eine sehr deutliche Abnahme während der Lagerung, so daß der Kreatinin-Gehalt (jetzt absolut und nicht nur als relatives Verhältnis) in Beziehung zur Qualität steht. 4. Am Beispiel Rotbarsch wird gezeigt, daß bei Filet aus Fischen, die vor der Filetierung eine Eislagerung durchgemacht haben, die Werte von -Alanin und im Falle längerer Lagerung auch bei Glycin merklich ansteigen. 5. Die Arbeiten werden fortgesetzt, um für die wichtigsten Nutzfische geeignete Indi-kator-Aminosäuren zu finden, welche sich mit der Lagerzeit stark ändern und deren Bestimmungen somit zur Beurteilung der Qualität geeignet sind und die bisher vorgeschlagene Methodik der Grenzwert-Über-. bzw. Unterschreitung ersetzen können.

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Application of jon-exchange-chromatography of amino acids for quality evaluation of fish. II.

Summary The limit values of the first paper were examined once more with regard to especially selected fresh fish. The difference between maximum and minimum values is now much smaller. It is not possible to apply the limit values of cod to other fish species. Storage trials demonstrated that in the case of redfish the creatinine values in the group of free amino acids were markedly changed. In our future work we shall try to identify markedly changed amino acids in other commercial fish also in order to get à basis for the analytical evaluation of the degree of freshness.

     

Aminos?ureanalysen in biologischem Material I. Mitteilung Einflu? von Hydrolysenbedingungen sowie von Kohlenhydraten und Purinbasen

Zusammentassung Spezifische Zusammensetzung und Hydrolysenbedingungen sind von entscheidender Bedeutung für vergleichende Aminosäureanalysen in biologischem Material. Bei gleichen Proben ist mit einer standardisierten Methode eine Reproduzierbarkeit von etwa ±3% möglich, extreme Unterschiede in der Zusammensetzung führen aber zu verschiedenen Werten. So verursachen Kohlenhydrate erhebliche Verluste, die sich auf die einzelnen Aminosäuren sehr unterschiedlich verteilen. Hydrolyse mit Phenolzusatz bringt keine generelle Verbesserung. Analysenkontrolle mit Testsubstanzen sowie Differenzanalyse bei sehr geringen und unterschiedlichen Aminosäurenmengen verbessern die Analysentechnik. Die proteinfreie Stickstoff-Fraktion ermittelt aus dem Aminosäurenspektrum und Kjeldahl-Stickstoff betrug bei Hefen 4,7–14,1%. Die Konzentration der freien (Pool) und strukturgebundenen (Protein) Aminosäuren veränderte sich beim Waehstum der Hefen, bei Belüftung im Wasser (Verarmung) erfolgte nur bei den freien Aminosäuren eine Konzentrationsänderung.

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Amino acid analysis in biological materials I. Influence of hydrolysis, carbohydrates and purin basis

Summary The specific composition and the condition of hydrolysis are very important for the comparative amino acid analysis of biological material. Wide differences in the composition of the biological material will give different results, the reproductivity with the standardized method with equal samples ranges within ± 3%. Carbohydrates for example cause a loss which is different with each amino acid. There is no improvement by addition of Phenol. Test substances as a controll of the analysis as well as difference analysis improve the analytical technique, when the sample contains some of the amino acids in very small amounts. The protein free fraction of yeasts was 4,7–14,1% when estimated by the amino acid spektrum and Kjeldahl nitrogen. There was a change in the composition of the amino acids in the pool and in the protein during growth of the yeast. Prolarged airation changes the concentration of the free amino acid pool only.

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Herrn Professor Dr. H. Simon möchte ich für sein besonderes Interesse und die Förderung meiner Arbeit herzlich danken.