皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino)肌肉酶解产物制备及其免疫活性研究

为开发鲍鱼生物制品,对鲍鱼肌肉酶解产物的制备以及免疫活性进行研究。以皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino)肌肉为原料,采用动物蛋白酶和风味蛋白酶进行酶解,同时以蛋白回收率和水解度为指标优化酶解工艺条件,获得鲍鱼酶解多肽(abalone enzymatic hydrolysis of peptides,AHP),进一步采用斑马鱼动物实验模型,对AHP免疫活性进行初步评价分析。结果表明,酶解4 h时,AHP的蛋白回收率和水解度最佳,分别为(55.88±0.03)%和(20.32±0.01)%。体内免疫活性实验结果显示:各样品均能够提高斑马鱼模型的溶菌酶(lysozyme,LYS)活性、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,Ig G)含量,其中,喂养冷冻干燥样品组中LYS活性最高达到(166.04±23.48) U/L、ALP活性最高达到(7.46±1.02) IU/L、Ig G含量最高达到(0.31±0.09)μg/m L,与空白对照组相比具有显著性差异(P <0.05);在超滤组...     

杂交鲍Haliotis discus hannai × Haliots discus discus体内食源性脂肪酸的标志分异

本文研究了底播增殖的杂交鲍的内脏团、肌肉和消化腺内的得到公认的几种食源性脂肪酸标志的分布特征,可为杂交鲍的长期食源的判别提供依据。同等大小的杂交鲍,其内脏团、消化腺和肌肉内的硅藻脂肪酸标志(∑C16/∑C18和C20:5n-3)之间无显著无差异;消化腺内的绿藻脂肪酸标志(C18:2n-6+C18:3n-3)显著高于肌肉中的(p5%);肌肉中的褐藻脂肪酸标志(C20:4n-6)显著低于肌肉内的(p5%);异养细菌脂肪酸标志(C18:1n-7/C18:1n-9)在同等大小的杂交鲍内脏团、消化腺和肌肉中无差异。内脏团脂肪酸标志受性腺发育的影响;肌肉内脂肪酸含量较低;消化腺中脂肪酸组成的季节变化由食物的季节变化所致且总脂含量较高。从影响脂肪酸组成的因素及测试方法的灵敏度来看,消化腺用于脂肪酸标志法判断杂交鲍的长期食源更适宜。     

皱纹盘鲍腹足营养成分分析

本文对皱纹盘鲍腹足常规营养成分(蛋白质、总糖、脂肪和灰分)和13种金属元素含量进行测定。研究样本为2个年龄段,3个不同品系的南方越冬鲍和北方鲍。常规营养成分和8种有益金属元素(K、Ca、Na、Mg、Cu、Zn、Mn、Se)采用主成分分析法进行降维处理,建立综合分析模型并排序。单因素方差分析结果表明10种不同鲍样本腹足常规营养成分之间差异显著(P<0.05),蛋白质、总糖、脂肪和灰分含量分别为60.80%~72.45%、5.09%~23.88%、1.52%~3.74%和6.27%~7.63%。5种有害金属元素(Pb、Cr、Cd、Hg、As)含量低,符合国家限量标准。有益金属元素含量丰富,其中微量元素Cu、Zn、Mn和Se含量分别为1.57~2.63、2.39~3.59、0.26~0.77和0.031~0.069 mg/100 g。提取3个有效主成分,累积方差贡献率80.742%,综合得分排名前3的为爱莲湾原种鲍1龄北、长岛野生鲍1龄北和生产鲍1龄北。结果说明北方鲍比南方越冬鲍有优势,3个品系中爱莲湾原种鲍处于优势地位,营养价值高。     

热处理对皱纹盘鲍腹足质构特性的影响研究

以皱纹盘鲍为原料,通过对鲍鱼腹足物理性质的分析,研究了热水热烫和蒸汽热烫对鲍鱼腹足质构特性的影响,及热处理温度、时间对鲍鱼腹足微观结构的变化。结果显示:热处理温度、时间对鲍鱼腹足微观结构的变化有显著的影响,其样品组织构造差异明显。85℃、40min热烫处理的鲍鱼腹足肌肉纤维收缩均匀,排列紧密。因此,确定即食鲍的最佳热处理条件为:热水热烫温度85℃、时间为40min。      

基于神经网络法优化即食皱纹盘鲍栅栏模式

以栅栏技术理论为指导,采用神经网络模型优化不同栅栏模式对即食鲍鱼（Haliotis discus hannai Ino）产品的防腐保鲜效果。通过研究几个栅栏因子（烘干后产品的水分活度（aw）、乳酸链球菌素（Nisin）、乳酸钠的添加量以及杀菌温度）组合得到的不同栅栏模式的防腐保鲜效果以及对产品品质的影响,以菌落总数及感官评分作为响应值建立神经网络模型并进行优化。结果表明：产品最适栅栏模式为：aw为0.92,Nisin、乳酸钠添加量分别为0.39 g/kg、1.6%,杀菌温度89 ℃,此栅栏模式防腐保鲜效果好,且能较好地保持产品的质地和风味。     

不同产地和季节皱纹盘鲍元素组成的聚类分析

产地和季节是判断皱纹盘鲍品质的重要依据。采用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法测定不同产地、不同季节皱纹盘鲍样本中16种无机元素的含量。建立皱纹盘鲍无机元素数据库,并结合聚类分析对18个皱纹盘鲍样品的产地进行区分,探讨无机元素溯源技术对皱纹盘鲍产地溯源的可行性。结果表明,皱纹盘鲍腹足中富含人体所需的微量元素,且无机元素含量和种类受季节及生长环境的影响,夏、秋两季元素含量普遍高于冬、春两季,秋季Fe元素含量十倍甚至百倍高于其它3季。聚类分析结果显示：分类与皱纹盘鲍样品的产地及海域分布显著相关,鉴别产地的效果与季节有关。     

皱纹盘鲍糖原合成酶基因多态性与糖原含量的相关性分析

糖原是皱纹盘鲍重要的营养性状,是高品质鲍鱼选育的重要指标。糖原合成酶（GS）是糖原合成代谢过程中的关键酶。本研究证实了糖原合成酶基因的表达量与糖原含量呈显著正相关。为了探讨糖原合成酶多态性与糖原含量的相关性,利用直接测序法在264个皱纹盘鲍中筛选并鉴定了3个位于GS基因外显子区的SNP位点。遗传多态性及相关性分析结果显示GS基因SNP1的GG基因型与高糖原含量显著相关,可作为高糖原含量选育的优势位点。这些结果揭示了糖原合成酶基因多态性对糖原含量的潜在影响,为糖原性状的选育提供分子标记。     

南北方养殖不同规格皱纹盘鲍营养成分和呈味物质分析

目的 系统探究养殖模式和规格对鲍营养和呈味成分的影响。方法 选取全年北方养殖、南北接力养殖和全年南方养殖3种模式下小规格、中规格皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai), 分别对其基本性状指标(总重、足肌重和壳长等)、营养成分(基本营养成分、脂肪酸和氨基酸)和呈味物质(游离氨基酸、核苷酸、有机酸和甜菜碱)进行测定和分析。结果 小规格南北接力养殖和全年南方养殖皱纹盘鲍足肌重(17.85±0.57 g)、蛋白质(67.55±5.01 g/100 g)、呈味物质[等效鲜味浓度(equivalent umami concentration, EUC)(2.06±0.02)、腺苷酸(71.04±8.15 g/100 g)和琥珀酸(8.16±0.76 g/100 g)]含量均高于小规格全年北方养殖皱纹盘鲍(P<0.05), 但小规格全年北方养殖皱纹盘鲍必需氨基酸总量(20.12±0.62 g/100 g)(P<0.05)和必需氨基酸指数(65.73)高于南北接力和全年南方养殖皱纹盘鲍; 中规格全年北方养殖皱纹盘鲍EUC值(1.63±0.05)显著高于(P<0.05)中规格南北接力养殖鲍, 但营养方面反之。3种来源的中规格皱纹盘鲍营养成分含量均高于小规格皱纹盘鲍; 除全年北方养殖鲍外, 小规格皱纹盘鲍呈味物质含量均高于中规格鲍。结论 不同养殖模式、规格皱纹盘鲍营养成分和呈味品质均有差异, 全年南方养殖和南北接力养殖鲍营养品质均优于全年北方养殖鲍, 但全年北方养殖鲍呈味品质优于南北接力鲍(小规格除外); 同一来源中规格鲍营养优于小规格鲍, 但小规格鲍呈味品质均优于中规格鲍(全年北方养殖鲍除外)。本研究结果将为皱纹盘鲍养殖、消费、加工及其营养品质评价提供有力数据支撑。     

冷海水喷淋对皱纹盘鲍生态冰温保活的影响

本文通过测定皱纹盘鲍的冻结曲线获得了生态冰温区,开展了皱纹盘鲍生态冰温保活工艺的研究。针对不同温度、不同降温模式、净化和充氧条件等开展皱纹盘鲍保活对比实验,寻求最适宜的生态冰温保活工艺。实验结果表明生态冰温区(-1.5℃-0℃)保活条件下皱纹盘鲍的存活率最佳,梯度降温和保活时的冷海水喷淋可显著提高皱纹盘鲍的存活率,此外净化和充氧可明显提高皱纹盘鲍的存活率。本文获得的皱纹盘鲍最佳保活工艺为:对皱纹盘鲍进行净化,采用充氧冷海水喷淋皱纹盘鲍将其梯度降温至生态冰温区、在保活阶段采用充氧冷海水喷淋为皱纹盘鲍提供氧气和潮湿的环境。     

即食皱纹盘鲍腌制配方及食盐渗透规律

利用皱纹盘鲍生产即食食品,运用感官模糊综合评判法确定最佳腌制配方,并对腌制过程不同温度条件下食盐渗透规律进行了研究。正交实验结果表明,最佳腌制配方为食盐添加量5%,白糖添加量9%,味精添加量1%,食醋0.15%,此腌制配方所得即食皱纹盘鲍风味、质地、色泽均较好。按照最佳腌制配方,通过对不同温度下（30、40、50℃）腌制过程中食盐渗透量的数据进行拟合,得到相关方程,温度越高渗透速度常数越高;30、40、50℃渗透速度常数分别为0.6224、0.7431、0.8777;要得到食盐含量3.8%的鲍鱼,在最佳腌制配方的腌制溶液中的腌制条件为:30℃-3.78h、40℃-2.95h、50℃-1.99h。本研究为合理控制即食鲍鱼的加工时间及其扩大化工业生产提供一定的基础。      

鲍鱼腹足肌肉成分和组织微观结构的季节差异研究

本文测定了不同季节捕获的鲍鱼腹足肌肉的水分、蛋白质、多糖等基本成分,氨基酸组成以及肌肉组织微观结构。结果发现,12月份的鲍鱼腹足肌肉水分含量为75.05%,从冬季到夏季水分含量呈逐渐下降趋势,而多糖含量呈逐渐上升的趋势,蛋白含量为15.48%~17.77%。在任一季节捕获鲍鱼腹足的肌肉蛋白中,谷氨酸占比都是最高,精氨酸含量达到13%左右。根据氨基酸组成、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和扫描电镜图谱,发现鲍鱼腹足肌肉的羟脯氨酸和副肌球蛋白含量在冬季和春季较高,且肌肉纤维结构致密,表明鲍鱼肌肉纤维疏密程度可能与胶原和副肌球蛋白含量有关。另一方面,利用冬季捕获的鲍鱼通过热风干燥制备成干鲍,其色泽参数a^*值和b^*值均最小。以上结果表明,12月~次年4月捕获的鲍鱼腹足肌肉基本成分、氨基酸组成和肌肉组织微观结构差异较小,这也为南日鲍的加工季节提供了参考。     

海洋寡糖及其衍生物活性的研究进展

海洋寡糖是海洋多糖降解得到的含两个至十个单糖残基的糖类化合物。相较于海洋多糖,海洋寡糖具有水溶性高、生物活性强、易于机体吸收等优点。海洋寡糖有抗肿瘤、抗氧化、降低胆固醇、免疫调节等生理活性,可以广泛应用于食品、医药等领域。本文综述了海洋多糖、海洋多糖酶法制备海洋寡糖和酶的催化机制,介绍了褐藻胶、壳聚糖和黄原胶三种主要的海洋多糖,以及褐藻胶裂解酶的β-消除作用机制、壳聚糖酶的置换机制和黄原胶降解酶的降解作用机制。对海洋多糖酶法制备海洋寡糖的不足开展了讨论和未来的发展趋势进行了展望,以期为海洋寡糖制备及应用提供理论依据。     

月柿果片不同部位主要化学成分分布特征

为探讨月柿果片不同部位的化学组成对其干燥过程中内外颜色变化的影响,通过参与非酶褐变反应的主要成分变化,研究新鲜月柿果片不同部位的化学成分分布差异。将月柿果片分成6个部位（由外到内,由顶到底划分为A1、A2、B1、B2、C1、C2）,研究果片不同部位主要化学成分含量差异,并明确其分布特征。结果表明：水分含量、可溶性蛋白质和果糖含量为1区<2区;还原糖、蔗糖含量表现为A1>A2、B1B2、C1C>B;还原糖和可溶性蛋白质则表现为A1>B1>C1;B2>A2>C2的规律。大多数游离氨基酸在A1区含量最少,在B2区含量最多。主成分分析说明月柿果片不同部位的化学成分含量具有显著差异。     

南极磷虾不同部位氟形态及其分布特征

利用连续化学-超声波浸提法,对南极磷虾全虾、虾头、虾壳、虾肉中总氟含量以及氟的存在形态进行研究分析。结果表明：总氟含量依次为虾壳＞虾头＞全虾＞虾肉。不同部位不同形态氟含量以残余态最高,其次为可交换态,氧化态氟和有机态氟含量相对较低,水溶态氟含量极少。由此可见,南极磷虾中氟的形态大部分以残余态和可交换态存在。相关性分析表明：水溶态氟与可交换态氟呈显著正相关（r=0.495**）,氧化态氟与残余态氟呈显著负相关（r=－0.254*）,有机态氟与残余态氟呈显著正相关（r=0.312*）。水溶态氟与南极磷虾pH值和水分含量均呈显著正相关（r=0.737**,r=0.292*）,有机态氟与蛋白质含量呈显著正相关（r=0.324*）,残余态氟与蛋白质含量呈显著负相关（r=－0.366*）。本研究可为南极磷虾不同组织中氟的不同存在形态提供科学依据,也为南极磷虾脱氟研究提供理论基础。     

月柿果片不同部位酚类组成及褐变酶活力分布特征

为研究月柿果片不同部位酚类组成与其在微波干燥过程中色泽变化不均匀的关系,将月柿果片由顶到底分为A、B、C 3 个区域,由外到内分成1、2 两个区域,从酶促褐变视角探究新鲜月柿果片不同部位水分、总酚、可溶性单宁、总黄酮含量及多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）、过氧化物酶（peroxidase enzyme,POD）活力的分布特征。结果表明,在纵向方向上,水分含量由顶到底依次减少,POD 活力则呈现相反的趋势;总酚和总黄酮含量分布为A 区>C 区>B区;可溶性单宁含量呈现A1 区C 区>A 区的分布特征。在横向方向上,水分含量和PPO、POD 活力分布表现为1 区<2 区;总酚、可溶性单宁和总黄酮含量呈现A1 区B2 区、C1 区>C2 区的变化趋势。此外,主成分分析表明月柿果片不同部位活性成分组成有明显差异。     

Matrix metalloproteinases (MMPs) inhibitory effects of an octameric oligopeptide isolated from abalone Haliotis discus hannai

Abalone (Haliotis discus hannai) is a marine gastropod, and an important fishery and food industrial resource that is massively maricultured in Asia, Africa, Australia and America. However, its health benefits have rarely been studied for nutraceutical and pharmaceutical application. In this study, the purified abalone oligopeptide (AOP) with anti-matrix metalloproteinases (anti-MMPs) effects was isolated from the digests of abalone intestine using recycle HPLC with a JAI W253 column and an OHpak SB-803 HQ column. The AOP was identified as Ala-Glu-Leu-Pro-Ser-Leu-Pro-Gly (MW = 782.4 Da) with a de novo peptide sequencing technique using a tandem mass spectrometer. The AOP exhibited a specific inhibitory effect against MMP-2/-9 activity and attenuated protein expression of p50 and p65 in the human fibrosarcoma (HT1080) cells, dose-dependently. The results presented illustrate that the AOP could inhibit MMP-2/-9 expression in HT1080 cells via the nuclear factor-kappaB (NF-κB)-mediated pathway. This data suggest that the AOP from H. discus hannai intestine may possess therapeutic and preventive potential for the treatment of MMPs-related disorders such as angiogenesis and cardiovascular diseases.     

基于HS-SPME-GC-MS 法分析春生田头菇子实体不同部位挥发性成分

春生田头菇具有独特的香味风格。采用顶空固相微萃取法结合气相色谱-质谱联用技术,对春生田头菇子实体菌盖和菌柄的挥发性成分进行测定。从菌盖和菌柄分别鉴定出48种和47种化合物,其中16种为相同物质,占挥发性物质的20.25%。主要以烷类、酮类、酯类和酸类化合物为主,其中十甲基环五硅氧烷、2-甲基-3-庚酮、丙位壬内酯、3-羟基扁桃酸乙酯和苯乙酸为菌盖和菌柄共同含有且相对含量最高的化合物。对春生田头菇挥发性成分进行了系统研究,为进一步开发利用田头菇中活性物质提供支撑。     

蛋白质组学技术研究凡纳滨对虾冰藏期间肌肉蛋白的变化

凡纳滨对虾是中国主要的对虾品种,深受消费者的欢迎,但对虾在运输销售过程中极易发生组织软化、肌肉自溶。为了揭示凡纳滨对虾在冰藏过程中的肌肉蛋白的变化规律,筛选出其鲜度的指示蛋白,作者将新鲜凡纳滨对虾依次冰藏0、2、4、6、8 d,采用蛋白质组学技术研究冰藏期间肌肉蛋白的变化。实验结果表明,肌球蛋白重链1和腺苷酸脱氨酶在冰藏期间生成的降解产物为差异蛋白I19和I14,两者的灰度值均随冰藏时间呈上升趋势。其中,差异蛋白肌球蛋白重链1的灰度值变化与冰藏时间呈良好的线性正相关,决定系数R~2为0.920;差异蛋白腺苷酸脱氨酶的灰度值与时间用二次多项式回归拟合效果较好,决定系数R~2达到0.986。因此,肌球蛋白重链1和腺苷酸脱氨酶对凡纳滨对虾新鲜度具有指示作用,有望成为对虾冰藏期间的新鲜度指示蛋白。     

三种马尾藻不同部位挥发性成分的比较分析

比较三种常见马尾藻不同部位挥发性成分的差异,为马尾藻在饵料营养学、食品应用等相关研究提供理论依据。采用固相微萃取技术,分别对羊栖菜、铜藻和鼠尾藻的不同部位进行提取,结合气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)进行挥发性成分的测定分析。结果表明:从三种马尾藻不同部位中共检测出68种挥发性组分,以醛类、非芳香族烷烃、醇类、酮类化合物为主。其中醛类物质的含量和种类占据优势,壬醛、癸醛、苯甲醛等是三种马尾藻挥发性成分的主要构成物质,十四烷、十二烷等烷烃类是含量仅次于醛类的挥发性成分,(5Z)-6,10-二甲基-5,9-十一碳二烯-2-酮是含量较高的酮类。差异性较大的挥发性物质主要有壬醛、乙酸乙酯、苯乙烯、1-辛醇,它们决定了不同马尾藻有着各自不同的风味。研究结果表明这些挥发性物质对马尾藻的饵料价值、养殖生物的肉质风味形成等有着重要意义。