杂粮早餐粉对砷致小鼠雄性生殖毒性的缓解作用

以昆明种纯系雄性小白鼠为受试动物,检测杂粮早餐粉对砷致小鼠雄性生殖毒性的影响。砷染毒组小鼠饮用含砷蒸馏水（砷质量浓度为10 mg/L）,早餐粉干预组小鼠在饮用含砷蒸馏水的同时分别灌胃7.15 g/100 mL和14.30 g/100 mL杂粮早餐粉溶液,每3 d一次。实验周期60 d,期间小鼠自由取水。灌胃结束后检测小鼠睾丸组织的抗氧化指标与组织结构,计算精子总数和精子畸形率。结果表明：通过饮水摄入砷能使小鼠睾丸脏器系数下降,睾丸组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力和还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量下降,H2O2含量升高,丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量显著升高（P＜0.05）,睾丸组织结构出现病理性改变,精子总数降低,精子畸形率升高;用杂粮早餐粉干预后,小鼠睾丸脏器系数升高,睾丸组织SOD活力和还原型GSH含量升高,H2O2和MDA含量降低,睾丸组织结构损伤得到缓解,精子总数升高,精子畸形率下降。上述结果表明,所用杂粮早餐粉能降低砷致雄性生殖毒性,对睾丸结构和功能有一定的保护作用,对雄性动物生殖健康具有积极意义。     

饮水型砷暴露对小鼠多系统脏器的毒性作用

目的：探究砷摄入对小肠的毒性及葡萄果皮提取物（grape skin extract,GSE）的干预效应。方法：模拟人类饮水砷暴露,小鼠饮用浓度10 mg/L的砷溶液56 d,建立小鼠砷中毒模型,并用不同浓度GSE隔天灌胃干预（150 mg/kg bw和300 mg/kg bw）;取小鼠小肠组织,显微镜观察组织形态结构;试剂盒法检测还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）和H₂O₂含量,及总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase,T-SOD）活性;qRT-PCR检测紧密连接基因和炎症通路IL-6/JAK2/STAT-3基因表达水平。结果：砷染毒后,小鼠小肠绒毛变短、排列紊乱,黏膜固有层及黏膜下层大量炎细胞浸润;小肠组织的GSH含量和T-SOD活性分别降低17.1%和25.2%,MDA和H₂O₂含量分别增加68.8%和54.3%（P<0.05）;细胞紧密连接基因ZO-1、ZO-2、occludin、claudin-1和claudin-7显著下调表达（P<0.05）;炎症通路IL-6/JAK2/STAT-3基因转录水平显著增高（P<0.05）。GSE高浓度干预组（300 mg/kg bw）,小肠黏膜损伤减轻,肠绒毛趋于正常,炎症浸润减轻;与砷染毒组比较,GSH含量增加17.9%、T-SOD活性升高14.3%、MDA和H₂O₂含量分别减少33.8%和25.4%（P<0.05）;紧密连接基因显著上调表达（P<0.05）;炎症通路IL-6/JAK2/STAT-3基因转录显著降低（P<0.05）。GSE低浓度干预（150 mg/kg bw）对砷毒性有一定的缓解作用,但差异不显著,无统计学意义（P>0.05）。结论：GSE通过抑制砷暴露诱导的小肠组织氧化应激、炎症反应及功能基因转录下调,缓解砷的小肠毒性,对机体具有保护作用。

     

原花青素对反式脂肪酸致雄性小鼠生殖损伤的保护作用

目的 研究原花青素(proanthocyanidins, PC)对反式脂肪酸(trans fatty acids, TFA)致雄性小鼠生殖损伤的保护作用。方法 以昆明成年雄性小鼠为实验对象, 60只小鼠随机分为5组: 正常对照组、TAF组、低、中、高剂量PC保护组, 实验结束后, 测定相关指标。结果 PC可以使小鼠生精细胞数量减少, 使其活率、活力升高, 从而降低畸形率; 经PC保护的染毒的小鼠睾丸乳酸脱氢酶同工酶(lactate dehydrogenase, LDH-X)、γ-谷氨酰转肽酶(glutamyl transpeptidase, γ-GGT)的活性均增加, 表明PC能拮抗TFA致睾丸酶的损害作用; 小鼠睾丸组织的丙二醛(malonic dialdehyde, MDA)含量在给予TFA染毒后明显增高, 说明TFA能对小鼠睾丸组织造成损伤作用, 而经PC保护后, 能降低TFA引起睾丸损伤小鼠MDA含量, 表明PC可明显抑制TFA所致自由基导致的睾丸脂质过氧化损伤作用, 提高机体清除氧自由基能力; 超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、γ-谷氨酰转肽酶(glutamyl transpeptidase, γ-GGT)活力降低, 而经PC保护后逐渐升高, 反映脂质过氧化产物在睾丸组织内大量堆积从而造成的生殖损害。结论 TFA染毒可以导致雄性小鼠生殖系统损伤。PC干预能够改善TFA致雄性小鼠生殖损伤的作用。     

蛹虫草基质多糖对雄性小鼠生殖毒性的影响

目的：探究蛹虫草基质多糖（Cordyceps militaris stroma polysaccharides,CMSP）对雄性小鼠生殖毒性的影响。方法：ICR雄性小鼠50 只,随机分成5 组,设空白对照组、阳性对照组以及不同CMSP剂量（150、300、600 mg/（kg•d））组。阳性对照组小鼠腹腔注射环磷酰胺（20 mg/（kg•d））,连续5 d;实验组小鼠灌胃不同剂量CMSP,连续灌胃30 d;空白对照组小鼠灌胃相同体积蒸馏水,定期称质量。30 d后,颈椎脱臼法处死各组小鼠,取睾丸和附睾称质量,计算脏器指数。苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色法对小鼠睾丸组织进行病理学检查;红细胞计数法测定精子数量;中性红活体染色法检测精子活动率和畸形率;酶联免疫吸附法（enzyme-linkedimmunosorbent assay,ELISA）测定血清中睾酮（testosterone,TTE）、黄体生成素（luteinizing hormone,LH）、卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）含量;免疫组化-链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法（streptavidinperosidase,SP）检测睾丸Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果：CMSP各剂量组小鼠体质量增长率、精子数量和精子活动率明显高于阳性对照组（P＜0.05）,精子畸形率明显低于阳性对照组（P＜0.05）,CMSP各剂量组间及其与空白对照组间的差异无统计学意义（P＞0.05）;CMSP各剂量组小鼠血清中TTE含量明显高于阳性对照组（P＜0.05）,LH及FSH含量显著低于阳性对照组（P＜0.05）,CMSP各剂量组间的差异无统计学意义（P＞0.05）;睾丸内Bax蛋白表达量显著低于阳性对照组（P＜0.05）,而Bcl-2蛋白表达量则显著高于阳性对照组（P＜0.05）,CMSP各剂量组间的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：CMSP对雄性小鼠无生殖毒性作用。     

VC对组胺致小鼠的毒性预防及治疗作用

采用常规急性毒理学研究的方法,探讨维生素C(VC)对组胺毒性的预防及治疗作用。组胺对小鼠饮食饮水无影响。组胺引起小鼠的痛阈下降,自主活动减少;肾、胃、肠、胸腺器官指数下降,SOD活力降低,MDA活性升高。VC对痛阈和器官指数下降有较好预防作用,对自主活动和SOD活性改善有明显治疗作用。VC对组胺毒性具有一定的预防及治疗作用。     

杭菊花乙醇提取物对大鼠生殖发育毒性研究

目的研究杭菊花乙醇提取物(CME)经过亲代、宫内、哺乳期和断乳后持续暴露对子代的影响。方法设对照组和CME低、中和高剂量组,CME掺入饲料,剂量分别为0、1、3、9 g/kg BW;参照OECD TG 443开展一代延长试验,每组孕鼠20只及其子鼠每组40只(雌雄各半),子鼠断乳后持续给予CME 13周,测定生长发育、生殖发育、血象、血生化指标,做组织病理学检查。结果 CME高、中剂量组子鼠睁眼时间明显迟于对照组;低剂量组子代雌性大鼠出生后(PND)56～112天体质量明显高于对照组,子代雌性大鼠CME高、低剂量组红细胞计数(RBC)和血红蛋白浓度(HGB)均降低,CME高剂量组谷丙转氨酶(ALT)升高,高、中剂量组谷草转氨酶(AST)、血磷(P)升高,CME各剂量组血糖(GLU)均降低、乳酸脱氢酶(LDH)均升高;子代雄性大鼠CME高、低剂量组血清钾(K~+)降低;子代雌雄大鼠CME高剂量组脾脏/体质量系数均高于对照组;以上均差异有统计学意义(F=2.818～42.75,P0.05)。结论低剂量CME促进子代雌性大鼠体质量生长发育,降低子代雌性大鼠的血糖,影响RBC、HGB和LDH;高、中剂量CME影响子代大鼠发育和子代雌性大鼠的肝功能,高剂量CME影响子代雌雄大鼠脾脏/体质量系数。     

二氧化硫对采后葡萄果皮酚类物质合成及其抗氧化能力的调控作用

为探究二氧化硫(Sulfur Dioxide,SO₂)对葡萄果皮酚类物质合成及其抗氧化能力的影响,该试验以木纳格葡萄为试材,采用500μL/L SO₂熏蒸处理2 h,以空气熏蒸为对照,放置于(0±1)℃贮藏44 d。定期测定各酚类物质含量变化,采用高效液相色谱法测定黄烷醇单体含量。结果表明：贮藏结束时,SO₂处理组总酚、总黄烷醇、总黄酮、总花青素、(+)-儿茶素、(-)-表儿茶素、(-)-表没食子儿茶素和(-)-表儿茶素没食子酸酯含量分别是CK组的0.74、1.26、1.33、1.33、1.47、1.79、1.59和1.49倍;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除活性以及铁离子还原能力(FRAP)分别比CK组高13.76%、20.44%和4.98%。SO₂处理在一定程度上诱导了苯丙氨酸解氨酶基因(L-Phenylalanine Ammonia-Lyase,PAL)、肉桂酸-4-羟基化酶基因(Cinnamate 4-...     

羧甲基赖氨酸在方便面中含量及其对雄性生殖和胚胎发育毒性的研究

采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)对市售20个品牌方便面中游离态和结合态羧甲基赖氨酸(CML)含量进行了定量分析,并以体外细胞培养评价了CML的雄性生殖毒性和胚胎发育毒性。市售方便面中,游离态CML质量分数为0.39~0.80 mg/kg,结合态CML质量分数为19.42~34.99 mg/kg。CML作用于睾丸间质细胞R2C细胞24 h,浓度在1 mmol/L以下对细胞存活率没有显著抑制作用,浓度在2 mmol/L以下对孕酮分泌量没有显著的抑制作用;CML作用于胚胎干(ES)细胞D3和成纤维细胞3T3 10 d,浓度在4 mmol/L以下对3T3细胞存活率没有显著影响,浓度在0.5 mmol/L以下对D3细胞存活率没有显著影响。根据市售方便面中的CML浓度评估CML的摄入量,常规食用方便面摄入的CML不会对这几种细胞的存活率和R2C细胞的孕酮分泌量产生显著抑制作用,可认为不会产生雄性生殖和胚胎发育毒性。     

金银花提取物对中波紫外线辐射致雄性小鼠生殖系统损伤的保护作用

研究金银花提取物对中波紫外线（UVB）辐射致雄性小鼠生殖系统损伤的保护作用。将60只雄性小鼠随机分为6组,分别为空白对照组、金银花提取物单独处理组、辐射模型组、金银花提取物低、中、高剂量处理组。其中金银花提取物单独处理组和低、中、高剂量组每天上午灌胃400、200、400和600 mg·kg-1·d-1的金银花提取物,空白和辐射模型组灌胃生理盐水,除空白和金银花提取物单独处理组外,其余4组均在下午接受3 h的UVB（285 nm）照射。实验处理30 d后,测定各组小鼠睾体比、精子活率、睾丸组织病理学变化及超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量。结果表明,与空白对照组相比,辐射模型组小鼠睾体比和精子活率均显著下降（p<0.05）,睾丸曲细精管生精上皮排列疏松,可见生精细胞脱落至管腔,睾丸组织SOD活性显著降低而MDA含量显著升高（p<0.01）。与辐射模型组相比,金银花提取物低、中、高剂量处理组小鼠睾体比和精子活率均显著升高（p<0.05）,生精上皮排列越来越致密,睾丸组织SOD活性显著增加而MDA含量显著下降（p<0.01）,并且呈现良好的剂量-效应关系。以上结果表明,金银花提取物对UVB辐射致雄性小鼠生殖系统损伤有一定的保护作用。      

山楂提取物对D-半乳糖致衰小鼠抗氧化系统的影响

探讨山楂提取物对D-半乳糖致衰小鼠抗氧化系统的影响.选用Babl/C小鼠,在注射D-半乳糖的同时,灌胃低、中、高3种不同剂量的山楂提取物,6周后测定小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性,以及肝组织中SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性.与衰老模型对照组相比,灌胃山楂提取物中、高剂量组的小鼠血清SOD、肝组织CAT活性显著升高(P<0.01),肝组织SOD、GSH-Px活性也有明显升高(P<0.05).     

葡萄籽和皮萃取物对小鼠乳腺癌细胞迁移的影响

目的：研究葡萄籽和皮萃取物对乳腺癌细胞迁移的抑制作用,以及对细胞活力的影响。方法：以小鼠乳腺癌细胞4T1为研究对象,四甲基偶氮唑盐(MTT)实验检测细胞增殖活性;细胞迁移实验检测细胞迁移能力;结果：质量浓度为5μg/mL的葡萄籽和皮萃取物对乳腺癌细胞的迁移具有明显的抑制作用,该抑制作用与药物质量浓度呈现剂量依赖关系;萃取物对癌细胞的活力有明显的抑制作用,葡萄籽和皮萃取物的半数有效质量浓度(IC50)分别为65.427μg/mL和72.408μg/mL。     

顺铂诱发大鼠睾丸毒性的机制及葡萄籽原花青素的防护作用

目的：探究葡萄籽原花青素（grape seed proanthocyanidin extracts,GSPE）对顺铂（cis -diamminedichloroplatinum,CDDP）诱发大鼠睾丸氧化损伤和细胞凋亡的防护作用。方法：将40 只大鼠随机分为空白对照组、CDDP模型组、GSPE低剂量组（200 mg/（kg•d））、GSPE高剂量组（400 mg/（kg•d））。分别以蒸馏水和相应剂量的GSPE对大鼠连续灌胃15 d,灌胃10 d后一次性腹腔注射CDDP,剂量为7 mg/kg,空白对照组注射相同剂量的生理盐水。注射CDDP后第5天处死大鼠,检测精子指标、大鼠睾丸组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）与谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力、还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）与丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,流式细胞仪检测大鼠睾丸细胞凋亡率,并观察睾丸组织在光镜下形态的变化。结果：CDDP模型组大鼠睾丸和附睾的质量、附睾精子的浓度和活动度、GSH-Px、SOD活力以及GSH含量均显著降低,而MDA水平和睾丸细胞凋亡率显著升高。预防性口服GSPE显著改善了CDDP引起的大鼠睾丸质量减小、功能减弱以及氧化应激、脂质过氧化和细胞凋亡这些不利影响。结论：GSPE对CDDP诱发的大鼠睾丸毒性有剂量依赖性防护作用,其机制很可能与抑制体内氧化应激及细胞凋亡有密切关系。     

低温处理对葡萄果皮细胞结构的影响

目的:通过研究低温处理对葡萄果皮细胞结构的影响,揭示其影响葡萄酒品质的内在机制。方法:分别对户太八号、赤霞珠葡萄果粒进行4、-8、-20、-32℃和液氮低温处理,电子显微镜观察果皮细胞的结构变化,并检测果实酚类物质和香气成分含量。结果:果皮细胞经4℃处理后,无明显变化;-8℃处理后,出现质壁分离,析出单宁、淀粉等结晶体;-20℃处理后,细胞严重变形,胞内物质混乱模糊,细胞膜系统出现裂痕,单宁等后含物增多;-32℃和液氮处理后,细胞壁、膜结构破坏更完全。结果表明:低温处理能够使果皮细胞溶出更多的单宁、总酚、总花色苷和香气物质,且在不同温度条件下处理其含量有显著性差异,其中-8、-20、-32℃处理后细胞溶出结果最显著;4℃、液氮处理不能溶出香气成分。结论:低温处理破坏了细胞结构,加快了酚类物质、芳香物质的溶出,有利于提高葡萄汁的品质。     

Evaluation of Protective Effect of Freeze‐Dried Strawberry,Grape, and Blueberry Powder on Acrylamide Toxicity in Mice

Berries are dietary plants with high antioxidant activity. The aim of this study is to investigate the protective effect of berries (strawberry, grape, and blueberry) against the acrylamide (AA)‐induced general toxicity, genotoxicity, and reproductive toxicity in mice model, respectively. Mice were treated with 50 mg/kg b.w./day AA intraperitoneal injection for 5 d after feeding control diet or diet containing freeze‐dried strawberry, grape, and blueberry powder. The results showed that AA induced a significant general toxicity, genotoxicity, and reproductive toxicity in mice. Compared with the control diet, the diets containing berries could reverse the AA‐induced alterations in liver antioxidant enzymes activities (P < 0.05). Moreover, the AA‐induced genotoxicity could be prevented by the diet containing berries. The DNA damage in the lymphocyte and liver cells and the micronucleus formation in bone marrow cell were significantly alleviated (P < 0.05). Meanwhile, the mice fed with diets containing berries showed a recovery in the sperm count, the sperm activity rate, sperm motility parameters, and the abnormal sperm rate (P < 0.05). Berry powders have remarkable intervention against the AA‐induced general toxicity, genotoxicity, reproductive toxicity. Abundant phenolics, especially anthocyanins, may contribute to the intervention.     

不同胁迫因子对葡萄皮中白藜芦醇含量的影响

为了提高葡萄皮的综合利用价值,探讨pH、过氧化氢、氯化铝等六个化学因素对葡萄皮中白藜芦醇含量的影响。分别在pH、过氧化氢、氯化铝等七个因素影响下探讨白藜芦醇的含量变化。结果表明,在pH为13、过氧化氢浓度为5%、氯化铝浓度为90μg/mL、硝酸银浓度为10μg/mL、紫外照射254 nm、热休克的影响下,葡萄皮中白藜芦醇含量是增加的;而在低温(-20℃)的影响下,白藜芦醇的含量是降低的。通过分析影响葡萄皮中白藜芦醇含量的变化的原因,提高了白藜芦醇的提取率,更好地提高葡萄皮的综合利用率。     

对山葡萄皮中白藜芦醇的抗氧化性质研究

对山葡萄皮中白藜芦醇进行提取和分离纯化,然后研究山葡萄皮中白藜芦醇的抗氧化性质。主要对白藜芦醇对猪油抗氧化性质的能力和消除氧自由基,羟自由基,超氧自由基的能力进行分析。得出结论:白藜芦醇具有抗氧化能力,随着浓度的增大其消除自由基作用逐渐增强。     

丙烯酰胺生殖毒性和发育毒性效应性生物标志物研究

目的：研究丙烯酰胺对机体造成的生殖毒性和发育毒性,并找出丙烯酰胺生殖毒性和发育毒性的效应性生物标志物。方法：通过对SD雄鼠灌胃22.5、11.25、5.625mg/（kg·d）的丙烯酰胺溶液,分析对其睾丸和附睾的影响,还对精子畸形率和睾丸内抗氧化酶系统进行评价,通过研究丙烯酰胺在动物模型中产生的效应性生物标志物来评价其生殖毒性。采用饮水给予怀孕第6d的孕鼠20.0、10.0、5.0mg/（kg·d）的丙烯酰胺,在怀孕0、7、12、16、20d称量体重并每天监测其饮水消耗量,观察胎鼠身长、尾长和骨骼发育情况;对断乳后的幼鼠采用直接饮水接触丙烯酰胺,在3—6w每周处死部分幼鼠,对其脏器和血液进行分析,通过研究丙烯酰胺在动物模型中产生的效应性生物标志物来评价其发育毒性。结果：丙烯酰胺显著增加了SD大鼠精子畸形率,显著降低了SD大鼠睾丸内抗氧化酶的活性;同时,丙烯酰胺导致幼鼠尾长的发育异常,幼鼠的肝、肾、脾、甲状腺发生组织病变,骨骼畸形率显著增加。结论：精子畸形率、睾丸内抗氧化物酶能够反应丙烯酰胺的生殖毒性,可作为丙烯酰胺生殖毒性的效应生物标志物;幼鼠尾长、骨骼畸形、组织病理学改变可反应丙烯酰胺的发育毒性,可作为丙烯酰胺的发育毒性的效应生物标志物。     

葡萄皮超微粉体特性研究

利用超微粉碎技术将葡萄皮粉碎成粒度均一、表观性能良好的超微颗粒。通过对葡萄皮粉体性质研究表明,随着葡萄皮微粒粒径的不断减小,其流动性、溶解性、分散性和多酚类物质的溶出量均有所增大,其营养成分可以更好地被人体吸收利用。