对破壁处理灵芝孢子粉功能特性的测定与分析

采用球磨法对灵芝孢子粉进行破壁处理,测定对比灵芝孢子粉破壁前后的水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分的溶出量,粗多糖和总三萜的生物活性物质溶出量,测定分析了水、醇提取物DPPH·、ABTS·清除能力和还原能力。结果表明:灵芝孢子粉破壁前后水分和灰分变化不显著,粗蛋白溶出量增加了33.96%,粗脂肪溶出量提高了2.94倍;灵芝孢子粉粗多糖和总三萜活性物质溶出量分别增加了40.90%和55.21%;破壁后灵芝孢子粉抗氧化能力显著提高。     

破壁与去壁灵芝孢子粉的化学成分与抗氧化活性比较

本研究以去壁灵芝孢子粉与破壁灵芝孢子粉为原料,探究不同孢子壁加工工艺对灵芝孢子粉化学成分及抗氧化活性的影响。实验对比了两种灵芝孢子粉的水分、灰分、膳食纤维、蛋白质、总三萜、总多糖、微量元素、氨基酸等主要指标及其体外抗氧化活性。结果表明,去壁灵芝孢子粉在灰分、水溶性膳食纤维、蛋白质、总多糖、总三萜和水解氨基酸的含量分别是2.227%、8.810%、15.922%、12.129%、2.556%、6.744%,均高于破壁灵芝孢子粉,其中总多糖含量较破壁提高了近12倍。三萜的色谱图显示,去壁孢子粉中含有更丰富的萜类物质。对比两种孢子粉醇提相与水提相的抗氧化活性,去壁灵芝孢子粉醇提相显示出最强的抗氧化活性,在2 mg/mL的浓度下,总还原力和DPPH自由基清除率分别为1.114和89.860%;在0.5 mg/mL的浓度下,其ABTS+自由基清除率为99.714%,与同浓度下V_C阳性对照组结果相当;在10 mg/mL浓度时,羟基自由基清除率达到84.301%。因此,去壁技术提高了灵芝孢子粉中关键物质含量,增强了其抗氧化能力。     

灵芝子实体、菌丝体和孢子粉化学成分的比较

为探讨灵芝子实体、菌丝体和孢子粉中化学成分的差异,主要对3种材料中的蛋白质、氨基酸、葡萄糖、糖醇、核苷以及三萜等成分含量进行测定,并对三萜的HPLC指纹图谱进行相似度分析。结果发现,灵芝孢子粉中蛋白质质量分数最高为11.1%,而菌丝体中蛋白质质量分数最低为7.1%。灵芝子实体中灵芝三萜含量高,种类全,而菌丝体中的三萜种类少,含量低,同时未破壁的孢子粉中基本测不到灵芝三萜。糖醇含量也有差别,菌丝体中有较高含量的阿糖醇,而在未破壁孢子粉和子实体中,都是甘露醇含量较高。同时发现3种材料所含核苷的类别、含量均不同。实验结果表明,灵芝子实体、菌丝体和孢子粉3种材料的化学成分差异大,在保健品使用上应区分使用。     

6个破壁灵芝孢子粉的理化性质

为更好地了解山东省破壁灵芝孢子粉的品质,收集6个灵芝孢子粉样品,对其理化性质进行分析。结果表明, 6个样品的灵芝破壁孢子粉含水率在2.013%～8.922%之间,粗脂肪含量在27.12%～34.05%之间;总糖含量在4.359%～5.769%之间,多糖含量在0.879%～1.182%之间,还原糖含量在0.196%～0.247%之间,段木栽培的破壁灵芝孢子粉多糖含量并不比代栽多糖含量高;破壁灵芝孢子粉的D[4, 3]在6.042～7.91μm之间, D50在5.723～6.284μm之间;经扫描电镜观察,发现代栽灵芝孢子粉粒径为(8.6～8.8)μm×5.6μm,而段木栽培的孢子粉粒径为8.8μm×6.6μm,碾压式孢子粉破壁率达100%。山东省破壁灵芝孢子粉多糖、重金属等含量符合中华供销总社灵芝孢子粉理化性质的行业标准。扫描电镜发现段木栽培比代栽孢子粉更饱满,但个别样品破壁率未达标。     

破壁灵芝孢子粉综合品质评价模型的构建

为构建不同产地破壁灵芝孢子粉综合品质评价模型,该研究收集了我国四大灵芝主产区的破壁灵芝孢子粉,对其水分、灰分、破壁率、L*值、a*值、b*值、脂肪、三萜类、多糖和脂肪酸等15个感官理化指标进行综合分析。首先采用SPSS统计软件对所得数据进行相关性分析(CA)和主成分分析(PCA),筛选出6个评价核心指标为水分、灰分、破壁率、L*值、多糖和亚油酸。然后运用层次分析法(AHP)确定各指标权重,计算各产地破壁灵芝孢子粉综合得分并排名。结果表明,吉林长白山地区破壁灵芝孢子粉品质相对最佳,而来自于同一产区的破壁灵芝孢子粉综合品质亦存在较大的差异。该方法不仅对破壁灵芝孢子粉综合品质评价提供了依据,同时可辅助市场上破壁灵芝孢子粉的溯源鉴别,促进破壁灵芝孢子粉产业的高品质发展。     

酸浸高压法破壁对灵芝孢子中三种主要成分变化影响的研究

研究酸浸高压法对未破壁灵芝孢子中灵芝多糖、灵芝总三萜和麦角固醇含量的影响,与未经酸浸高压的未破壁及已破壁的灵芝孢子进行含量比较。以无水葡萄糖为对照品,用紫外–可见分光光度法,对灵芝孢子的灵芝多糖含量进行测定;以齐墩果酸为对照品,用紫外–可见分光光度法,对灵芝孢子的灵芝总三萜含量进行测定;以麦角固醇为对照品,用反相高效液相色谱法,对灵芝孢子的麦角固醇含量进行测定,根据结果对三种成分含量进行比较。结果表明,经酸浸高压的未破壁灵芝孢子,其灵芝多糖的含量明显高于未经酸浸高压的未破壁及已破壁灵芝孢子,其灵芝总三萜和麦角固醇的含量明显高于未经酸浸高压的未破壁灵芝孢子。酸浸高压法可作为一种新的灵芝孢子破壁方法,该法获得的灵芝多糖、灵芝总三萜和麦角固醇的含量明显高于对照组。     

响应面法优化灵芝孢子粉高压脉冲电场破壁工艺

本试验利用高压脉冲电场对灵芝孢子粉进行破壁试验以期提高其破壁率,以电场强度、脉冲个数和脉冲宽度为试验因子进行单因素试验,并在此基础上进行响应面试验。结果表明:三个试验因子对灵芝孢子粉破壁率的影响大小依次为电场强度、脉冲宽度和脉冲个数;灵芝孢子粉高压脉冲电场破壁最优工艺参数为电场强度25 kV/cm、脉冲宽度80 μs、脉冲个数40000个,破壁率可达到66.74%±0.03%;破壁孢子粉的多糖和总三萜溶出量分别达到了(0.99±0.11)g/100 g和(1.79±0.03)g/100 g。     

灵芝菌丝体总三萜超声辅助提取工艺优化

以灵芝菌丝体为原料,在单因素试验基础上,通过正交试验和Box-Behnken响应面设计法优化超声辅助提取灵芝菌丝体总三萜工艺。结果表明,超声辅助提取灵芝菌丝体总三萜正交试验最佳工艺为:超声功率90 W、超声时间50 min、pH 8、料液比1∶40(g/mL),在此条件下灵芝菌丝体三萜平均提取率为0.76%;超声辅助提取灵芝菌丝体总三萜响应面试验最佳工艺为:超声功率90 W、超声时间42 min、pH 8、料液比1∶30(g/mL),在此条件下,灵芝菌丝体总三萜平均提取率为1.09%,与最大预测值1.13%相差0.04%。这两种方法得到的提取工艺参数可靠,可为灵芝三萜工业化生产提供技术参考。     

灵芝孢子粉破壁工艺优化及其抗肿瘤作用

以灵芝孢子粉为原料,采用高压均质法破壁灵芝孢子,研究灵芝孢子粉破壁优化工艺及破壁孢子粉抗肿瘤作用。选取水为破壁溶剂,以均质压力、均质次数、料液比为试验因素,以灵芝孢子破壁率为试验指标,通过单因素试验及正交试验对灵芝孢子破壁工艺进行优化。通过建立S180荷瘤小鼠模型,对破壁灵芝孢子粉的抗肿瘤作用进行研究。结果表明,最佳破壁工艺条件为均质压力150 MPa、均质次数3、料液比1∶100（g/mL）,破壁率为94.35%。抗肿瘤实验表明,破壁灵芝孢子对小鼠S180肉瘤的抑制率为43.37%～57.59%,且肝体比和肺体比变化稳定,并可显著提高小鼠的胸腺指数和脾指数。因此,破壁灵芝孢子粉具有良好的抗肿瘤作用。     

破壁灵芝孢子粉破壁率的测定

对破壁灵芝孢子粉破壁率的检测方法进行优化,以降低试验误差。使用血球计数板对灵芝孢子粉和破壁灵芝孢子粉进行计数,考虑到灵芝孢子粉破壁率的分析方法中出现的孢子悬液分布不均匀问题,故对超声振荡的时间和蔗糖粉末粗细程度试验条件进行优化,并对优化前后的结果进行比较。结果表明,方法优化前,破壁灵芝孢子粉破壁率测量为98%,相对标准偏差(S_RSD)为10.25%,经试验条件优化后,其破壁率测量的结果提高到99%,相对标准偏差(S_RSD)下降至1.79%,前后差异明显,效果满意。通过分析灵芝孢子粉破壁率测量误差的主要来源,并采取针对性措施,可以有效降低灵芝孢子粉计数结果的相对标准偏差,提升破壁率测量的准确度。     

挤压处理灵芝孢子粉提取灵芝多糖

以挤压喷爆为处理方法,孢子破壁率和灵芝多糖得率为研究对象,分析水分含量、螺杆转速、温度、进料速度对灵芝孢子的破壁率和灵芝多糖得率的影响。采用正交试验优化挤压工艺条件得出：水分含量15%、螺杆转速223r/min、温度125℃、进料速度155g/min,在此条件下灵芝孢子破壁率为78.6%,多糖得率为2.219%,通过在最佳条件下进行二次挤压,灵芝孢子破壁率提高为83.48%,多糖得率为2.37%。     

灵芝孢子粉多糖的PMP-HPLC指纹分析

采用部分酸水解耦合PMP柱前衍生反相高效液相色谱法对15个不同灵芝(赤芝)孢子粉样品中多糖进行检测和指纹表征,研究建立灵芝孢子粉多糖的HPLC指纹图谱。标定了19个共有特征指纹峰,同一产地不同批次产品间的相似度均大于0.97,不同产地产品间的相似度大于0.8;赤芝孢子粉与其他不同部位及不同品种的灵芝类产品的多糖指纹图谱显示出较大的差异。这些相似性和差异可作为灵芝孢子粉产品质量监控、与其他不同部位和不同品种的灵芝类产品的区别鉴定以及灵芝孢子粉的真伪与掺假检测的主要依据之一。     

破壁灵芝孢子的体外模拟消化特性研究

为探究破壁灵芝孢子在口腔和胃肠道中的消化吸收情况以及对肠道环境的影响。以机械碾压法、微波法和超声法破壁的灵芝孢子（Ganoderma lucidum spore,GLS）为研究对象,经体外模拟人体口腔、胃、小肠消化系统及透析模型,随后将消化后的底物进行体外发酵。测定消化各个阶段的灵芝孢子失质量率、多糖和三萜化合物释放量、生物可接受率和透析率以及小肠消化底物在0、6、12、24、48 h体外发酵过程中pH变化。结果显示,胃和小肠是灵芝孢子的主要消化场所,破壁组平均失质量率达到23.84%,其中机械碾压组更易被消化,其失质量率为29.46%。97%的多糖在胃肠液中溶出,机械碾压组多糖的生物可接受率具有最高水平,为87.33%。三萜只在破壁组小肠模拟消化中有微量溶出,平均约1.50±0.04 mg/g,95.2%的三萜随沉淀进入结肠。体外发酵结果显示,发酵液pH在0~12 h持续下降,并在12 h基本到达发酵终点。对比三种破壁灵芝孢子的消化特性,机械碾压法破壁的品质可观,不失为企业规模化破壁生产的优选。综上所述,破壁有利于提高灵芝孢子的有效成分在人体消化环境内释放量和生物可接受率,促进结肠发酵产酸,有助于调节人体肠道环境。     

不同品种灵芝子实体及孢子粉元素成分分析及重金属安全性评价

针对我国鲁西地区主栽灵芝品种,利用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定不同品种灵芝子实体、孢子粉及破壁孢子粉中元素及重金属含量,开展元素成分分析及重金属安全性评价。元素成分分析结果表明,藏芝和香血芝子实体中大部分元素含量明显高于赤芝、美芝和新大片子实体中元素含量,特别是Fe、Cu、Zn、Mn、Se、B、V、Co、Sr 9种人体必需微量元素,其中藏芝子实体中Fe元素含量达到234 mg/kg、Zn元素含量达到57.9 mg/kg、Se含量达到0.309 mg/kg,香血芝子实体样品Sr元素含量最高,达到3.60 mg/kg。赤芝粉和赤芝椴木粉元素营养质量高于美芝粉和新大片孢子粉元素营养质量,赤芝粉和赤芝椴木粉中硒含量分别是美芝粉中硒含量的3倍和2倍。重金属安全性分析结果表明5种灵芝子实体与4种孢子粉样品Pb、Hg 2种重金属含量远低于相关标准,安全性较高,藏芝及香血芝子实体、新大片孢子粉样品As元素含量较高,具有一定的安全性风险。破壁技术会造成孢子粉中As、Pb、Cd、Cr、Cu、Ni金属元素含量不同程度的提高,孢子粉破壁过程中重金属存在一定的安全风险。     

灵芝孢子粉生物活性成分及药理作用

灵芝孢子粉是灵芝子实体在成熟期释放出的卵型生殖细胞,含有多糖、三萜和核苷等多种活性成分,药用价值高于灵芝子实体和菌丝体,具有抗肿瘤、抗氧化、免疫调节等药理作用。本文对灵芝孢子粉的结构、功能性成分、药理作用及产品开发现状方面的研究进行了综述,为其进一步开发与利用提供重要的理论参考。     

灵芝多糖和三萜的提取工艺研究

以灵芝子实体为原料,采取溶剂浸提、超声波法和微波法对灵芝子实体中的多糖和三萜进行提取。以提取率为指标,设计正交试验,考察料液比、提取时间和提取温度等因素对各种方法的影响。结果表明,提取多糖的最佳工艺为超声波法提取,其最优组合为料液比1∶20,提取时间30min,提取温度60℃,提取三萜的最佳工艺为微波法提取,其最优组合为料液比1∶15,提取时间20min,提取温度70℃,乙醇浓度75%。     

不同来源灵芝孢子粉的多糖分子量分布分析与比较

以超声波辅助提取灵芝孢子粉多糖,采用高效体积排阻色谱法分析和比较不同产地和不同厂家的灵芝孢子粉多糖相对分子质量的分布.结果表明,不同来源的孢子粉样品的多糖含量和分子量分布均有较大差异,且多糖含量和相对分子量大小顺序明显不同,故多糖分子量分布也应作为孢子粉的主要质量指标之一.