超高效液相法测定黄秋葵中的氨基酸

目的:采用柱前衍生超高效液相色谱法,建立黄秋葵种子及种皮中游离氨基酸含量的检测。方法:以Acc Q-Fluor衍生化试剂盒对黄秋葵种子及种皮中的氨基酸进行柱前衍生,衍生化反应后,采用超高效液相色谱检测,根据17种标准氨基酸对照品的保留时间定性,采用峰面积外标法定量计算含量。结果:17种氨基酸在0.003~0.18 mg/m L内有良好的线性关系(r20.9990),平均回收率(n=6)为98.5%。该方法10 min内17种氨基酸能够完全分离。此外,黄秋葵种子中含有17种氨基酸,总游离氨基酸含量为126.70 mg/g,其中必需氨基酸约42.16 mg/g,非必需氨基酸约84.53 mg/g。种皮中含有15种氨基酸,总游离氨基酸含量为51.9 mg/g,必需氨基酸约18.48 mg/g,非必需氨基酸约33.47 mg/g。结论:黄秋葵种子及种皮中主要以亮氨酸、缬氨酸、谷氨酸和天冬氨酸为主,可以作为营养功能食品进一步开发。     

HPLC法同时测定采后莲雾果实7 种有机酸的含量

为探讨采后莲雾果实有机酸代谢对果实絮状绵软和品质的影响,建立同时测定莲雾果实中7 种有机酸含量的高效液相色谱法。采用Atlanis T3色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）分离并进行梯度洗脱,流动相为甲醇和0.02 mol/L的磷酸盐（pH 2.2）,流速0.5 mL/min,柱温25 ℃,紫外检测器,检测波长213 nm。在此色谱条件下,各有机酸组分都很好地分离,线性范围较宽,相关系数不低于0.999 5,检出限为0.001～0.014 mg/g,定量限为0.003～0.042 mg/g,加标回收率为86.84%～98.86%,相对标准偏差小于5%。该方法高效快捷、定量准确、灵敏度高,适用于莲雾果实7 种有机酸含量的同时测定。测得莲雾果实贮藏期间7 种有机酸含量变化分别为丙酮酸0.395～0.975 mg/g、苹果酸6.951～10.059 mg/g、抗坏血酸0.013～0.172 mg/g、乳酸0.030～0.735 mg/g、乙酸0.263～0.702 mg/g、柠檬酸1.658～5.370 mg/g、富马酸0.269～0.518 mg/g。     

高效液相色谱法测定玉米蛋白粉中游离氨基酸含量

建立高效液相色谱法同时测定玉米蛋白粉中17种游离氨基酸含量的方法。样品用盐酸溶液(0.1 mol/L)提取,采用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯(AQC)为衍生剂衍生。应用Nova-PakTM C_(18)柱,以10 mmol/L醋酸铵缓冲液、乙腈和超纯水为流动相进行梯度洗脱,柱温为37℃,检测波长为248 nm,外标法定量。结果表明,17种游离氨基酸线性关系良好,其中16种游离氨基酸在0.002 5~0.5μmol/mL范围内具有良好的线性关系,胱氨酸浓度在0.006 3~1.25μmol/mL范围内线性关系良好,相关系数在0.999 1~0.999 9之间,回收率为95.10%~105.21%,RSD为1.36%~4.39%。该方法灵敏度高、重现性好、操作简单,可用于检测玉米蛋白粉中游离氨基酸含量。     

6种葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸含量测定及比较

以异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂,采用Thermo Acclaim~(TM) 120 C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为pH 6.5的乙酸钠缓冲溶液,流动相B为甲醇—乙腈—水(体积比20:60:20),在流速1.0mL/min,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长254nm的条件下,建立了高效液相色谱法测定葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量。结果表明,在试验浓度范围内,17种氨基酸的R~2均0.999 0;水解氨基酸的加样回收率为92.0%～104.6%,RSD为0.83%～4.07%;游离氨基酸的加样回收率为95.2%～102.4%,RSD为1.06%～3.98%。同时,6种葡萄籽中水解氨基酸的含量为130.46～163.24 mg/g,游离氨基酸的含量为2.04～5.13mg/g;用于酿造白葡萄酒的雷司令、赛美容和贵人香3种葡萄籽中游离氨基酸含量较高,用于酿造红葡萄酒的黑皮诺、蛇龙珠和赤霞珠3种葡萄籽中水解氨基酸含量较高。该方法稳定可靠,可用于葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量测定。     

全自动氨基酸分析仪法测定4种贝类肌肉中谷胱甘肽和游离氨基酸含量

建立一种测定贝类肌肉中谷胱甘肽和游离氨基酸的全自动氨基酸分析仪法,以4种常见贝类为研究对象,采用0.02 mol/L盐酸溶液作为提取剂,体积分数5%磺基水杨酸溶液为蛋白沉淀剂,同时优化了缓冲溶液的组成及洗脱程序,并对该方法的线性范围、检出限、精密度以及回收率进行测定。结果表明:贝类肌肉中的谷胱甘肽和游离氨基酸有着较好的分离效果,线性关系良好,相关系数为0.999 1~0.999 9,检出限(RSN=3)为0.07~0.27μmol/L,加标平均回收率为86.40%~102.42%,日内和日间相对标准偏差分别为0.31%~0.73%和1.14%~2.60%。4种贝类肌肉组织中的游离氨基酸含量比较丰富,总游离氨基酸含量分别为1 396.39、1 016.04、911.15、287.01 mg/100 g,文蛤青蛤缢蛏牡蛎,主要的游离氨基酸为牛磺酸(Tau)、谷氨酸(Glu)、丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg);谷胱甘肽含量分别为103.20、82.53、61.77、33.37 mg/100 g,青蛤文蛤缢蛏牡蛎。该方法适用于贝类肌肉中谷胱甘肽和游离氨基酸含量的测定与分析。     

河北省特种桑叶中游离氨基酸的含量测定

测定河北省特种桑叶中游离氨基酸的含量。超声辅助提取桑叶中的游离氨基酸,以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用反相高效液相色谱法梯度洗脱测定。液相条件为Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温40℃,流速1 m L/min,检测波长254 nm。16种氨基酸在0.03125~1μmol/m L浓度范围内呈现良好的线性关系,r均大于0.9961,平均回收率为92.2%~101.4%(n=6),RSD5.0%。此方法准确可靠,可用于桑叶及其他药食两用植物中游离氨基酸的含量测定。     

侗家奇液酒中游离氨基酸含量测定分析

采用日立L-8800型氨基酸自动分析仪分析研究侗家奇液酒中游离氨基酸的组成,色谱条件:标准分析柱4.6mm×60.0mm,反应柱温度:150℃,测定了不同地区保健酒中游离氨基酸的含量。结果表明,所测试样中各种氨基酸加标回收率均在85.2%~112.6%,最低检出限为3pmol。该仪器重现性好,实验数据可靠。测定的侗家奇液酒中游离氨基酸总含量为488.48mg/L,仅次于灵芝酒;谷氨酸含量为252.12mg/L,占氨基酸总量的51.59%,在6种保健酒中含量最高,是一种天然绿色、营养健康的保健佳品。     

高效液相色谱法测定江米甜酒中游离氨基酸的含量

以江米为原料,通过安琪纯种根霉酒曲和民间传统甜酒曲发酵制备江米甜酒。采用高压液相色谱(HPLC)和邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生法测定其游离氨基酸的组成。结果表明:在安琪纯种根霉发酵江米甜酒中共检测出游离氨基酸15种,而在民间传统甜酒曲发酵江米甜酒中共检测出游离氨基酸16种,其中都有8种为人体必需氨基酸。在安琪纯种根霉发酵江米甜酒中总游离氨基酸含量为0.02%,其中赖氨酸含量最高,为24.36mg/L;而在民间传统甜酒曲发酵江米甜酒中总游离氨基酸含量为0.03%,为安琪纯种根霉发酵江米甜酒的1.5倍,其中苯丙氨酸含量最高,为27.46mg/L。     

高效液相色谱法测定米渣复合氨基酸营养液中氨基酸含量

应用邻苯二甲醛(OPA)柱后衍生、离子交换高效液相色谱法同时测定20种氨基酸,氨基酸浓度在50~180μmol/L(色氨酸浓度为61.5~221.4μmol/L)时,其峰面积和氨基酸浓度的线性相关系数均大于0.96,20种氨基酸的加标回收率在95.7%~104.2%。用此法对米渣经多菌种发酵后制成的复合氨基酸营养液中游离氨基酸含量进行检测,取得了满意的结果。     

HPLC法同时测定采后莲雾果实木质素代谢途径中5种酚酸的含量

为探讨采后莲雾果实贮藏期间酚酸含量变化对果实木质化代谢的影响,建立高效液相色谱法同时测定采后木质素代谢途径中5种酚酸(肉桂酸、对香豆酸、咖啡酸、阿魏酸、芥子酸)的方法。采用InfinityLab Poroahell C18色谱柱为固定相,以甲醇和乙酸溶液(p H 2.4)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,柱温25℃,紫外检测器于波长279 nm和320 nm处进行检测。各酚酸组分的线性范围较宽,相关系数均大于0.999 4,检出限为0.01～0.03 mg/kg,定量限为0.03～0.09 mg/kg,相对标准偏差小于5%,加标回收率为86.18%～99.05%。该方法准确度、灵敏度高,操作简便,适用于采后莲雾果实木质素代谢途径中5种酚酸的同时测定。测得莲雾贮藏期间肉桂酸、对香豆酸、咖啡酸、阿魏酸和芥子酸的含量范围分别为11.46～24.69、0.92～1.45、2.31～5.32、8.86～20.58 mg/kg和9.48～22.62 mg/kg。     

UPLC-MS/MS法同时测定采后莲雾果实中7 种酚酸类物质含量

建立一种超高效液相色谱-串联质谱法同时测定莲雾果实中7 种酚酸类物质含量。采用CORTECD? T3色谱柱（2.1 mm×100 mm,2.7 μm）,柱温30 ℃。流动相为流速0.3 mL/min的0.1%甲酸-乙腈。样品用乙腈提取2 次,外标法定量。结果表明：7 种酚酸类物质在5.0～1 000 ng/mL范围呈良好线性关系,相关系数r不小于0.996 1,加标回收率为93.6%～98.8%,相对标准偏差为1.9%～7.5%,检出限为0.3～2.7 μg/kg,定量限为1.0～5.0 μg/kg。使用该方法对采后莲雾果实中酚酸类物质含量进行测定,经主成分分析获得了3 个主成分和相应数学评价模型。综合得分F值在贮藏第6天出现负值,说明其酚酸类物质已经开始大量分解。该方法前处理简单,灵敏度高,稳定可靠,可为采后莲雾果实品质研究提供参考。     

苹果酒发酵过程中酵母对氨基酸利用的研究

对酵母J00的氨基酸利用特性进行了研究，确定出该酵母对各种氨基酸和NH_4~+的需要范围。通过调整苹果浓缩汁中的氨基酸含量，并分析氨基酸对酵母发酵代谢产物的影响，发现当果汁中氨基酸及NH_4~+的组成为：NH_4~+(120mg／L)、组氨酸(30mg／L)、苯丙氨酸(30mg／L)、缬氨酸(35mg／L)、异亮氨酸(30mg／L)、亮氨酸(10mg／L)、天门冬氨酸(160mg／L)、苏氨酸(1000mg／L)、谷氨酸(45mg／L)、甘氨酸(5mg／L)、丙氨酸(25mg／L)、蛋氨酸(15mg／L)、酪氨酸(15mg／L)、赖氨酸(45mg／L)、精氨酸(25mg／L)、天门冬酰胺(30mg／L)时，各种氮源的比例比较合适，使酵母发酵过程较优，可增加乙醇产率，提高总糖利用率，同时可以达到降低高级醇生成量的目的。     

PITC柱前衍生-反相高效液相色谱法测定黄酒中游离氨基酸和生物胺

建立柱前衍生-反相高效液相色谱,同时测定黄酒中17 种氨基酸及7 种生物胺含量的方法。采用异硫氰酸苯酯柱前衍生试剂,采用Inertsil ODS-SP C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）分析,以乙酸钠溶液和乙腈溶液混合液进行梯度洗脱,在254 nm波长处进行氨基酸和生物胺的含量分析。氨基酸和生物胺在2.0～500 mg/L和0.5～125 mg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数R2大于0.99,平均回收率在86.44%～99.75%之间,相对标准偏差在0.31%～3.53%之间;检出限为0.02～0.25 mg/L,定量限为0.25～4.50 mg/L。方法线性范围广、准确性高、稳定性好,适用于黄酒中氨基酸及生物胺的检测。     

液相色谱-电喷雾飞行时间质谱法同时测定虫生真菌菌丝中16种游离氨基酸

采用液相色谱-电喷雾飞行时间质谱(LC-ESI-TOF-MS)法,选择阴离子电离模式,建立了一种同时检测虫生真菌菌丝中16种游离氨基酸的定性定量分析方法。研究结果表明:16种氨基酸的色谱特征和质谱离子特征明显,可用来对氨基酸进行准确定性分析。定量实验结果表明,16种氨基酸的线性范围广准确性高,在氨基酸浓度线性范围4.0～125μmol/L,16种氨基酸的峰面积与浓度相关系数都大于0.998。在氨基酸浓度为50μmol/L时,16种氨基酸的相对标准偏差在0.84%～2.75%之间。用液质联用法对7种虫生真菌菌丝样品中16种游离氨基酸含量的测定结果显示,同一菌株中各种氨基酸的含量相差较大,但所有供菌株中含量最高的均为苯丙氨酸,它在不同供试菌株中的含量范围为0.718～2.173 mg/g,其中中国被毛孢的苯丙氨酸含量最高。供试菌株中含量较高的氨基酸还有脯氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸和谷氨酸,它们含量大部分都在0.3mg/g以上,较其他氨基酸含量明显较高,这些含量较高的氨基酸可作为判定虫生真菌菌丝中游离氨基酸的特征指标。不同菌株的游离氨基酸总量也存在较大差异,中国被毛孢中游离氨基酸总含量为7.537 mg/g,较蝉棒束孢(3.196 mg/g)的总含量高出1.36倍。     

Effects of magnesium ions on both VHG batch and continuous fruit wine fermentations

In Poland, fruit wines or aromatized fruit wines are semi‐sweet or sweet and contain approximately 15–16% (v/v) ethanol. Their production can be classified as a very high‐gravity (VHG) fermentation. Magnesium has a beneficial effect on VHG fermentations as it protects the yeast cells against ethanol, osmotic and temperature stress. The effect of the magnesium concentration in an apple must, containing 32% sugars, on the fermentative parameters of batch and continuous fermentations was assessed. In the batch process, a magnesium concentration of ~8.5 mg/L resulted in decreased the ethanol production in comparison to a magnesium concentration of ~250, 490 and 970 mg Mg²⁺/L. The highest amount of Mg also caused a metallic taste. A continuous fermentation was carried out for 2.5 months in a four‐column packed‐bed fermentor. The medium contained ~50, 250 and 490 mg Mg²⁺/L and the yeast was immobilized on foam glass. During the continuous fermentation, no differences at p ≤ 0.05 in terms of fermentative parameters were seen with magnesium additions. The same beginning amount of magnesium ions in the medium led to a similar use of this element, both in batch and in continuous fermentation. The more Mg²⁺ that was present in the medium, the more Mg²⁺ was used by the yeast. The results suggest that the minimal dose of magnesium, under the described conditions, is 50 mg/L, corresponding to the amount of Mg in the medium prepared using concentrated apple juice and tap water. This finding has industrial significance, as Polish wine companies prepare their fruit musts using tap water. Copyright © 2014 The Institute of Brewing & Distilling     

高效液相色谱法测定苹果果实中的有机酸

目的：建立苹果果实中有机酸含量的测定方法。方法：采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC),水浴超声提取果实中的有机酸,色谱条件：色谱柱为WatersWAT010290(7.8mm×300mm,7μm),流动相为0.01mol/L H2SO4溶液,流速0.5mL/min,柱温50℃,检测波长210nm。结果：在选定的色谱条件下,柠檬酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸、乙酸和草酸都得到很好分离。6种有机酸的线性范围为0.001～1.000(草酸为0.800)mg/mL,标准曲线相关系数均在0.9998以上;精密度检测,RSD为0.10%～1.59%(n=5);重现性检测,RSD为1.79%～4.26%(n=5);回收率在91.05%～105.18%之间。结论：该方法简单快捷、准确、重复性好,可用于苹果果实中的有机酸测定。     

Apple Aminoacid Profile and Yeast Strains in the Formation of Fusel Alcohols and Esters in Cider Production

The amino acid profile in dessert apple must and its effect on the synthesis of fusel alcohols and esters in cider were established by instrumental analysis. The amino acid profile was performed in nine apple musts. Two apple musts with high (>150 mg/L) and low (<75 mg/L) nitrogen content, and four enological yeast strains, were used in cider fermentation. The aspartic acid, asparagine and glutamic acid amino acids were the majority in all the apple juices, representing 57.10% to 81.95%. These three amino acids provided a high consumption (>90%) during fermentation in all the ciders. Principal component analysis (PCA) explained 81.42% of data variability and the separation of three groups for the analyzed samples was verified. The ciders manufactured with low nitrogen content showed sluggish fermentation and around 50% less content of volatile compounds (independent of the yeast strain used), which were mainly 3‐methyl‐1‐butanol (isoamyl alcohol) and esters. However, in the presence of amino acids (asparagine, aspartic acid, glutamic acid and alanine) there was a greater differentiation between the yeasts in the production of fusel alcohols and ethyl esters. High contents of these aminoacids in dessert apple musts are essential for the production of fusel alcohols and most of esters by aromatic yeasts during cider fermentation.     

超高效液相色谱串联质谱法测定豆类食品中的游离神经递质类氨基酸

本文建立了超高效液相色谱串联三重四极杆质谱（UPLC-MS/MS）测定豆类食品中神经递质类氨基酸的分析方法。样品经超纯水超声提取,Zorbax SB-Aq RRHT色谱柱（3.0 mm×100 mm, 1.8 μm）分离,以甲醇和0.5 mmol/L乙酸铵溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.3 mL/min。采用电喷雾离子源（ESI）正离子模式扫描,多反应监测（MRM）模式进行检测,外标法定量。结果表明,神经递质类氨基酸在各自浓度范围内线性良好,相关系数（r）为0.991~0.999,检出限（LOD, S/N≥3）为2~8 μg/kg,定量限（LOQ, S/N≥10）为8~40 μg/kg;在3个不同浓度加标水平下的平均回收率为80.30%~109.97%,相对标准偏差（RSD, n=6）为0.12%~7.20%;稳定性、精密度、重复性在峰面积上的RSD值分别为4.74%~6.98%、0.63%~7.27%、0.46%~5.17%,说明该方法简单、高效、灵敏,适用于豆类食品的快速定量检测。