非转基因和转基因小麦中氨基酸含量的分析及比较

目的:对小麦中氨基酸分析的水解方法进行研究,比较非转基因和转基因小麦中氨基酸的含量。方法:样品用含0.1%巯基乙酸的盐酸溶液水解提取,样液经定容、过滤、浓缩、复溶、过膜后,用氨基酸分析仪测定,外标法定量。结果:应用含巯基乙酸的盐酸水解液对小麦样品进行水解的同时有效防止了含硫氨基酸(蛋氨酸和半胱氨酸)的氧化,相对氧化水解方法节省前处理时间,方法的回收率为93%~99%,相对标准偏差小于2.4%。非转基因和转基因小麦样品的17种氨基酸分析,氨基酸含量不存在显著性差异。结论:该方法准确快速、重现性好,适用于小麦中氨基酸含量分析的检测要求。     

黑龙江省2014年大豆转基因情况普查与分析报告

对黑龙江省大豆主产区绥化、齐齐哈尔、双鸭山和黑河4个地区不同市县田间种植的800个大豆样品和产区4个粮库80个大豆样品进行转基因成分普查和检测。结果表明:黑龙江省田间种植的大豆样品100%为非转基因大豆,因此黑龙江省大豆主产区保持了非转基因原产地种源;而粮库四的大豆样品被检出含有GTS40-3-2转化事件,转基因大豆样品数量占粮库样品总数量的12.5%,说明转基因大豆已经混入粮库,呼吁国家相关部门对此引起高度重视,进一步加强原产地保护。     

转基因与非转基因大豆营养及次生物质的比较

对转基因大豆与非转基因大豆种子中主要营养指标及次生代谢物方面进行差异检测。研究结果表明,转基因大豆中粗蛋白、粗脂肪、总酚、酚酸以及黄酮的含量都明显高于非转基因大豆。因此,通过这些研究有望对今后大豆的转基因育种及转基因食品的膳食提供基础数据。同时,对转基因大豆食品安全性评价和检测提供参考。     

改良LAMP法检测转基因作物

目的 建立简易的可视化环介导等温扩增(LAMP)检测转基因作物的方法。方法 通过一对特异的能识别一段正义链和一段反义链的内引物和一对链置换引物, 在Bst DNA聚合酶作用下, 以等温条件实现对外源转基因成分的扩增, 反应液和高浓度的显色液SYBR GREENⅠ同时置于特殊设计的反应管中, 反应后可实现闭管可视化检测。结果 对转基因作物中常见的外源基因元件胭脂碱合成酶终止子(T-NOS)和烟草花叶病毒35S启动子(P-CaMV35S)进行了LAMP检测。T-NOS LAMP对大米品系BT63, 玉米品系BT11, MON810, 大豆品系GTS40-3-2的检测结果呈阳性, P-CaMV35S LAMP对大米品系BT63, 玉米品系BT11, MON810, MON863, 大豆品系GTS40-3-2的检测结果呈阳性, 二者对非转基因大米, 玉米, 大豆的检测结果均呈阴性。上述结果表明, 本文中建立的T-NOS 和P-CaMV35S LAMP检测方法特异性高。另外, 通过对大豆品系GTS40-3-2模拟样品的检测, 证明T-NOS LAMP能检出转基因成分含量为0.5%的样品, P-CaMV35S LAMP能检出转基因成分含量为0.1%的样品, 检测灵敏度较高。结论 改良LAMP法灵敏度高, 特异性好, 能用于快速初筛转基因作物。     

抗草甘膦转基因大豆的营养学实质等同性分析

为评价抗草甘膦转基因大豆与非转基因大豆的实质等同性,对两种大豆的常规营养成分、氨基酸、脂肪酸和部分抗营养因子含量进行检测.结果表明,两种大豆的粗蛋白含量差异不大,除酪氨酸外,转基因大豆中17种氨基酸含量均低于非转基因大豆,其中,天冬氨酸、谷氨酸、精氨酸含量远低于非转基因大豆;转基因大豆的粗脂肪含量高于非转基因大豆,脂肪...     

荧光PCR和数字PCR法检测转基因DAS-44406-6品系大豆

目的：建立实时荧光聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测转基因DAS-44406-6品系大豆的定性检测方法和使用数字PCR检测转基因DAS-44406-6品系大豆的定量检测方法。方法：针对转基因DAS-44406-6大豆品系,进行5’-RACE,测定该品系转基因大豆外源片段与大豆染色体重组的边界序列,并根据该边界序列设计引物和探针。使用23 种非DAS-44406-6品系转基因植物作为阴性对照测试实时荧光PCR引物和探针的特异性,以DAS-44406-6品系样品制备6 个含量梯度的样品进行检测低限实验。使用数字PCR技术进行定量检测,并确定定量检测的低限。结果：建立的转基因DAS-44406-6大豆品系的实时荧光PCR特异性检测方法品系鉴定特异性较强,实时荧光PCR检测方法的检测低限在模板DNA浓度为100 ng/反应时,为0.01%的转基因大豆含量,约为16.6 个拷贝的DAS-44406-6基因组DNA;数字PCR检测方法的检测低限在模板DNA浓度为0.5 ng/反应、转基因大豆含量为1%时,相对标准偏差为0.7%。因此,建立的转基因DAS-44406-6大豆品系实时荧光PCR和数字PCR特异性检测方法符合转基因检测的要求。     

农业部检测表明:黑龙江省非转基因大豆生态环境保护良好

<正>近期,投资黑龙江农业的恒大粮油集团通过对我省大豆主产地绥化、齐齐哈尔、双鸭山和黑河四大地区不同市县田间种植的800个大豆样品进行转基因成分普查和检测,检测结果证明黑龙江省田间种植的大豆样品100%为非转基因大豆,表明黑龙江省大豆主产区保持了非转基因原产地种源。取样方案选择黑龙江省大豆主产地绥化、齐齐哈尔、双鸭山和黑河四大地区不同市县的大豆田,按种     

利用蛋白质SDS-PAGE电泳方法检测转基因大豆的初步研究

为建立利用蛋白质检测转基因大豆的较稳定的新方法,采用SDS-PAGE蛋白质电泳方法时转基因大豆和非转基因大豆进行检测,初步研究发现转基因大豆中大约45 ku蛋白带的表达量明显强于非转基因大豆中相对应的蛋白带,通过固定转基因大豆的上样量,逐渐增加非转基因大豆的上样量进一步验证了结果.以国内不同品种的非转基因大豆进行SDS-PAGE蛋白电泳检测,初步排除了结果偶然性的产生.     

大豆转基因成分测定能力验证结果与分析

目的进一步提高实验室对转基因成分的检测水平,提升检验人员的专业素养。方法根据能力验证计划作业指导书中推荐使用的GB/T 19495.5-2004《转基因产品检测核酸定量PCR检测方法》中提供的3种方法分别对样品进行检测。结果样品013和083为GTS-40-3-2品系转基因大豆,142为非转基因大豆。能力验证获得满意结果。结论转基因成分检测应重点关注DNA提取效率和实验过程质控等因素。     

多品系混杂转基因大豆样品中复合品系的检测

摘要：目的 确认一份多品系混杂转基因大豆样品中是否含有复合性状转基因大豆。方法 采用实时荧光定性PCR方法对实验室留存的一份转基因初筛阳性大豆样品进行品系筛查检测,后分别采用单粒多靶点筛查检测和清洗后单粒多靶点筛查检测方法进行复合性状品系的确认。结果 经鉴定,该大豆样品中混杂了5种转基因大豆品系,检出复合性状转基因大豆为MON87708×MON89788品系,该品系为中国未经批准进口的转基因大豆品系。结论 鉴于目前缺乏完整的检测技术体系和技术标准,这种多品系混杂样品中掺杂未批准复合性状品系的行为非常具有隐蔽性和欺骗性,国内的农业安全监管部门和海关检疫部门都应该对此高度重视。     

实时荧光定性聚合酶链式反应标准方法检测转基因产品的验证及应用

目的验证实验室大豆、玉米和水稻及其制品转基因检测方法,并应用于实际样品检测。方法根据GB 19495.4-2018《转基因产品检测实时荧光定性聚合酶链式反应(PCR)检测方法》要求对无转基因标识的样品进行转基因成分检测。结果方法验证满意。40批次样品(大豆、玉米和水稻及其制品)中发现1批次的转基因成分检出,检出率为2.5%。结论市场中绝大部分未标示转基因成分的大豆、玉米和水稻及其制品确实未检出转基因成分,仅有极少数产品含有转基因成分,但未进行有效标识。     

2011年深圳转基因大豆及其制品的市场占有率和标识情况调查

目的 了解深圳市场转基因大豆及其制品的市场占有率和标识情况,为政府监管转基因大豆提供科学依据.方法 按照监测计划,定期在深圳市场随机抽取大豆及其制品,采用实时荧光PCR方法对其进行定性和定量检测,评估深圳市场转基因大豆的市场占有率和标识情况,并与2006年的监测结果进行比较和分析.结果 2011年共监测样品106份,检出2份转基因阳性样品,市场占有率为1.89％;两份阳性样品中转基因大豆的含量分别为0.93％和0.51％,定量检出限为0.1％.所有检出转基因阳性样品均没有转基因标识;与2006年结果比较,转基因大豆及其制品的市场占有率以及标识情况差异均无统计学意义.结论 目前深圳市场转基因大豆及其制品(食用油脂除外)的市场占有率还很低,并且5年来未发现明显上升;转基因产品标识的管理还有待加强,政府应该加大这方面的执法力度.     

转基因大豆MON89788实时荧光PCR检测方法的建立

为实现转基因大豆MON89788的标识管理,针对转基因大豆MON89788的品系特异性序列设计引物和TaqMan探针,建立转基因大豆MON89788实时荧光聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行检测。结果显示：建立的转基因大豆MON89788实时荧光PCR检测方法能扩增出127 bp的产物,特异性强,灵敏度达到0.1%,约为40 个单倍体基因组拷贝,检测重复性好,可成功应用于实际样品检测。因此,建立的转基因大豆MON89788实时荧光PCR检测方法可以应用于转基因大豆MON89788大豆及其制品的检测。     

PCR方法对转基因食品定性检测的研究

转基因食品的检测一般基于聚合酶链式反应（PCR）方法，对35S启动子和NOS终止子进行筛选。本实验以转基因大豆、玉米（购自Fluka）为参照物，转基因含量为0％，1％，2％，5％的样品均获得正确识别。以上介绍的方法能对转基因原材料及加工成品实施高精度、高灵敏的检测。     

ELISA方法定量检测转基因大豆及其产品的研究

以美国、阿根廷、巴西转基因大豆等为材料,建立了ELISA法定量检测抗草甘膦转基因大豆CP4 EP- SPS蛋白的方法,成功检测出美国转基因大豆含量为3.768%、阿根廷转基因大豆含量为2.820%、巴西转基因大含量为1.920%,转基因豆粉、转基因豆粕和中国大豆未检测到CP4 EPSPS蛋白。此方法具有简便、快速、稳定等优点,其检测灵敏度可达到0.0075%,并且稳定性良好,为抗草甘膦转基因大豆中CP4 EPSPS蛋白的定量检测提供了有效的手段。     

几种食品中色氨酸含量的测定

<正> 色氨酸是人类必需氨基酸之一,在进行营养研究和对食物蛋白质作营养评价时,都需要对样品中的色氨酸含量作准确的测定。 在氨基酸分析时,进行样品预处理过程中通常采用的盐酸水解法会使色氨酸全部遭到破坏,而以往采用碱水解法即以淀粉为保护剂,用氢氧化钠溶液进行碱水解处理样品时,又往往出现色氨酸测定的回收率低,分析数据精密度差等问题。 近年来Bernardo Lucas和Angela Sotelo在对色氨酸测定进行研究中提出含5％     

基于近红外光谱结合化学计量学的转基因大豆产地判别

为探求无损、快速和准确判别转基因大豆产地的方法,该研究选取阿根廷转基因大豆、巴西转基因大豆、美国转基因大豆和加拿大转基因大豆样品共260份,将近红外光谱结合化学计量学对4种转基因大豆进行判别分析。利用近红外光谱仪采集260份样品的原始光谱,采用平滑+标准正态变量变换(standard normal variate transformation, SNV)方法对近红外光谱预处理。选取阿根廷转基因大豆、巴西转基因大豆、美国转基因大豆和加拿大转基因大豆样品共240份参与建模,Kennard-Stone(KS)算法划分训练集和预测集,主成分分析法(principal component analysis, PCA)、偏最小二乘判别分析(partial least squares-discriminate analysis, PLS-DA)和误差反向传播人工神经网络(back-propagation artificial neural network, BP-ANN)对预处理后的光谱数据进行分析。试验结果表明平滑+SNV的预处理方法能有效减少近红外光谱的噪音;PCA方法能判别出4种转基因大豆中的...     

16种转基因大豆品系的实时荧光PCR法筛查

采用实时荧光PCR法,对河北主要进口转基因大豆口岸秦皇岛港及京唐港的45批次转基因大豆进行了16种转基因大豆品系筛查。结果发现,在45批样品中均检测到GTS-40-3-2品系;30批样品检测到MON89788品系,占所检测样品66.7%;14批样品检测到A2704-12品系,占所检测样品31.1%;2批样品检测到MON87701品系,占所检测样品4.4%;1批样品检测到MON87701×MON89788品系,占所检测样品2.2%;其他品系在所有45批样品中均未检测到。通过对河北主要进口口岸转基因大豆品系方面摸底筛查,为我国转基因大豆品系进口管控提供了数据支持。     

转基因大豆DAS44406-6多重荧光定量PCR检测方法的建立

本文针对大豆内源基因Lectin和转基因大豆DAS44406-6品系的5'端插入位点序列,设计特异性引物及探针,建立同时检测转基因大豆DAS44406-6品系和大豆内源基因Lectin的多重荧光定量PCR方法,并运用15种转基因大豆、3种转基因玉米、1种转基因油菜、1种转基因水稻和非转基因大豆对该方法进行特异性评价,并分析该方法的灵敏度和稳定性。结果显示,该方法能准确从20种转基因样品和1种非转基因样品中检出靶目标,检测结果与待检样品信息一致,表明本方法具有良好的特异性;灵敏度高达0.01%;重复性实验表明DAS81419品系4种含量、9次重复反应Ct值的标准偏差介于0.050~0.222,相对标准偏差介于0.169%~0.677%,均在可接受范围内。该方法特异性强、灵敏度高、稳定性强,适用于各口岸实验室进行转基因大豆DAS44406-6的快速、准确的检测。     

2012~2015年深圳市售转基因大豆及其产品的监测结果分析

目的 了解2012~2015年深圳市售转基因大豆及其制品的市场占有率、标识情况及发展态势。方法 在深圳各大连锁超市随机抽取大豆及其制品, 采用试剂盒法提取样品DNA, 采用实时荧光PCR的方法扩增大豆内源基因Lectin, 并扩增外源基因CaMV35S启动子和NOS终止子对样品进行定性筛查, 分析不同类别、不同年份样品的阳性率差异及变化趋势。结果 4年监测大豆及豆制品共283份, 检出阳性样品19份,总体阳性率为6.71%; 大豆样品的转基因阳性率为0; 不同年份的豆制品转基因阳性率之间存在显著性差异且有逐年上升的趋势; 所有检出的阳性样品均未按照规定标识。结论 目前深圳市场转基因大豆及其制品(大豆油除外)的市场占有率还很低, 但豆制品转基因阳性率有逐年上升的趋势。政府应该加强转基因产品的标识管理, 并加强转基因农产品的监管。