共固定化乳糖酶和葡萄糖异构酶的研究

研究了明胶-戊二醛法在共固定化乳糖酶和葡萄糖异构酶中的应用,并与开孔明胶法、卡拉胶包埋法进行了比较。进一步研究pH、明胶质量浓度、前交联中戊二醛的体积分数和二次交联的时间对明胶-戊二醛法共固定乳糖酶和葡萄糖异构酶的影响。结果表明,共固定化的最佳条件为:pH8.6,明胶浓度27%（w/w）,前交联戊二醛体积分数0.15%和二次交联时间10min。在此条件下共固定化,乳糖酶的活力回收率为30.85%,葡萄糖异构酶的活力回收率为83.48%。共固定化乳糖酶和葡萄糖异构酶用于制备乳果糖,间歇操作6批次后酶活力仍然保持在初始活力的75%以上。      

葡萄糖淀粉酶和异构酶共固定化的改进

Ｔａｋｅｄａ和Ｈｉｚｕｋｕｒｉ（淀粉科学，３６，１６９～１７６（１９８９）曾报道过，葡萄糖淀粉酶（ＧＡ）与菌丝体葡萄糖异构酶（ＧＩ）共同固定化以改善异构糖浆的产率，共同固定化酶是在ＧＡ／ＧＩ＝１：１（Ｗ／Ｗ）的高比率条件下，将适当纯化了ＧＡ与ＧＩ相互变联制备而成的，使用该酶，在５５℃，ｐＨ７．３空间速率（ＳＶ），０．３ｈ＾－１的最适条件下，由３０％的液化淀粉（平均聚合度（Ｄ．ｐ．）＝３．８）连续生     

固定化乳糖酶的研究

用明胶作为固定化乳糖酶的载体，研究比较载体的用量、交联剂的浓度，用酶量、制备的pH值。结果表明，选择150g／L质量浓度的明胶为载体，体积分数为0．5％的戊二醛为交联剂，用酶量为0．5g／L，在pH值为7．2．混和搅拌时间为3min的条件下制备固定化果胶酶．其酶活力回收率可达78．12％，重复回收使用7次后，酶活力还可以保留75％以上，是乳糖酶固定化的一种较好的方法。     

浅析固定化葡萄糖异构酶影响因素

在生产实践中总结影响固定化葡萄糖异构酶对葡萄糖浆转化作用,并对其影响因素进行了研究,为固定化葡萄糖异构酶在果糖行业生产中的优化应用提供了理论依据,同时也对生产中的异构工序高效能工作进行了新的尝试。     

固定化葡萄糖异构酶的微波活化及其性质研究

为寻求微波处理对酶进行活化改性的可行性,以固定化葡萄糖异构酶为对象,研究微波处理对其活性、酶学性质及动力学参数等方面的影响。研究结果表明:微波处理对固定化葡萄糖异构酶具有活化作用,在微波功率400 W,温度70℃时,固定化葡萄糖异构酶活性增强最明显,此时固定化酶的酶活力为156.13 U/g,比水浴对照高24.50%;同时微波处理降低固定化葡萄糖异构酶Km,增大Vmax,但对其最适p H和最适金属离子浓度几乎没有影响;此外,微波处理在一定程度上降低固定化葡萄糖异构酶的最适反应温度及高温下的热稳定性、操作稳定性,但这些参数依旧较为理想,能够满足实际生产需求。     

磁性壳聚糖复合微球固定化葡萄糖异构酶制备及性能研究

通过化学共沉淀法合成纳米级Fe3O4粒子,并将其作为磁核,采用乳化交联法制备磁性壳聚糖复合微球,用SEM、FT-IR及激光粒度仪对微球结构进行表征。以磁性复合微球为载体,对葡萄糖异构酶进行固定化,并对固定化酶的参数、性质以及动力学参数进行研究。试验结果表明:磁性复合微球呈圆球形,具有较好的磁性。在加酶量12 mg/mL、戊二醛体积分数2%、交联时间2 h、振荡时间6 h条件下可以得到较佳的固定化效果,其酶活回收率达84.7%。对固定化酶性质的测定结果显示,最适Mg2+浓度0.01 mol/L,最适Co2+浓度0.003 mol/L,最适pH 7.2,最适温度75℃。通过计算其半衰期为40 d。对动力学参数的测定结果是:固定化酶的米氏常数为9.720,游离酶的米氏常数为8.190。     

固定化葡萄糖异构酶活化条件对其酶活的影响

固定化葡萄糖异构酶在使用前需先进行活化,从而使酶发挥其最佳催化功效。本文从糖液浓度、温度、pH、活化时间和金属离子五个方面研究了活化条件对GENSWEETTMIGI-SA固定化葡萄糖异构酶酶活的影响。该酶的最适活化条件为:葡萄糖液浓度60%、温度55℃、pH7.5、时间4h。经此条件活化之后,其酶活达815U/g,与常规活化条件相比,酶活提高了40%以上。固定化葡萄糖异构酶活化时不宜加入Mg2+、Co2+、Mn2+和Zn2+。      

纳米花固定化葡萄糖异构酶的制备及性能分析

该研究采用共沉淀法制备了葡萄糖异构酶（Glucose Isomerase,GI）纳米花,对固定化条件进行了优化,同时对纳米花固定化酶的形态特征以及酶学性质进行了探究。结果表明,40 μL酶液中加入9 mL、pH值7.4的PBS缓冲液后与30 μL CuSO4混合,在35 ℃条件下静置反应18 h,制得的纳米花固定化葡萄糖异构酶（Glucose Isomerase @ Nano flowers,GI@NFs）的酶活回收率高达183.06%。SEM表征结果显示GI@NFs有完整的纳米花结构,傅里叶红外光谱显示GI@NFs具有酶和PO43-的特征吸收,X-射线衍射结果进一步证明其载体为Cu3(PO4)2。酶学性质研究发现,GI@NFs的最适反应温度为60 ℃,比自由酶的提高了10 ℃;最适反应pH值为8,比游离酶的最适pH更高;GI@NFs的温度稳定性和pH稳定性均比自由酶的明显提高;固定化酶被循环使用8次,其酶活力仍保持最初活力的60.32%。实验结果表明,纳米花结构提高了葡萄糖异构酶的酶活,表现出较好的循环性能和稳定性,具有一定的应用价值。     

葡萄糖异构酶固定化细胞的制备方法优化及应用

本研究比较了壳聚糖微球法、聚乙烯醇-海藻酸钠包埋法、微晶纤维素法及壳聚糖絮凝-戊二醛交联法对含有葡萄糖异构酶细胞的固定化效果,发现壳聚糖絮凝-戊二醛交联法效果最好。最佳固定化条件为:壳聚糖浓度为0.015%(m/v),戊二醛浓度为0.05%(v/v),交联时间为3 h。采用该方法制备的固定化细胞的酶活为2579 U·g-1,酶活回收率为70.5%,机械强度为1797 g。在分批转化方面,固定化细胞在70℃下重复使用8批次后,转化率仍保持在42.1%以上。此外,固定化细胞在连续柱式转化反应器中连续转化19天,转化得到了约5.7 kg果糖。     

固定化乳糖酶研究进展

乳糖酶水解乳糖为半乳糖和葡萄糖,可缓解乳糖不耐症.固定化乳糖酶极易与底物分离,可较长时间进行反复分批反应和装柱反应,提高酶稳定性,且利于过程控制,产物中无酶的残留,能简化提纯工艺;固定化乳糖酶与游离酶相比更适合多酶反应,使用效率更高,成本降低.文中阐述了国内外关于固定化乳糖酶载体、方法及其性质与应用等方面的研究进展.     

乳糖酶固定化研究进展

乳糖酶是一种重要的食品添加剂,具有催化β-1,4糖苷键水解和转糖苷作用,能水解乳糖和生产低聚半乳糖,在乳品工业中有重要的研究应用价值。受复杂反应体系、反应条件的影响,乳糖酶在实际应用中稳定性和活性相对较差,制约了乳糖酶的应用。针对游离乳糖酶在工业应用中的不足,固定化乳糖酶技术应运而生。传统乳糖酶固定化技术仅侧重于酶的固定化,随着新材料、生物工程技术的发展,新兴酶固定化载体及技术可以很好实现乳糖酶固定化,提升了乳糖酶在乳品工业中的应用,降低了低聚半乳糖和无乳糖牛奶的生产成本。本文对乳糖酶的特性、传统固定化技术、新兴固定化技术、固定化载体材料、固定化策略进行简要综述,并展望了乳糖酶固定化的发展前景,旨在为乳糖酶的固定化研究提供借鉴。     

乳糖酶的固定化及其特性的研究

本文研究了用卡拉胶包埋法制备固定化脆壁酵母乳糖酶的方法以及影响制备的因素。此法具有包埋酶活力回收率高,方法简便等优点。比较研究了固定化乳糖酶和非固定化乳糖酶的一些生物化学特性。其中固定化酶的最适pH、最适温度和最适水解乳糖浓度与非固定化酶相比无显著性改变。对此固定化酶水解乳清、脱脂乳和全乳中乳糖的研究表明,它能有效地水解这些溶液中的乳糖;在45℃下,它水解这些溶液中乳糖的半衰期均在169～200h之间。     

应用固定化乳糖酶生产乳清糖浆的研究

本课题将来源于脆壁酵母的乳糖酶用食用卡拉胶固定化后,装填于充填床反应器中处理乳清,生产乳清糖浆,试验结果表明充填床反应器在10℃条件下运行,在第25天和42天时对固定化乳糖酶进行再生处理,可安全运行50日左右,符合工业生产要求,乳糖含量为15％的乳清以21/1·min速度通过反应器循环6～7次,能够生产出乳糖水解率在80％以上的乳清糖浆,符合商业要求。     

乳糖酶的应用及固定化

乳糖酶是应用范围较广的一种酶，尤其在食品行业应用较多。本文对乳糖酶的性质、应用及固定化方面的研究进行了综述。     

乳糖酶在海藻酸钙上的固定化研究

以海藻酸钙为载体、戊二醛为交联剂,对乳糖酶进行固定化。研究了戊二醛浓度、给酶量及温度对酶固定化的影响,并对固定化酶酶促反应的最适pH、温度等进行了测定。结果表明,0.3%戊二醛,4%的海藻酸钠,在4℃条件下对30%的乳糖酶的固定化率较高。酶促反应特性测定结果表明,固定化后乳糖酶的稳定性增强,最适温度范围较非固定化乳糖酶大,最适pH不变。      

固定化乳糖酶水解乳清粉合成低聚半乳糖的研究

以脱盐乳清粉为原料,研究了用固定化乳糖酶水解乳清粉合成GOS的工艺条件。试验结果表明,反应时间、乳清粉浓度、温度、加酶量及pH对GOS的合成均能产生不同程度的影响,其中乳清粉浓度和反应时间影响较大,pH影响较小。通过正交试验优化出的乳糖酶水解乳清粉催化合成GOS的最佳工艺条件为:反应体系的pH5.0、乳清粉浓度50%、乳糖酶用量40U/g、温度55℃、反应时间为36h。在此条件下GOS的合成率为29.78%。     

海藻酸钠卡拉胶固定化乳糖酶的条件优化

探讨了乳糖酶在海藻酸钠和卡拉胶中的固定化技术,并对影响固定化酶的酶活回收率和固定化酶胶粒机械强度的因素进行了研究。结果表明,固定化酶的质量受海藻酸钠浓度、卡拉胶浓度、固定化酶量的影响,通过采用三因素二次回归旋转设计得到优化条件为:海藻酸钠浓度2.0%,卡拉胶浓度0.81%,乳糖酶的浓度0.23%,由此得到的固定化酶的酶活回收率可达89.19%,固定化酶胶粒的机械强度为74.74%。     

乳糖酶和酿酒酵母的共固定化及其在乳清发酵中的应用

利用凹凸棒土的强吸附作用,首先将乳糖酶吸附于凹凸棒土上,再采用壳聚糖溶液包埋的方法制成乳糖酶与酿酒酵母细胞的共固定化凝胶颗粒。实验结果表明,凹凸棒土与壳聚糖的适宜比例为5：1,加酶量为300u儋凹凸棒土,室温下吸附时间为4h;所制得的共固定化酶-酵母细胞发酵乳糖的适宜pH值和温度分别为6．0和32℃,乳糖浓度13％～15％;在适宜的发酵条件下,以20％的乳清（乳糖含量为13．42％）为底物发酵30h,酒精浓度达8．3％（v／v）,乳糖转化率达93．2％。