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采用甲苯自溶法、冻融法、SDS抽提法3种方法从酵母中提取蔗糖酶,经质量分数50%的乙醇分级沉淀、Mono Q阴离子交换柱层析纯化后,制得高纯度的酵母蔗糖酶。比较了上述3种提取方法并对该酶的部分性质进行了研究。纯化的酶经等电聚焦测定,等电点为5.6,SDS-PAGE鉴定其相对分子质量为60kD。以蔗糖为底物测得酵母蔗糖酶的表观米氏常数Km为0.013mol/L。结果显示3种提取方法各有优劣,冻融法和SDS抽提法的提取效率远高于传统的甲苯自溶法。其中SDS抽提法的效率最高,加之其操作简便,更适合于酵母蔗糖酶大规模的制备提取。 相似文献
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《中国食品添加剂》2016,(6)
目的:本研究主要是为了探讨岩藻黄素的提取纯化方法及其对不同来源糖苷酶的抑制作用。方法:本研究以大连产海带为原材料,通过酶解辅助提取法及硅胶柱层析柱法制备岩藻黄素,并测定其对酵母来源的α-葡萄糖苷酶与大鼠肠来源的蔗糖酶和麦芽糖酶抑制作用。结果:通过单因素实验与正交实验确定了岩藻黄素最佳的酶解制备条件:纤维素酶和果胶酶添加量分别为7.5%和3%(酶容积/海带干重质量),酶解pH为5.0,酶解温度为50.0℃,酶解时间1.5 h,提取溶剂为80%乙醇,液料比为1∶15,提取温度为55℃,提取时间为24 h,岩藻黄素得率为1.471±0.063 mg/g(以干重计算)。经过大量提取、收集、硅胶柱层析纯化后的岩藻黄素纯度达到了92.33%,且其对酵母来源的α-葡萄糖苷酶与大鼠肠来源的蔗糖酶、麦芽糖酶均具有较弱的抑制活性,说明岩藻黄素的虽具有体外降糖作用,但是效果不显著。 相似文献
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采用SDS抽提法从啤酒酵母中提取蔗糖酶,通过正交实验对SDS浓度、提取时间、pH、提取温度等条件进行优化,确定了最佳提取工艺条件是:SDS浓度0.6mmol/L,温度50℃,时间10h,pH5.0。制得的粗酶经醇沉后,采用Q-琼脂糖凝胶FF阴离子交换层析方法得到纯化的酵母蔗糖酶,纯化倍数为16.8倍,并对蔗糖酶的酶性质进行了研究。 相似文献
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通过比较不同的研磨、洗涤、裂解和沉淀方法,成功获得一种适于土壤真菌DNA提取的方法.结果表明,采用石英砂研磨、TENP和PBS联合洗涤、SDS高盐裂解、异丙醇沉淀等一系列步骤,所获取的土壤微生物DNA质量最佳.该试验方法可以直接从土壤中提取微生物基因组,尤其适用于土壤病原真菌的提取,所得DNA完全可以直接用于酶切和PCR扩增.该方法高效、价廉、操作简单,对改进土壤病原菌生态的研究方法具有重要价值. 相似文献
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采用顶空固相微萃取-气相质谱联用(SPME-GC-MS)技术检测西兰花挥发性成分,应用自动质谱退卷积定性系统(AMDIS)进行数据分析,并结合保留指数进行定性。首先对SPME萃取头进行筛选,然后通过剪切、常温研磨、低温研磨和灭酶研磨4种样品制备方式,考察西兰花内源酶对其主要挥发性物质形成的影响。结果显示:65μm PDMS/DVB在萃取西兰花挥发性成分的数量及种类上优于75μm CAR/PDMS和100μm PDMS。剪切组主要成分为酯类、醇类和硫化物,分别占检出成分的42.11%,41.22%,3.53%;常温研磨组为醇类、硫化物和酯类,分别占51.58%,27.21%,16.19%;低温研磨组为醛类、醇类和硫化物,分别占79.81%,3.5%,3.44%;灭酶研磨组为醛类、呋喃,分别占19.91%和6.96%,结果表明由于内源酶充分作用,所以常温研磨下形成醛、醇、酯及硫化物等西兰花主要成分种类最多,其次是剪切组;低温和加热抑制了酶的作用,使低温研磨和灭酶研磨组的挥发性成分种类受限,特别是灭酶过程挥发性损失较大。此外,二甲基二硫含量,常温研磨低温研磨剪切灭酶研磨;二甲基三硫含量,常温研磨低温研磨,剪切组和灭酶研磨未检出(均P0.01),说明西兰花中二甲基二硫/三硫主要是含硫氨基酸等前体物质通过酶催化作用产生。 相似文献
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酿酒酵母中的蔗糖转换酶基因(SUC2)研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
蔗糖转换酶基因(SUC2)编码蔗糖转换酶(Invertase),通过降解酵母细胞外的蔗糖成果糖和葡萄糖来提供酵母生长所需的碳源,在以蔗糖为主要碳源的培养条件下,蔗糖转换酶对于酵母生长必不可少.因此研究蔗糖转换酶基因序列、转录、调控等对酵母蔗糖代谢具有重要意义.蔗糖转换酶基因的表达受葡萄糖浓度、氧气和其在染色体上的位置等因素的影响.本文就葡萄糖浓度对SUC2表达的影响以及葡萄糖浓度对其表达调控的机制进行了综述,并展望了该基因及蔗糖转换酶在今后的应用和研究趋势. 相似文献
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菠菜叶中叶绿素提取工艺研究 总被引:8,自引:0,他引:8
以菠菜叶为测试材料,运用不同的提取方法,对菠菜样品中的叶绿素的提取量进行了研究。在考察了不同提取剂、提取剂用量、提取时间、提取剂中各成分的配比、乙醇质量分数等各单因素对提取效果的影响的基础上,得出用丙酮研磨法提取叶绿素的效率比石油醚一乙醇萃取法高,乙醇研磨法提取叶绿素的效果明显不如丙酮,用石油醚研磨法的效果最差。通过正交试验得出叶绿素的最佳提取工艺条件为:提取剂用量10ml,混合溶剂中各成分配比2:1,乙醇质量分数50%,提取时间10min。同时,对提取时使用单一溶剂和混合溶剂对叶绿体色素提取结果的影响也进行了探讨。 相似文献
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将谷氨酸钠、5′-磷酸鸟苷按1:1混合后,添加柠檬酸,然后用硬脂酸包覆,能够有效地保护核苷酸5′-位上的磷酸基团。其中,(5′-磷酸鸟苷+谷氨酸钠):柠檬酸:硬脂酸=30.3:9.1:60.6时,5′-磷酸鸟苷的残存率可达93%。 相似文献
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就皮化材料与清洁化制革的关系、目前传统制革工艺中存在的严重污染问题及针对这些问题近年来采取的新的方法进行了探讨,指出清洁化是我国制革行业的必由之路,清洁化制革工艺与皮化材料的关系非常密切,只有研发出相应新型的、高吸收的、功能型的、易降解型的各类化工材料,才合乎清洁化生产的要求。在制革工艺中采用生物酶制剂辅助浸水脱脂、无硫脱毛与无灰浸碱工艺、无铵脱灰/碱等改造传统工艺,减少污染;采取高吸收铬鞣、无铬或少铬鞣制,提高铬的吸收率或克服铬鞣的弊端;在染整中,合成并采用助剂辅助染料、复鞣剂和加脂剂等的吸收与结合。这几方面通过集成应用,方可减轻制革的污染,实现清洁化生产。同时,就皮革固废物的利用及水的循环使用问题提出些看法。 相似文献
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目的 分析食用油中酸价测定的不确定度来源并建立不确定度评定方法, 为检验数据的可靠性和准确性提供参考。方法 依据GB 5009.229-2016《食品安全国家标准 食品中酸价的测定》和JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》建立数学模型, 计算各变量的不确定度, 最终计算扩展不确定度。结果 结果显示, 样品中酸价的扩展不确定度为U=1.764×10?3 mg/g, 样品中酸价含量为(0.16±0.002) mg/g(置信水平95%, 包含因子k=2)。结论 在测定过程中, 测量重复性对总的不确定度影响最大, 其次是滴定管的体积。 相似文献
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有梭织机稀密路织疵成因分析 总被引:4,自引:1,他引:3
从有梭织机打纬过程中织机构件的位置和状况对纬纱之间距离的影响出发,推导出纬向密度计算公式,直观分析了影响纬向密度的各种因素,提出了为减少稀密路织疵在国产老织机上采取的几项改进措施:采用弹簧回综、机外送经、电子驱动、导布辊加压等装置。 相似文献
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The article gives a brief account of the main streamlines and scope of scientific activities of Department of Preventive Medicine of RAMS for the recent 10 years. 相似文献
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脂肪酸聚甘油酯(Polyglycerol esters of fatty acids,简写为PGE)在常温下有半固态和固态两种存在状态,本文通过对分别添加这两种PGE的软冰淇淋基料进行粘度、pH、粒径分析和垂直扫描分散稳定性分析(Turbiscan),发现半固态PGE的添加量为0.2%时,乳状液的粘度最低,粒径最小,稳定性最好;固态PGE的添加量为0.4%时.乳状液的粘度最低,粒径最小.通过比较发现,两种PGE对基料的影响有很大差别:半固态PGE能使乳状液的粒子更小,并能有效延长乳状液的稳定性;而固态PGE由于其熔点较高,可以促进脂肪结晶. 相似文献