发酵液中γ-聚谷氨酸含量快速测定方法研究

通过γ-聚谷氨酸（γ-PGA）溶液与十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）的氢氧化钠溶液反应形成混悬液,配制不同浓度的γ-PGA标准品溶液,与CTAB溶液形成反应体系并进行全波长扫描,绘制不同波长下标准曲线,并对CTAB试剂浓度、反应时间和温度对反应体系的影响分别进行了比较优化。研究结果为：CTAB比浊法最佳检测波长为250nm,CTAB溶液质量浓度为5g/L,反应温度为环境温度,络合时间为3min,回归线性方程y=0.0335x-0.1519,R2=0.9995,发酵液中加标平均回收率为106.6%,平均RSD值为2.56%。应用比浊法测定γ-PGA的含量快速、简洁、重现性好,可用于发酵液中γ-PGA浓度的检测。     

酶法快速检测发酵液中的γ-聚谷氨酸浓度

提出了酶法快速检测发酵液中γ-聚谷氨酸(γ-PGA)浓度的方法,并与传统的HPLC法进行了比较,结果一致.所确定的两参数γ-PGA计算式很好反映了测定过程中γ-PGA随时间的变化规律,从而使检测时间由传统的HPLC法的27h缩短为2-5h.     

聚γ-谷氨酸的分离提纯

采用乙醇沉淀、酸沉淀、透析等方法从纳豆中分离提纯了γ- PGA。 15 0g纳豆中分离提纯出 0 . 5 92 5 gγ -PGA ,提取率 0 . 39% ,纯度 75 %。     

γ-聚谷氨酸发酵液预处理及提取纯化工艺

采用醇析和盐析结合的方法提取γ-PGA粗品。最佳稀释倍数为2倍,硅藻土和粉末活性炭（颗粒活性炭）用量分别定为10g/L和10g/L（15g/L）,在室温下抽滤最佳pH为3.0。用5%NaCl和一倍体积乙醇提取γ-PGA,经过冷冻真空干燥可得到白色颗粒状γ-PGA粗品,提取率为95.21%,纯度可达96.89%,大大降低了乙醇用量,节约了生产成本。      

γ-聚谷氨酸发酵液预处理及提取纯化工艺

采用醇析和盐析结合的方法提取γ-PGA粗品。最佳稀释倍数为2倍,硅藻土和粉末活性炭(颗粒活性炭)用量分别定为10g/L和10g/L(15g/L),在室温下抽滤最佳pH为3.0。用5%NaCl和一倍体积乙醇提取γ-PGA,经过冷冻真空干燥可得到白色颗粒状γ-PGA粗品,提取率为95.21%,纯度可达96.89%,大大降低了乙醇用量,节约了生产成本。     

γ-聚谷氨酸提取条件的优化

目的:通过实验对γ-聚谷氨酸提取条件进行优化得到一组产量高的最优条件。方法:利用枯草芽孢杆菌通过发酵生产得到含有γ-聚谷氨酸的发酵液,再以异丙醇作为沉淀剂提取发酵液中的产物。通过响应曲面分析方法设计三因素三水平Box-Behnken实验优化提取条件。最后利用薄层色谱和红外光谱对产物进行结构鉴定。结果:利用Design-Expert软件处理数据并优化得到一组最佳提取条件:异丙醇的添加倍数为4.5,沉淀温度为-5℃,沉淀时间为23h。在最优条件下得到γ-聚谷氨酸的产量为0.1796g/10mL,预测精确度达99%。结论:在低温下用异丙醇沉淀发酵液中的产物是一种有效可行的提取γ-聚谷氨酸的方法。      

γ-聚谷氨酸提取条件的优化

目的:通过实验对γ-聚谷氨酸提取条件进行优化得到一组产量高的最优条件。方法:利用枯草芽孢杆菌通过发酵生产得到含有γ-聚谷氨酸的发酵液,再以异丙醇作为沉淀剂提取发酵液中的产物。通过响应曲面分析方法设计三因素三水平Box-Behnken实验优化提取条件。最后利用薄层色谱和红外光谱对产物进行结构鉴定。结果:利用Design-Expert软件处理数据并优化得到一组最佳提取条件:异丙醇的添加倍数为4.5,沉淀温度为-5℃,沉淀时间为23h。在最优条件下得到γ-聚谷氨酸的产量为0.1796g/10mL,预测精确度达99%。结论:在低温下用异丙醇沉淀发酵液中的产物是一种有效可行的提取γ-聚谷氨酸的方法。     

枯草芽孢杆菌发酵生产聚-γ-谷氨酸的条件优化

为提高聚-γ-谷氨酸(poly-γ-glutamic acid,γ-PGA)产量,降低其生产成本,利用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),采用单因素试验及正交试验优化法,探究培养基组分及发酵条件对γ-PGA发酵产量的影响。结果表明:最佳培养基组成和培养条件为:蔗糖5%,谷氨酸钠6%,氯化铵0.3%,磷酸氢二钾2%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸锰0.003%,p H 7.0,接种量为3%,发酵温度33℃,发酵时间48 h。与未优化前γ-PGA产量(15.8 g/L)相比,经优化后的产量达20.8 g/L,提高了31.65%。     

聚-γ-谷氨酸降解特性的初步研究

利用高效液相色谱仪,测量聚-γ-谷氨酸(γ-PGA)在热、酸、碱、超声波及微生物处理条件下的降解量,以及降解产物谷氨酸的生成量,研究γ-PGA的降解特性.试验表明:γ-PGA可在热、酸、碱、超声波条件下发生降解.在热、酸、超声波水解过程中,从γ-PGA分子内部任何位置随机断裂酰胺键.在碱性条件下,γ-PGA酰胺键的水解从分子的末端开始较为容易.从土壤中分离的γ-PGA生产菌株B.subtilis CCTCC202048能降解γ-PGA,通过PCR扩增从该菌株中得到了γ-PGA降解酶基因.     

黏度法测定γ-聚谷氨酸含量

采用乌氏黏度计测定了不同浓度下γ-聚谷氨酸稀溶液的黏度,由哈金斯(Huggins)方程和克拉默(Kraemer)方程结合外推法求得室温下γ-聚谷氨酸在中性水溶液中的特性黏度[η]为7.830 L/g,并推导出由溶液的相对黏度ηr与增比黏度ηsp计算γ-聚谷氨酸溶液浓度的公式。依据溶液黏度与浓度的关系,可以简便、快速、准确地估算出γ-聚谷氨酸的浓度。     

酶法快速检测发酵液中的γ-聚谷氨酸浓度

提出了酶法快速检测发酵液中γ-聚谷氨酸（γ-PGA）浓度的方法,并与传统的HPLC法进行了比较,结果一致。所确定的两参数γ-PGA计算式很好反映了测定过程中γ-PGA随时间的变化规律,从而使检测时间由传统的HPLC法的27h缩短为2⁵h。      

一株产聚γ-谷氨酸菌株的筛选

从豆瓣酱等样品中分离获得一株细菌菌株L536,其代谢产物通过紫外扫描分析、纸层析及氨基酸组成分析,确定其为聚谷氨酸,本文报道了聚γ-谷氨酸产生菌株的筛选过程。     

利用响应面法优化γ-聚谷氨酸发酵培养基

利用筛选出的枯草芽孢杆菌发酵生产γ-聚谷氨酸,并对其发酵培养基进行优化。首先采用逐因子试验法寻找出各因素的参考范围。在此基础上,利用Plackett-Burman试验筛选出显著影响γ-PGA产量的3个主要因素:酵母粉、谷氨酸钠和CaCl2。用最陡爬坡试验逼近最大产γ-PGA的区域。然后利用Box-Behnken试验对显著因素进行优化,得酵母粉、谷氨酸钠和CaCl2的最佳浓度分别为4.18g/L、76.89g/L和0.1422g/L。在优化后发酵培养基条件下,γ-PGA的产量达到了43.26g/L,比初始γ-PGA产量提高了1.035倍。     

γ-聚谷氨酸的发酵条件优化及其初步表征分析

为提高微生物发酵生产γ-聚谷氨酸(γ-PGA)的产量,采用枯草芽孢杆菌发酵制备γ-聚谷氨酸,并通过单因子试验及正交试验分析,得到枯草芽孢杆菌发酵生产γ-聚谷氨酸的最佳营养条件为:40g/L葡萄糖、5g/L酵母膏、30g/L谷氨酸钠、3g/L NH4Cl、2g/L K2HPO4、0.25g/L MgSO4:最佳培养条件为:接种量2%,装液量40mL(250ml三角瓶),培养温度37℃,摇床转速200r/min,pH值7.0,发酵时间48h,此时γ-聚谷氨酸的产量最高,达到20.15g/L.纯化后产物经纸层析及红外光谱检测,初步确定为γ-聚谷氨酸.     

γ-聚谷氨酸高产菌株选育及发酵条件优化

本研究从实验室保藏的产γ-聚谷氨酸地衣芽孢杆菌作为出发菌株,采用60Co-γ射线辐照和ARTP诱变协同复合诱变技术,筛选出了一株γ-聚谷氨酸高产菌株FA-22,产量达20.63g/L.通过对其培养基组分和摇瓶培养条件优化,确定了菌株FA-22的最适发酵培养基组分:L-谷氨酸20.0g/L、柠檬酸12.0 g/L、甘油9...     

新型生物材料-聚γ-谷氨酸

聚γ-谷氨酸是一种由微生物合成的水溶性的生物可降解性的新型高分子材料。作为一种多功能新型生物制品,广泛应用于医药制造、食品加工,化妆品工业等许多领域,开发、应用前景广阔。介绍了聚γ-谷氨酸的性质、生产现状及应用。     

γ-聚谷氨酸吸附金属离子性能的研究

研究了γ-聚谷氨酸的阻垢性能以及对六价铬离子的吸附性。试验表明,在pH8、温度为60℃、γ-聚谷氨酸的含量为0.32 mg/mL的条件下,吸附钙离子24 h,可达到最高阻垢率77.07%;pH6、温度为60℃,γ-聚谷氨酸的量为0.04 mg/mL条件下,γ-聚谷氨酸对24μg/mL铬离子液中六价铬的吸附率可达72.50%。     

γ-聚谷氨酸的性质与生产方法

γ-聚谷氨酸(γ-Polyglutamic acid)是由L-谷氨酸(L-Glu)、D-谷氨酸(D—Glu)通过γ-酰胺键结合形成的一种多肽分子，结构式如图1。     

γ-聚谷氨酸的应用进展

γ-聚谷氨酸作为一种生物可降解性、水溶性、无毒和可食用的高分子材料,由于其独特的性质得到研究者的广泛关注.该文主要从γ-聚谷氨酸在医药、水处理、食品及日用品方面的应用进行了综述.     

γ-聚谷氨酸微孔板微缩发酵与快速测定

为了有效地筛选获得γ-聚谷氨酸(γ-PGA)高产菌株和便于发酵条件的优化,建立了基于微孔板微缩发酵以及利用酶标仪快速检测γ-PGA的方法.利用单因素实验优化检测条件,优化后的检测波长、温度、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)浓度、反应时间分别为430 nm、25℃、15g/L、2 min,在此条件下构建的标准曲线R2达到...