巴西蘑菇胞外多糖的分离及抗肿瘤活性研究

从巴西蘑菇深层发酵的滤液中分离得到胞外粗多糖Ab FP ,用DEAE柱色谱经阶段洗脱得到 4个主要组分 ,其中前 2个组分为蒸馏水洗脱部分 ,后 2个组分分别为 0 1mol/LNaCl和 0 3mol/LNaCl洗脱部分。以KM纯系小白鼠为实验模型 ,巴西蘑菇胞外多糖具有较高的抗肿瘤活性 ,并呈剂量依赖性     

粗毛纤孔菌液体发酵工艺优化及胞外多糖的抗菌和抗肿瘤活性

目的:优化粗毛纤孔菌液体发酵工艺,提高胞外多糖产量,以利于其在抑菌和抗肿瘤活性方面进行开发利用.方法:利用单因素实验结合正交试验优化粗毛纤孔菌液体发酵工艺;采用牛津杯法对胞外多糖进行抑菌活性实验;采用体外细胞实验分析胞外多糖的抗肿瘤活性.结果:粗毛纤孔菌的最适发酵工艺为:葡萄糖35 g/L,酵母粉10 g/L,KH2P...     

巴西蘑菇胞外多糖的分离及抗肿瘤活性研究

从巴西蘑菇深层发酵的滤液中分离得到胞外粗我糖Ab-FP,用DEAE柱色谱经阶段洗脱得到4个主要组分，其中前两个组分为水洗部分，后两个组分分别为0.1M和0.3MNl洗脱部分，以KM纯系小白鼠为实验模型，Ab-FP对S180移植瘤的抑制率达43%。     

冬虫夏草发酵余液活性成分分析及胞外多糖抗肿瘤活性研究

冬虫夏草是一种名贵药材,目前国内已实现人工发酵生产,但相关的产品多以菌丝体为主,胞外多糖的研究还鲜有报道。冬虫夏草发酵余液浑浊呈黑褐色,具有浓郁的蜂蜜样香味略酸。本实验以虫草发酵余液为材料,硫酸苯酚法测多糖含量,容量法测虫草酸含量,高效液相色谱法测定虫草素的含量,MTT法检测样品对Hela细胞的抑制活性。结果证实虫草发酵余液含有一定胞外多糖、虫草酸和虫草素,其中胞外多糖具有一定的抗肿瘤活性。     

发酵乳杆菌CECT 5716产胞外多糖培养基成分优化及抗氧化活性研究

采用单因素和正交试验对发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)CECT 5716产胞外多糖(EPS)的培养基成分进行优化,并通过评价胞外多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基的清除活性以及其总抗氧化能力和Fe³⁺总还原力考察胞外多糖的抗氧化活性。结果表明,发酵乳杆菌CECT 5716产胞外多糖的最优培养基配方：麦芽糖2.0%、蔗糖1.0%、酵母膏2.5%、L-半胱氨酸盐酸盐0.2%、乙酸钠0.5%、磷酸氢二钾0.2%、硫酸镁0.02%、硫酸锰0.005%、柠檬酸氢二胺0.2%、吐温80 0.1%。在此条件下,EPS产量为(1 575±22.91)mg/L,是优化前的6.38倍。胞外多糖具有较好的抗氧化活性,并与其质量浓度成正比,当胞外多糖的质量浓度为8 mg/m L时,对DPPH自由基的清除率为(84.17±1.30)%、对ABTS自由基的清除率为(35.37±1.24)%,总抗氧化能力为0.31±0.01、Fe³⁺总还原力为0....     

乳酸菌胞外多糖发酵条件优化及抗肿瘤活性的研究

该研究以胞外多糖产量为评价指标,采用单因素试验及响应面试验对副干酪乳杆菌副干酪亚种（Lactobacillus paracasei subsp. paracasei）M5L产胞外多糖的发酵条件进行优化,并采用噻唑蓝（MTT）法及实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-FQPCR）研究胞外多糖的抗肿瘤活性。结果表明,乳酸菌M5L产胞外多糖的最优发酵条件为发酵温度37 ℃、发酵时间12.8 h、初始pH值7.7、菌体浓度108 CFU/mL,在此最优发酵条件下,胞外多糖产量达到最大,为167.2 mg/mL,是优化前的1.3倍。当质量浓度为500 μg/mL的胞外多糖对Caco-2细胞处理72 h时,抑制作用最佳,抑制率达19.5%,显著增加胞内Caspase-3、Bax基因且降低Bcl-2基因的表达量,说明该胞外多糖可通过影响凋亡相关蛋白的表达来促进Caco-2细胞凋亡。     

巴西蘑菇抗肿瘤活性研究

以巴西蘑菇深层发酵的滤液和菌丝体为材料,分离出胞外多糖Ab-FP和菌丝体水溶性多糖Ab-MP,对其抗肿瘤(S180)效果进行了研究,腹腔注射最高抑瘤率分别达43%和44%,人工栽培的巴西蘑菇子实体水溶性多糖Ab-BP的最高抑瘤率达61%.将菌丝体和子实体粉末加入饲料,使小鼠自由摄食六周,观察到肿瘤完全消失率分别在60%和50%左右.肿瘤完全消失的小鼠,再次注射瘤细胞悬液,抗肿瘤效果在96%以上.     

灵芝液体发酵产胞外多糖培养基的优化

采用摇瓶液体发酵法探讨了培养基组成对灵芝胞外多糖产量的影响。单因素和正交试验结果表明,摇瓶发酵培养基的最佳配方为豆饼粉0.2%、蔗糖2%、KH_2PO_4 0.1%、FeSO_4 0.05%、VB10.005%,其中豆饼粉和蔗糖为显著性因素。在此条件下,胞外多糖产量达213.9 mg/100 mL。     

巴西蘑菇胞外多糖的抗肿瘤活性及化学组成研究

巴西蘑菇深层发酵胞外多糖FP-A-2具有显的抗肿瘤效果，并呈剂量依赖性。化学分析表明FP—A—2为多糖与多肽共价结合的复合体，含有多种氨基酸，含有葡萄糖、甘露糖及木糖，摩尔比为1：2：0．5。     

巴西蘑菇抗肿瘤活性研究

以巴西蘑菇深层发酵的滤液和菌丝体为材料 ,分离出胞外多糖Ab FP和菌丝体水溶性多糖Ab MP ,对其抗肿瘤 (S180 )效果进行了研究 ,腹腔注射最高抑瘤率分别达 43%和 44 % ,人工栽培的巴西蘑菇子实体水溶性多糖Ab BP的最高抑瘤率达 6 1%。将菌丝体和子实体粉末加入饲料 ,使小鼠自由摄食六周 ,观察到肿瘤完全消失率分别在6 0 %和 5 0 %左右。肿瘤完全消失的小鼠 ,再次注射瘤细胞悬液 ,抗肿瘤效果在 96 %以上。      

米糠多糖及硫酸酯化米糠多糖的体外免疫应答和抗肿瘤活性研究

以小鼠黑色素瘤细胞(B16)为抗肿瘤模型,通过MTT比色法评价米糠多糖及硫酸酯化米糠多糖对B16增殖抑制能力。以小鼠巨噬细胞Raw264.7细胞系为免疫模型,通过MTT比色法评价Raw264.7增殖能力,中性红吞噬试验评价巨噬细胞活性,Griess方法检测一氧化氮(NO)释放量,以及酶联免疫(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF-α)分泌量,考察米糠多糖及硫酸酯化米糠多糖的免疫活性。研究发现:米糠粗多糖(RBP)和米糠多糖纯化组分(RBP2a)主要通过增强机体的免疫功能而间接抑制肿瘤细胞。质量浓度为250μg/m L时,RBP和RBP2a样品组的NO释放量分别为对照组的4.67、6.36倍,TNF-α分泌量为对照组的441.1、465.5倍;RBP直接组和间接组的B16抑制率分别为8.16%、45.55%,间接组的B16抑制率比直接组增长458%。硫酸酯化米糠多糖(SRBP-B,SRBP-D,SRBP2a-B)一方面可以直接抑制B16增殖,质量浓度为1 000μg/m L时,对B16抑制率达73.65%、65.53%、78.43%,另一方面也可通过免疫途径提高NO和TNF-α等细胞因子释放,进一步提高抗肿瘤活性。但高浓度SRBP-B,SRBP-D,SRBP2a-B能抑制Raw264.7增殖,在500μg/m L时,Raw264.7存活率仅为83.26%、81.8%、79.78%。     

芽孢杆菌ZYCHH-01发酵条件优化及其抑菌物质的研究

采用芽孢杆菌ZYCHH-01发酵生产抑菌物质,以大肠杆菌（Escherichia coli）为指示菌株,通过牛津杯法测定其抑菌圈的大小判断其抑菌活性。通过单因素试验结合响应面法研究培养基pH值、发酵温度、接种量以及发酵时间对芽孢杆菌ZYCHH-01浓度和抑菌物质活性的影响。结果表明,最佳发酵条件为接种量3%,发酵温度36 ℃,培养基pH值7.8,发酵时间27.5 h。在此优化条件下,抑菌圈最大直径为21.12 mm。最小抑菌浓度为上清液稀释1∶64。生化试验结果表明,芽孢杆菌ZYCHH-01产抑菌物质对蛋白酶敏感,较耐储存,对有机溶剂和部分表面活性剂稳定,抑菌活性pH范围较大且具有良好的热稳定性,对食源性病菌抑菌活性良好。     

芜菁多糖提取工艺及清除自由基活性的研究

在单因素实验的基础上,应用响应面法对芜菁多糖的提取工艺进行优化。测定了芜菁多糖清除自由基的活性。结果表明:芜菁多糖的最佳提取工艺为,浸提温度80℃,浸提时间2.5 h,液料比(30∶1)(mL∶g)。此条件下芜菁多糖的得率为8.858%,接近于理论值。芜菁多糖的体外清除自由基活性实验证明,芜菁多糖(WJc)对羟自由基的清除活性较好。     

铁皮石斛多糖多肽的发酵法提取及其抗氧化活性分析

目的 研究一种有效的铁皮石斛多糖多肽提取方法,并分析其基本性质及体外抗氧化活性。方法 以铁皮石斛为研究对象,采用芽孢杆菌发酵法对铁皮石斛进行提取,用蒽酮-硫酸法和双缩脲法分别测定铁皮石斛提取液的多糖和多肽含量,以传统热水浸提法和超声波辅助提取法为对照,通过提取液对自由基清除能力、螯合金属离子能力、抑制亚油酸自氧化能力、抑制红细胞溶血能力、保湿能力等指标,评价芽孢杆菌发酵提取液的抗氧化活性。结果 芽孢杆菌发酵提取法工艺参数为投料比例1:25(g/mL),发酵pH6,发酵温度33.5 ℃,发酵时间46 h,此时多糖提取率为37.21%,多肽含量高达4.43 mg/ kg,分子量主要分布在2000 Da以下,占84.95 %。提取液对羟基自由基(.OH)、DPPH自由基(DPPH.)和 ABTS自由基(ABTS₊^.)有较强的清除能力,Fe₂₊^螯合能力67%、亚油酸抑制率53%、H₂O₂诱导溶血抑制率64.34%、皮肤含水量提高33.57 %。结论 芽孢杆菌发酵法提取铁皮石斛,提取液多糖多肽含量高,具有较好抗氧化性和保湿性,为铁皮石斛在食品和化妆品领域的开发利用提供了一定的理论指导和实验数据参考。     

裙带菜多糖的分离纯化及抗肿瘤活性

目的:对自提精制裙带菜粗多糖(UPPS)进行分离纯化及体外抗肿瘤活性研究。方法:实验首先对裙带菜粗多糖进行Sevage法除蛋白、H2O2法脱色素、透析法除去小分子;然后运用DEAE-52、Sephadex G-200柱层析对裙带菜多糖半纯品进一步纯化;最后采用MTT法测定了UPPS-B1对肿瘤细胞SGC-7901和HepG-2生长、增殖的抑制作用。结果:裙带菜粗多糖通过脱蛋白、脱色、透析后运用DEAE-52、Sephadex G-200柱层析进行分离纯化,得到一个组分UPPS-B1。其对SGC-7901和HepG-2均具有一定的抑制作用并具有剂量依赖性。结论:UPPS-B1是均一度较好的多糖组分,具有抗肿瘤活性。     

黑皮鸡枞菌多糖超声辅助提取条件优化及抗氧化活性研究

目的 响应面法优化超声波提取法提取黑皮鸡枞菌(Oudemansiella raphanipes)多糖的工艺。方法 以黑皮鸡枞菌多糖的提取率为指标,采用超声波提取法从黑皮鸡枞菌中提取多糖,以超声功率、超声提取时间和碱浓度作为单因素变量,利用单因素试验结合响应面法优化确定超声波提取黑皮鸡枞菌多糖的最佳提取工艺。采用乙醇分级法黑皮鸡枞菌多糖进行乙醇分级,并对分级多糖的抗氧化活性进行研究。结果 结果表明优化得到的黑皮鸡枞菌多糖最佳工艺条件为：超声功率151.8 W、超声时间102.0 min和碱浓度0.05 mol/L,在此条件下,黑皮鸡枞菌多糖提取率最高,达到15.40% ± 0.20%,与响应面预测值16.02%相近。此外,5种乙醇分级多糖均具有一定的抗氧化活性。结论 响应面模型是成功的、可行的,80%以上分级多糖的羟基自由基清除率和还原力最强,80%分级多糖的DPPH自由基清除能力最强。     

放射型根瘤菌辅酶Q_(10)发酵助剂的研究

研究了几种促进剂和前体对放射型根瘤菌细胞生长及其辅酶Q10发酵的影响,结果表明,在培养基中适量添加番茄汁、胡萝卜汁、蛋氨酸、VB1和对羟基苯甲酸均可明显提高辅酶Q10的产量。在所试浓度范围内,VB1、胡萝卜汁和蛋氨酸3种添加物最高可使辅酶Q10产量比对照组分别提高25%、18%和13%。     

超声辅助热水浸提小球藻多糖及抗氧化活性测定

选取超声时间、提取温度和提取时间为变量,在单因素试验的基础上,利用响应面优化超声辅助热水浸提小球藻多糖的提取条件。利用傅里叶红外变换（FTIR）对提取的多糖进行结构表征,并测定了其体外抗氧化活性。结果表明,超声辅助热水浸提小球藻多糖的最佳条件为：超声时间52 min,提取温度97 ℃,提取时间3.0 h。此优化条件下,多糖得率为5.30%。FTIR结果显示该多糖含有糖醛酸,为吡喃糖。同时该多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、OH自由基有显著清除作用,半抑制浓度（IC50值）分别为4.83 mg/mL、0.77 mg/mL。试验结果表明超声辅助热水浸提法可有效提取小球藻多糖并保留多糖活性。     

根瘤菌胞外多糖的分离纯化及组分分析

以根瘤菌发酵液为原料,提取纯化发酵液中胞外多糖(extracellular polysaccharides,EPS),并对其多糖组分进行分析。采用木瓜蛋白酶与sevage法结合脱蛋白,并利用柱层析法对胞外多糖进行单组分离和纯化,分别得到EPS 1-1、EPS 2-1、EPS 3-1、EPS 4-1和EPS 5-1等5种相对较纯的单一组分。分别采用不同色谱法对上述各单一组分的纯度、结构、相对分子量及单糖组成进行分析和测定,表明各个组分均具有多糖特征峰,且均是以β-型糖苷键连接的吡喃糖,其中EPS 1-1和EPS 3-1是β构型的半乳吡喃糖; 5种多糖组分均主要由具有不同摩尔比的半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成,除了EPS 4-1之外,在其他组分中还检测到了不同含量的岩藻糖、鼠李糖和阿拉伯糖等。     

紫山药多糖超声结合酶法提取工艺优化及抗氧化活性研究

以紫山药为实验材料,采用超声结合酶法提取多糖,用Sevag法脱蛋白,用活性炭除花青素,并对其进行体外抗氧化实验,研究了紫山药中多糖提纯工艺和体外抗氧化活性。实验结果表明,最佳工艺条件为加酶量1.5%、料液比1:10 g/m L、提取时间25 min、超声功率200 W。在上述最佳条件下,紫山药多糖平均得率为9.83%。经脱蛋白、去除花青素后的紫山药多糖粉末中多糖质量分数为58.9%。体外抗氧化实验中,紫山药多糖表现出明显的抗氧化能力,对1,1-二苯基-2-苦肼基自由基（DPPH·）的清除能力较维生素C弱,但对羟基自由基（·OH）的清除能力略强于维生素C。