采用黑曲霉发酵制备阿拉伯木聚糖酶和阿魏酸酯酶的研究

采用黑曲霉发酵麦麸、蔗渣和玉米麸皮都能获得阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶,并在第3d达到产酶高峰。但不同发酵基质产酶活性差别很大,麦麸最好,蔗渣最差。同时,酶制剂因发酵基质不同会产生底物专一性,因此,在生产酶制剂时应注意根据所降解的对象选择发酵基质。     

冷冻干燥法制备阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶固体混合酶制剂

阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶在食品、饲料和造纸工业中具有广泛的应用前景,本研究探讨了冷冻干燥制备固体酶制剂的方法。结果表明,在干燥过程中酶活力有所损失,酶液厚度增大会增加干燥时间,但对酶活力的影响不显著。为此,实验研究了不同保护剂对减少酶活损失的效果,得出了以下结论:添加1%～2%的聚乙二醇可以有效保护酶制剂在冷冻干燥过程中不失活。     

冷冻干燥法制备阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶固体混合酶制剂

阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶在食品、饲料和造纸工业中具有广泛的应用前景,本研究探讨了冷冻干燥制备固体酶制剂的方法。结果表明,在干燥过程中酶活力有所损失,酶液厚度增大会增加干燥时间,但对酶活力的影响不显著。为此,实验研究了不同保护剂对减少酶活损失的效果,得出了以下结论:添加1%～2%的聚乙二醇可以有效保护酶制剂在冷冻干燥过程中不失活。      

阿魏酸酯酶的制备

阿魏酸酯酶是一种新型酶制剂,在食品、饲料和造纸工业中都有着广阔的应用前景,但目前还没有工业化产品。文中研究了超滤和冷冻干燥制备阿魏酸酯酶的工艺条件,结果表明,酶液pH值为8.06时有利于酶蛋白截留;装液厚度为6mm时,酶粉剂冷冻干燥时间为24h;添加1%～2%的聚乙二醇可以保护酶液在冷冻干燥过程中不失活;阿魏酸酯酶的液体和固体产品在保存过程中均表现出了较好的稳定性。     

超滤法浓缩阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶混合酶制剂的研究

用截留分子量2万的中空纤维膜超滤阿魏酸酯酶与阿拉伯木聚糖酶的混合酶制剂。研究了超滤进口压力、超滤温度对膜通量和酶活的影响,确定了进口压力0.10～0.15MPa、超滤温度25～30℃为最佳操作工艺参数。酶的浓缩倍数可达7倍以上,使酶制剂更加方便保存。采用2次超滤的方法可以去除浓缩酶液中90%的低聚糖和阿魏酸等小分子物质,解决了酶制剂使用中的产物抑制问题。     

两种丝状真菌发酵小麦麸皮中酚酸的释放及与阿魏酸酯酶和木聚糖酶的关系

为了评价两种丝状真菌对小麦麸皮降解能力,以及对酚酸释放能力的差异,本实验在不同时间进行总酚和9种酚酸组分的变化监测并且结合阿魏酸酯酶和木聚糖酶活性,电镜观察小麦麸皮表面结构对黑曲霉和棒曲霉进行综合评估。黑曲霉发酵7 d阿魏酸含量达到416.56μg/g麦麸。次之是没食子酸,从7.71μg/g麦麸增加到105.77μg/g麦麸。棒曲霉阿魏酸含量达到200.81μg/g麦麸。次之是丁香酸,没食子酸,对羟基苯甲酸和香豆酸,从分别从原麦麸中含量14.7μg/g麦麸、7.71μg/g麦麸、8.57μg/g麦麸和5.62μg/g麦麸增长至88.4μg/g麦麸,60.38μg/g麦麸,55.56μg/g麦麸,52.93μg/g麦麸。黑曲霉对麦麸的降解能力及对阿魏酸和没食子酸的释放能力都显著优于棒曲霉,而对丁香酸的释放能力略差于棒曲霉。电镜结果显示,黑曲霉降解能力优于棒曲霉。     

小麦麸皮阿魏酸的制备

本文以小麦麸皮为原料，采用碱法和酶法制备阿魏酸，通过正交试验确定出制备阿魏酸的最佳工艺参数，碱液浸提法阿魏酸最高释放量为3.08mg／g麦麸，最优组合是碱液浓度为1％，温度为80℃，提取时间为4h，麸皮粒度为80目；酶法提取的最高释放量为3、35mg／g麦麸，最优组合是料液比1：20．混合酶浓度1％。混合酶作用时间3h。另外，碱处理后的反应液颜色为深棕色，褐变较为严重；混合酶处理后反应液颜色较浅。酶法提取效果较佳。     

阿魏酸酯酶功能特性及应用概述

阿魏酸酯酶(ferulic acid esterase,FAE)广泛存在于自然界,属于羧酸酯水解酶的一个亚类.经过一系列反应,其能将天然半纤维素和果胶中的酚酸、阿魏酸(ferulic acid,FA)及对香豆酸等释放出来,是一种具有应用潜力的酶.因此,各行业通过相关科学技术来利用FAE,以获得如人畜食品、纸浆和纸张、燃...     

高产阿魏酸酯酶菌株的筛选及其固态发酵的研究

从自然界中采集土壤样本,使用阿魏酸乙酯为唯一碳源的选择性培养基;进行初筛、固态发酵产酶试验、复筛得到1株高产阿魏酸酯酶的菌株,通过形态学观察鉴定为黑曲霉。对该菌株固态发酵产阿魏酸酯酶的培养条件进行了研究,单因素实验结果表明,相同汽爆条件下汽爆稻草的发酵产酶酶活较高;在固液比1∶3、初始pH3、麸皮添加量25%、30℃下发酵3d后酶活最高,可达445.1mU/g。     

阿魏酸酯酶在黑曲霉中的同源表达

利用食品级黑曲霉表达系统同源表达阿魏酸酯酶是提高阿魏酸酯酶产量、降低生产成本的有效途径。利用PCR技术扩增黑曲霉阿魏酸酯酶A基因（faeA）的编码区,构建黑曲霉表达载体pSZHG-faeA,并通过农杆菌介导法转化黑曲霉。经筛选获得将faeA基因整合到糖化酶基因位点的同源重组转化子4株。在酶摇瓶发酵条件下,重组菌株培养液上清中的阿魏酸酯酶活性最高达18.6mU/mL。SDS-PAGE分析显示,4株重组菌株都有约36ku目的蛋白条带,表达量为188²62μg/mL。结果表明,实现了阿魏酸酯酶在黑曲霉中的同源表达,为食品级阿魏酸酯酶的大规模工业化生产奠定了基础。      

产阿魏酸酯酶乳酸菌的乳杆菌筛选以及基因克隆

运用平板法和高效液相色谱法筛选出一株具有阿魏酸酯酶活性的发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum ATCC9338),其酶活力为260mU/L,并成功运用鸟枪法对该菌株进行阿魏酸酯酶克隆并测序,为产阿魏酸酯酶益生菌的开发提供理论依据。      

冠突散囊菌发酵燕麦对阿魏酸含量的影响

以燕麦为基质,利用冠突散囊菌进行燕麦固态发酵,通过单因素试验和正交试验优化阿魏酸提取工艺及燕麦发酵条件,采用 高效液相色谱（HPLC）法测定燕麦的阿魏酸含量。 结果表明,阿魏酸提取最佳工艺是采用固液比为1∶10（g∶mL）的体积分数60%的乙 醇在50 ℃条件下浸提发酵燕麦6 h; 燕麦发酵最佳条件为裸燕麦在pH 5的水溶液中浸泡12 h,121 ℃灭菌后接种1%的冠突散囊菌, 26 ℃恒温发酵;在此条件下发酵燕麦阿魏酸含量在发酵第4 d时达到最高835.89 μg/g,是未发酵燕麦的4.2倍。     

农药残留对普洱茶发酵中挥发性香气物质的影响

为了探究联苯菊酯农药残留对晒青毛茶益生菌发酵过程中挥发性香气物质的影响,采用同时蒸馏萃取（SDE）和气质联用（GC-MS）法分析喷洒联苯菊酯后2 h,人工接种黑曲霉（Aspergillus niger）、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）、产黄青霉（Penicillium chrysogenum）及对照（不接菌）4种固态发酵处理下普洱茶中挥发性香气成分。结果表明,与对照组相比,3种接种发酵条件下能有效增加1-石竹烯含量,且酵母菌发酵其增加量最高（192.4%）,芳樟醇、环氧芳樟醇（芳樟醇氧化物Ⅰ、Ⅱ）、α-松油醇等含量下降量最低（87.17%、22.06%、30.01%、91.40%）;长叶薄荷酮和三甲基乙酸香芹烯酯仅在3种接种发酵普洱茶中检测出。联苯菊酯不仅能影响晒青毛茶内含挥发性香气物质,还影响发酵过程中关键香气的形成和变化,而接种益生菌能改善和提升普洱茶的香气,其中接种酵母菌的普洱茶花果香显著,香气最好。     

高产阿魏酸酯酶菌株的筛选及其产酶条件优化

通过初筛、复筛从茯砖茶中筛选到了1株产阿魏酸酯酶活力较高的菌株,经个体形态和菌落特征初步鉴定其为冠突散囊菌;以阿魏酸酯酶酶活为衡量指标,选取黑毛茶含水量、接种量、培养温度、培养时间为因子,研究确定筛选出来的冠突散囊菌进行固态发酵黑毛茶的产酶条件。结果表明:黑毛茶固态发酵实验中,黑毛茶含水量26%,接种量1‰,温度30℃条件下培养4d,其酶活力最高可以达到142m U/g。      

高产阿魏酸酯酶菌株的筛选及其产酶条件优化

通过初筛、复筛从茯砖茶中筛选到了1株产阿魏酸酯酶活力较高的菌株,经个体形态和菌落特征初步鉴定其为冠突散囊菌;以阿魏酸酯酶酶活为衡量指标,选取黑毛茶含水量、接种量、培养温度、培养时间为因子,研究确定筛选出来的冠突散囊菌进行固态发酵黑毛茶的产酶条件。结果表明:黑毛茶固态发酵实验中,黑毛茶含水量26%,接种量1‰,温度30℃条件下培养4d,其酶活力最高可以达到142m U/g。