Evaluating,the inhibitory action of honey on fungal growth, sporulation, and aflatoxin production

Summary Unprocessed honey was inoculated with toxigenic strains ofAspergillus flavus NRRL 5862 andA. parasiticus NRRL 2999. The fungi grew and sporulated in varying amounts of honey diluted with water, but none of the cultures produced detectable levels of aflatoxin. Growth and subsequent sporulation were seen only in media containing up to and including 60% of honey. Media having 40% of honey showed growth and sporulation by day two. Neither species ofAspergillus produced toxins even in 10% honey. These results confirm our earlier observations that pure honey inhibited fungal growth and now even diluted honey seems capable of inhibiting toxin production or possibly neutralizing it. The general procedures recommended by the AOAC for extraction and thin layer chromatography were applied successfully in analyzing the honey substrate for aflatoxin.

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Abschätzung der Hemmwirkung von Honig auf Pilzwachstum, Sporulierung und Aflatoxin-Produktion

Zusammenfassung Unbehandelter Honig wurde mit toxigenen Stämmen vonAspergillus flavus NRRL 5862 undAspergillus parasiticus NRRL 2999 beimpft. Der Pilz wuchs und sporulierte in mit verschiedenen Wasser-Mengen verdünntem Honig, aber keine der Kulturen produzierte nachweisbare Mengen von Aflatoxin. Wachstum und nachfolgende Sporulation konnte nur in Medien mit nicht mehr als 60% Honig entdeckt werden. Medien mit 40% Honig zeigten innerhalb von 2 Tagen Wachstum und Sporulation. Selbst in 10% wäßriger Honiglösung produzierte keine derAspergillus-Arten Toxine. Diese Ergebnisse erhärten unsere früheren Beobachtungen, daß reiner Honig das Pilzwachstum hemmt und daß sogar verdünnte Honig-Lösungen fähig sind, die Toxin-Produktion zu hemmen. Die von AOAC empfohlenen Arbeitsanweisungen für Extraktion und Dünnschichtchromatographie waren auch bei der Honig-Analyse auf Aflatoxin erfolgreich.

     

Methylenreduktius?ure, ein neues Redukton aus Glucose

Zusammenfassung Zur hochdruckflülssigchromatographischen Untersuchung von Honig auf Restgehalte an Chloramphenicol (1) und Sulfathiazol (2) werden die Proben in 0,05 m-Phosphorsäure/Acetonitril gelöst und nach Ultrafiltration direkt injiziert. Die Trennungen werden über eine Phasen-Umkehr-Säule mit Alkyl Phenyl-Belegung durchgeführt. Als Laufmittelgemische dienen 0,05 m-Phosphorsäure/Acetonitril zur Analyse von1 und Wasser/Methanol (mit 0,005 m-PIC-BS [13]) für die Bestimmung von2. Die schnelle und einfache Aufarbeitungsmethode gewährleistet eine verlustfreie Wiederfindung bei einer Nachweisempfindlichkeit von 1 ppm.

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High pressure liquid chromatographic analysis of residues of drugs in honeyII. Chloramphenicol and sulfathiazole

Summary For the high pressure liquid chromatographic analysis of residues of chloramphenicol (1) and sulfathiazole (2) in honey, samples were dissolved in 0.05 m phosphoric acid/acetonitrile and after ultrafiltration injected immediately. The separations were carried out using a reversed phase column with alkylphenyl coated silica gel. For the analysis of1, 0.05 m phosphoric acid/acetonitrile was used as eluent and for the determination of2 water/methanol (with 0.005M PIC-BS [13]). The rapid and simple procedure allows for complete recovery and has a sensitivity of 1 ppm.

     

HPLC-Bestimmung von Oxacillin, Cloxacillin und Dicloxacillin in Muskelfleisch vom Rind mit automatischem Cleanup durch on-line Festphasenextraktion

Zusammenfassung Beschrieben wird ein HPLC-Verfahren mit automatischem Cleanup durch on-line Festphasenextraktion zur quantitativen Bestimmung von Oxacillin-, Cloxacillin- und Dicloxacillinrückständen in Muskelfleisch. Die Penicilline werden aus dem Fleisch mit Acetonitril extrahiert, in Phosphatpuffer überführt und an einer RP-18 Phase automatisch angereichert und gereinigt. Nach Elution auf die analytische HPLC-Säule (RP-18) werden die Penicilline isokratisch chromatographiert und über UV-Detektion (=225 nm) quantitativ bestimmt. Im Bereich der Höchstmenge (0,3 mg/kg) lagen die mittleren Wiederfindungen bei 92% für Oxacillin, 92% für Cloxacillin und 86% für Dicloxacillin. Der Variationskoeffizient für den Bereich von 0,15–0,6 mg/kg lag für die drei Penicilline bei 13,8%, 11,0% bzw. 7,3%. Die Anwendbarkeit des Verfahrens für die Bestimmung von Cloxacillinrückständen in Milch wird gezeigt.

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HPLC determination of oxacillin, cloxacillin and dicloxacillin in bovine muscle with automated cleanup by on-line solid phase extraction

A high-performance liquid chromatographic (HPLC) method with automated cleanup by on-line solid phase extraction was developed for the determination of oxacillin, cloxacillin and dicloxacillin in bovine muscle tissue. The penicillins were extracted from the matrix with acetonitrile, transfered to phosphate buffer and automatically trapped on a RP-18 solid phase extraction column. After on-line elution onto the analytical HPLC-column, penicillins were quantified by UV (=225 nm) after isocratic separation. Mean recoveries at the MRL (0,3 mg/kg) were 92% for oxacillin, 92% for cloxacillin and 86% for dicloxacillin. The coefficients of variation for the three penicillins in the range of 0.15–0.6 mg/kg were 13,8%, 11,0%, and 7,3%, respectively. The applicability of this method for the determination of cloxacillin in milk was demonstrated.

     

Flavonoids in honey of different geographical origin

Summary The flavonoids present in honey samples from different geographical areas (Europe, North America, Equatorial regions, South America, China and Australia) have been analysed by HPLC. These flavonoids are incorporated into honey from propolis, nectar or pollen. As a general rule, honey samples from the Northern Hemisphere (where poplars, the source of propolis, are native) show flavonoid profiles characterized by the presence of propolis flavonoids. In contrast, honey samples from most Equatorial regions and Australia are generally devoid of propolis-derived flavonoids, showing only flavonoids from other plant sources. However, several honey samples from Central and South America and from New Zealand do contain the flavonoids characteristic of propolis. This means that importedApis mellifera colonies may locate poplar trees, occasionally finding an imported specimen in gardens or agro-industrial exploitations, and incorporate propolis flavonoids into honey. These preliminary results show that flavonoid analysis could be used as an adjunct to geographical origin studies of honey.

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Flavonoide in Honig verschiedenen geographischen Ursprungs

Zusammenfassung Die im Honig verschiedenen geographischen Ursprungs (Europa, Nordamerika, äquatoriale Regionen, Südamerika, China und Australien) vorkommenden Flavonoide wurden durch HPLC untersucht. Diese Flavonoide stammen aus dem Bienenharz, Nektar und Pollen. Als generelle Regel gilt, daß in Honigproben aus der nördlichen Hemisphäre, wo die Pappeln als Quelle des Harzes heimisch sind, die Flavonoide den Charakter des Harzflavonoids aufweisen. Im Gegensatz dazu sind die Honigproben aus äquatorialen Regionen und Australien frei von Harzfiavonoiden, sondern sie zeigen Flavonoide aus anderen Pflanzenquellen. Jedoch mehrere Honigproben aus Zentral- und Südamerika und aus Neuseeland enthalten Flavonoide, die für das Bienenharz charakteristisch sind. Dies deutet darauf hin, daß importierteApis-mellifera-Kolomen versuchen, Pappelbäume ausfindig zu machen und gelegentlich importierte Exemplare in Gärten aufsuchen und dadurch Flavonoide des Harzes in Honig übertragen. Diese ersten Resultate zeigen, daß die Flavonoid-Analysen zusätzlich als Hilfe für geographische Studien der Honigherkunft dienen könnten.

     

The diastase number of honey: A comparative study

Summary In this article a review is given of the various methods which have been developed in order to determine, visually as well as photometrically the diastase number of honey. Particularly the various modifications of the photometric method are given, notably the influence of begin-and endabsorbance and the influence of the wavelength. It is demonstrated that the various photometric methods can give rise to diastase numbers which can vary a factor 2 for the same honey. As, according to the various honey regulations, the diastase number must have a minimum value of 8, independant of the method used in question, it is evident that in some cases false conclusions can be drawn where a possible excessive heating of the honey is concerned. It is recommended to follow the Codex alimentarius (FAO/WHO) procedure. A screening procedure based on this method is given.

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Zusammenfassung Eine Übersicht der verschiedenen Methoden zur visuellen and photo-metrischen Bestimmung der Diastasezahl von Honig wird gegeben. Insbesondere werden die verschiedene Modifikationen der photometrischen Methoden gegeben, und zwar wird auf den Einfluß der Anfaugs- und Endextinktion näher eingegangen. Es wird gezeigt, daß die verschiedenen photometrischen Methoden Diastasezahlen ergeben können, die für einen and denselben Honig um den Faktor 2 differieren. Da der Grenzwert für die Diastasezahl 8 beträgt, unabhängig von der Methode, sollte man darauf achten, keine falsehen Folgerungen zu ziehen, so weit es sich darum handelt, eine eventuelle zu starke Erhitzung des Honigs nachzuweisen. Es wird empfohlen die Codex alimentarius Methode (FAO/WHO) anzuwenden. Ein auf these Methode gegründetes Schnellverfahren wird beschrieben.

     

A screening method for the simultaneous determination of putrescine, cadaverine, histamine, spermidine and spermine in fish by means of high pressure liquid chromatography of their 5-dimethylaminonaphthalene-l-sulphonyl derivatives

Summary A simple and rapid method is described for the extraction, derivatization and subsequent determination by means of high pressure liquid chromatography of putrescine, cadaverine, histamine, spermidine and spermine as their 5-dimethylaminonaphthalene-1-sulphonyl derivatives.The amines are extracted from the fish material by an aqueous trichloroacetic acid solution and derivatized by means of 5-dimethylaminonaphthalene-1-sulphonylchloride (dansyl chloride). The reaction mixture is then injected on a RP-8 column using gradient elution to separate the amine derivatives. Use of the method results in a considerable saving with respect to both time and costs.

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Eine Screening-Methode für die gleichzeitige Bestimmung von Putrescin, Cadaverin, Histamin, Spermidin und Spermin im Fisch mittels Hochdruck-Flüssigchromatographie ihrer 5-Dimethylaminonaphthalin-Sulfonyl-Derivate

Zusammenfassung Eine einfache und schnelle Methode für die Extraktion, Derivatisierung und Bestimmung von Putrescin, Cadaverin, Histamin, Spermidin und Spermin als 5-Dimethylaminonaphthalin-1-sulfonyl-Derivate mit Hilfe der Hochdruck-Flüssigchromatographie (HPLC).Die Amine werden mit einer wäßrigen Trichloressigsäure-Lösung aus dem Fisch extrahiert und mit Hilfe von 5-Dimethylaminonaphthalin-1-sulfonyl (Dansylchloride) derivatisiert. Die Reaktionsmischung wird auf eine RP-8-Säule injiziert und durch Gradientelution getrennt. Die beschriebene Methode bring einen beträchtlichen Zeitgewinn und eine Verringerung der Analysenkosten.