微生物转化蔗糖制备新科思糖的分离纯化研究

对通过微生物转化蔗糖制备的含新科思糖的糖浆进行分离纯化以制备新科思糖进行了研究。首先以巴斯德毕赤酵母去除糖浆中的果糖和葡萄糖,研究了酵母添加量和发酵时间对新科思糖纯度的影响;然后利用Bio-Gel P-2对初步纯化的糖浆进行进一步分离纯化,研究了上样量和洗脱液流速对新科思糖纯度和回收率的影响。结果表明:当巴斯德毕赤酵母的细胞添加量为60 g/L,处理时间为10 h时,新科思糖的纯度由10.92%提高到19.39%;当进样量为0.5 m L,流速为0.1 m L/min时,新科思糖的纯度由19.39%提高到76.68%。结论:此方法可用于制备新科思糖。      

大孔树脂对刺葡萄酒渣中提取的白藜芦醇的纯化工艺研究

通过静态吸附-解吸试验从6种大孔树脂中筛选出最适合刺葡萄酒渣中白藜芦醇纯化的大孔树脂,并对其进行静态、动态吸附-解吸工艺条件优化,结果表明：供试树脂中,大孔树脂H103为最适树脂,其静态吸附-解吸最优条件为：上样液质量浓度为0.65 mg/mL,上样液pH值为3,洗脱液为体积分数70%乙醇;动态吸附-解吸最优条件为：上样流速1.5 mL/min,上样液体积6 BV;洗脱流速0.5 mL/min,洗脱液体积6 BV,在此条件下,树脂H103对白藜芦醇的吸附量为55.7 mg/g,解吸率为89.86%,经树脂H103纯化后,样品纯度由11.54%提高至59.76%。     

黄绿蜜环菌细胞生物转化对羟基苯甲醇的产物分离纯化及结构鉴定研究

采用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、制备液相色谱等方法对天麻素生物催化合成体系的转化产物分离纯化,得到两个组分,经质谱和核磁共振结构鉴定为天麻素和对羟基苯甲醇。在试验过程中,对获得的水相体系产物进行重结晶,光谱和半制备液相鉴定,获得一结晶组分,经初步定性鉴定该组分为尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG);同时生物转化体系中还存在另1种糖苷类物质,其具体结构有待鉴定。     

指状青霉DSM62840生物转化柠檬烯生产α-松油醇过程中关键酶的分离纯化及质谱鉴定

以指状青霉DSM62840为研究对象,通过高压法破碎细胞,采用超高速离心、硫酸铵沉淀、羟基磷灰石层析和凝胶过滤层析等方法对指状青霉DSM62840生物转化柠檬烯生产a-松油醇过程中的关键酶进行分离纯化.经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,结果显示在分子质量约为50 kDa处有一条明显的蛋白条带,并通过液相色谱-串...     

单环刺螠体壁多糖的分离纯化、理化性质及抗脂质过氧化活性

为研究和开发单环刺螠中活性多糖成分,采用酶法提取和色谱分离技术,从单环刺螠的体壁中提取分离多糖组分,采用化学和仪器分析方法对其单糖组成、分子质量等理化性质进行研究,并通过体外清除脂质过氧化物实验对其进行初步的活性评价。结果表明：采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶两步酶解后,单环刺螠多糖（unicinctus polysaccharide,UP）得率为5.3%。通过离子交换柱层析分离纯化后主要得到两个组分UP-1和UP-2。UP-1是主要由葡萄糖（Glc）组成的高聚葡聚糖,分子质量340 kD,而UP-2为组成复杂的类糖胺聚糖,分子质量约为7.9 kD,主要含有葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gal）、氨基葡萄糖（GlcN）和岩藻糖（Fuc）,还含有少量的甘露糖（Man）和氨基半乳糖（GalN）。其单糖组成Man、GlcN、GalN、Glc、Gal、Fuc物质的量比例为1.0∶1.47∶0.64∶6.49∶2.5∶3.0。和其他海洋动物来源类糖胺聚糖类似,UP-2还含有少量的硫酸基,含量为7.4%。对UP-1和UP-2进行初步体外抗氧化活性研究表明,类糖胺聚糖UP-2具有显著的脂质过氧化物清除活性,半数清除质量浓度为5.0 mg/mL。     

杜仲叶中绿原酸的提取分离及结构鉴定

研究杜仲叶中绿原酸的提取分离工艺并对其结构进行鉴定.通过正交试验,研究绿原酸最佳水提工艺,对柱层析纯化绿原酸的工艺路线进行初步探讨.水提法最佳工艺条件为:料液比为1:8,提取时间为70 min,提取温度为80℃,以热水作为溶剂提取杜仲叶2次,绿原酸得率为1.78％.先后利用D-101大孔吸附树脂、硅胶柱层析、SephadexLH-20凝胶柱层析对提取物进行分离得到绿原酸.杜仲叶中绿原酸的含量远大于其皮中的含量.     

从黑曲霉固态发酵产物中纯化α-L-鼠李糖苷酶及酶法制备普鲁宁

本文研究了从黑曲霉固态发酵产物中纯化α-L-鼠李糖苷酶,并探究利用该酶转化柚皮苷制备普鲁宁。用黑曲霉固态发酵柚皮产生α-L-鼠李糖苷酶,通过40%~80%硫酸铵沉淀、疏水层析、亲和层析和凝胶过滤层析,从黑曲霉固态发酵产物中分离纯化得到了1种α-L-鼠李糖苷酶;该酶为单体分子量约为160 k Da;它由二硫键连接的两个肽段构成,其中有一个大肽段分子量约为130 k Da。其水解柚皮苷的最适温度为50~60℃,最适p H 4.0~5.0,米氏常数和最大酶反应速度分别为0.24μmol/m L和312.5 U/m L。用该酶转化柚皮苷制备普鲁宁的最适反应时间为60~90 min,柚皮苷转化率达98%以上。转化产物中普鲁宁的含量在95%以上,普鲁宁的分解产物柚皮素的含量小于5.0%。用从黑曲霉固态发酵产物中纯化的α-L-鼠李糖苷酶制备普鲁宁具有热稳定性好、底物亲和力强、转化率高和副产物少等优点,为开发酶法制备普鲁宁的工艺提供了重要参考。     

苹果废渣中天然抗氧化物的提取、分离及活性研究

以苹果渣为原料,用不同浓度乙醇提取得到苹果多酚粗提物,再分别用乙酸乙酯萃取和薄层层析纯化,用猪油POV值测试为跟踪方法对各组分进行筛选,然后以BHT为对照,对最高活性组分与V_c、PG、柠檬酸的协同作用进行了系统探讨。结果表明,95％乙醇的提取效果最好,其干物质以无水乙醇重溶后活性显著提高；PG与苹果多酚的协同效果最好,是对照BHT的2．33倍。     

血液中免疫球蛋白的分离提取及功能特性的研究进展

对血液中免疫球蛋白的性质、提取、纯化、活性测定及应用等的研究现状进行了论述.     

鼠尾藻中岩藻聚糖硫酸酯提取工艺及纯化研究

研究利用热水浸提法,复合酶解法提取鼠尾藻中岩藻聚糖硫酸酯的最佳工艺参数及纯化工艺.结果表明:在pH为6,时间为5 h,温度为98℃,料液比为15的条件下浸提,鼠尾藻岩藻聚糖硫酸酯提取率为3.15%,总硫酸根质量分数为0.87%;采用复合酶解法提取岩藻聚糖硫酸酯最佳条件为:复合酶添加量为1.7%,pH为5.5,时间为1h,温度为45℃,在该条件下鼠尾藻中岩藻聚糖硫酸酯提取率为3.6%,总硫酸根质量分数为1.1%,岩藻聚糖硫酸酯经DEAE-52阴离子纤维素变换层析分级得到F1、F2,F3,F4,F5五个组分,硫酸根含量分别为0、3.94%、6.57%、12.60%、38.08%.将含有硫酸根的组分F2、F3、F4、F5分别经Sephadex G-200凝胶柱层析分级纯化后得到f1、f2、f3、f4、f5、f6六个级分,其中f2、f4为大分子质量凝聚体,f1、f3、f5、f6相对分子质量分别为:4.05×104、7.13×104、1.325×105、7.99×104.     

Rare Sugars and Antioxidants in Itea virginica,Itea oblonga Hand.-Mazz., and Itea yunnanensis Franch Leaves

Except Itea virginica, Itea ilicifilia, and Itea yunnanensis Franch, there had been few reports of other itea plants related to rare sugars. Likewise, little had been known about the antioxidants in itea plants. In this study, the rare sugars, phenolic profiles, as well as their antioxidant activities in the itea leaves, which were from Itea virginica, Itea oblonga Hand.-Mazz., and Itea yunnanensis Franch, were determined and compared. The first discovery of D-psicose and allitol in Itea oblonga Hand.-Mazz. further demonstrated the great potential application of itea plants in the production of rare sugars. Moreover, the leaves of Itea virginica and Itea oblonga Hand.-Mazz. showed good antioxidant activities in the assays of free radical scavenging activities and reducing power. The high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry experiment revealed the presence of several flavonoid glycosides as major antioxidant components in these leaves. These results indicated that the itea plants, especially Itea virginica, could be used for potential antioxidants in addition to functional sweeteners.     

叶黄素的生物转化及纯化

本实验对叶黄素衍生物的微生物转化进行了研究,主要考察了培养基种类、菌种、震荡培养与静置培养、pH值、菌种接种量等因素对叶黄素转化效果的影响,以双波长薄层色谱法进行定性、定量检测,优化出最佳转化条件:用pH值为3的诱导产酶培养基接种C菌(青霉属)6环,震荡培养15d,使得游离叶黄素的含量由0.25%提高到56.70%。采用硅胶柱层析对微生物转化产品进行分离纯化,得到最佳柱层析分离条件:上样量为0.5g;洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯=3:2;流速为3ml/min,所得产品游离叶黄素纯度可达90.20%。     

生物转化生产稀有糖醇——阿洛醇(蒜糖醇)研究进展

阿洛醇(又称蒜糖醇)是一种低热量六碳稀有糖醇,不会导致肥胖和血糖升高,适合于肥胖、糖尿病人群。此外,因其具有润肠通便等作用,在食品、医药等领域具有重要应用。同时,阿洛醇还是合成其他具有重要生理功能的D/L-型稀有糖的原料。文中介绍了阿洛醇的应用价值、生物合成方法,对生物合成阿洛醇的生物酶、生产工艺及研究进展进行了综述,并对阿洛醇的生物合成进行了展望。     

黄水生物转化技术研究

以黄水、米酒醪液和酒精醪液为筛选源,采用固体MRS和琼脂黄水为筛选培养基,选育出3株黄水碳源利用能力较强的菌株,分别为13h、52﹟和ah。将这3株菌依据不同比例进行混菌发酵,确定了最佳的混合模式,为ah∶13h∶52﹟=1∶2∶1,其碳源转化率高达67.8%;采用菌株13h、52﹟、ah进行黄水发酵的最佳工艺条件为:黄水中补充0.04%MgSO4、0.2%K2HPO4后,调节pH值至6.0,按照ah∶13h∶52﹟=1∶2∶1的比例,接种量13%。32℃发酵48 h,降糖幅度可达70%,发酵结束后,发酵液中的乙酸和丙酸含量达到了496.97 mg/100 mL和603.03 mg/100 mL。     

枸杞叶黄酮提取物的纯化及组成结构分析

为了确定枸杞叶黄酮的最佳纯化工艺及纯化后产物的结构和含量,本文比较了AB-8、DM301、NKA-9、HPD-100、HP-20、D101六种大孔吸附树脂的吸附解析性能,并选取吸附性能与解吸效果最好的树脂对上样条件及洗脱条件进行研究,考察上样浓度、上样液pH、上样流速、以及洗脱剂的浓度、流速、用量对洗脱性能的影响。采用紫外可见光谱(UV-Vis),傅立叶变换红外光谱(FT-IR)、高效液相色谱(HPLC)对纯化物组成和结构进行分析。结果表明,D101型大孔吸附树脂的吸附性能与解吸效果最好,其最佳纯化工艺为:上样浓度3.728 mg/mL,上柱液pH6,上样流速2 mL/min,以70%乙醇为洗脱液,洗脱流速2 mL/min,洗脱液用量3.5 BV。以此工艺纯化枸杞叶黄酮粗提物,其总黄酮含量由355.05 mg/g提高到809.89 mg/g,提高了2.28倍。经紫外可见光谱(UV-Vis)扫描分析纯化产物具有黄酮类化合物C6-C3-C6的基本结构;经傅立叶变换红外光谱(FT-IR)扫描分析其多种特征官能团包括C=O、羟基、酚羟基、甲氧基以及甲基较粗提物更为突出;经高效液相色谱(HPLC)检测,该纯化产物中芦丁、绿原酸、槲皮素、咖啡酸、对香豆酸、山奈酚、阿魏酸的含量依次为:179.45、60.92、3.14、6.35、2.66、2.45、1.38 mg/g。     

越橘叶超氧化物歧化酶的分离纯化与定性研究

采用超声波辅助提取越橘叶超氧化物歧化酶得粗酶液,经选择性热变性、Sephadex G-75柱层析、透析、冷冻干燥,得到纯度较高的越橘叶超氧化物歧化酶。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示在32kD和42kD左右有2条清晰条带;紫外-可见光谱扫描在波长258nm和280nm处有吸收峰;原子吸收光谱也测定出越橘叶超氧化物歧化酶中含有铁、锰、锌离子。结果表明越橘叶超氧化物歧化酶有3种类型:Fe-SOD、Mn-SOD和Cu/Zn-SOD。     

芝麻叶黄酮纯化工艺研究

本文探讨了用树脂吸附法对芝麻叶总黄酮进行纯化的工艺。黄酮粗品上柱后,用pH值为8.0的水洗、再用体积分数为70%的乙醇作为洗脱剂的洗脱效果最佳。可得到黄酮纯度为31.6%的芝麻叶黄酮浸膏产品。     

苦荞叶黄酮的提取及精制

对苦荞麦叶、茎、壳和籽粒粉碎物中的生物类黄酮进行了定性定量分析,选用总黄酮含量最高的苦荞叶为原料制备苦荞黄酮精粉,确定最佳的提取工艺为：料液比为1：20、pH8．15的60％乙醇、75℃、浸提180min。最佳的纯化工艺为：DA．201树脂,处理量为5ml／g树脂,洗脱溶剂60％乙醇溶液,洗脱流速2ml／min,洗脱剂用量为180ml。经此工艺制备的苦荞酮精粉中芦丁和总黄酮含量达到85．34％和91．36％。     

桑叶多糖的分离纯化及其抑菌活性研究

为研究大孔树脂分离和纯化桑叶多糖的最佳工艺及抑菌活性.以超声-微波协同提取的桑叶多糖为原料,考察8种不同类型大孔树脂的比吸附量、吸附率及解吸率,筛选出最佳纯化树脂类型为AB-8,对其吸附和解吸条件进行考察和优化,经过单因素试验,确定最优纯化工艺参数,并用牛津杯法考察桑叶多糖纯化前后的抑菌效果.结果显示,最优工艺参数为:...     

竹叶总黄酮的提取和纯化工艺的研究

采用L9（3^4）正交试验设计，以溶剂种类、溶剂浓度、料液比、浸提时间，作为主要考虑凼素，确定了竹叶黄酮的最佳提取工艺为：60％丙酮，料液比为1：40的条件下回流浸提3h。其中，溶剂浓度和料液比是两个主要影响因素，其p〈0．01，达到了显著性水平。在此基础上，采用x-5大孔吸附树脂与聚酰胺树脂联用的方法纯化竹叶提取物，最终竹叶总黄酮含量可达78．97％。