藠头中抗菌活性成分的抑癌作用及机理研究

从藠头(Allium chinense G.Don)中提取的活性物质在不同温度处理下具有良好的热稳定性。利用其活性物质处理肝癌(HepG-2)细胞和海拉(Hela)细胞,发现该物质对两种癌细胞生长都有抑制作用,且呈浓度依赖性。采用流式细胞仪分析发现,该物质可改变两种癌细胞的细胞周期,但不诱导细胞凋亡。通过体外对木瓜蛋白酶和蛋白酶K活力的测定,该物质对木瓜蛋白酶活力有较大的影响,对蛋白酶K活力影响不明显,这可能与木瓜蛋白酶的活性中心含巯基有关。分析认为藠头活性成分的抑癌作用可能是通过影响癌细胞内象木瓜蛋白酶等一些活性中心含巯基的酶的活力来实现的。     

一株粪肠球菌8-1所产抑菌物质的生物学特性研究

为获得具有应用潜力的抑菌活性菌株,本实验采用双层琼脂平板扩散法对内蒙古传统乳制品酸马奶中分离的一株粪肠球菌(Enterococcus faecalis)8-1进行研究。排除有机酸和过氧化氢的干扰后,其无细胞发酵上清液对指示菌单核增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)有明显的抑菌作用。且经过胰蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶处理后,抑菌活性几乎完全丧失,表明该抑菌物质是蛋白类物质。该抑菌物质在酸性条件下抑菌活性明显,且具有良好的热稳定性。对有机溶剂、金属离子、紫外线不敏感,与SDS和EDTA共同作用抑菌效果增强。有较广的抑菌谱,能抑制多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,初步推断属于类细菌素。     

纯天然食品品质改良剂——木瓜蛋白酶制剂

木瓜蛋白酶从未成熟的番木瓜提炼而成,是一种含巯基(-SH)的肽链内切酶(endopeptidase)。食品工业用的主要是木瓜蛋白酶的粗制品或部份纯化的木瓜蛋白酶,它们中均含有木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶A和B、木瓜肽酶Q和溶菌酶,前三种     

食品成分和环境对乳酸链球菌素抑菌活性的影响

以金黄色葡萄球菌为指示菌,研究酪蛋白、卵磷脂、氯化钠、乙醇和四种蛋白酶分别对乳酸链球菌素活性的影响,发现氯化钠、乙醇和蛋白酶K对乳酸链球菌素的活性有增强作用,而食品中的酪蛋白、卵磷脂和木瓜蛋白酶则有负面影响,胃蛋白酶和胰腺蛋白酶对乳酸链球菌素的活性没有显著影响。     

嗜酸乳杆菌WS所产细菌素生物学特性的研究

LactobacliiusacidophilusWS在MRS培养基中经过37℃培养得到的细菌素经受70℃、121℃处理20min后,活性几乎不变,对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌有明显的抑制作用,而对大肠杆菌为代表的革兰氏阴性菌的抑制作用不明显,说明该细菌素是一种广谱抗菌的细菌素。细菌素对木瓜蛋白酶(papain)、蛋白酶K(proteinaseK)以及胰蛋白酶(trypsin)敏感,而对中性蛋白酶(subtilisin)和胃蛋白酶(pepsin)的敏感性差。在一定的范围内,细菌素的抑菌活性和环境的酸度呈正相关。     

具有抑菌作用乳酸菌的筛选及其抑菌物质特性的研究

从内蒙古地区传统谷物发酵食品——酸粥中分离并鉴定的13株乳酸杆菌中筛选具有抑菌活性的菌株,并对其抑菌能力及抑菌物质的特性进行研究。结果表明,菌株NSZL-2(鼠李糖乳杆菌L.rhamnose)和NSZL-12(植物乳杆菌L.plantarum)对指示菌具有较高的抑菌活性,且抑菌能力主要来自菌体的发酵代谢产物。排除酸和过氧化氢的干扰后代谢产物仍具有抑菌活性,且抑菌物质对热具有很高的稳定性。代谢产物经蛋白酶K、胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、过氧化氢酶、溶菌酶处理后,抑菌能力均有不同程度的降低,说明抑菌物质对蛋白酶敏感,故判定抑菌物质中有蛋白质类细菌素。     

鲈鱼肠道LactobacillussakeiLY1-6对荧光假单胞菌抑制作用研究

目的:从海鱼肠道中筛选对荧光假单胞菌具有较强抑制作用的乳酸菌。方法:采用牛津杯琼脂扩散法筛选菌株,通过生理生化反应和16S rRNA测序进行菌株生物学鉴定,利用蛋白酶、p H和温度等因素对抑菌活性进行分析,采用扫描电镜分析乳酸菌无细胞上清液(CFS)对荧光假单胞菌细胞结构的完整性影响。结果:从鲈鱼肠道中筛选出对荧光假单胞菌具有较强抑制活性的菌株LY1-6,经生理生化和16S rRNA测序鉴定为清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)。菌株LY1-6 CFS经胃蛋白酶处理后其抑菌活性完全丧失,经中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和碱性蛋白酶处理后其抑菌活性分别丧失了38.22%、38.00%、22.48%和18.46%。在p H2.5~5.0具有抑菌活性,并具有良好的热稳定性,初步结果表明LY1-6 CFS中抑菌活性物质可能为细菌素。扫描电镜结果表明经LY1-6 CFS处理使荧光假单胞菌细胞结构被破坏并溶解。结论:来自鲈鱼肠道的清酒乳杆菌LY1-6对荧光假单胞菌具有较强抑制作用,其抑菌活性物质为细菌素类,作用机制为破坏细胞的完整性,可作为控制水产品中荧光假单胞菌腐败生物保鲜的出发菌株。     

复合酶生产酪蛋白磷酸肽的工艺研究

实验以木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶As1．398、碱性蛋白酶As2709 4种酶复合水解酪蛋白，生产酪蛋白磷酸肽。设计了木瓜蛋白酶 中性蛋白酶As1．398、木瓜蛋白酶 碱性蛋白酶As2709，胰蛋白酶 中性蛋白酶As1．398、胰蛋白酶 碱性蛋白酶As2709、木瓜蛋白酶 胰蛋白酶 中性蛋白酶As1.398和木瓜蛋白酶 胰蛋白酶 碱性蛋白酶As2709六种试验方案。通过比较水解度、酶促水解速率(酶活力)、得率和N／P比等工艺参数，探索合适的实验工艺条件。我们发现胰蛋白酶 中性蛋白酶As1．398这组的产品综合结果最佳。     

瑞士乳杆菌AJT所产抗菌物质的初步研究

从内蒙古地区传统乳制品中分离的瑞士乳杆菌AJT,培养至6h开始具有抗菌活性,20h达到抗菌活性最大值.用甲醇和乙酸乙酯提取的菌株AJT的抗菌物质,排除酸性产物和过氧化氢干扰后,对大肠杆菌等革兰氏阴性菌、金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌及扩展青霉等真菌具有抗菌活性.抗菌物质经胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K和木瓜蛋白酶处理后,抗菌活性下降,但仍然具有活性,表明该抗菌物质由蛋白类或非单一类物质组成,在pH2.0～5.0范围内有抑菌活性,对热稳定,对紫外线照射不敏感,属于类细菌素.     

蛋白酶种类及水解时间对猪血浆蛋白水解物抗氧化性和乳化性的影响

主要探讨蛋白酶种类及水解时间对猪血浆蛋白水解物抗氧化活性以及乳化能力的影响。采用3种蛋白酶(碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶)对猪血浆蛋白分别水解20、40、60、80、120 min。测定猪血浆蛋白水解物的抗氧化活性、乳化活力、乳化稳定性以及分子质量的变化趋势。结果表明:相对于木瓜蛋白酶和中性蛋白酶来说,碱性蛋白酶能够显著提高猪血浆蛋白水解物的还原能力、ABTS~+·和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力(P0.05),而且碱性蛋白酶水解60 min时所获得的猪血浆蛋白水解物具有最高的乳化活力和乳化稳定性(P0.05)。另外,随着水解时间的延长,猪血浆蛋白水解物中小于5 k D的成分显著增加(P0.05),且碱性蛋白酶对猪血浆蛋白的酶解效果最佳(P0.05)。上述结果表明,碱性蛋白酶适度水解猪血浆蛋白以后获得的水解物同时具有良好的抗氧化活性和乳化能力。     

具有抑霉菌作用乳杆菌抑菌物质特性研究

从内蒙古传统发酵食品中筛选出2株对霉菌具有较强抑制作用的乳杆菌ALAC-1和ALAC-4。研究了2株菌代谢产生抑菌活性物质的特性,并测定其对黄曲霉的最低抑菌浓度。结果表明,2株菌所产抑菌物质经排酸和过氧化氢酶处理后,对霉菌仍具有一定的抑制作用,且活性物质对热有良好稳定性。经胰蛋白酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、木瓜蛋白酶、蛋白酶K处理后,活性物质对霉菌的抑制作用明显下降,抑菌物质对蛋白酶敏感,即抑菌物质中存在蛋白类物质。ALAC-1和ALAC-4对黄曲霉的最低抑菌浓度分别为62.50 mg/m L和31.25 mg/m L。     

罗汉果蛋白酶的化学修饰

通过对罗汉果蛋白酶进行化学修饰,分析该酶结构与功能的关系。利用8种化学修饰剂对罗汉果蛋白酶进行修饰,并测定修饰后该酶的酶活的变化。结果显示:苯甲基磺酰氟(PMSF)、N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)和焦碳酸二乙酯(DEPC)对该酶的抑制作用很强,而其它修饰剂对酶活性影响不大,说明羟基、吲哚基和咪唑基可能为蛋白酶活性的必需基团,而巯基、氨基、羧基、胍基和二硫键可能并不是酶活性的必需基团。     

乳杆菌代谢产生抑菌物质的特性研究

从内蒙古传统发酵食品中筛选出具有抑酵母作用的乳杆菌,对其特性进行研究。结果表明,ALAC-3和ALAC-4菌株经排酸后,对酵母仍有抑菌效果。活性物质对热有很好的稳定性,并且对紫外线辐射不敏感。Ca2+、Mn2+对ALAC-3代谢产物的抑菌作用起促进作用,而K+、Na+、Mg2+对其代谢产物的抑菌作用起抑制作用。K+,Ca2+,Na+,Mg2+,Mn2+对ALAC-4代谢产物的抑菌作用均起抑制作用。经过氧化氢酶处理后,仍有抑菌效果。经木瓜蛋白酶、蛋白酶K、胰蛋白酶、胃蛋白酶处理后,抑菌活性均有不同程度降低,说明抑菌物质对蛋白酶敏感,故判定抑菌物质中有蛋白类物质。     

出口甜酸藠头的腌制与加工

蕌头原名薤(Scallion),为百合科,属于葱类。蕌头中的辛辣成分与大蒜很相似,都含有大蒜氨酸(alliin),甲基大蒜氨酸,大蒜糖(Scorodose)。其结构式为。(?)蕌头在我国南方地区均有栽培,其内含有蛋白质、脂质、糖分、纤维、维生素 B_1、维生素 B_2、维生素 C。蕌头中的蒜氨酸在酶的作用下能分解出一种具有强烈杀菌作用的挥发性物质——蒜素。故可防止多种疾病,特别是通过腌制发酵加工出来的精制甜酸蕌头,具有     

天然有机物对中性蛋白酶活力的影响

本文探讨了两种不同天然有机物对1398中性蛋白酶活力的影响，测试了该蛋白酶的最适作用条件，即最适温度为50℃，最适pH值为7．6。较系统地分别考察了不同浓度的天然有机物H、天然有机物K及H与K同时对1398中性蛋白酶活力的影响，结果表明对酶活均有不同程度的激活，其中天然有机物H和K同时作用于蛋白酶，提高酶活最为显著。     

具免疫活性的鲶鱼胶原多肽酶解工艺研究

以鲶鱼头、骨为原料,以感官评价等为指标,探索了较好的脱脂方法,并以蛋白酶种类(木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶)、底物浓度、酶解时间、加酶量为实验因素,以脾淋巴细胞的转化程度为观察指标,设计了四因素五水平的正交实验,对具有免疫活性的鲶鱼胶原多肽的酶解条件进行了筛选.研究结果显示:采用异丙醇-乙酸乙酯法对前处理后鲶鱼头、骨泥的脱脂效果最好;获得具有较高免疫活性鲶鱼胶原多肽的最佳酶解工艺条件为:以木瓜蛋白酶水解鲶鱼头、骨,加酶量1600U/g、水解时间为4h、底物浓度为1:4.5(W/W);实验结果同时显示,在本研究条件下,酶的种类是影响酶解物活性的主要因素.     

木瓜蛋白酶的应用研究进展

木瓜蛋白酶属巯基蛋白酶，广泛存在于番木瓜的茎叶和果实中。本文对木瓜蛋白酶的结构，组成以及在食品、医药、工业中的用途进行了综述。     

乳酸乳球菌L9所产类细菌素Lactococcin GJ-9的初步研究

采用双层平板法 ,自 117株分离的乳酸菌中筛选出一株具有较广抑菌活性的菌株L9,经鉴定为乳酸乳球菌 (Lactococcuslactics)。在排除酸性产物和过氧化氢的干扰后 ,L9菌株发酵液对溶壁微球菌 (Micrococcuslysodeikticus)、金黄色葡萄球菌 (Staphylococcusaureus)和枯草杆菌 (Bacillussubtilis)等革兰氏阳性菌以及大肠杆菌 (Escherichiacoli)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium )等革兰氏阴性菌有强烈的抑制作用。表明该菌株产生一具有广谱抑菌活性的物质。经胰蛋白酶、胃蛋白酶和蛋白酶K处理后发酵液抑菌活性不变 ,表明该活性物质为非蛋白成分 ,属于类细菌素 ,命名为LactococcinGJ 9。它具有很好的热稳定性 ,在酸性条件下稳定且活性高 ,对蛋白酶不敏感 ,且具有较广的抗菌谱     

蛋白酶酶解红花籽粕的工艺条件研究

研究了蛋白酶酶解红花籽粕的工艺条件。首先研究了超声处理前后对木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和枯草芽孢杆菌中性蛋白酶的酶活力的影响,结果表明,经超声处理对蛋白酶酶活力影响最大的是木瓜蛋白酶,酶活力提高了2.95倍。然后采用单因素和正交试验,确定最佳的工艺条件:超声时间10 min,超声温度65℃,pH 6.5,酶用量1.9%,在此条件下,水解度为51.1%,还原力的吸光度值为0.428。     

乳链球菌素最小抑菌浓度(MIC)测定及理化性质分析

金黄色葡萄球菌是一种常见的食品致病菌,能引起严重的感染。乳链球菌素(nisin)是世界卫生组织公认的天然食品防腐剂。采用二倍梯度稀释法探究nisin对金黄葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC),通过琼脂平板扩散法分析nisin的理化性质。结果表明,nisin对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为2.34μg/mL。理化性质分析发现,nisin在pH为2~6状态下,抑菌效果好,在pH7~11抑菌活性逐渐减弱。Nisin在100℃以下热处理,活性保持良好,120℃处理仍有部分活性,说明其耐热稳定性好。胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、蛋白酶K处理nisin,抑菌活性均有一定的削弱,其中蛋白酶K削弱最为明显。Triton-100、Tween20表面活性剂对nisin抑菌活性有细微的协同作用,但SDS可明显抑制其抑菌活性。