高效液相色谱-大气压化学电离质谱分析双(2-羟乙基)砜

利用高效液相色谱-大气压电离质谱(HPLC-APCI-MS)对硫芥子气的氧化产物之一双(2-羟乙基)砜进行了测定,优化了获得最佳准分子离子峰的探头温度和锥体电压,最低检出限为0.4 ng(S/N>3),利用源内CID技术获得了丰富的离子碎片,并对碎片进行了解释,同时对禁止化学武器组织(OPCW)第十五轮水平考试中水样品中的双(2-羟乙基)砜进行了28天的定性、定量分析。     

人尿中Carphedone的气相色谱-质谱分析

建立检测人尿中兴奋剂 Carphedone分析方法。 5 0 m g尿样流经 XAD-2填装小柱淋洗 ,用甲醇洗脱后收集洗脱液 ,经过缓冲和酶解后振荡、离心 ,加入衍生化试剂 N-甲基 -N-三甲硅烷基三氟乙酰胺 ( MSTFA)和三甲硅烷基咪唑 ( TMSI)进行 TMS硅烷基化。气相色谱 -质谱 ( GC/MS)分析结果表明 :可以检测到 5 0 h内的代谢产物 ,同时可以检测 Carphedone衍生化后的脱水反应产物。此方法适用于兴奋剂检测尿中Carphedone代谢物的分析     

氯丙嗪在不同种属肝微粒体中代谢差异研究

采用体外肝微粒体孵育实验研究氯丙嗪在鼠、猪、鸡肝微粒体的代谢速率及代谢产物。利用液相色谱-串联质谱测定不同时间点氯丙嗪的峰面积,计算氯丙嗪的体外代谢率、代谢半衰期（T1/2）及固有清除率（CLint）,通过氯丙嗪及其代谢产物的保留时间、碎片离子等信息,推断氯丙嗪的代谢产物和代谢途径。结果表明,在猪、鼠、鸡肝微粒体孵育体系中,氯丙嗪的T1/2分别为18.2、173.3、346.5 min,CLint分别为76.2、8.0、4.0 μL/(min·mg)。在3种肝微粒体孵育体系中共发现8种代谢产物,在鼠、猪和鸡肝微粒体孵育体系中分别发现5种、7种和4种氯丙嗪代谢产物,均检测出产物氯丙嗪亚砜、去甲基氯丙嗪、6-羟基氯丙嗪和7-羟基氯丙嗪。氯丙嗪在肝微粒体孵育体系中的代谢途径以氧化、羟基化和去甲基反应为主,其在猪肝微粒体孵育体系中代谢和清除速度最快,其次是鼠、鸡,在不同种属肝微粒体孵育体系中代谢产物的种类和含量存在差异。     

HPLC-MS/MS法鉴定落新妇苷在大鼠尿中的代谢产物

为鉴定大鼠给药落新妇苷后尿中的主要代谢产物,收集其尿样,用聚酰胺固相萃取小柱处理后进样,采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法分析.电喷雾离子源在负离子模式下进行扫描,借助碰撞诱导解离方式进行落新妇苷在大鼠体内主要代谢产物的结构确证.共鉴定出6个落新妇苷在大鼠尿中的代谢产物,分别为落新妇苷异构体(M1)、...     

液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱鉴定赛拉嗪在人尿中的代谢产物

为研究赛拉嗪在人体内的代谢产物,采用液-液萃取法和蛋白沉淀法对赛拉嗪阳性尿液进行前处理,利用液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱（LC-Q-Orbitrap MS）技术,在HESI-Ⅱ正离子模式下分析,利用Compound Discoverer 软件对赛拉嗪代谢产物进行质谱解析。结果表明,赛拉嗪在人体内的主要代谢途径包括羟基化、氧化、N-脱烷基化、S-氧化成砜与葡萄糖醛酸及硫酸的结合等,在人尿液中共检测到13个代谢产物。本工作初步阐明了赛拉嗪在人体内的代谢途径以及主要代谢物。     

固相萃取-高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法检测芥子气染毒血样中的三肽加合物

三肽加合物,(S-2-羟乙基硫代乙基)-半胱氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸[(S-HETE)-Cys-Pro-Phe]是芥子气染毒后体内重要生物标志物之一。本文首先合成并纯化(S-HETE)-Cys-Pro-Phe,应用固相萃取-高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法对其进行定性定量分析。将芥子气染毒血样经Hitrap Blue亲和柱提取白蛋白,选择链霉蛋白酶进行酶解,应用固相萃取柱进行富集净化,采用四级杆飞行时间质谱进行检测。     

基于液相色谱-质谱联用及~(19)F核磁成像技术测定一种新型氟类化合物

(2-甲基丙烯酸乙酯)-N-(3,3,3-三氟丙基)-N-甲基甘氨酸(CBF_3)是本团队新合成的一种~(19)F核磁成像基团。本研究结合液相色谱-质谱联用方法对低浓度样品检测灵敏度高的特点,建立了CBF_3液相色谱-质谱联用检测标准曲线,并进行了低、中、高3个浓度组CBF_3的提取回收率和精密度等方法验证。结果表明采用液相色谱-质谱联用方法检测CBF_3在浓度范围10μg/L～1000μg/L内线性关系良好,相关系数(R)大于0.995,方法定量限为10μg/L;日内精密度和日间精密度(RSD)、提取回收率均符合生物样品的分析要求。为研究CBF_3在活体内的代谢情况,在小鼠给药后不同时间点,采用液相色谱-质谱联用方法进行血清CBF_3浓度的定量分析,分析结果显示给药45min后血清CBF_3浓度迅速下降;同时我们还采用~(19)F核磁成像技术检测小鼠肝脏、肾脏和膀胱组织中的CBF_3信号,并证明该化合物一部分可通过肝脏代谢,绝大部分经过肾脏代谢,随尿液形成蓄积在膀胱中,最终通过尿液排出体外的代谢途径。     

高效液相色谱法制备大鼠体内5-甲氧色胺衍生物（5-MT）的代谢产物

建立了大鼠尿中5-甲氧色胺衍生物(5-MT)一硫酸化代谢产物的高效液相色谱分离与制备方法.大鼠单剂量按120mg/kg灌胃给药,收集0～8h尿样,将尿样品经过SPE(固相萃取)柱预处理后,用半制备型HPLC对预处理后样品中的代谢产物进行分离与制备.结果表明该方法操作简单,分离效果好,可用于5-MT硫酸化代谢产物的制备.     

HPLC-MS/MS法分析大鼠体内淫羊藿素葡糖醛酸结合物

应用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法鉴别大鼠血浆及尿粪中淫羊藿素葡糖醛酸结合物。生物样品经固相萃取法处理后,以V(乙腈)∶V(水)∶V(乙酸)=45∶55∶1.5为流动相,通过Dikma C18柱分离,采用电喷雾离子四极杆串联质谱在负离子检测方式下进行一级和二级全扫描质谱分析。通过提高离子源内的DP电压,使待测物发生源内裂解产生碎片离子,再对产生的碎片离子进行子离子扫描,可获得相当于三级质谱分析的结果。根据待测物的色谱和质谱信息,发现淫羊藿素在大鼠体内可代谢为1种双葡糖醛酸结合物M1和2种单葡糖醛酸结合物M2、M3。大鼠灌胃给予淫羊藿素后,在血浆和尿样中可检测到M1、M2和M3,在粪便中仅检测到M2和M3。     

通过RRLC-Q-TOF MS和UPLC-QQQ MS分析原人参三醇型皂苷在人肠道菌群中的代谢产物

通过高分离度快速液相色谱-四极杆飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS)和超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-QQQ MS)法对原人参三醇型皂苷Re、Rg 1、Rg 2、Rh 1、Rf、F 1、R 1在人肠道菌群中的转化产物进行定性、定量分析,确定原人参三醇型皂苷的代谢产物、转化途径和60 h时的转化率。结果表明,人参皂苷Re的转化产物为人参皂苷Rg 1、Rg 2、Rh 1、F 1和PPT,转化率为91%;人参皂苷Rg 1的转化产物为人参皂苷Rh 1、F 1和PPT,转化率为80%;人参皂苷Rg 2的转化产物为人参皂苷Rh 1和PPT,转化率为73%;人参皂苷Rh 1和F 1主要通过PPT代谢,转化率分别为82%和81%;人参皂苷Rf的转化产物为人参皂苷Rh 1和PPT,转化率为89%;三七皂苷R 1的转化产物为人参皂苷Rg 1、R 2、Rh 1和PPT,转化率为79%。原人参三醇型皂苷类成分可被人肠道菌群代谢,主要通过丢失糖残基形成转化产物,而次级皂苷和苷元是人参在体内发挥药理作用的物质基础。     

GC/MS测定强离子干扰水中的6种化学毒剂降解产物

建立强阳离子交换固相萃取一气相色谱/质谱(SCX/GC/MS)同时检测强离子干扰水中甲基膦酸(MPA)、异丙基膦酸(IPA)、甲基膦酸嚬哪酯(PMPA)、硫二甘醇(TDG)、硫二甘醇亚砜(TDGO)和硫二甘醇砜(TDGO2)的方法。利用优化的条件,测定TDGO在5.0～25 μ g/mL、其他化合物在2.5～25 μ g/mL的浓度范围内呈良好的线性关系,同时对浓度各为1.0μg/mL和10 μ g/mL的6种目标化合物的加标回收率均在34.1%～ 103.8%之间,且相对标准偏差均小于10%。该方法可实现强离子干扰水样中烷基膦酸的检测,有效避免真实样品中目标化合物的丢失,具有实用价值。     

UPLC-MS/MS方法研究次乌头碱在大鼠肝微粒体CYP450中的体外代谢产物及代谢酶亚型

次乌头碱是一种二萜类双酯型乌头碱类化合物,广泛存在于乌头属植物中。本工作利用超高效液相色谱-串联质谱联用（UPLC-MS/MS）及高分辨质谱（HRMS）法分析确定了次乌头碱在大鼠肝微粒体CYP450中的代谢产物,分别选取磺胺苯吡唑、α-萘黄酮、奎那定、酮康唑、二乙基二硫代氨基甲酸铵作为CYP2C、CYP1A2、CYP2D、CYP3A、CYP2E1的特异性抑制剂,确定了各产物的CYP450酶的代谢亚型。结果表明:次乌头碱在大鼠肝微粒体中的主要代谢产物有7种,分别为15-脱氢次乌头碱、8-O-脱乙酰基-次乌头碱、2-羟基-次乌头碱、中乌头碱、1-去甲基-次乌头碱、18-去甲基-次乌头碱和羟基-8-O-脱乙酰基-次乌头碱;CYP3A为次乌头碱的主要代谢酶,CYP2C、CYP1A2、CYP2D和CYP2E1也参与了次乌头碱的代谢。     

基于多成分序贯代谢的石榴皮中枢神经系统保护作用物质基础研究

将序贯代谢法与超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）相结合,研究石榴皮发挥中枢神经系统保护作用的物质基础。首先制备石榴皮提取液,通过肠灌流和封闭肠环法收集肠壁代谢、肠道菌群代谢的血浆样品,经液相色谱-串联质谱分析以原型吸收入血成分和代谢产物;综合代谢组大鼠灌胃给药后,鉴定其血中移行成分;再结合以上结果对脑脊液样品进行解析,鉴定出入脑成分。结果表明,从提取液中共检测到鞣质类、黄酮类、酚酸类和异香豆素类等38个化学成分。肠壁代谢、肠道菌群代谢情况基本一致,检测到30个原型入血成分和12个代谢产物;综合代谢组血浆中检测到7个原型入血成分和16个代谢产物;在脑脊液中发现2个原型成分和4个代谢产物,分别是柠檬酸、鞣花酸和2个甲基鞣花酸同分异构体、二甲基鞣花酸、二甲基鞣花酸葡萄糖醛酸化物。本研究基于多成分序贯代谢靶向识别出石榴皮及其代谢产物中入脑成分,可为阐明石榴皮中枢神经系统保护作用提供证据。     

高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱检测芥子气染毒动物血浆中烷基化白蛋白加合物

建立高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(HPLC/Q-TOFMS)分析动物血液样品中芥子气(HD)染毒烷基化白蛋白加合物(半胱氨酸-34加合物)的方法。在采用不同样品处理和仪器条件优化的基础上,确定最佳实验条件。HD染毒全血首先离心分离成血细胞和血浆,然后取50μL血浆加入50μL的10mg/mL链霉蛋白酶NH_4HCO_3(50mmol/L)水溶液,于37℃孵化酶解2.5h,酶解后的样品用0.5mL10KD超滤管超滤,在滤液中成功检测到S-[2-[(巯乙基)硫]乙基]半胱氨酸-脯氨酸[(S-HETE)Cys-Pro]二肽加合物。结果表明该方法简单、快速、准确、灵敏。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定大豆中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸的残留

采用超高效液相色谱-串联质谱法建立了快速检测大豆中草甘膦和氨甲基膦酸残留量的分析方法。试样经水超声提取,二氯甲烷去除脂肪,C18固相萃取柱净化后,在硼酸钠缓冲溶液中与9-芴甲氧羰酰氯(FMOCCl)进行衍生反应,其衍生产物在C18色谱柱上以2mmol/L乙酸铵溶液和乙腈为流动相,进行液相色谱分离:质谱检测采用电喷雾正离子化模式和多反应监测模式(MRM)。结果表明,草甘膦和氨甲基膦酸在0.001~0.5mg/L范围内线性关系良好,相关系数(R)分别为0.9996和0.9993,定量限(LOQ)均为0.01mg/kg。在空白大豆样品添加浓度为0.02、0.2、2mg/kg时,草甘膦和氨甲基膦酸的平均回收率分别为80.2%~91.5%和77.7%~89.3%,相对标准偏差(RSD)分别为3.37%~6.96%和4.11%~8.27%(n=6)。本方法快速、简便、灵敏,适用于大豆中草甘膦和氨甲基膦酸残留的同时检测。     

5,6,7,4′-四羟基黄酮和5,6,7,4′-四甲氧基黄酮高分辨电喷雾串联质谱裂解规律对比研究

以5,6,7,4′-四羟基黄酮和5,6,7,4′-四甲氧基黄酮为例,运用高分辨电喷雾串联质谱在正离子模式下(HR-ESI-MS/MS)获得的碎片离子,根据一、二级质谱离子的精确质荷比,分别推导出两种黄酮可能的裂解途径,并比较多甲氧基、多羟基黄酮质谱裂解规律的异同。结果表明:在正离子模式下,5,6,7,4′-四羟基黄酮和5,6,7,4′-四甲氧基黄酮的一级质谱均可获得稳定的准分子离子。5,6,7,4′-四羟基黄酮的二级质谱碎片离子由准分子离子[M+H]+经RDA裂解及进一步脱水和(或)脱一氧化碳中性分子产生,直接由准分子离子脱水及一氧化碳中性分子获得的碎片离子丰度比较低;5,6,7,4′-四甲氧基黄酮二级质谱碎片即可由准分子离子[M+H]+直接经RDA裂解,还可先脱去乙烷或甲烷中性分子再经RDA裂解(1,3断裂)获得。此外,该化合物还有大量的碎片离子是由准分子离子[M+H]+分别经脱水、甲烷、乙烷或进一步脱甲基、一氧化碳而获得。两个化合物质谱碎片的比较结果表明,多甲氧基黄酮的二级质谱碎片裂解机制更复杂,碎片信息更丰富。该方法可为黄酮类化合物成分的快速定性分析提供支持,也可为黄酮类化合物体内代谢产物的LC-MS/MS鉴定提供依据。     

基于UHPLC-MS/MS分析痕量芥子气染毒血样中血红蛋白加合物

芥子气可以与血红蛋白的组氨酸侧链发生反应，生成芥子气暴露染毒的生物标志物。本研究建立了定性、定量检测痕量芥子气暴露染毒人血红蛋白加合物的方法。采用2-氯乙基乙基硫醚（2-CEES）染毒的血红蛋白溶液作为内标，用链霉蛋白酶对芥子气-珠蛋白加合物进行酶解，经PPL柱固相萃取纯化以及苄氧羰基氯（Cbz-Cl）衍生，使用超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）进行分析检测。经过优化实验条件，最终选择链霉蛋白酶的酶解温度55 ℃，酶解时间10.0 h，使用3.0 mL 5%甲醇水溶液淋洗，1.0 mL 50%甲醇水溶液洗脱，Cbz-Cl衍生时间30 min。结果表明，在10.0~1 000 μg/L线性范围内，线性关系良好（R²>0.997），准确度为89.8%~113%，精密度（RSD）不高于12.4%，检出限(LOD)为10.0 μg/L(S/N>5)。该方法采用2对离子对进行确证，有助于痕量芥子气暴露染毒的溯源性分析，与传统酸解法相比，该方法样品处理时间短，反应条件温和、操作简单，且灵敏度可提高约150倍。     

分光光度法和气相色谱-质谱法在芥子气测定中的比较研究

分别对紫外分光光度法和气相色谱-质谱法在芥子气定性定量方面的能力进行了对比研究,提出了两种方法的适用范围。在选定浓度范围内,两种方法均具有良好的线性关系和可重复性,其中气相色谱-质谱法检出限较分光光度法至少低两个数量级,更适合环境样品中痕量芥子气的测定。在较低浓度杂质干扰下,两种方法对芥子气的回收率均无明显影响;当路易氏剂或芥子砜浓度高于一定范围时,分光光度法将无法对芥子气进行定性或定量测定。     

聚酯多元醇Re-Pol 98038的电喷雾质谱研究

电喷雾质谱(ESI-MS)是近十几年快速发展起来的一种"软电离"技术,主要应用于中等极性至强极性、难挥发、热不稳定化合物如蛋白质、多肽[1]、药物代谢产物[2]、天然产物[3～5]等样品的定性、定量分析.电喷雾电离还能使一些化合物在电离过程中产生多电荷.因此,即使分析样品分子量超出质量分析器的检测能力范围,通过形成多电荷也能满足大分子量化合物的质谱分析要求.     

基于UPLC-Q-TOF MS技术的血栓心脉宁片成分分析

为全面了解中药大品种血栓心脉宁片(XXT)化学成分,采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱联用技术(UPLC-Q-TOF MS)测定该复方制剂的小分子成分(100～1 500 u),通过UNIFI天然产物分析平台,比对各成分的精确分子质量、保留时间及质谱碎片离子信息,分析鉴定各化合物结构。结果表明,在XXT中共鉴定出187种化学成分,包括三萜皂苷类、菲醌类、蟾蜍甾二烯类和甾体类及其他结构类型的化合物。血栓心脉宁片富含小分子化学成分且结构类型多样,是其发挥抗血瘀活性及多靶点作用机制的物质基础。该研究可为阐明XXT的药效物质基础和提升质量控制标准提供数据参考。