石榴酸对人膀胱癌T24细胞凋亡的影响

利用MTT法检测石榴酸对T24细胞增殖的影响,利用Hoechst33342染色后观察细胞形态学的变化,并用流式细胞仪检测细胞凋亡率。MTT分析结果显示,石榴酸的半致死浓度(IC50)为30μmol/L。应用荧光显微镜观察Hoechst荧光染色后细胞核形态变化,石榴酸处理T24细胞后,细胞核体积明显变小,并呈现皱缩致密的颗粒状的强荧光。应用流式细胞仪分析石榴酸对细胞凋亡的影响,发现石榴酸能够诱导膀胱癌T24细胞的凋亡,30μmol/L石榴酸处理细胞24h,凋亡率为49.4%。说明石榴酸能够显著抑制膀胱癌T24细胞的活力,有效诱导T24细胞凋亡。     

胡椒碱对人胃癌SGC-7901细胞抗肿瘤活性的体外实验研究

胡椒碱（Piperine）是一种从胡椒属植物中提取的生物碱,具有镇静、抗炎、抗肿瘤等多种药理活性.探讨胡椒碱对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用.采用MTT比色法测定其对SGC-7901细胞增殖抑制率;通过免疫荧光法、流式细胞术、Western blot法对其进行抗癌机制研究.MTT结果显示Piperine处理细胞72h的IC50值为37.41 μmol·L-1,且呈现时间剂量依赖性; Hoechst33258染色荧光显微镜观察发现Piperine能诱导SGC-7901细胞核形态学改变,部分细胞呈现典型的凋亡形态学特征;Annexin V-FITC/PI荧光双染结果亦证实Piperine可以诱导SGC-7901细胞发生凋亡;DAPI和DCFH-DA染色流式细胞术分析显示Piperine诱导SGC-7901细胞G2/M期阻滞、细胞活性氧产生增加; Western blot分析发现Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达逐渐增加,呈现剂量依赖性,且Bax/Bcl-2比例增加.因此,Piperine具有抑制SGC-7901细胞增殖和诱导凋亡的抗肿瘤活性.     

梯度低氧及葡萄糖剥夺对脑胶质瘤细胞凋亡及增殖的影响

探讨不同低氧浓度及葡萄糖剥夺对脑胶质瘤细胞(T98G)凋亡及增殖的影响.T98G细胞分别于常糖和无糖下培养,并分别在21%O2,3%O2,0.5 O2%,0.1 O2%下培养24 h,48 h,72 h,流式细胞仪及Hoechst染色检测细胞凋亡,MTT法检测存活及增殖.各常糖组均无明显细胞凋亡(P0.05);而各无糖组均有明显细胞凋亡(P0.01),常氧无糖组凋亡较3%、0.5%低氧无糖组显著,且随时间延长,细胞凋亡率递增(P0.01).常氧无糖组48 h凋亡率比0.1%低氧无糖组高,至72 h时低于0.1%低氧无糖组.MTT示低氧可促进T98G细胞增殖,3%O2常糖组呈现明显增殖趋势,但0.5%及0.1%低氧增殖率减慢,各无糖组细胞增殖均显著受到抑制,但无糖低氧组细胞较无糖常氧组生长好.研究显示葡萄糖存在的条件下,适度低氧促进脑胶质瘤细胞存活及增殖,氧浓度低至0.1%,72 h以内仍无明显凋亡,但较常氧下增殖减慢,提示低氧不能作为独立因素诱导胶质瘤细胞发生凋亡,而葡萄糖剥夺可独立诱导脑胶质瘤细胞发生凋亡;0.5%及以上浓度的适度低氧对无糖逆境中及脑胶质瘤细胞有一定的抑制凋亡和促增殖作用.48 h内极度低氧浓度(0.1%)对无糖逆境中胶质瘤细胞仍具有抑制凋亡作用,但随着时间的延长,这种抗无糖逆境抑制凋亡的能力将消失.     

人参皂苷Compound K对人膀胱癌T24细胞凋亡的影响

对人膀胱癌T24细胞进行体外培养,采用MTT方法观察不同浓度人参皂苷Compound K处理细胞24、48、72h后对细胞增殖的抑制作用,利用Hoechst33342对细胞进行染色,荧光显微镜观察细胞形态学变化,应用流式细胞术观察人参皂苷Compound K对T24细胞凋亡的诱导作用,并应用WesternBlotting检测不同浓度人参皂苷Compound K处理后T24细胞中caspase-3及相关蛋白的表达情况。结果显示,人参皂苷Compound K对膀胱癌T24细胞的增殖具有较强的抑制作用,呈浓度和时间依赖关系,并诱导肿瘤细胞凋亡,同时caspase-3活化型表达量增加。说明人参皂苷Compound K能够显著抑制膀胱癌T24细胞的活力,有效地诱导T24细胞凋亡。     

放线菌素D诱导的SL-1细胞凋亡的初步研究

研究了一定浓度的放线菌素D诱导SL-1细胞凋亡作用.以终浓度为50ng/mL,100ng/mL,200ng/mL,500ng/mL的放线菌素D处理正常SL-1细胞,24h后,终浓度为200ng/mL,500ng/mL的放线菌素D处理的细胞出现较明显的细胞凋亡现象,光学显微镜下可见细胞膜表面突出或形成小泡,细胞碎裂成凋亡小体;DAPI染色荧光显示细胞核逐渐形变,直至碎裂成小块而被凋亡小体包裹;DNA琼脂凝胶电泳呈典型的凋亡细胞DNA梯形条带;流式细胞仪检测结果,对照和以上四种浓度的放线菌素D处理的细胞凋亡率分别为3.43%,10.61%,15.60%,32.67%,72.24%.实验结果证明一定浓度的放线菌素D能诱导SL-1细胞凋亡,且成剂量正相关.     

不同浓度血清对大鼠骨髓间充质干细胞生长的影响

血清缺乏是在细胞治疗中对供体BMSCs活性影响的重要因素之一。作者探讨了不同浓度血清对MSCs细胞凋亡的影响。体外培养大鼠MSCs,用不同浓度血清(FBS)处理MSCs,MTT法检测MSCs细胞生长曲线,用Hoechst33342/PI染色检查MSCs的细胞凋亡,并使用Western blot法分析细胞凋亡相关生物信号分子的表达。结果表明,血清缺乏培养条件下,MSCs在培养72h内出现细胞凋亡。并且,无血清培养直接引起了Casepase-3,Casepase-8和Casepase-9蛋白质表达量的增加,导致细胞凋亡的发生,从而致使细胞生长曲线的下降。此外,高浓度的血清对细胞凋亡具有保护作用。     

苦参碱对肝癌细胞的作用

用浓度分别为0.25,0.5,0.75,1.0,2.0 mg/mL的苦参碱提取液分别体外培养SMMC-7721细胞24,48,72,96 h后,再用MTT法观察其对SMMC-7721细胞的生长抑制作用.结果表明：不同浓度的苦参碱具有抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖和诱导肿瘤细胞的凋亡的作用,呈明显的时间、剂量依赖性 各浓度和时间之间具有显著差异性.     

家蝇幼虫凝集素的分离纯化及其抑制MCF-7细胞活性的研究

家蝇幼虫血淋巴粗提液经过亲和层析,分离出3种与D-半乳糖特异性结合的蛋白,经高效液相色谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳。分离出分子质量为38ku的家蝇幼虫凝集素（MLL-2）,该组分具有明显的凝血活性．圆二色谱结果表明,MLL-2的二级结构主要是以／3折叠（80．3％）和无规卷曲（19．5％）的构象存在．MTT实验结果显示,MLL-2对人乳腺癌（MCF-7）细胞的生长具有明显的抑制作用,其抑制效果具有时间和浓度依赖性．形态学观察表明,MLL-2处理过的MCF-7细胞出现凋亡小体、染色质浓缩凋亡现象．经流式细胞仪分析MCF-7细胞被阻遏在G2／M期,并且凋亡率随作用时间的延长而增加．MLL-2通过诱导MCF-7细胞发生凋亡,从而起到抑制肿瘤细胞生长的作用．     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA联合ZD55-TRAIL溶瘤腺病毒对肝癌细胞杀伤作用的研究

研究组蛋白去乙酰化抑制剂SAHA(suberoylanilide hydroxamic acid)联合ZD55-TRAIL对人肝癌细胞株的体外杀伤效果,实验采用MTT法检测SAHA、ZD55-TRAIL以及二者联合对肝癌细胞株Huh-7、Bel-7404、Hep3B以及人正常肝细胞株QSG-7701增殖的抑制作用;利用Hoechst33342染色对联合处理的细胞进行凋亡形态学观察;通过结晶紫实验进一步检测联合用药对肿瘤细胞的杀伤情况;通过Western blot实验在蛋白水平上检测一些凋亡相关蛋白表达情况的变化.实验结果表明:SAHA联合ZD55-TRAIL处理3d后对肝癌细胞株Huh-7的增殖抑制率达到50％,对Hep3B、Bel-7404也达到近40％的杀伤效率,并且联合治疗后对人正常细胞株QSG-7701未见明显的毒副作用.同时结晶紫实验也证明联合治疗对肿瘤细胞的杀伤力强于用SAHA或ZD55-TRAIL单独使用.Western blot实验证明了药物和病毒的联合作用使促凋亡蛋白Bcl-2,Bcl-xL的表达量明显减少,caspase-8和caspase-9蛋白也有相应剪切现象的发生.流式细胞仪同样检测出SAHA和ZD55-TRAIL联合作用对肝癌细胞有很好的杀伤作用.     

Nutlins类似物诱导TCA-8113细胞凋亡的研究

目的:研究新型小分子化合物Nutlins类似物在体外对舌癌TCA-8113细胞的凋亡作用.方法:采用MTT法检测新型小分子化合物Nutlins类似物对TCA-8113细胞增殖的影响;用流式细胞仪(FCM)检测Nutlins类似物诱导TCA-8113细胞凋亡情况和周期阻滞情况;用DAPI染色法观察细胞核变化.结果:Nutlins类似物NL-11和NL19以浓度依赖的方式抑制TCA-8113细胞增殖并诱导其凋亡,而且能引起TCA-8113细胞发生G2期周期阻滞.结论:NL-11和NL-19化合物能够有效地在体外抑制TCA-8113细胞增殖,并诱导细胞凋亡.     

大孔树脂纯化紫薯花色苷的研究

利用AB-8大孔树脂对紫薯花色苷的吸附和解吸性能进行了研究,得到其静态吸附率为80．2％,静态解吸率为99．4％。当紫薯花色苷质量浓度为8．8mg／L时,100mL提取液需AB-8树脂4．0g,静态吸附140min,可使吸附量达到最大;解吸液为盐酸酸化的乙醇溶液（φEthanol=60％）时,可使解吸量达到最大。通过色价、HPLC分析表明用选定的树脂纯化方法能提高紫薯花色苷的品质。     

紫甘薯红色素上染牛奶蛋白织物的染色性分析

以紫甘薯红色素水溶液为染液,采用3种不同染色工艺及黄土、铁盐和铝盐为媒染剂对牛奶蛋白织物进行染色,通过正交试验综合分析确定了紫甘薯红色素上染牛奶纤维织物的最佳工艺条件:染液质量浓度6 g/L,染液pH=3,染色温度80℃,染色时间40 min,浴比1:40.织物经过媒染后,色牢度、色差和上染率都有明显的提高;预媒染与后...     

紫甘薯色素提取工艺研究

紫甘薯色素作为天然食用色素,具有资源丰富、色泽自然、安全可靠、兼具药理功能等特点,在食品、化妆品、医药等方面有着巨大的应用潜力。笔者采用浸提法,以新鲜紫甘薯为原料,考察了提取剂种类、料液比、提取时间和温度对紫甘薯色素提取效果的影响。在单因素实验基础上通过正交实验,确定了紫甘薯色素提取的最佳工艺条件为:40%乙醇溶液为提取剂,料液比为1∶20(g/mL),提取时间为1h,提取温度为30℃。     

紫甘薯红色素上染柞蚕丝织物的染色性分析

以紫甘薯红色素水溶液为染液,用直接染色方法和稀土媒染方法对柞蚕丝织物染色,以明度、饱和度、色差和上染率为检测指标,研究了上染工艺和染色效果。通过正交试验和单因素分析确定了直接染色最佳工艺条件:染液质量浓度5g/L,染液pH=4,染色温度80℃,染色时间60min,浴比1∶40;预媒染的最佳工艺条件是稀土2.5g/L,媒处理温度70℃,时间45min。结果表明,染色后的织物色泽鲜亮,经预媒染织物明度和色差有所降低,皂洗牢度和摩擦牢度较直接染色织物提高1～2级。     

幽门螺杆菌VacA毒素诱导凋亡

研究了天然VacA细胞空泡毒素蛋白诱导细胞空泡和凋亡的生物学活性.培养空泡毒素阳性的Hp菌株,超声碎菌后提取上清,用SDS—PAGE分析上清中目的条带,测定其蛋白含量,用电镜观察VacA致Hela细胞空泡样变,然后用MTT法检测Hela细胞的生长曲线后,分别用MTT法分析VacA对Hela细胞的生长抑制作用,以及用TUNEL法和流式细胞技术检测VacA蛋白致凋亡的细胞毒活性.实验结果表明,在PAGE上可见相应VacA蛋白条带,电镜下天然VacA毒素致Hela细胞空泡化明显,因此VacA毒素可以抑制Hela细胞的生长,并且诱导其凋亡;在倒置显微镜下观察可见细胞空泡、脱落,胞浆浓缩,胞核皱缩、碎裂,呈现圆形固缩状态.MTT法数据示H.pylori Va-cA蛋白具有浓度依赖性地致细胞毒活性,光镜下可见TUNEL法中可显示棕黄色凋亡细胞,因此证明幽门螺杆菌VacA蛋白有明显的诱导Hela细胞凋亡的作用.     

ATP对大鼠成肌细胞抗H_2O_2凋亡模型分析

为了探讨解决L6大鼠成肌细胞被H2O2损伤的问题,分别用1.210 48、2.420 96、4.841 92 g/L ATP溶液对成肌细胞处理后,利用MTT法、流式细胞仪和荧光凋亡抗体检测了细胞损伤程度.结果表明,经H2O2损伤后L6成肌细胞存活率明显降低,凋亡率增加.各种剂量ATP溶液均能提高L6成肌细胞的存活率,促使抗凋亡因子bcl-2表达增加,促凋亡因子bax表达降低,减少凋亡的发生.其保护程度随ATP溶液剂量的减少而增强,在1.210 48 g/L剂量时效果最为显著.ATP溶液对H2O2诱导损伤的L6大鼠成肌细胞具有明显保护作用,其机制是通过mTOR/STAT3信号通路增强凋亡抑制因子bcl-2表达、抑制凋亡促进因子bax表达,从而与抑制细胞凋亡有关.     

Hsp90抑制剂BIIB021对人急性T细胞白血病Molt-4细胞周期和凋亡的影响

为了研究Hsp90抑制剂BIIB021对人急性T淋巴细胞白血病细胞株Moh-4增殖和凋亡的影响,采用MTT法检测了BILB021对Molt-4细胞增殖的影响,Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡形态学变化,流式细胞术检测药物作用前后细胞周期和凋亡的改变,Westernblotting检测BIIB02l对细胞周期和凋亡相关蛋白的影响。结果显示：BIIB021以时间和刺量依赖性方式抑制Molt-4细胞增殖,48、72h的IC50分别为384．6nmol／L和301．8nmol／L;Hoechst33258染色可观察到细胞内出现凋亡小体,且随着药物浓度增大,凋亡小体的数目也逐渐增多;流式结果同样显示,随着药物浓度升高,细胞凋亡率逐渐上升,400nmol／LBILB021可诱导细胞凋亡率达34．4％;另外,BIIB021可显著阻滞细胞于GO／G1期;Westernblotting显示BILB021激活Caspase-8、-9、-3和PARP,下调CDK4／6,上调p21和p18,并能明显抑制Akt和p65。由此表明,BIIB021能激活死亡受体途径和线粒体途径诱导Molt-4细胞凋亡,并通过影响CDK4／6和p21、p18使得Molt-4细胞被阻滞于GO／G1期,抑制细胞增殖;BIIB021对Mott-4的Akt和NF-kB也有抑制作用。     

双菌多糖的抗肿瘤活性研究

以蒙古口蘑多糖(MOP)和紫蘑菇多糖(COP)为实验材料,分别对两种多糖和混合多糖(MCP)进行了体外和体内抗肿瘤实验,用MTT比色法测定了MOP、COP、MCP对肝癌细胞(HepG2)和人宫颈癌细胞(Hela)的抑制作用,并利用统计学方法进行分析,结果表明:三者对HepG2和Hela两种癌细胞均有一定的抑制作用.但MCP的抑制效果最好,对HepG2抑制率为72.33%,对Hela的抑制率为80.68%.MCP对S180在KM小鼠体内的增殖有明显的抑制效果,最大抑制率达到58.74%,并呈现出良好的量效关系.获得的试验结果为开发真菌双糖抗肿瘤药物提供研究基础.