卡泊芬净合成前体Pneumocandin Bo的发酵工艺研究

以Pneumocandin B0 PB5-31为出发菌株,从筛选高产菌株和提高产物中有效组分的比例两方面进行研究,以期提高Pneumocandin B0 的发酵水平.结果表明,紫外线诱变复合氯化锂后处理筛选出高产菌株,其发酵效价比出发菌株提高了72％；发酵培养基中添加0.3％的脯氨酸很好地提高了有效组分B0的比例.     

卡泊芬净合成前体Pneumocandin B0的发酵工艺研究

以Pneumocandin B0 PB5—31为出发菌株,从筛选高产菌株和提高产物中有效组分的比例两方面进行研究,以期提高Pneumocandin B0的发酵水平。结果表明,紫外线诱变复合氯化锂后处理筛选出高产菌株,其发酵效价比出发菌株提高了72％;发酵培养基中添加0．3％的脯氨酸很好地提高了有效组分B0的比例。     

高产木糖醇菌株的诱变选育及其发酵培养基优化

为提高生物转化法的木糖醇转化率,促进绿色生产,以生物转化木糖醇的菌株为出发菌株,采用亚硝酸钠和紫外线诱变处理及二轮复合诱变,对高转化木糖醇的菌株进行筛选.在此基础上,通过单因素实验和正交试验,对发酵培养基的氮源和无机盐进行优化.结果获得1株高产菌株,其木糖醇转化率从出发菌株的36.5％提高到54.5％.对该菌株进行发酵...     

利用前体物质定向选育阿维菌素高产菌株

以除虫链霉菌(Streptomyces avermitilis)AV-0105为出发菌株,采用紫外线诱变处理,并结合前体抗性定向选育阿维菌素高产菌株. 通过对致死率的考察,确定了紫外线诱变的最适剂量. 在分离培养基中分别加入不同体积分数的缬氨酸和D -脱氧葡萄糖作为前体物质进行正突变株的定向筛选,选育得到阿维菌素高产菌株 AV-03-35,其摇瓶发酵效价达到4 695 u/mL,较出发菌株提高15.5%. 采用该菌株在2 t罐进行生产验证,平均发酵效价达4 592 u/mL,较出发菌株提高了13%.     

替考拉宁产生菌醋酸钠抗性变株的选育

为选育替考拉宁高产菌种，提高替考拉宁发酵单位，采用替考拉宁产生菌（Actinoplanes teichomyceticus）经紫外诱变后筛选链霉素抗性。获得了替考拉宁高产变株04-10-3，其发酵单位比出发菌株XYU-28提高55％。传代试验表明菌株04-10-3的遗传特性较稳定。     

大孔吸附树脂分离纯化Pneumocandin B0的研究

研究了用大孔吸附树脂从发酵液中提取Pneumocandin B0（PB0）的工艺条件.从8种大孔吸附树脂中筛选出HZ818吸附PB0效果较好,静态吸附量可达10 436 μg·g-1.以HZ818树脂吸附饱和后,先用40％乙醇洗脱去除杂质、再用85％乙醇解吸,解吸收率这91.6％,PB0浓度富集20倍以上,色谱纯度由13.3％提高至78.6％.该吸附-洗涤-解吸工艺简单易行、成本低、环保,适合工业化生产.     

安丝菌素P-3生产菌株Actinosynnema pretiosum ssp. auranticum的诱变育种及其发酵培养基优化

为了提高安丝菌素P-3（AP-3）的发酵产量,通过紫外诱变并运用紫外-分光光度法建立96孔板高通量快速筛选体系对原始菌株（Actinosynnema pretiosum ssp.auranticum）进行育种,筛选获得了一株产量较高的突变菌株B24-13。发酵7天后,其发酵液中AP-3的含量为112.5mg/L,是原始菌株的2.03倍。随后通过单因素优化与正交实验设计对突变菌株B24-13进行发酵培养基优化,得到最优发酵培养基组分：蔗糖25g/L,甘油15g/L,玉米浆25g/L,CaCO₃ 7g/L,异丁醇2g/L,缬氨酸0.5g/L,MgSO₄·7H₂O 0.5g/L,FeSO₄·7H₂O 0.01g/L。对优化结果进行验证实验,发酵7天后AP-3的产量为（127.5±6.3） mg/L。实验结果表明：通过对生产菌株的诱变育种与发酵培养基优化可有效的提高AP-3的发酵产量,也从侧面验证了该研究所建立的96孔板高通量快速筛选体系用于AP-3高产菌株的初筛是可行的。     

棘白霉素B脱酰基酶产生菌转化条件的优化研究

为提高棘白霉素B脱酰基酶产生菌的转化率,通过紫外诱变复合Cu2+抗性处理筛选转化高产菌种,利用均匀设计方法优化菌种的转化工艺。结果表明,筛选得到的突变株132#的棘白霉素B转化率比出发菌株提高了22.6%,优化后的转化条件为:底物浓度2 400μg·mL-1,转化时间56h,转化温度30℃,发酵培养基pH值6.0。132#菌株在优化转化条件下的转化率较出发菌株在原始转化条件下提高了57.3%。优化的转化条件更有利于高产菌株的转化,转化率得到大幅提高,也为其工业化应用打下基础。     

稀土和硫酸二乙酯联合诱变米曲霉产氨基酰化酶的研究

为获得高产氨基酰化酶的米曲霉菌株,选用稀土硝酸镧和硫酸二乙酯对米曲霉菌株CICC-2339进行联合诱变,经摇瓶发酵筛选到氨基酰化酶高产菌株SDESLa,其酶活为39.63 μmol·g-1·h-1,较出发菌株提高了39.50%,诱变效果显著.     

替考拉宁高产菌株的选育

以替考拉宁产生菌1-16为出发菌株,经热诱变复合替考拉宁抗性筛选高产菌株,获得一株高产突变菌株TC3-25,其替考拉宁产量较出发菌株提高46%。传代试验表明该菌株的发酵水平较稳定。     

抗药性基因突变筛选高产菌株

本文通过洁霉素对盐酸林可霉素产生菌 98-1菌株孢子的致死浓度测定 ,采用诱变剂EMS的四种不同诱变剂量对菌株孢子进行诱变处理 ,诱变处理的孢子涂布在含洁霉素 ( 2 0 0 0 0ug/ml)的高氏平板上 ,获得了大量的洁霉素抗性基因突变株 ,然后从 90 0株洁霉素抗性基因突变株中通过初筛获得高于诱变出发菌株产素能力的菌株 5 6株 ,再进一步通过摇瓶复筛 ,并结合菌丝生长及摇瓶代谢情况 ,获得优于出发菌株的诱变菌株 4株。将这 4个菌株连同出发菌株连续三批次进行摇瓶发酵 ,结果 4个突变株的产素能力 (产量 )及摇瓶代谢和菌丝生长情况均优于出发菌株 ,试验筛选出最优菌株 0 2 -0 3 -40 2。将 0 2 -0 3 -40 2进行罐上发酵生产试验 ,结果试验罐比对照罐平均效价提高 1 7.5 6% ,平均产量提高 1 9.3 4%。本文建立了林可霉素高产菌株的洁霉素抗性基因突变诱变快速高效的筛选方法     

亚硝基胍-紫外复合诱变选育高产衣康酸菌株

为提高土曲霉KYK-031发酵生产衣康酸能力,对出发菌株开展诱变育种和高产能力选育研究。采用亚硝基胍（NTG）和紫外（UV）复合诱变方法,通过平板初筛和摇瓶复筛,筛选衣康酸高产突变株。结果表明,亚硝基胍在500μg/mL浓度下的最佳诱变时间为40 min,15 W紫外诱变的最佳诱变时间为2 min,亚硝基胍-紫外复合诱变后筛选得到一株衣康酸高产菌株KYK-1035,摇瓶发酵产量为73.7 g/L,比出发菌株（41.8 g/L）提高了76.3%,糖酸转化率为63.4%。采用亚硝基胍-紫外复合诱变,提高了出发菌株诱变的正突变率,为衣康酸发酵继续放大和工业化生产奠定了基础。     

头孢菌素C产生菌的诱变育种及发酵应用

以头孢菌素C产生菌顶头孢霉(Cephalosporium acremonium)B-1822-S-04为出发菌株,经过紫外线和丙二酸复合诱变,筛选得到了4株头孢菌素C高产菌株D-G-017、D-G-083、D-G-096和D-G-133,其中菌株D-G-096的效价高达6 816 mg·L~(-1),较出发菌株提高了50.80%,且高产特性稳定;50 L发酵罐小试结果显示,菌株D-G-096的效价达到了29 270 mg·L~(-1),较出发菌株提高了111.06%,可作为优良高产菌株保存使用。该实验筛选出的高产菌株及其在小试中的应用,可为后期工业化生产提供优质菌种资源,为发酵工艺提供指导。     

从环丝氨酸抗性突变株中筛选α-淀粉酶高产菌株

以枯草杆菌ＢＦ－７６５８发出了菌株，采用化学诱变剂甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ）诱变，筛选Ｄ－环丝氨酸抗性株，逐步增加环丝氨酸浓度，从中得到α－淀粉酶高产菌株ＮＨ－５。采用往复式摇床和２Ｌ玻璃发酵罐进行发酵试验，ＮＨ－５菌株酶活较出发菌分别提高３０％和４８％。     

原生质体紫外诱变选育纤维素酶高产菌株

以绿色木霉T0为出发菌株,对其进行原生质体紫外谤变,通过刚果红透明圈平板初筛和油菜籽皮固态发酵复筛,得到一株稳定性好的纤维素酶高产菌株UVT12,其CMC酶活达到了1020.24 U·g-1,比出发菌株T0提高了124.3%.     

低能离子注入诱变美伐他汀高产菌株的选育

以提高美伐他汀的产量为目的,利用100 keV氮离子分4个剂量并辅之以制霉菌素抗性平板筛选美伐他汀高产菌株.结果表明:注入剂量为1 ×1014 N /cm2时在10 u g/mL制霉菌素抗性平板上的菌株的正变率最高,达到36.7%.筛选到了高抗性突变株CP-116,该菌株的发酵单位比出发菌株高35%,且遗传性能稳定.实验表明离子注入技术对选育美伐他汀高产菌株方面行之有效.     

产高纯度阿维菌素B组分的阿维链霉菌突变株

对某生产菌株MA-1进行诱变的过程中筛选得到一株新菌株MA-2,通过TLC和HPLC分析,确认其发酵产生的活性成分只有B组分,包括B1a和B2a两种主要成分,以及微量B1b成分。经多次菌株传代培养,表明这一组分组成的稳定性良好。     

农抗120生产菌高能电子流诱变育种与发酵性能研究

通过诱变育种提高农抗120生产菌株的发酵效价。采用不同剂量高能电子流辐射孢子芽管悬液、琼脂移块 法初筛、摇瓶管碟法复筛得到高产菌株,然后在发酵罐中放大培养。选育得到一株高产突变株D3226,其摇瓶效价达 9260 μg·mL-1,比出发菌株O11提高了100．4％,并且传代稳定;在100 L和10 t发酵罐中的分批培养实验表明:pH值 下降到最低点5．7时为抗生素累积高峰,pH值可以作为一种新的有效的放罐指标。得到的高产菌株及发酵规律可以应 用于工业生产。     

紫色杆菌素合成工程菌太空诱变效应及其高产菌株的筛选

利用太空搭载("神舟七号"航天飞船)对合成紫色杆菌素的弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)基因工程菌株进行了太空诱变,平板和液体发酵筛选实验表明太空诱变后菌株突变率达到70%左右,其中正向突变率7.3%,负向突变率为61.2%。筛选到一株紫色杆菌素高产突变菌株M_(S4),该菌株在摇瓶水平上,以0.45%(体积分数)的甘油为碳源,于20℃发酵32 h,紫色杆菌素浓度达到2.16 g·L~(-1),较出发菌株提高约143.8%。遗传稳定性、HPLC和DNA序列分析结果表明太空搭载突变菌株有很高的遗传稳定性,产生的紫色杆菌素比例比出发菌株有明显提高,但是紫色杆菌素生物合成基因簇序列没有发生突变,表明太空搭载有可能对菌株的基因调控网络产生了影响。     

聚β-羟基丁酸高产菌株的选育及发酵条件优化

以分离筛选到的1株产PHB的蜡状芽孢杆菌13及其经紫外诱变获得的高产菌13(3)为出发菌株,再进行紫外和亚硝酸双因子诱变,筛选到了稳定高产菌株13-2,其PHB产量比野生型菌株13增加了82.63%,比高产菌株13(3)增加了48.01%。设计正交试验。确定突变株13-2培养的最佳发酵条件是碳源为蔗糖,氮源为蛋白胨,p H值为7.5,发酵温度为37℃,发酵周期为16h。