拟除虫菊酯类农药半抗原合成及酶联免疫分析研究进展

酶联免疫技术是近年来发展的农药残留检测方法,具有方便快速、特异灵敏等优点。主要介绍了拟除虫菊酯类农药半抗原的合成方法以及酶联免疫分析技术的研究进展和展望。半抗原的合成入手点主要为菊酯分子的三碳环、中间和芳环部分,连接一个连接臂作为半抗原。目前制得的抗体多数是多克隆抗体,最低检测限最好的能达到0.2μg/L。酶联免疫分析技术在拟除虫菊酯类农药的残留检测中会发挥越来越大的作用。     

拟除虫菊酯类农药通用人工抗原合成及免疫原性鉴定

[目的]为建立拟除虫菊酯类农药多残留免疫分析方法,对拟除虫菊酯通用人工抗原的合成鉴定进行研究。[方法]根据拟除虫菊酯农药公共结构设计合成了3种通用半抗原,并通过高分辨质谱和核磁共振氢谱对其结构进行鉴定。通过活性酯法将3种通用半抗原分别与多聚赖氨酸(PLL)和牛血清蛋白(BSA)偶联制备成免疫抗原和包被抗原,采用紫外吸收法鉴定。将3种免疫抗原免疫小鼠,制备了拟除虫菊酯抗血清,非竞争间接酶联免疫吸附分析方法测定抗血清效价。[结果]通用半抗原和人工抗原制备成功,合成的人工抗原具有较高的免疫原性,3种抗血清效价分别达到3.2×104、3.2×104、6.4×104。[结论]成功制备了拟除虫菊酯通用人工抗原,为拟除虫菊酯农药多残留免疫分析的方法研究奠定了基础。     

基于漂浮固化分散液液微萃取的水样中拟除虫菊酯类农药分析

[目的]建立漂浮固化分散液液微萃取测定水样中8种拟除虫菊酯类农药的分析方法。[方法]向水样中加入1-十二醇(萃取剂)和甲醇-乙腈(分散剂),涡旋离心后,于冰浴中浸泡,待1-十二醇凝固后转移,融化后进行气相色谱分析。[结果]方法线性范围在0.1～1.0μg/L之间,回收率为82.3%～99.1%,RSD均小于4.0%。富集倍数为586～1442倍。同时讨论了富集倍数与质量浓度之间的关系。[结论]该方法操作简单快速、灵敏度高,可满足水样中拟除虫菊酯类农药残留的检测要求。     

基于QuEChERS净化-气相色谱法检测樱桃中16种有机氯及拟除虫菊酯类农药残留

[目的]基于QuEChERS净化,气相色谱电子捕获检测器检测,建立一种樱桃中16种有机氯及拟除虫菊酯类农药残留的检测方法。[方法]樱桃经乙腈超声提取、QuEChERS净化管净化后,用气相色谱检测。[结果]在质量浓度0.08~1.60mg/kg范围内,16种农药与其对应的峰面积呈良好的线性关系,方法检出限为0.002~0.010mg/kg。在0.16、0.32、1.60mg/kg 3个添加水平下,16种农药的回收率为79.8%~122.0%,相对标准偏差为1.0%~4.8%。[结论]该方法准确、高效,适用于樱桃中16种有机氯及拟除虫菊酯类农药的残留分析。     

气相色谱法探究果蔬中有机氯和拟除虫菊酯类农药残留的基质效应

[目的]应用农业标准方法NY/T 761—2008,考察气相色谱法(GC-ECD)同时测定水果和蔬菜基质中有机氯和拟除虫菊酯类农药残留的基质效应。[方法]选用15种水果和蔬菜上机液作为溶剂,将20种有机氯和拟除虫菊酯类农药配制成4个不同质量浓度水平的混合标准溶液,与同等质量浓度水平下的溶剂标准溶液进行比较,得出各种农药在不同浓度水平下不同基质中的绝对基质效应。[结果] 15种水果和蔬菜对20种有机氯和拟除虫菊酯类农药均存在不同程度的基质效应,梨、香蕉、黄瓜中各农药的基质效应与农药的浓度和种类没有很强的关联性,表现为弱基质效应;有机氯类农药受基质效应的影响显著高于拟除虫菊酯类农药;基质效应的强弱和待测物的质量浓度之间存在着一定的相关性,在低浓度水平更易产生显著的基质效应。[结论]检测水果和蔬菜中有机氯和拟除虫菊酯类农药残留时,建议采用基质配制的标准品进行定量检测,从而保证检测结果的准确性。     

菜地土壤中3种拟除虫菊酯类农药的多残留分析

[目的]准确评价拟除虫菊酯类农药在菜地使用后的生态环境安全性。[方法]借助气相色谱分析技术,研究并建立了3种拟除虫菊酯类农药(联苯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯)在菜地土壤中的定量分析方法。样品中的拟除虫菊酯类农药用丙酮提取,经石油醚萃取后,用气相色谱仪检测。[结果]当添加质量分数为0.05、0.10、0.50 mg/kg时,方法的最小检出量为5×10-11g,添加回收率为92.24%～108.77%,相对标准偏差为0.36%～6.42%。[结论]方法符合农药残留量分析与检测的技术要求。     

多壁碳纳米管滤过型净化-气相色谱串联质谱法测定香蕉中5种拟除虫菊酯类杀虫剂残留

[目的]建立了多壁碳纳米管滤过型净化,气相色谱串联质谱技术同时测定香蕉中联苯菊酯等5种拟除虫菊酯类杀虫剂残留量的分析方法。[方法]香蕉样品用乙酸乙酯提取,经多壁碳纳米管滤过型净化柱净化后,用气相色谱-串联质谱法测定。[结果]联苯菊酯等5种拟除虫菊酯类杀虫剂的质量浓度在0.01～0.2 mg/L范围内线性良好,定量限均为10μg/kg,相关系数均大于0.99,平均加标回收率为71.3%～108.3%,相对标准偏差为0.7%～3.6%。[结论]方法学考察及实际样品的测定证明该方法简便、快速、准确,可用于香蕉中联苯菊酯等5种拟除虫菊酯类杀虫剂残留量的检测。     

丽春红S与拟除虫菊酯农药的共振散射研究

在p H为8.92的Britton-Robinson缓冲液中,拟除虫菊酯类农药与丽春红S作用可使体系共振散射强度显著增强,在共振散射波长位于576 nm处,有良好线性关系,其相关系数为0.9992~0.9999、检出限(3σ)为0.047~0.061μg/m L,并对水果蔬菜样品中拟除虫菊酯类农药进行加样回收实验,其回收率为76.8%~90.9%。据此建立了检测拟除虫菊酯类农药残留量的快速、灵敏的新方法。     

QuEChERS-气相色谱法同时测定蜂花粉中多种有机氯和拟除虫菊酯残留量

建立了QuEChERS-气相色谱法同时测定蜂花粉中9种有机氯类和6种拟除虫菊酯类农药残留的定性定量分析方法。蜂花粉样品用乙酸乙酯-正己烷混合溶液提取,QuEChERS技术净化,气相色谱-电子捕获检测器分析,外标法定量。结果表明:该法能有效分离9种有机氯和6种拟除虫菊酯农药,峰形良好,且在10~200μg/L浓度范围内线性良好,检出限0.05~0.30μg/kg,相关系数R均大于0.997,75.1%~103.5%,RSD为1.9%~7.9%。该方法简单、快速、高效,适用于有机氯类和拟除虫菊酯类农药残留限量的检测要求。     

气相色谱双柱法检测烟草中多种有机氯和拟除虫菊酯农药残留

建立了烟草中26种有机氯和9种拟除虫菊酯农药残留的同时测定方法。烟叶样品经正己烷+乙酸乙酯振荡提取,固相萃取净化,DB-35ms和DB-5ms双柱定性,气相色谱电子捕获检测器检测。26种有机氯农药的线性范围为0.002~0.2 mg/L,平均回收率为78.2%~94.6%,相对标准偏差为1.7%~6.5%,定量限为0.001~0.008 mg/kg。9种拟除虫菊酯农药的线性范围为0.02~1.2 mg/L,平均回收率为87.2%~103.9%,相对标准偏差为1.9%~6.2%,定量限为0.008~0.060 mg/kg。该方法适用于烟草中多种有机氯和拟除虫菊酯类农药残留量的测定。     

气相色谱-双柱双检测器测定水稻土中菊酯农药的残留

建立全自动索氏提取-气相色谱法双柱双检测器测定水稻土中的7种拟除虫菊酯的分析方法。水稻土经石油醚和丙酮(2∶1)提取后,弗罗里矽小柱净化,ECD检测器分析,外标法定量,对水稻土前处理和仪器条件进行优化。结果表明:石油醚和丙酮(2∶1)提取液的效果及弗罗里矽小柱净化作用较为突出,结果符合农药残留分析要求。7种拟除虫菊酯类农药含量在0.02～0.50mg/L间呈良好的线性关系,相关系数R2均大于0.995。检出限(S/N=3)为0.001～0.003 mg/kg,添加0.02～0.50 mg/kg浓度,平均回收率72.8%～88.6%之间,相对标准偏差(RSD)2.3%～6.7%之间。该方法具有操作简单、灵敏度高、重现性好等特点,适用于水稻土中拟除虫菊酯类农药残留的检测分析。     

SBSE-TDU-GC快速测定茶叶中7种拟除虫菊酯类农药残留

采用搅拌棒吸附萃取技术(SBSE)对茶叶中7种拟除虫菊酯类农药残留进行一次性吸附萃取,使农药与其他杂质得到较好分离,再用热脱附-气相色谱仪器(TDU-GC)分析.所使用的SBSE-TDU-GC方法可以同时定性、定量测定7种拟除虫菊酯类农药残留,在给定的质量浓度范围内,各农药组分呈现良好的线性相关,7种拟除虫菊酯类农药的平均回收率为97.06%～104.48%,相关系数大于0.9937,变异系数小于9.5%.用该方法测定4种茶叶中的拟除虫菊酯类农药残留,其残留最均低于我国和欧盟的MRL.     

固相萃取气相色谱法检测烟叶中拟除虫菊酯类杀虫剂残留

[目的]建立烟叶中拟除虫菊酯类杀虫剂多残留的固相萃取-气相色谱检测方法.[方法]烟叶样品经正己烷-乙酸乙酯超声提取、Florisil固相萃取柱净化后,用气相色谱电子捕获检测器检测.[结果]7种拟除虫菊酯类杀虫剂在0.1、0.5、1.0 mg/kg三个加标水平上的回收率为85.32％～101.21％,相对标准偏差为2.97％～4.88％,检出限为0.003～0.005 mg/kg.[结论]该方法灵敏准确,适用于烟叶中拟除虫菊酯类杀虫剂多残留分析.     

甲磺隆人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

为了建立测定磺酰脲除草剂甲磺隆残留的酶联免疫吸附检测方法(ELISA),以邻甲酸甲酯苯磺酰胺与琥珀酸酐反应合成半抗原1-[(2-甲酸甲酯)苯磺酰]单胺琥珀酸.用活性酯化法将半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原和包被抗原.通过免疫抗原免疫新西兰大白兔获得甲磺隆的多克隆抗体,抗体效价达800 000.以此抗体建立的间接竞争ELISA法,检测甲磺隆的线性范围在0.7~40 mg/L,最低检测限为0.16mg/L.与甲磺隆结构相似的磺酰脲类除草剂的交叉反应结果表明,氯嘧磺隆的交叉反应率为38.2%,其他4种除草剂的交叉反应率都小于1%.     

毛细管气相色谱法测定中药材中拟除虫菊酯类农药的残留量

建立了中药材中6种拟除虫菊酯类农药残留量测定的气相色谱分析方法。对提取溶剂进行优化,样品以石油醚-丙酮(V/V,2:1)超声提取15min,氟罗里硅土层析柱净化,采用HP-5毛细管柱分离,用GC-ECD同时检测。低、中、高3种浓度(n=3)的加标平均回收率均在80%～120%范围内,符合要求;日内和日间的精密度分别在0.03%～5.50%﹑2.38%～11.43%之间。该方法操作简便、试剂用量少、回收率高、重现性好、分析准确快速,适用于中药材中拟除虫菊酯类农药的残留分析。     

GC-ECD检测茶叶中4种拟除虫菊酯类农药残留研究

本文采用固相萃取法结合旋转蒸发技术进行样品的前处理,经气相色谱-电子捕获检测(GC-ECD)进行溴氰菊酯、氰戊菊酯、联苯菊酯、氯氰菊酯四种菊酯类农药残留的检测分析。茶叶样品过40目网筛,60℃震荡提取30min,固相萃取法进行前处理,经GC-ECD检测,基质外标法定量。结果表明:茶叶基质中,4种菊酯类农药峰面积响应值与其质量浓度在10~200μg/L范围内呈良好线性关系(R20.897)。在80、160μg/L二个添加水平下,4种拟除虫菊酯类农药的回收率在78.77%~125.78%,相对标准偏差为2.58%~5.78%。该方法简便快速、准确灵敏,适合茶叶中菊酯类农药残留的检测和安全监控。     

固相微萃取-气相色谱质谱联用法测定苹果中4种有机氯类农药残留

[目的]建立固相微萃取气相色谱质谱联用法同时检测苹果中五氯硝基苯、六氯苯、七氯和百菌清4种有机氯类农药残留量的方法。[方法]采用正交试验优化萃取头类型、萃取时间、萃取温度、萃取搅拌速度和NaCl浓度,确定最优萃取条件,结合气相色谱质谱联用法对目标分析物进行分离和检测。[结果]固相微萃取(SPME)正交试验最优的萃取条件:65μm PDMS/DVB萃取头,50℃下萃取50 min,萃取搅拌速度为600 r/min,NaCl浓度为10%。4种目标分析物在线性范围内(0.02~2.00 mg/L)呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.9992,回收率为83.3%~93.4%,相对标准偏差为2.5%~8.4%(n=6)。[结论]该方法快速简便,回收率、精密度均符合检测要求,适合苹果中多种有机氯类农药残留量的快速测定。     

中药材农药残留分析中的前处理方法比较

[目的]比较中药萝芙木中17种农药残留的2种前处理技术。[方法]样品经有机溶剂提取后,采用磺化法和固相萃取法进行净化,并采用GC-ECD进行检测,对前处理的提取条件和净化条件进行优化。[结果]石墨炭黑/氨基(CARBON/NH2)复合固相萃取小柱能够较好地去除杂质,磺化法不适用硫丹(含硫丹Ⅰ和硫丹Ⅱ)、狄氏剂和拟除虫菊酯类农药。[结论]采用CARBON/NH2复合固相萃取技术的方法平均回收率为75.11%~113.53%,相对标准偏差为0.34%~4.84%,适合中药萝芙木中17种农药残留的分析。     

3种有机磷农药间接竞争ELISA检测方法的建立

[目的]建立能同时检测甲基对硫磷、杀螟硫磷和倍硫磷的间接竞争酶联免疫分析方法(ic-ELISA)。[方法]根据ic-ELISA检测的基本程序,利用能同时识别甲基对硫磷、杀螟硫磷和倍硫磷的宽谱特异性单克隆抗体,优化相关反应的理化参数,确定最佳反应条件。[结果]建立的ic-ELISA检测方法对甲基对硫磷、杀螟硫磷和倍硫磷的灵敏度(IC_(10)值)分别为8.81、11.73、13.25μg/L;检测范围分别为12.03μg/L~0.94 mg/L、15.84μg/L~1.07 mg/L和18.92μg/L~2.79 mg/L。[结论]建立的ic-ELISA方法可以满足甲基对硫磷、杀螟硫磷和倍硫磷在果蔬及谷物中最大残留限量的检测要求。     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定枸杞中24种农药残留

[目的]建立高效液相色谱-串联质谱法同时检测枸杞中苯菌酮等24种农药残留的分析方法。[方法]样品经乙腈提取,Qu ECh ERS净化,高效液相色谱-串联质谱法在多反应离子监测模式(MRM)下检测,外标法定量。[结果] 24种农药在0.01～0.5 mg/L的质量浓度范围内呈良好的线性关系(R20.99);在0.01～0.5 mg/kg添加水平下,平均回收率为71.5%～106.0%,相对标准偏差(RSD)为0.7%～13.1%;定量限(LOQ)均为0.01 mg/kg。[结论]方法快速、简便、净化效果好、成本低,适用于同时检测枸杞中24种农药残留。