一株耐盐性莠去津高效降解菌Halomonas sp.SY-AD-9的分离、鉴定及其特性

[目的]进行盐单胞菌Halomonas sp.对莠去津降解的研究,解决含有莠去津的高盐废水处理问题。[方法]从长期受莠去津污染的土壤中分离出一株莠去津降解菌SY-AD-9,通过摇瓶实验及分子生物学技术研究该菌株对于莠去津的降解特性。[结果]结合生理化特性以及16S r RNA基因相似性分析将其初步鉴定为盐单胞菌属,基因序列已提交Gen Bank,登陆号为HM627247。该菌含有trz N和atz BCDEF 6个莠去津降解相关基因。该菌株具有很高的耐盐性,耐受极限高达14%。Na Cl质量分数为6%时该菌株在48 h内对200 mg/L的莠去津降解率为98.5%。[结论]利用盐度为6.5%的莠去津实际废水并且通过与本实验室另外一株莠去津降解菌SY-AD-39(Pseudomonas sp.)比较,菌株SY-AD-9具有更好的应用潜力。     

莠去津高效降解菌的鉴定和降解特性分析

[目的]筛选并鉴定莠去津降解菌,分析其降解特性。[方法]从土壤中分离降解菌,用形态观察、生理生化鉴定、16S r DNA序列扩增和同源性分析方法,明确菌株分类地位。通过改变培养条件,分析菌体生长、温度、pH值、盐度和碳源对莠去津降解的影响。[结果]降解菌为肠杆属细菌,菌体生长与莠去津降解同步,在25～35℃、pH值近中性、0.5%盐度、单糖或双糖下降解效果好。[结论]菌株具有较高的莠去津降解能力,具开发潜力。     

固定化变栖克雷伯氏菌对莠去津的降解特性

[目的]制备莠去津高效降解菌剂,为修复莠去津污染土壤、地下水等环境提供理论依据。[方法]选用一种高效降解莠去津的变栖克雷伯氏菌FH-1降解菌株,采用生物炭-海藻酸钠固定化包埋技术制备成固定化菌剂,提高变栖克雷伯氏菌FH-1对莠去津的降解能力和菌剂的稳定性。[结果]在4种供试载体中,生物炭对FH-1菌株在4 h时固定率最高,达到74.50%;而其他3种载体稻壳、麦麸和蛭石对菌株FH-1固定率分别为65.34%、61.38%和53.94%,因此选用生物炭固定FH-1菌株。同时利用海藻酸钠3%和CaCl22%,制备的固定化菌剂具有较好的稳定性效果。固定化菌剂FH-1在无机盐培养基中降解莠去津的最适温度为30℃、pH值9、底物莠去津的质量浓度50 mg/L和固定化菌剂添加量10 g时降解效果最好,达到93.90%。采用Box-Behnken法进一步优化了固定化菌剂降解莠去津的条件,响应面分析法优化后预测得到的结果表明,固定化菌剂FH-1降解莠去津pH值为8.96,温度为30.27℃,莠去津质量浓度为54.32 mg/L,最高莠去津降解率为94.59%。[结论]固定化菌剂FH-1的制备,提高了降...     

2,4-滴丁酯降解菌Enterobacter sp.M11-3的分离和鉴定

[目的]利用生物降解修复2,4-滴丁酯污染的土壤。[方法]使用以2,4-滴丁酯为唯一碳源和能源的无机盐培养基对菌株培养,利用高效液相色谱法测定农药降解率,分离筛选2,4-滴丁酯高效降解菌。通过形态学观察及16S r RNA序列分析进行菌种鉴定,测定菌株的最佳生长条件和对其他11种农药的降解率。[结果]分离得到的菌株M11-3对2,4-滴丁酯的降解率为99.98%,初步鉴定为肠杆菌属(Enterobacter sp.)。确定了该菌株最佳的生长温度为25℃、p H值为7.0,对毒死蜱和螺螨酯的降解率为37.25%~54.34%,对莠去津、吡虫啉、乙嘧酚磺酸酯、氟铃脲、啶虫脒和氯氰菊酯的降解率为15.53%~28.77%。[结论]菌株M11-3可为2,4-滴丁酯污染土壤的生物修复提供适宜的菌种资源。     

一株可同时降解毒死蜱和联苯菊酯降解菌的筛选鉴定及其降解特性初探

[目的]筛选及鉴定一株可同时降解毒死蜱和联苯菊酯的降解菌,分析其降解特性。[方法]通过富集培养从污染淤泥中分离降解菌,经形态学特征和16S r DNA序列分析和同源性分析方法,鉴定菌株的分类。通过改变培养条件的单因素的试验,分析初始接种量、温度、p H值和农药初始质量浓度对联合降解的影响。通过GC-MS等分析其主要代谢产物。[结果]降解菌为寡养单胞菌(Stenotrophomonas sp.),降解菌可以单独或者混合降解毒死蜱和联苯菊酯,通过单因素试验研究,发现降解菌混合降解的最优条件:接种菌的最佳初始浓度OD_(600)值为0.5,p H值为7.0,温度为30℃,2种农药初始质量浓度为10 mg/L。毒死蜱的主要代谢产物为3,5,6-TCP,联苯菊酯的主要代谢产物为2-甲基-3-联苯甲醇。[结论]降解菌对环境中毒死蜱和联苯菊酯的生物降解具有较好的应用前景。     

烟嘧磺隆高效降解复合菌系的构建及降解特性

[目的]构建烟嘧磺隆高效降解复合菌系并明确其降解特性，为高效修复烟嘧磺隆污染土壤提供理论支撑。[方法]通过富集驯化培养，从山西省不同生态区烟嘧磺隆污染土壤中筛选出5株烟嘧磺隆降解菌，通过16S rDNA和ITS序列分析鉴定降解菌的分类地位。通过全组合构建高效降解复合菌修复体系，并通过单因素试验明确其降解特性。[结果]筛选获得10株具有烟嘧磺隆降解能力的菌株，其中5株菌株降解能力较强。经16S rDNA和ITS序列鉴定和系统发育分析，5株烟嘧磺隆降解菌株分别为A枯草芽孢杆菌、B黑曲霉、C草酸青霉、D土曲霉和E绿木霉。全组合复配结果表明，由3种菌株组成的复合菌系对烟嘧磺隆降解率最好，其中ABD组合对烟嘧磺隆降解能力最高，较单株菌降解率最高的菌株D降解率提高23.74%；将筛选的A、B、D进行不同比例复配，菌株最佳复配比A∶B∶D为2∶3∶1时，烟嘧磺隆降解率最高达98.31%，各菌株对烟嘧磺隆降解的影响效果A>B>D。复合菌系较单一菌株增加了适宜的温度、pH值和烟嘧磺隆初始浓度范围，最适培养降解条件为接种量2%～5%，温度30～40℃，pH 7.0，烟嘧磺隆初始质量浓度50～2...     

假单胞菌QLD-9的分离鉴定及其对喹啉的生物降解

[方法]采用富集培养法从受杂环类污染的土壤中分离喹啉降解菌株。[结果]分离得到1株以喹啉为唯一氮源、葡萄糖为碳源生长的QLD-9菌株,经16S rDNA鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.),该菌株能在48 h内将300 mg/L的喹啉降解99.9%以上,对600 mg/L以内喹啉具有良好的降解效果。[结论]QLD-9菌株对环境中喹啉的生物修复具有很好的应用潜力。     

焦化厂污染土壤中多环芳烃降解菌群解析

以苯并[a]芘、苯并[a]蒽、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、茚并[1,2,3-cd]芘5种较难降解的多环芳烃为碳源和能源,采用富集培养的方法从焦化厂污染的土壤中筛选分离得到50株PAHs降解菌。通过对其16S rRNA基因序列分析,将这些PAHs降解菌分为15个种群,分别属于Sphingomonas(鞘氨醇单胞菌属)、Methylobacterium(甲基杆菌属)、Burkholderia(伯克霍尔德氏菌属)、Rhodococcus(红球菌属)、Bradyrhizobium(慢生根瘤菌属)、Phyllobacterium(叶杆菌属)、Chryseobacterium(金黄杆菌属)、Microbaterium(微杆菌属)8个属,其中优势菌为鞘氨醇单胞菌属。纯菌株降解能力测试表明,培养12 d后,菌株3-6-12降解效果要优于其他菌株,对苯并[a]蒽、苯并[a]芘、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、茚并[1,2,3-cd]芘的降解率分别可达39.64%、33.52%、38.57%、25.37%、31.17%。实验结果可为多环芳烃污染土壤的生物修复提供高效的降解菌源。     

Pseudomonas putida QTH3对五氯硝基苯的降解特性

[目的]明确五氯硝基苯降解菌Pseudomonas putida QTH3的降解条件及降解特性。[方法]选择温度、pH值、底物初始浓度和接种菌量进行单因素试验,筛选温度、pH值和接种菌量3个因素进行最陡爬坡试验,获得最大响应区域,通过Box-Behnken试验设计3因素3水平的响应面试验,对其降解条件进行优化,在优化条件下测定了菌株QTH3降解五氯硝基苯的能力及其生长量。[结果]最适降解条件为温度28.48℃,pH值7.43,接种菌量1.63 g/L。优化后的培养条件降解率提高了19.17%,菌株QTH3在7 d后对五氯硝基苯的降解率为58.35%,菌株QTH3的生长量逐步增加。[结论]菌株QTH3能够利用五氯硝苯基作为唯一碳源和能源生长,可用于五氯硝基苯的生物修复。     

白腐菌漆酶对莠去津最适降解条件的探讨

[目的]将白腐菌Coprinopsis cinerea okayama 7#130漆酶对三嗪类农药莠去津的降解条件进行了研究。[方法]向纯漆酶溶液中加入一定浓度的莠去津溶液进行降解反应,采用HPLC测定其含量,计算降解率。利用Box-Behnken设计对影响降解此农药的关键因素进行优化。[结果]经Design-Expert软件二次回归分析,得到莠去津降解的最适条件:pH值为6.9,温度为38.3℃,反应体系体积为5.3 mL,转速为186 r/min。在此条件下,莠去津降解率响应预测值为52.41%,验证值为52.32%。[结论]最适条件下的降解率提高了10%~15%,这为降低莠去津对环境的危害提供了科学依据。     

一株三唑醇降解菌M1的筛选、鉴定及降解特性

[目的]分离筛选得到一株三唑醇降解菌株,完成菌株鉴定并对其降解特性进行分析。[方法]通过富集驯化法从三唑醇长期污染土壤中筛选三唑醇降解菌株,基于形态学特征、生理生化特性及16S rRNA和gyrB序列分析,对菌株进行鉴定。利用紫外分光光度计测定菌株生长量与三唑醇降解率的关系;并采用单因素试验探究不同温度、pH值及接种量对三唑醇降解作用的影响。[结果]从土壤中分离得到一株可降解三唑醇的细菌菌株M1,经鉴定为产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)。以三唑醇100 mg/L为初始质量浓度,28℃振荡培养7 d后,菌株的生长量OD600为0.2110,菌株M1对三唑醇的降解率为70.23%。该菌的最适降解温度为28℃,最适降解pH值为4,最适降解接种量为1%。[结论]产酸克雷伯氏菌M1可有效降解三唑醇,为三唑醇农药的降解提供了新的微生物资源。     

莠去津修复细菌对大豆生长及根围微生物的影响

[目的]细菌Enterobacter sp.可高效降解土壤中残留的莠去津,为明确其施用效果和环境安全性,对不同处理的大豆生长、药害指标和根围微生物进行了调查和比较。[方法]试验设3组处理,分别为莠去津+细菌处理、莠去津处理和空白对照,观察各处理中的幼苗生长情况和药害指标、成熟期植株生理和药害指标、成熟期根围微生物的数量和活度。[结果]在莠去津+细菌处理中,大豆各时期的生长指标均与空白对照接近,且无明显药害,显著优于莠去津单独处理。根围微生物调查结果也表明,添加细菌处理的微生物数量与活度显著高于对照和莠去津处理。[结论]试验菌株能有效缓解莠去津对大豆的伤害,并能促进根围微生物的数量和活性,环境安全性较高。     

氯嘧磺隆降解菌SN10对土壤微生物及作物生长的影响

[目的]研究氯嘧磺隆降解菌SN10菌株对土壤微生物种群动态变化和作物生长的影响。[方法]通过室内盆栽试验,采用稀释涂布平板法,氯嘧磺隆添加质量分数分别为10、50、100μg/kg。将配好的土样接种SN10菌株,同时设置不加氯嘧磺隆的清水对照和加氯嘧磺隆不加菌株的对照。[结果]接种降解菌SN10菌株后减弱了氯嘧磺隆对原有土壤微生物区系的影响,减轻对玉米、高粱、黄瓜、小麦的药害作用,使出苗率、株高和鲜质量均有所提高,低质量分数药剂加降解菌SN10的处理基本恢复到清水对照水平。[结论]SN10菌株能够有效降低土壤中氯嘧磺隆的残留,对于被氯嘧磺隆污染的土壤具有较好的修复作用。     

生姜种植土壤中螺螨酯降解菌Enterobacter sp.QD26-6的筛选与鉴定

[目的]利用生物降解治理螺螨酯污染土壤。[方法]采用富集培养和高效液相色谱测定等方法,从山东青岛生姜种植地采集的土壤样品中筛选出1株螺螨酯高效降解菌。对该菌株进行了菌种鉴定并测定了农药降解谱。[结果]筛选出的菌株QD26-6能够以螺螨酯为唯一碳源,在无机盐培养基中培养120 h后对100 mg/L螺螨酯的降解率为71.72%。该菌株在培养72 h后对吡虫啉和三氟羧草醚的降解率为33.74%~39.14%;对乙嘧酚磺酸酯、丁醚脲和烯酰吗啉的降解率为21.93%~26.60%。根据菌落形态、革兰氏染色结果及16S r DNA序列分析,初步鉴定该菌株为肠杆菌属(Enterobacter sp.)。[结论]菌株QD26-6对环境中的螺螨酯生物修复具有很好的应用潜力。     

樱桃番茄植株内源物质对甲基硫菌灵降解影响

[目的]甲基硫菌灵为一种广谱性内吸苯并咪唑类杀菌剂,能防治多种作物病害,具有内吸、预防和治疗作用,为了进一步了解其在植物体内的代谢降解过程。[方法]以樱桃番茄植株为载体,研究其体内微生物、常见氧化酶和生物碱3类不同物质对甲基硫菌灵降解代谢的影响。[结果]植物内生菌对甲基硫菌灵有缓慢的降解作用;过氧化物酶、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶处理的试验中甲基硫菌灵分别降解了35.55%、23.20%、27.43%。葫芦巴碱也可显著加速甲基硫菌灵的降解。[结论]植物对农药有其自身的代谢解毒过程。     

复合菌YM4对烟嘧磺隆降解及对土壤微生物影响

[目的]构建烟嘧磺隆降解复合菌,促进玉米生长,修复受污染土壤。[方法]对蜡样芽胞杆菌N1和黏质沙雷氏菌N80的复合比例、培养基优化、降解特性、促生能力及土壤修复定殖进行研究。[结果]蜡样芽胞杆菌N1和黏质沙雷氏菌N80按照1∶1混合,命名为YM4。最适培养条件为20.00 g/L可溶性淀粉,10.00 g/L硝酸钾,5.50 g/L氯化钙,可降解92.96%的烟嘧磺隆。最适降解条件：温度35℃,pH 6.0,底物质量浓度为50 mg/L。复合菌YM4促生能力高于2株单菌。利福平诱导的YM4L可很好的在玉米根际及土壤中定殖,起到改善土壤微生物数量和修复土壤的效果。[结论]复合菌YM4较单菌N1和N80降解能力和促生能力均有提高,为改善烟嘧磺隆污染土壤的生物修复提供理论基础。     

耐高温秸秆降解菌的筛选、鉴定及复合菌剂降解效果分析

[目的]筛选耐高温秸秆降解菌,并对其进行鉴定,分析复合菌剂的秸秆降解效果。[方法]从河南地区农田腐烂的玉米秆、麦秸秆、枯枝败叶中通过分离培养基分离出4株耐高温且具有纤维素降解能力的菌种,并对其进行16/18SrRNA鉴定,NGW11菌株为米曲霉菌,NGW12菌株为芽枝孢霉菌,NGW13菌株为枯草芽孢杆菌,NGW14菌株为苏云金芽孢杆菌,复合菌液降解菌种组合为3︰1︰4︰2。[结果]通过DNS法测定各菌株对不同秸秆的纤维素降解酶活,结果表明复合菌液对不同秸秆都有较好的降解效果。     

氟乐灵降解菌Bacillus sp.的分离鉴定及其降解特性

[目的]从长期被氟乐灵污染的土壤中筛选出能以氟乐灵为唯一碳氮源生长的细菌,并对其降解特性进行研究。[方法]以连作15年以上棉田土壤为材料,采用直接稀释涂布法分离得到1株能够降解氟乐灵的细菌D8,通过形态特征、生理生化特性和16S r DNA序列分析,对菌株D8进行鉴定;通过单因素试验研究降解特性。[结果]鉴定菌株D8为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),在氟乐灵质量浓度为50 mg/L、接种量为4%、外加氮源酵母浸粉0.1%、温度37℃、p H值为5.0的条件下,接种3 d后对氟乐灵降解率达到59.89%以上。[结论]该研究为氟乐灵的生物降解和土壤修复提供理论依据。     

敌草隆内生降解真菌筛选

[目的]筛选可降解敌草隆菌株,并研究其降解特性,为微生物降解敌草隆提供新途径。[方法]采用平板涂布法从植物体内分离内生真菌,并通过摇瓶富集法筛选有降解作用的菌株;通过形态学特征和ITS鉴定菌株;采用高效液相色谱法检测分离的内生菌对敌草隆的降解效果,并研究其降解的最适温度、pH值、营养源和降解动力学特性。通过标准品比对鉴定降解产物。[结果]从牛筋草中分离得到一株具有降解除草剂敌草隆能力的真菌,命名为D12,鉴定为镰刀菌属(Fusarium Lk.ex Fr.)。降解条件优化试验结果表明,该菌的最佳营养源为淀粉,在35℃和pH值6的条件下对敌草隆具有良好降解作用。以敌草隆50 mg/L为起始质量浓度进行研究,经过7 d培养,降解率达57.42%,半衰期为7.30 d。鉴定其降解产物为1-(3,4-dichlorophenyl)methylurea。[结论]镰刀菌属D12具有降解敌草隆得能力,在微生物降解除草剂领域具有良好的应用前景。     

一株腐殖质还原菌的分离鉴定及其对敌草快的厌氧降解特性

[目的]分离筛选出具有腐殖质还原能力且能厌氧降解敌草快的菌株。[方法]以蒽醌-2,6-二磺酸二钠(AQDS)为唯一电子受体,从河流沉积物中富集分离具有腐殖质还原能力的菌株,通过形态学和生理生化特征,以及16S rRNA基因序列分析对菌株进行鉴定;筛选其电子供受体谱;并研究其厌氧条件下对敌草快的降解特性。[结果]获得1株具有腐殖质还原能力的菌株HN05,鉴定为Kosakonia oryzae HN05。HN05能以蔗糖、葡萄糖、乳糖、乳酸、丙三醇、乙酸、乙醇、甲醇作为电子供体还原AQDS,利用能力依次递减。HN05能以蔗糖作为电子供体还原腐殖质模式物蒽醌-1-磺酸钠(α-AQS)、蒽醌-2-磺酸钠(AQS)、AQDS、蒽醌-1,5-二磺酸钠(1,5-AQDS)。HN05能以蔗糖作为电子供体厌氧降解敌草快,但降解率较小;加入AQDS能极大促进敌草快降解,22 d降解率可达41.93%。[结论]试验首次报道水稻科萨克氏菌HN05具有腐殖质还原以及降解敌草快的能力,丰富了腐殖质还原菌的菌种资源及其功能多样性,可为敌草快污染环境修复提供基础。