超声条件下蔗糖-6-月桂酸单酯及蔗糖-6'-月桂酸单酯的合成、纯化与结构鉴定

采用薄层层析(TLC)和硅胶柱层析分离纯化了超声处理条件下合成的蔗糖月桂酸单酯,并对纯化后的组分采用高效液相色谱(HPLC)、红外光谱(IR)、质谱(MS)、核磁共振(1H-NMR、13C-NMR)进行了结构鉴定和表征TLC分离蔗糖月桂酸酯的理想条件:点样量4μL,以氯仿/甲醇/冰乙酸/水(V/V/V/V,75∶15∶7∶3)展开25min,然后用10％磷钼酸乙醇溶液喷雾,105℃显色10min 硅胶柱层析分离蔗糖月桂酸酯的较佳条件为:3g样品溶于10mL洗脱剂上,35mm×700mm硅胶(200～300目)层析柱,流动相为TLC展开剂配比,流速为40～50mL/h,每30min收集一份洗脱液 两种单酯组分分别为蔗糖-6-月桂酸酯和蔗糖-6’-月桂酸酯.     

高效液相色谱法测定壳寡糖的含量

探讨高效液相色谱(HPLC)法在壳寡糖含量测定中的应用.选用Shodex Asahipak NH2P-50 4E色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)测定壳寡糖样品中2～6个聚合度壳寡糖的含量.检测器为示差折光检测器,流动相V(乙腈):V(水)=75:25,流速1.2 mL/min,柱温30℃.液相检测壳寡糖的回收率为96.9％～98.2％,相对标准偏差为0.1％～1.0％.结果表明:该定量分析方法可快速、高效地测定壳寡糖样品中2～6个聚合度壳寡糖的含量.     

麦芽糖月桂酸酯的分离纯化与结构鉴定

采用薄层层析(TLC)和硅胶柱层析分离纯化了脂肪酶催化合成的麦芽糖月桂酸酯,然后用高效液相色谱(HPLC)、质谱(MS)、红外光谱(IR)和核磁共振(NMR)法鉴定了纯化组分的分子结构。TLC分离麦芽糖月桂酸酯的合理条件:点样量5μl,以氯仿/甲醇(4:1,V/V)展开15min,然后用5%硫酸乙醇溶液喷雾、120℃显色20min。硅胶柱层析分离麦芽糖月桂酸酯的适宜条件:10ml反应液上12mm×1000mm硅胶(100～200目)层析柱,流动相为氯仿/甲醇(4:1,V/V),流速18ml/h,按1管/10min收集洗出液。两种分离组分分别为6’-O-麦芽糖月桂酸酯和6,6’-O-麦芽糖月桂酸二酯。     

高效液相色谱法测定叔丁基对苯二酚含量的方法学研究

建立了HPLC叔丁基对苯二酚含量的方法:色谱柱:Shim-pack Vp-ODS(150mm×4.6 mm,5μm)接Cl8保护柱(20mm×4.6mm,5μm);以乙腈∶水=32∶ 68(V/V,含1%乙酸)作为流动相;流速:0.8mL/min;检测波长:290nm;柱温:25℃.结果表明TBHQ浓度在2×10-4～1.0mg/mL范围内与峰面积线性关系良好r≥0.9999,最低检测限为4ng,并建立了回收率及日内和日见精密度实验.     

保健食品中花色苷分析方法研究

为了建立保健食品中花色苷测定方法,采用薄层色谱法(TLC)对花色苷进行定性鉴别,采用高效液相色谱法(HPLC)对花色苷进行定量检测。结果发现,TLC鉴别的适宜条件为:展开剂各组分比例为V(甲酸)∶V(水)∶V(正丁醇)=9.1∶8.4∶32.5;点样量为2μL。HPLC检测时花色苷在4.361~52.332μg/mL(R;=0.999 5)内线性关系良好,平均加样回收率为98.22%(RSD=1.23%,n=6),且精密度、重复性、稳定性良好。     

香荚兰豆的TLC鉴别及香兰素、对羟基苯甲醛的含量测定

采用薄层色谱法(TLC)对香荚兰豆原料进行了定性鉴别,并用高效液相色谱法(HPLC)同时测定香荚兰豆药材中香兰素和对羟基苯甲醛的含量。TLC法:采用正丁醇-无水乙醇-浓氨水(7∶2∶1)为展开剂,置紫外灯(254 nm)下检视。HPLC法:采用Agilent ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以甲醇-水为流动相梯度洗脱;体积流量1.0 mg/m L;检测波长分别为275 nm;柱温25℃。TLC中斑点清晰可见。香兰素线性范围为0.408μg~0.816μg(r=0.999 8),平均回收率为100.13%,RSD为1.75%;对羟基苯甲醛线性范围为0.004μg~0.020μg(r=0.9999),平均回收率为99.56%,RSD为1.20%。所测香荚兰豆中,香兰素和对羟基苯甲醛的平均含量分别为7.26%、0.37%。以上方法可靠、准确、重复性好,适用于马达加斯加香荚兰豆的鉴别及其香兰素及对羟基苯甲酸及含量测定。     

应用高效液相色谱检测红法夫酵母胞内虾青素的含量

采用高效液相色谱法定量地测定了红法夫酵母胞内虾青素的含量。色谱条件为 :色谱柱KromasilC18,5 μm ,(2 5 0× 4 6 )mm ;流动相为V(甲醇 )∶V(乙腈 ) =9∶1;流速 1 4mL/min ;检测波长 4 78nm ;柱温为室温。加标回收率为 98 2 %～ 10 0 8%。     

复合酶法结合液相色谱技术测定山药酒中薯蓣皂苷的含量

对复合酶法结合高效液相色谱（HPLC）测定山药酒中薯蓣皂苷的方法进行优化,通过单因素和正交试验确定酶法提取优化条件为采用复合酶（纤维素酶∶淀粉酶为1∶1）对山药酒进行酶解,复合酶用量为2 U/mL,酶解时间为12 h,酶解温度为40 ℃,酶解初始pH值为5.0。高效液相色谱法最优检测条件为采用Inertsil■ODS-3色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为乙腈-水（50∶50,V/V）;流速1.0 mL/min;柱温30 ℃;检测波长203 nm。采用该方法对市售山药酒进行测定,薯蓣皂苷含量为0.106～1.156 mg/L,不同品牌产品含量水平存在差异。     

酶法糖基化芦丁的高效液相色谱法测定

对酶法转化芦丁后的酶反应产物糖基化芦丁的高效液相色谱(HPLC)测定方法进行了研究。HPLC法的色谱条件为:色谱柱使用Agilent公司ZORBAX Eclipse XDB-C18(4·5mm×150mm,5μm);流动相为V(乙腈):V(超纯水):V(甲酸)=18:81·9:0·1;流动相流速为0·8mL/min;紫外检测波长为254nm;柱温30℃;进样量5μL。运用该方法,在7min之内可以完成样品糖基化芦丁的测定,并且在HPLC谱图上能将芦丁和葡萄糖基芦丁(转入1个葡萄糖单元)完全分离,从而保证测定的准确性。实验结果表明,利用HPLC方法测定糖基化芦丁不失为一种方便、快速、可靠的测定方法。     

应用C30-HPLC-PDA分离与鉴定番茄红素几何异构体

在装备了二极管阵列检测器(PDA)的高压液相色谱(HPLC)上,应用C30柱,番茄红素几何异构体获得了良好的分离。色谱条件为:WatersYMCCarotenoidS-5(4.6×250mm)柱;乙腈-甲醇-三乙胺(75∶25∶0.05,V/V)为流动相A,甲基叔丁基醚-三乙胺(100∶0.05,V/V)为流动相B,流动相B在8min内由0%线性增至55%,而后维持恒定至35min;流速:1.0mL/min;PDA波长范围:260～700nm;进样量:20μL。根据各组分的色谱行为、光谱特征和在碘催化下发生几何异构的产物分析,13,13'-顺式番茄红素、11,11'-顺式番茄红素、9,9'-顺式番茄红素和全反式番茄红素4个组分被鉴定。本项研究的结果奠定了应用C30-HPLC-PDA定量检测番茄红素几何异构体的基础。     

超声条件下蔗糖-6-月桂酸单酯及蔗糖-6’-月桂酸单酯的合成、纯化与结构鉴定

采用薄层层析（TLC）和硅胶柱层析分离纯化了超声处理条件下合成的蔗糖月桂酸单酯,并对纯化后的组分采用高效液相色谱（HPLC）、红外光谱（IR）、质谱（MS）、核磁共振（1H-NMR、13C-NMR）进行了结构鉴定和表征。TLC分离蔗糖月桂酸酯的理想条件:点样量4μL,以氯仿/甲醇/冰乙酸/水（V/V/V/V,75:15:7:3）展开25min,然后用10%磷钼酸乙醇溶液喷雾,105℃显色10min。硅胶柱层析分离蔗糖月桂酸酯的较佳条件为:3g样品溶于10mL洗脱剂上,35mm×700mm硅胶（200～300目）层析柱,流动相为TLC展开剂配比,流速为40～50mL/h,每30min收集一份洗脱液。两种单酯组分分别为蔗糖-6-月桂酸酯和蔗糖-6’-月桂酸酯。      

HPLC法测定小儿泻速停颗粒中儿茶素和表儿茶素的含量

目的建立测定小儿泻速停颗粒中儿茶素和表儿茶素含量的HPLC方法。方法采用Shiseido Capcell Pak C18色谱柱（4．6mm×150mm,5μm）;流动相为Ⅳ,N-二甲基甲酰胺-四氢呋喃（4：1）-0．04mol／L枸橼酸溶液（13：87）,流速1mL／min;检测波长280nm。结果阴性对照品与样品分离良好,儿茶素的线性范围为0．0646～1．6150μg,r=0．99996,表儿茶素的线性范围为0．0818～1．0225μg,r=0．99996。儿茶素的平均加样回收率为101．06％,RSD为1．71％;表儿茶素的平均加样回收率为99．13％,RSD为1．63％。样品溶液在8h内稳定。结论此方法简便、准确、可靠,可用于该制剂的质量控制。     

高效液相色谱法测定培美曲塞二钠中间体的有关物质

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定培美曲塞二钠中间体有关物质的方法。方法采用Agilent Extend-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.0265 mol/L磷酸二氢钾(32:68),检测波长254 nm,柱温25℃,流速1.0 mL/min。结果培美曲塞二钠中间体在2.51~25.1 mg/mL范围内线性关系良好(r=0.9999),精密度试验中总杂质含量的RSD为0.25%(n=18)。结论本法简便、快速、专属性强、精密度好,可作为培美曲塞二钠中间体的有关物质控制方法。     

亲水作用液相色谱串联质谱法测定糙米中灭瘟素残留量

建立了糙米中灭瘟素残留量的亲水作用液相色谱-质谱联用测定方法。样品用80%甲醇/水提取,经MCX固相萃取小柱净化,以Waters HPLC BEH HILIC色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm)分离,采用UPLC-MS/MS多反应监测(MRM)正离子模式测定,外标法定量。灭瘟素最低检测浓度为0.02mg/kg,在0.02、0.05和0.20mg/kg 3个添加水平下平均回收率为78%~95%,相对标准偏差为2.9%~5.2%。     

HPLC法测定草浆黑液中对羟基肉桂酸的含量

合成了对羟基肉桂酸,并做为标样利用HPLC法测定了草浆黑液中对羟基肉桂酸的含量。方法：Agilent C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：乙腈一0.3%冰醋酸水溶液（20：80,v/v）,检测波长：310 nm;流速为：1.00 ml/min;柱温：25℃。在上述色谱条件下标样的保留时间在11.294 min左右,黑液样品的保留时间为11.255 min,对羟基肉桂酸在0.0 656～1.64 mg/ml（r=0.9998,n=6）内线性关系良好,平均回收率97.24%,RSD 0.92%。HPLC法简单快速,灵敏度高,可重复性好,定量分析准确,可用于草浆黑液中对羟基肉桂酸含量的测定。     

在线固相萃取富集-高效液相色谱法快速测定花生中白藜芦醇

建立了简便、快速测定花生中白藜芦醇的在线固相萃取富集-高效液相色谱法。固相萃取富集柱填料为dsDNA,在线固相萃取富集过程的上样溶剂为纯水,淋洗溶剂为纯水,转移溶剂为乙腈-水（80：20,V/V）,分析测定溶剂为乙腈-水（25：75,V／V）。本方法对白藜芦醇检测的线性方程为Y=1843．805X＋39．1791,相关系数为0．99978;检出限（LOD）为0．004mg／kg;定量限（LOQ）为0．01mg／kg;基质4个水平添加回收率（n=6）在92．48％-107．98％;6次加标回收相对标准偏差（RSD）在0．19％～6．05％。     

油菜不同器官高质量总蛋白提取方法和双向电泳体系的优化

以显性核不育油菜Shaan—GMS不育株和可育株的花序和叶片为材料,采用TCA（三氯醋酸）-丙酮法提取油菜花蕾、花药及叶片总蛋白,对总蛋白提取方法、IPG（固定pH梯度）胶条种类、聚焦程序、凝胶浓度、上样量等环节进行了优化。结果表明,采用理想的蛋白质裂解液（7mol／L尿素,2mol／L硫脲,4％CHAPS（3-[3-（胆酰氨丙基）二甲氨基]丙磺酸内盐）,65mmol二硫苏糖醇,0．5％IPG缓冲液pH3～10或pH4～7,全蛋白酶抑制片剂（片／10mL））裂解蛋白,以150μg上样,按IEF程序Ⅱ（30V,12h;200V,1h;500V,1h;1000V,0．5h;10000V,2h;10000V,8h）进行等电聚焦,10％SDS—PAGE胶浓度进行第二向电泳,银染方法检测,可得到背景清晰、分辨率较高的油菜花蕾、花药及叶片蛋白质电泳图谱。高质量油菜蛋白的提取方法和蛋白质分离双向电泳体系的优化可为油菜蛋白质组学研究奠定技术基础。     

HPLC法测定丹参叶茶中丹酚酸B的含量

目的:采用高效液相色谱法(HPLC)对丹参叶茶中的保健因子丹酚酸B的含量进行检测,为丹参叶茶的保健功能提供依据。方法:采用Phenomenex Prodigy ODS3-C18色谱柱(4.60×250mm,5μm)进行分离;流动相为甲醇-乙腈-甲酸-水(30:10:1:59);检测波长为286nm;流速为1.0ml.min-1。结果:丹酚酸B在0.67～2.68μg间线性关系良好(r=0.9989,n=6),平均回收率为99.14%。丹参叶茶的丹酚酸B的含量相对较高,平均含量为2.42%。结论:本检测方法简便易行,适用于丹参叶茶中丹酚酸B的含量检测;丹酚酸B是热不稳定物质,但经丹参叶茶高温炒制工艺后其含量较高,仍具有较好的保健功能。     

壳聚糖丙烯酰胺接枝共聚物的制备及其与Fenton氧化法联合处理麦草浆中段废水

以硝酸铈铵为引发剂,合成了壳聚糖丙烯酰胺接枝共聚物（CAM）;结果表明,当m（丙烯酰胺）∶m（壳聚糖）=3∶1,c（硝酸铈铵）=3 mmol/L,反应温度为60℃时,合成的CAM接枝率达到239.4%,单体转化率达到79.83%;将其与Fenton试剂联用,可处理麦草浆中段废水。Fenton氧化预处理的最佳工艺为：ρ（H2O2）=2 g/L,m（H2O2）∶m（FeSO4）=2∶1,pH=4,处理时间为60 m in。絮凝阶段处理的最佳工艺为：ρ（CAM）=10 mg/L,在此条件下,处理后麦草浆中段废水CODCr去除率达82.38%,浊度去除率达到98.53%。