青藏高原干旱地区8种主栽小麦品种对旱雀麦的化感作用评价--测试文章

以青藏高原地区青海省东部干旱区域常见杂草旱雀麦（Bromus tectorum Linn）作为受体,用琼脂共培法对青藏高原青海省东部干旱区域8种主要栽培小麦品种进行化感作用的评价。结果表明：8种小麦品种对旱雀麦的发芽率、发芽势抑制强度为2.78%～69.44%,其中高原448抑制作用最强,乐麦5号抑制作用最弱,青春38、高原437、通麦1号对旱雀麦种子萌发的抑制率都达到10%以上,而互助红、互麦14则对旱雀麦种子萌发表现为负的抑制率。相关性分析得出：处理间化感作用的差异在根长、芽长、干重方面的P值分别为0.0166、0.0194和0.0001,达到显著水平,鲜重P值大于0.5,无相关性。利用化感作用效应指数（RI值）作为化感指标,结合聚类分析得出高原448化感作用最强,青春38、高原437、通麦1号、阿勃化感作用中等,互助红、互麦14号、乐麦5号没有化感作用。     

保护性耕作下小麦和豌豆投入产出能值分析--测试文章--测试文章

应用能值分析的基本理论和方法,探讨了传统耕作(T)、免耕(NT)、传统耕作+秸秆还田(TS)、免耕+秸秆覆盖(NTS)、传统耕作+地膜覆盖(TP)、免耕+地膜覆盖(NTP)等不同耕作模式下小麦和豌豆的投入产出能值,测算了其净能值产出率、能值投入率、宏观经济价值。结果表明：同一耕作方式下,种植小麦能值投入大于豌豆,豌豆能值产出是小麦的5倍以上,且豌豆宏观经济价值远远大于小麦;不同耕作方式下,两种作物净能值产出率均为免耕处理大于相应的耕作处理;由于传统耕作的三种模式人工和机械费用的投入远高于免耕三种模式,使得耕作处理下能值总投入大于相应的免耕处理;免耕+秸秆覆盖处理下,小麦和豌豆净能值产出率和宏观经济价值均达到最大,分别达到了0.64、3.93和9.26、53.1。说明免耕+秸秆覆盖不仅能够实现节约投入,而且可以增产增收,能够达到生态经济效益的最优。     

2015~2017年深圳市场小麦及其制品中转基因成分监测与分析

目的 分析2015~2017年深圳市场小麦及其制品转基因阳性率的变化, 了解深圳市场是否存在未获授权的转基因小麦污染及其本底情况。方法 依据相关国家标准对2015~2017年期间在深圳各大超市抽取的97份小麦及其制品, 进行转基因成分检测, 评估3年来深圳市场转基因小麦及其制品转基因阳性率的变化, 并分析其变化的原因。结果 3年来共检出13份阳性小麦类样品, 小麦类样品总体阳性率为13.40%。2015~2017年, 转基因小麦及其制品转基因阳性率分别12.50%、8.11%、25.00%。不同产地、不同采样地点样品阳性率无明显差异。结论 2017年深圳市场转基因小麦及其制品转基因阳性率明显升高, 但阳性样品均为弱阳性, 提示小麦及其制品中检出的转基因阳性成分可能来源于其他转基因生物的基因污染。     

热带假丝酵母肉毒碱乙酰基转移酶基因的删除及功能鉴定

缺乏高效基因删除技术是限制热带假丝酵母菌株代谢工程育种的重要因素。论文发展了一种新型的基因删除技术并利用该技术成功删除了肉毒碱乙酰基转移酶的两个等位基因。首先PCR扩增标记基因(URA3)的3'端324 bp序列作为基因删除辅助序列(gda序列),同向插入到URA3基因的5'端,在此基础上构建两端含有CAT基因同源臂序列的基因删除突变盒,转化宿主菌XZX,获得CAT基因单拷贝和双拷贝敲除的突变株。PCR鉴定和DNA测序结果表明,获得的URA3基因弹出后的突变株,仅在基因组重组位点上残留一个gda序列。进一步鉴定了突变株的生理性能,单拷贝敲除菌株CAT活性较亲本下降80%,但在葡萄糖或烷烃上的生长性能并不受显著影响。双拷贝缺失菌株CAT活性完全丧失,不能利用烷烃生长,同时在葡萄糖培养基中的生长受到显著影响,最终生物量达到7.56(OD600),仅为出发菌株的57.8%。     

CO2浓度升高对不同水分养分条件下小麦幼苗生长的影响--测试文章

设置了5个氮素浓度梯度（N₀、N₁、N₂、N₃、N₄）、3个PEG（P₀、P₁、P₂）浓度梯度以及2个CO₂浓度（370±50 μmol·mol^-1; 700±50 μmol·mol^-1）水平的盆栽试验,探究了小麦幼苗生长、物质积累与分配以及植株水分条件的变化规律。结果表明：小麦幼苗株高、地上部干重、根干重、生物量以及叶水势的最大值以及高浓度CO₂的最大刺激作用均出现在处理N₁P₀; 而根长和根冠比的最大值分别出现在处理N₀P₀和N₁P₂,高浓度CO₂的最大刺激值也分别出现在处理N₀P₀和N₁P₂; 适宜养分条件下,高浓度CO₂能够最大限度地促进小麦幼苗的生长,同时高浓度CO₂通过提高小麦幼苗叶水势,一定程度上缓解了低浓度PEG胁迫的不利影响。因此,未来CO₂浓度升高将对水肥条件好的小麦产生促进作用,可缓解轻度水分不足的不利影响,而对严重干旱胁迫下小麦的生长作用不明显。     

转基因小麦外源基因插入位点初步分析及检测方法的建立

利用染色体步移(genome-walking)原理和巢式PCR方法,对转基因小麦外源基因sGNA插入位点的序列特征进行了分析,并以此建立了sGNA基因转化事件特异性检测的方法。根据sGNA基因的核苷酸序列设计特异引物,利用Takara公司提供的简并随机引物,通过染色体步移法扩增到了转sGNA基因株系zy2-18的插入位点的边界序列,分析得到的边界序列可知,外源基因片段是通过部分同源重组的方式与小麦基因组进行整合的,整合位点位于A染色体组。检测结果显示携带外源基因sGNA的质粒在与小麦基因组整合的过程中发生了剪切,且Ubi启动子与bar基因被切除,保留了两个串联的NOS基因,且在4500~4520 bp区间发生了重组后的缺失,而在4786~4810 bp区间有一段碱基序列插入,导致插入区段的小麦基因组序列发生重排,初步分析外源基因是通过同源重组的方式进行整合的。通过验证,证明了插入位点信息的准确性,并初步判断插入位点位于小麦A染色体组。因此,随机引物法genome-walking可以作为转基因小麦安全检测及身份识别的有效方法。     

虾壳源蛋白水解物降糖降脂活性评价及肽序分析

目的：采用酶解法制备克氏原螯虾壳蛋白水解物（Procambarus clarkii shell protein hydrolysates,PCSPHs）,并分析其体外降糖降脂活性及肽序。方法：分别采用胃蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶水解制备不同虾壳蛋白水解物,分析其体外降糖降脂活性和肽序列;运用Peptide Ranker及BIOPEP-UWM网站在线分析,再以核受体PPARγ配体结合区域的晶体结构作为靶点,使用Autodock vina进行分子对接模拟,获得具有潜在降糖降脂活性的虾壳肽。结果：胃蛋白酶水解物（PEP-PCSPHs）对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性具有较强的抑制作用,IC₅₀值分别为（5.42±0.05）,（7.11±1.01） mg/mL;胰蛋白酶水解物（TRY-PCSPHs）对胰脂肪酶活性具有最强的抑制能力,IC₅₀值为（4.71±1.12） mg/mL,且对甘氨胆酸钠表现出最好的体外结合效果。此外,经质谱鉴定PEP-PCSPHs和TRY-PCSPHs中分别得到3 391,2 086条肽序;通过在线网站预测和分子对接筛选出多条均能与PPARγ结合的降糖降脂虾壳活性肽（PCSAPs）。结论：酶解克氏原螯虾壳制备的虾壳蛋白水解物具有潜在的降糖降脂活性,可能改善糖脂代谢紊乱。     

不对称还原苯丙酮酸的L-乳酸脱氢酶L-LcLDH2的表达及生物信息学分析

以干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增一种L-乳酸脱氢酶(L-Lc LDH2)的编码基因Lcldh2;借助表达质粒pET-28a(+)将Lcldh2在大肠杆菌BL21(DE3)中实施异源表达。实验结果表明,细胞超声破碎液中L-Lc LDH2催化苯丙酮酸的酶活性为47 U/mg总蛋白质;采用重组E. coli/Lcldh2全细胞催化苯丙酮酸还原,所获产物L-苯乳酸的对映体过量(eep)值 99%。生物信息学分析表明,Lcldh2开放阅读框长906 bp,编码含301个氨基酸的L-Lc LDH2,预测其相对分子质量和等电点分别为32 585和5.5;L-Lc LDH2含有典型的NAD+结合位点序列(GXGXXG),属于NAD依赖型L-乳酸脱氢酶,且是一种非分泌、非跨膜、无信号肽和定位于细胞质的酶蛋白。L-Lc LDH2的获得为生物法制备高光学纯L-苯乳酸提供了新的酶源。     

鸡源大肠埃希氏菌mcr-1基因携带及分析

目的 了解在农业农村部禁止使用多黏菌素作为动物促生长使用后四川部分地区鸡源大肠埃希氏菌（E.coli）mcr-1基因的携带情况,为制定进一步防控措施提供依据。方法 采集四川部分地区市场售卖点肉鸡直肠拭子,用含有多黏菌素（终浓度4 μg/mL）的EC肉汤增菌接种含多黏菌素（终浓度4 μg/mL）的麦康凯平板,挑取可疑菌落,采用PCR方法鉴定菌株并检测mcr-1基因;微量肉汤稀释法测定mcr-1基因阳性菌株对临床常见抗菌药物耐药情况。脉冲场凝胶电泳（PFGE）对mcr-1基因阳性菌株进行同源分析。耐药基因质粒结合实验验证mcr-1基因传播途径。结果 从70份肉鸡样本中的13份检出mcr-1基因阳性大肠埃希氏菌,检出率18.57%（13/70）,对实验的13种抗生素,除13株mcr-1阳性菌株对头孢西丁有12株敏感以外,对其他抗生素都表现出不同程度的耐药,其中四环素和甲氧苄啶/磺胺甲恶唑耐药率最高,达到了100%（13/13）;其次是氨苄西林和氯霉素,耐药率为84.62%（11/13）。PFGE显示13株mcr-1阳性大肠埃希氏菌分属13个不同的型别;质粒结合实验显示mcr-1基因能够通过质粒传播。结论 mcr-1基因在鸡大肠内大肠杆菌中检测率比较高,且鸡大肠中mcr-1阳性大肠埃希氏菌的耐药情况比较严重。     

沈糯9号在黑龙江省东南部生育特性及开发潜力分析--测试文章

以当地糯玉米主栽品种垦粘1号和京科糯2000为对照,在5个种植密度下对沈糯9号及两个当地对照品种的鲜穗产量、鲜籽粒产量、穗部性状、植株性状及熟期进行了研究。结果表明：密度对三个品种产量的影响达极显著水平;各密度下鲜穗产量、穗长、穗粗、穗行数均显著高于垦粘1号和京科糯2000;籽粒深度、行粒数、百粒重及株高与京科糯2000相当,显著高于垦粘1号,但穗位显著低于京科糯2000;沈糯9号熟期较垦粘1号和京科糯2000分别晚6 d和早9 d。综上所述,沈糯9号在产量、穗部性状及田间长势均优于垦粘1号和京科糯2000,且填补了垦粘1号和京科糯2000之间的熟期空白,因此,沈糯9号在黑龙江省东南部乃至全省的开发前景十分可观。     

食品及临床样本中沙门菌多重耐药相关基因的研究

目的 了解从食品及临床样本中分离的沙门菌整合子以及产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)菌分布,以及不同耐药基因与多重耐药之间的关系。方法 利用K-B法进行产ESBL菌表型确证试验;通过聚合酶链式反应方法,对产超广谱β-内酰胺酶沙门菌相关耐药基因(bla_TEM、bla_SHV、bla_CTX)以及可移动元件—整合子基因进行扩增,对整合子可变区扩增产物进行基因测序,分析携带耐药基因盒。结果 共分离309株沙门菌,138株来自食品(禽类96株,生猪肉19株,水产品23株),171株来自临床样本。309株沙门菌耐药率达78.3%,多重耐药率达41.1%,其中禽类耐药率占比最高。共检出56株产ESBL菌,其中35株携带产ESBL菌相关耐药基因(bla _TEM基因型15株,bla_CTX基因型10株,bla _TEM与bla _CTX双基因型10株),未检出bla _SHV基因。检出98株Ⅰ类整合子阳性菌,阳性率为31.7%。其中54株携带...     

三文鱼来源副溶血性弧菌的血清分型、毒力基因及耐药性研究

目的 对2019年广州市售三文鱼中副溶血性弧菌的血清型、毒力基因分布及耐药特征进行研究,为防控因食用三文鱼引起副溶血性弧菌食源性疾病提供数据支持。方法 根据GB 4789.7—2013方法对90份广州市售三文鱼样品进行副溶血性弧菌分离、定量及血清分型,分离株的鉴定及耐药性分析采用全自动微生物鉴定仪分析,通过PCR扩增对毒力基因进行检测。结果 90份三文鱼样品中,有16份检出副溶血性弧菌,总检出率为17.78%,阳性样品污染量范围为3.6~93 MPN/g,其中批发市场的检出率（27.50%）最高。MPN计数阳性管分离得到的72株副溶血性弧菌经血清凝集共分出11个O群血清型,分型率为80.56%,其中O11、O9和O6群为主要血清型,占51.39%,其他血清型分布较分散。72株副溶血性弧菌均含有tlh基因,且均未检测到trh和tdh基因。药敏分析发现,全部分离株对碳青霉烯类、单酰胺环类、氨基糖苷类、喹诺酮类和硝基呋喃类等5类18种抗生素敏感。分离株对氨苄西林高度耐药,耐药率达97.22%,少数分离株对哌拉西林（1.39%）和复方新诺明（5.56%）耐药。6.94%的分离株同时对2种抗生素耐药,未出现多重耐药。结论 广州市售三文鱼受到副溶血性弧菌污染程度较高,分离株的血清型呈多样化,主要为非致病株,但具有一定程度的耐药,存在危害健康的潜在风险。     

2020—2021年绍兴市水产品和腹泻患者来源的霍乱弧菌耐药性与分子特征分析

目的 了解2020—2021年绍兴市霍乱弧菌的血清型、霍乱毒素编码基因（ctxAB）携带率、耐药性及分子分型情况。方法 收集2020—2021年分离自水产品、腹泻患者粪便的霍乱弧菌68株,使用玻片凝集法进行血清分型;利用实时荧光PCR检测ctxAB基因;采用微量肉汤稀释法和脉冲场凝胶电泳（PFGE）分别进行药物敏感试验和分子分型。结果 68株霍乱弧菌只有3株为O1群小川型,其余65株均为非O1/O139血清群;所有菌株均未检出ctxAB基因;菌株对头孢他啶、头孢他啶/阿维巴坦和复方新诺明的耐药率分别为45.6%、38.2%和36.8%,对四环素、替加环素、阿奇霉素、阿米卡星敏感,17株菌对3种及以上抗生素耐药;菌株经Not I酶切后的PFGE图谱呈多样性,水产品分离株与病例分离株的分子分型差别较大。结论 2020—2021年绍兴市霍乱弧菌主要为非O1/O139血清群,不携带毒力基因ctxAB,对多种抗生素耐药,分子特征复杂多样。     

1株食源性蜡样芽胞杆菌分离株的分子特征毒性及耐药性研究

目的 研究株蜡样芽胞杆菌SCY分离株的毒力和耐药性。方法 使用选择性培养基从银川市某餐厅鱼肉菜肴中培养分离获得蜡样芽胞杆菌SCY分离株,经23S rRNA基因PCR测序鉴定后,通过二代全基因组测序技术分析SCY分离株的基因组特征,进而分别采用免疫组化技术和药敏纸片实验研究SCY分离株的毒性和耐药性。结果 SCY分离株的基因组大小为5.82 Mb,编码基因个数为5 767,编码区总长度占全基因组的85.50%。SCY分离株基因组中共含有11个基因岛、16个CRISPR和5个前噬菌体;其中,SCY编码基因分别在PHI和VFDB毒力因子数据库中注释到了14个和62个毒力基因（Identiy>80,Evalue<0.05）,在CARD耐药数据库中注释到了215个耐药基因（Best Hit evalue<0.05）。小鼠肠道组织切片免疫组化结果表明,炎性因子IL-1β、CASP1和Nlrp3的表达水平发生差异显著性上调。22种细菌抗生素药敏纸片试验结果显示,SCY分离株对氯霉素、克林霉素等高度敏感,对四环素、头孢唑啉、头孢哌酮、氨苄青霉素表现为中介,对青霉素、苯唑西林、哌拉西林、杆菌肽、头孢他啶等10种抗生素表现为耐药,SCY分离株多重耐药情况较为严重。结论 本研究发现的SCY分离株属于肠毒株,携带多种肠毒素毒力基因,且具有典型的多重耐药特征。研究结果为揭示蜡样芽胞杆菌分离株的致病机制提供参考依据。     

砂仁多糖对小麦淀粉理化性质及消化特性的影响

[目的]探究砂仁多糖对小麦淀粉体系的作用机理,揭示砂仁多糖对小麦淀粉品质形成影响的量效关系。[方法]通过制备砂仁多糖—小麦淀粉复配体系,研究砂仁多糖添加量对小麦淀粉糊化特性、流变特性、热力学特性、结晶结构及消化特性的影响。[结果]砂仁多糖可提高小麦淀粉复配体系的黏度和糊化温度,减少糊化过程中直链淀粉浸出,降低小麦淀粉糊化过程中结晶区的破坏程度,延缓糊化过程。当砂仁多糖添加量为1.00%时,复配体系崩解值为299 mPa·s,回生值为532 mPa·s、糊化焓为666.29 J/g,此时抗老化效果最佳且稳定性最好。红外光谱分析表明,砂仁多糖与小麦间通过氢键相互作用,当砂仁多糖添加量为1.00%时,氢键作用最强。体外模拟消化结果显示,砂仁多糖可以抑制小麦淀粉消化。[结论]添加砂仁多糖可有效提高小麦淀粉的热稳定性,降低小麦淀粉的消化率。     

北京市售鸡肉和猪肉中大肠杆菌污染情况及耐药特征分析

目的 分析北京市售生鸡肉和生猪肉中大肠杆菌的污染情况以及耐药表型及耐药基因型。方法 从北京市辖6个区的大型超市和农贸市场随机采集259份生鲜肉类样品（鸡肉168份、猪肉91份）,增菌后分离大肠杆菌,并使用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱和16 s rRNA测序对分离菌株进行鉴定。对分离菌株进行药物敏感性测定和全基因组测序,对耐药基因和耐药表型进行比较分析。结果 从259份样品中分离出169株大肠杆菌,检出率为65.25%,其中鸡肉和猪肉中大肠杆菌的检出率分别为77.38%和42.86%。药敏试验结果表明大肠杆菌对甲氧苄氨嘧啶-磺胺甲恶唑（鸡肉83.33%,猪肉91.67%）高度耐药,其次是多西环素（鸡肉32.35%,猪肉38.89%）,同时,它们对庆大霉素、妥布霉素、头孢噻肟、黏菌素等药物都呈现出了不同程度的耐药性。耐药基因分析发现β-内酰胺类基因ampC1与ampC2携带水平最高,检出率分别为93.10%、98.28%,另外也检测到ESBL、NDM-1、mcr-1等重要耐药基因,其中bla_TEM-1D和blaCTX-M_-9是主要存在的ESBL耐药基因。结论 目前北京市售鸡肉存在较为严重的大肠杆菌污染,分离菌株呈现复杂的耐药表型并携带多样的耐药基因,应加强对生鲜肉类样品的微生物污染和细菌耐药性控制,尤其是产ESBL耐药大肠杆菌,为预防控制由其引起的食源性疾病提供科学依据。     

2017—2020年江苏省无锡市沙门菌的血清型与耐药性研究

目的 分析2017—2020年江苏省无锡市沙门菌报告病例的血清型特点和抗生素耐药性流行特征及变化趋势。方法 收集分离自 2017—2020年无锡市食源性疾病哨点监测医院腹泻病例（住院和门诊患者）标本中的216株沙门菌菌株,采用玻片凝集法对216株菌进行血清型鉴定及分析,并采用微量肉汤稀释法检测沙门菌对13种抗生素的药物敏感性。结果 216株沙门菌分为42种血清型,优势血清型分别为肠炎沙门菌28.70%（62/216）占比,鼠伤寒沙门菌26.39%（57/216）。耐药性分析结果显示,216株沙门菌对美洛培南、阿米卡星、阿奇霉素和头孢他啶高度敏感,高敏菌株占比均高于90%;所有沙门菌对氨苄西林的耐药率最高,达到68.06%,对美洛培南的耐药率最低,仅0.46%;沙门菌在2017—2020年对氨苄西林的耐药率呈逐年增高的趋势,且每年沙门菌分离株对氨苄西林耐药性最高;共130株菌株产生了多重耐药性（60.19%）,耐药菌株数最多的耐药谱为AMP-TET-STR,占比5.56%（12/216）,优势耐药谱不明显。结论 无锡市沙门菌的流行血清型以肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌为主,且沙门菌耐药性形势严峻,应该尽快建立高效的管控机制, 加强药敏监测, 优化治疗方案, 避免抗生素滥用。     

赣州市食源性腹泻患者分离沙门菌耐药性和分子分型特征研究

目的 了解赣州市食源性沙门菌耐药性和分子分型特征,建立赣州市食源性沙门菌耐药性和分子指纹图谱数据库,为临床合理用药和食源性沙门菌病的暴发溯源提供科学依据。方法 对赣州市2020—2022年食源性疾病主动监测中分离的136株沙门菌进行血清分型、药物敏感性试验、全基因组测序（WGS）和脉冲场凝胶电泳（PFGE）,并进行耐药基因注释和图谱聚类分析。结果 赣州市食源性沙门菌对STR耐药率最高（83.09%）,其次为TET（78.68%）和AMP（76.47%）;多重耐药菌株占76.47%,耐药谱型广泛,主要流行耐药谱型为AMP-TET-CHL-STR-SXT;WGS预测出7种类别共61种耐药基因,以氨基糖苷类耐药基因携带率（99.19%）最高,大环内酯类（8.87%）最低;136株沙门菌以鼠伤寒变种和鼠伤寒为优势血清型,经PFGE分子分型分为98种带型。结论 赣州市食源性沙门菌耐药状况严重,耐药基因携带率高且基因型多样,PFGE分子型别呈多态性,优势血清型别可能引起暴发流行,应加强监测和研究。     

Comparison of antimicrobial resistance in Salmonella and Campylobacter isolated from turkeys in the Midwest USA

The current study was carried out to determine the antimicrobial resistance profiles and evaluate some molecular characteristics of a set of Salmonella and Campylobacter isolates recovered from production line turkeys in the Midwest region of the United States. A total of 94 birds identified as being positive for both Salmonella and Campylobacter spp. were selected for study. All Salmonella isolates were examined for antimicrobial resistance using the methods employed in the National Antimicrobial Resistance Monitoring System (NARMS). Campylobacter isolates were subjected to similar analysis using the Etest^®. In addition, polymerase chain reaction (PCR) was carried out to determine the presence of the antimicrobial resistance associated genes, integrase (int1), class 1 integrons (Salmonella and Campylobacter) and a multidrug efflux pump (Campylobacter spp.). Results from the study showed that the Salmonella and Campylobacter isolates examined displayed resistance to a number of antimicrobials, with Salmonella and Campylobacter isolates being resistant to at least three antimicrobials while some isolates showed resistances to 6 or 8 different antimicrobials. In addition, 68.1% of the Salmonella isolates tested were found to be positive for the class I integrase gene (int1), 28.7% possessed a 1000 bp gene cassette and 17% possessed an 800 bp gene cassette. All Campylobacter isolates were negative for int1, but 36.2% tested positive for the Campylobacter multidrug efflux pump (CmeB). A considerable number of Salmonella and Campylobacter isolates tested displayed varying degrees of antimicrobial resistance as well as the presence of some factors associated with the carriage and persistence of antimicrobial resistance. Similarities in the types of antimicrobial resistance observed in Campylobacter and Salmonella strains was evident. The results of this study suggest that prescribing practice at the farm level may be a factor in promoting antimicrobial resistance in more than one species of organism. Such practices may, therefore, contribute to the potential health risk for consumers should micro-organisms carrying multiple antimicrobial resistances enter the food chain. This study may be one of the first to report on the incidence of the multidrug efflux pump (CmeB) in Campylobacters recovered from processed turkeys. The antimicrobial resistance and molecular characteristics of Salmonella and Campylobacter is discussed.     

A papaya-specific gene, papain, used as an endogenous reference gene in qualitative and real-time quantitative PCR detection of transgenic papayas

Genetically modified (GM) papaya lines have been approved for commercialization and are widely cultivated in many countries. As a step towards the development of reliable qualitative and quantitative PCR methods for detecting GM papayas, one papaya (Fructus Caricae Carica papaya L.) species specific gene, papain, was selected and validated as suitable for using as an endogenous reference gene in transgenic papaya PCR detection. In this article, both qualitative and quantitative PCR assays for the papain gene were assayed with 11 different papaya varieties and identical amplification products were obtained with all of them. No amplified fragments could be detected when DNA samples from 18 kinds of other species were used as templates, which demonstrated that this system was specific for papaya. In real-time quantitative PCR analysis, the detection limit was as low as 10 pg of DNA. Southern blot analysis confirmed that the papain gene was two copies in the tested papaya varieties and no allelic variation was testified among these tested papaya varieties. In addition, the common used exogenous genes of the coat protein (CP) and the replicase (RP) were also assayed in qualitative and real-time quantitative PCR. Electronic supplementary material  The online version of this article (doi:) contains supplementary material, which is available to authorized users. Wentao Xu and Weibin Bai contributed equally to this work.