基于茶汤中应用的单宁酶固定化工艺研究

目的优化单宁酶固定方法,改善茶汤质量。方法采用壳聚糖、离子交换树脂和活性炭等易得原料作为载体对单宁酶进行固定化研究,最终确定用壳聚糖作为载体,采用吸附法制备固定化单宁酶。通过单因素和正交实验对壳聚糖作为载体制备单宁酶的条件进行优化。结果壳聚糖作为载体固定单宁酶的最佳条件为酶总活力80 U,吸附时间4 h,酶与载体吸附温度35℃,制得的固定化单宁酶酶活力回收最高。采用固定化单宁酶对茶汤进行处理并进行感官审评,经固定化单宁酶处理的茶汤和未经固定化单宁酶处理的茶汤在感官质量上有很大的差异。结论经固定化单宁酶处理的茶汤质量有很大改善,澄清效果显著。     

甲壳素、壳聚糖作为固定化酶载体的研究进展

介绍甲壳素、壳聚糖作为载体的酶的固定化条件及固定化方法，并介绍其活力回收率及稳定性。甲壳素、壳聚糖来源丰富，可以通过多种方法进行处理用作固定化酶载体。     

甲壳素、壳聚糖作为固定化酶载体的研究进展

介绍了甲壳素、壳聚糖作为载体的酶的固定化条件及固定化方法,并介绍其活力回收率及稳定性。甲壳素、壳聚糖来源丰富,可以通过多种方法进行处理用作固定化酶载体。     

天然多糖在酶固定化载体材料中的应用

简述了5种常用的酶固定化方法及近年来国内外酶固定化载体的研究新进展，介绍了几种天然聚多糖如纤维素及其衍生物、壳聚糖及其衍生物、甲壳素等在酶固定化载体材料中的应用，及其固定化过程，并对酶固定化用材料的发展前景予以展望。     

球形α-壳聚糖固定化糖化酶的比较研究

α-甲壳素经高浓度NaOH溶液处理后，制成了3种不同脱乙酰度的壳聚糖载体，用戊二醛接枝，与游离酶偶联后便得到固定化酶。固定化酶性质和动力学参数的研究表明，脱乙酰度高的壳聚糖载体固定化糖化酶的性能最好：其酶回收率达75％；最适反应pH6．0-7．5，最适反应温度50℃；米氏常数22．63mg／L，与游离酶（34．62mg／L）相比，对底物的亲和力增强；室温时操作半衰期较游离酶延长6d以上；经过8次重复操作，酶活损失低于5％。由此可见，固定化酶提高了游离酶的贮藏和操作稳定性。     

甲壳素、壳聚糖作为固定化酶载体的研究进展

介绍了甲壳素、壳聚糖作为裁体的酶的固定化条件及固定化方法,并介绍其活力回收率及稳定性。甲壳素、壳聚糖来源丰富,可以通过多种方法进行处理用作固定化酶载体。     

壳聚糖涂覆磁性纳米颗粒对纤维素酶的固定化

设计具有高稳定性、选择性的酶-载体复合物是固定化酶领域的研究重点。本研究以环氧氯丙烷作为表面活性剂,通过沉淀法制备磁性纳米颗粒并涂覆壳聚糖,用以固定化纤维素酶。通过SEM扫描电镜、VSM磁强计、FTIR红外光谱对 Fe₃O₄-壳聚糖磁性纳米颗粒进行表征,并研究其固定化纤维酶的表征及酶学性质。结果表明,制备的磁性纳米颗粒晶形完整,纤维素酶有效固定在Fe₃O₄-壳聚糖载体表面;固定化纤维素酶比游离纤维素酶具有更好的酸碱稳定性和热稳定性。固定化纤维素酶在pH 2~9范围内均有较好的活性,并且置于60和70 ℃条件下4 h后,仍然能保持将近50％的活性,经10次循环利用后,固定化纤维素酶仍然保持在52.6%的活性,说明Fe₃O₄-壳聚糖可作为固定纤维素酶的有效载体,为固定化酶的进一步应用提供了参考。     

壳聚糖-铜(Ⅱ)配合物固定化青霉素G酰化酶

目的壳聚糖与CuSO4络合为壳聚糖铜后以高分子配位键法固定化青霉素G酰化酶,考察固定化酶的性质。方法单因素优化固定化条件,对Cu^2＋浓度、络合时间、pH、温度、加酶量进行L16（4^5）的正交试验,获得最佳固定化条件,并研究固定化酶的最适反应温度、pH及批次稳定性。结果最佳固定化条件为：壳聚糖直接与Cu^2＋络合制备壳聚糖铜载体,Cu^2＋浓度／0．1g·mL^-1,络合时间16h;载体0．3g,酶量1mL,pH4．9,温度30℃,固定化25h。最高固定化酶活性为65U／g湿载体,固定化酶最适反应温度60℃,最适pH9．0,固定化酶具有较好的保存稳定性。结论壳聚糖-铜（Ⅱ）配合物固定化青霉素G酰化酶的活性高,具有一定的应用潜力。     

壳聚糖微球的制备及其对脂肪酶的固定化研究

采用反相悬浮法制备壳聚糖微球,并以此作为载体固定了脂肪酶。对壳聚糖微球的制备条件、微球的性能及其固定化脂肪酶的条件进行了探讨,结果表明,壳聚糖微球成球效果最好的制备条件是壳聚糖溶液与分散相液体石蜡体积比为1∶2,吐温-80使用量为15mL,壳聚糖浓度为4%,所制得的壳聚糖微球具有良好的热稳定性、耐酸碱性和抗氧化性;壳聚糖微球固定化脂肪酶的最佳条件为戊二醛用量0.6mL,交联时间60min,加酶量1mg/g载体,pH值为7。采用壳聚糖微球固定化脂肪酶具有较高的酶活回收率,为60%     

壳聚糖膜固定化葡萄糖氧化酶的特性研究

研究了以壳聚糖膜为载体、戊二醛为交联剂的固定化葡萄糖氧化酶的特性。结果表明：固定化酶、溶液酶的最适pH均为5．5；固定化酶、溶液酶的最适温度分别为40℃，35℃；固定化酶的Km值为12．16mmol／L，溶液酶的Km值为20．86mmol/L；固定化酶比溶液酶更耐热，且贮藏稳定性及操作稳定性也有所提高；该固定化酶重复使用率较高。     

大豆β-淀粉酶、产气杆菌异淀粉酶在虾壳几丁质上的固定化及在麦芽糖生产中的应用

本文研究了大豆β—淀粉酶和产气杆菌异淀粉酶在同一载体上的固定化作用。以虾壳几丁质和壳聚糖为载体,证明几丁质更适于固定化异淀粉酶。用5％甲酸和50％乙酸预处理载体可增加固定化异淀粉酶的活性和稳定性,这可能是由于载体中壳聚糖的溶解造成的。经甲酸处理的几丁质先与4～6％pH7～9的戊二醛反应1小时,再同酶液(10mg/ml,pH6)反应2小时,并添加0.2mol/1Ca~#,将有利于固定化作用。用本方法得到的固定化酶具有高度活性和稳定性。固定化异淀粉酶最适pH由6.5变为5.0,而固定化β—淀粉酶最适pH变化不大。固定化酶在60℃稳定,在70℃5分钟失活。固定化酶在水中贮藏稳定,并具有良好的操作稳定性,使其在麦芽糖生产中具有潜在的应用价值。     

Dephytinization of food stuffs by phytase of Geobacillus sp. TF16 immobilized in chitosan and calcium-alginate

In this work, Geobacillus sp. TF16 phytase was separately immobilized in chitosan and Ca-alginate with the efficiency of 38% and 42%, respectively. These enzymes exhibited broad substrate specificity. Maximal relative phytase activity was measured at pH 5.0 and 95°C and pH 3.0 and 75°C for chitosan and Ca-alginate, respectively. The enzymes were highly stable in a wide pH and temperature range. Values of K_m and V_max were determined as 2.38 mM and 3401.36 U/mg protein for chitosan, and 7.5 mM and 5011.12 U/mg protein for Ca-alginate. The immobilized enzymes showed higher resistance to proteolysis. After 4 h incubation, hydrolysis capacities of chitosan- and Ca-alginate immobilized enzymes for soymilk phytate were calculated as 24% and 33%, respectively. The chitosan- and Ca-alginate immobilized phytases conserved its original activity after 8 and 6 cycles of reuse, respectively. The features of the enzymes were very attractive and they might be useful for some industrial applications.     

Immobilization of β-Glucosidase and Its Application for Enhancement of Aroma Precursors in Muscat Wine

Enzyme immobilization is becoming more widely practised in biotechnology because of the advantages that this method brings. In this study, commercial β-glucosidase for aroma released in winemaking was immobilized on diverse supports (alginate–chitin, chitosan–chitin) by using different methods. It was found that the most appropriate matrix was chitosan by adsorption and reticulation. The optimal immobilization conditions were pH 3.5, immobilization time 120 min, and concentration of cross-linker glutaraldehyde 0.25 %. Stability of the immobilized enzymes was assessed, which revealed a number of advantages, such as a lower enzyme dose required for immobilization (367 times lower than the free enzyme dose recommended by the manufacturer), high stability over time, and reusability. In vitro studies of cellobiose and in vivo studies of wine and aroma precursors isolated from grape must yielded similar outcomes with respect to enzyme hydrolysis of free and immobilized proteins.     

天然多糖在酶固定化载体材料中的应用

天然聚多糖来源广泛，具有良好的生物相容性和易于改性的特点，使其在酶固定化技术中研究较早。简述常用的几种酶固定化方法及近年来国内外酶固定化栽体研究的新进展，介绍了纤维素及其衍生物、壳聚糖及其衍生物、甲壳素等在酶固定化领域中的应用。给出了上述材料固定化酶的过程，并展望了酶固定化用材料的发展前景。     

产菊糖酶固定化细胞包埋剂的筛选

把产菊糖酶的克鲁维酵母γ-85细胞固定于脱乙酰几了质、聚乙烯醇-海藻酸钠、琼脂、海藻酸钠、明胶等不同的载体上进行连续发酵,经过对凝胶的机械强度、固定化细胞的最适作用条件及其稳定性、酶活保留率和制作工艺等的综合比较,最后认为明胶是较好的载体。     

天然多糖在酶固定化载体材料中的应用

天然聚多糖来源广泛，具有良好的生物相溶性和易于改性的特点，使其在酶固定化技术中研究较早。简述了常用的几种酶固定化方法及近年来国内外酶固定化载体研究的新进展，纤维素及其衍生物、壳聚糖及其衍生物、甲壳素等在酶固定化领域中的应用。给出了上述材料固定化酶的过程，并对酶固定化材料的发展前景予以展望。     

糠醛渣复合材料固定果胶酶的制备

本文以糠醛渣为原始材料进行磺化预处理,利用静自电组装技术将壳聚糖包覆表面,得到糠醛渣-壳聚糖和磺化糠醛渣-壳聚糖复合材料。以FT-IR、SEM等技术对以上制备的复合材料的进行分析表征;然后将两种复合材料利用戊二醛交联后进行果胶酶的固定化。采用单因素变量法研究新型固定化酶的最佳催化性能和稳定性。未磺化糠醛渣复合材料固定酶的最佳催化条件:pH 3.5,果胶酶浓度50 mg/mL,果胶浓度15 mg/mL,反应时间120 min,反应温度45℃;磺化糠醛渣复合材料固定酶的最佳催化条件:pH 3.5,果胶酶浓度20 mg/mL,果胶浓度10 mg/mL,反应时间60 min,反应温度50℃。其中糠醛渣复合材料的固定化果胶酶的最大载酶量为197.20 mg/g,在重复循环使用8次后剩余相对酶活可达81.78%,磺化糠醛渣复合材料的固定化果胶酶在4℃下储存32 d后仍剩余88.98%的相对酶活。两种固定酶都表现出较好的操载酶量和储存稳定性,有较好的经济价值和应用前景。     

多胺柔性链改性壳聚糖微球固定化木瓜蛋白酶

用反相悬浮交联法制备了单分散壳聚糖微球树脂,以其作为固定化载体基体,经氨基保护、C6羟基环氧化后接枝亲水性多乙烯多胺,制备了粒径为220～300μm、具有较高机械强度的多胺柔性链改性壳聚糖载体。采用该载体对木瓜蛋白酶在pH8.0缓冲液中室温下固定25h,固定化酶表观活力最高可达313U.g-1,活力回收率最高达61.5%,是采用未经多胺分子修饰的壳聚糖微球固定化的2.3倍。该柔性固定化酶的最适温度为65℃,最适pH为8.0,连续使用6～7次后仍保持原来活力的一半。     

Effects of Immobilization and Permeabilization Procedures on Growth of Chenopodium rubrum Cells and Amaranthin Concentration

Cultures of Chenopodium rubrum were subjected to permeabilization and immobilization procedures to examine their potential for pigment production. Amaranthin content of culture media was highest for cultures treated with dimethylsulfoxide (DMSO) or dissolved chitosan. Labelling of the cells with L-(U-¹⁴C) tyrosine revealed that amaranthin was released from the cells but degraded rapidly. Product degradation in chitosan immobilized cells was delayed by 12–24 hr. Sufficient cell growth was observed in cultures treated with 0.77 mg chitosan per gram fresh biomass, with 0.42 ml.g^-1 DMSO, or when immobilized in a complex Ca-alginate-chitosan gel system. All other treatments resulted in inhibition of growth.