黑豆粉中β-淀粉酶的提取研究

研究了黑豆粉中β-淀粉酶的提取工艺条件.分别讨论了提取酸度、温度、时间、外加盐、表面活性剂、还原剂等对黑豆粉中β-淀粉酶提取量的影响,通过正交试验优化了料水比1:10的提取工艺条件为:提取时间0.5h,提取温度45%,提取酸度pH6.0,0.2mol/LNaCI,0.5%(w/v)SDS,0.2%(w/v)CH3CH2SH.β-淀粉酶在最优化条件下的提取量为34.25 U/mL.     

耐热β-葡聚糖酶产生菌AS35产酶条件的研究

本试验对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AS35产β-葡聚糖酶的发酵条件进行优化研究。单因素实验结果表明:该菌产β-葡聚糖酶的最佳碳源为麦糟粉,添加量为3.0%(w/v),最佳麦糟粉颗粒直径为0.5mm左右;最佳氮源为蛋白胨,添加量为0.8%(w/v);最佳培养基初始pH为7.0;最佳摇瓶装液量为50mL/250mL三角瓶;最佳发酵温度为36℃。在上述优化条件下,以接种量10%(v/v)接种菌龄18h的种子于发酵培养基中,200r/min摇床培养60h,β-葡聚糖酶酶活达到32.5U/mL。同时,耐热性实验表明,该酶最适反应温度为65℃。     

响应面法分析优化米曲霉产β-葡萄糖苷酶液体发酵培养基

利用快速有效的响应面分析法对米曲霉ASPE0485产β-葡萄糖苷酶的发酵培养基进行优化,利用PlackettBurman显著因子实验和Box-Behnken响应面分析优化了β-葡萄糖苷酶产生菌的发酵培养基,确定摇瓶发酵的最佳培养基组成为(%,w/v):玉米芯3.8%、大豆蛋白胨0.5%、KH2PO40.5%、MgSO4.7H2O0.05%、CaCl20.05%、吐温-800.27%和接种量5.3%;在此条件下发酵,得到酶活为21.1U/mL比原始酶活(17.65U/mL)提高了19.55%。     

酶法提取蕨根膳食纤维的工艺优化

为有效利用蕨渣,采用水酶法制备蕨根膳食纤维,对木瓜蛋白酶和β-淀粉酶的工艺条件进行优化,并对产品的功能特性指标进行分析.确定提取工艺条件为:料水比1:6(W:V),木瓜蛋白酶(400 000 U/g)的添加量0.03%、温度50～55 ℃、pH 6.5、水解时间90 min;β-淀粉酶(100 000 U/g)添加量0.02%、温度60～65 ℃、pH 5.6、水解时间60 min.所制备的蕨根膳食纤维持水力和膨胀力分别为519%和6.04 mL/g,说明蕨渣是一种良好的膳食纤维资源.     

耐高温α-淀粉酶产生菌产酶条件的研究

以一株高温淀粉酶产生菌为出发菌,经过单因素法和正交实验法确定优化培养条件为:玉米粉0.50g, 黄豆粉1.00g,NaCl 0.5g,蒸馏水100mL, pH10.0,接种量0.4%(v/v),装液量14%,50℃,180r/min摇床培养48h后,测定酶活达到32225.4BV,较初始酶活15812.0BV提高了103.8%.     

紫色红曲霉液态发酵产糖化酶的工艺研究

通过培养基和发酵条件的优化提高紫色红曲霉G6液态发酵产糖化酶活力。研究接种菌龄、碳源、氮源、金属离子、培养基初始pH、接种量、装液量、摇床转速以及温度等对产酶的影响。结果表明,最佳培养基配方(w/v)为大米粉8%,蛋白胨1%,KCl0.1%,ZnSO_40.01%,FeSO_40.005%,MnSO40.015%,培养基初始pH为4.0;最适发酵条件:装液量50mL/250mL,转速150r/min,温度32℃,接种量12%(v/v);在此条件下发酵10d,糖化酶活力为1652.36U/mL比优化前(109.54U/mL)提高了14.08倍。     

酶催化改性淀粉的可控降解

采用耐高温、耐酸碱的β-甘露糖酶对改性淀粉进行可控降解,在(90±0.5)℃用旋转粘度计测量粘度,用DNS法测酶活。由此,得到β-甘露糖酶降解改性淀粉的最佳降解条件为:缓冲液的pH为9.0,β-甘露糖酶的用量为5%(v/v),改性淀粉的用量为2.5%(w/v),加热温度为90℃,加热时间为3h。在此条件下,改性淀粉的粘度变化是2.5Pa.s,酶活为1262mg/mL.min。     

大豆乳清废水中β-淀粉酶工业生产工艺的研究

大豆乳清废水中含有较高含量的β-淀粉酶,分别用超滤和乙醇沉淀方法分离大豆乳清废水中的β-淀粉酶,并确定其最佳条件。选用截留分子量为20000 u的超滤膜,在跨膜压差(Δp)为0.25 MPa下,2级超滤9倍,然后先加入冰无水乙醇至乙醇体积分数为30%(v/v)沉淀以除去杂质,再加入冰无水乙醇使乙醇体积分数为70%(v/v)沉淀β-淀粉酶。沉淀用50 mmol/L、p H6.0醋酸钠缓冲液复溶,复溶体积为超滤后体积的1/10,最后得到的β-淀粉酶酶液单位酶活为118600 U/m L,酶活得率为77.54%。应用超滤和乙醇沉淀相结合的方法,使得从大豆乳清废水中大规模地生产β-淀粉酶成为可能。     

酶-碱法制备酵母碱不溶性葡聚糖

以啤酒废酵母为原料,采用酶-碱法提取酵母碱不溶性葡聚糖,确定了酵母碱不溶性葡聚糖的制备条件:50 g酵母泥加入200 mL浓度为20 mg/L木瓜蛋白酶溶液,55℃处理36 h,离心所得沉淀物,以1:5固液比(w/v)加入1.0 mol/LNaOH溶液,45℃处理3 h.此条件下多糖得率为10.1%,多糖纯度达到92.6%.红外光谱分析显示产品含有β-(1-3)键葡聚糖.     

忧遁草茎中黄酮类化合物的提取工艺优化及比较

为筛选适合忧遁草茎中黄酮类化合物的提取方法,以得率为评价指标,在单因素基础上,通过正交试验优化纤维素酶法和有机溶剂浸提法提取忧遁草茎中的黄酮类化合物工艺;采用ABTS自由基法、DPPH自由基法和还原力法比较提取物的抗氧化性。结果表明,纤维素酶辅助提取忧遁草茎中黄酮类化合物的最佳工艺条件为:乙醇浓度80%(v/v)、温度55 ℃、pH5.0、底物质量浓度30 g/L、酶用量300 U/g、时间1.5 h;有机溶剂浸提的最佳工艺条件为:乙醇浓度80%(v/v)、温度55 ℃、料液比1:15 (g/mL)、时间2.5 h。纤维素酶辅助提取忧遁草茎中的黄酮类化合物得率为(1.32±0.11)%(w/w),高于有机溶剂浸提法的(1.05±0.08)%(w/w)。2种提取方法得到的黄酮化合物均具有较强的抗氧化性,其中纤维素酶辅助提取物清除ABTS自由基和DPPH自由基的半抑制浓度(IC50)值分别为(1.94±0.04)、(0.178±0.013)mg/mL,低于有机溶剂提取物的(2.76±0.05)、(0.200±0.015)mg/mL,说明酶法提取物的抗氧化性强于有机溶剂浸提法。忧遁草茎中黄酮类化合物提取采用纤维素酶辅助提取较为适宜。     

黄精总皂苷提取工艺优化及其对α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶抑制活性

以黄精总皂苷得率为评价指标,通过单因素试验对纤维素酶添加量、果胶酶添加量、料液比、酶解pH、酶解温度以及酶解时间进行研究,采用响应面对提取条件进行优化,并以阿卡波糖为阳性对照,探究不同浓度下黄精总皂苷的α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明,最佳提取条件为:纤维素酶添加量0.4%、果胶酶添加量5.0%、料液比1:16 g/mL、酶解pH为5.0、酶解温度45℃、酶解时间2.0 h,总皂苷得率4.06%。当黄精总皂苷浓度为3.000 mg/mL时,其对α-葡萄糖苷酶最高抑制率可达74%,接近于阿卡波糖(0.5 mg/mL)的82%;当黄精总皂苷浓度为2.000 mg/mL时,其对α-淀粉酶最高抑制率可达82%,超过阿卡波糖(0.5 mg/mL)的80%。本研究使用的复合酶法提高了黄精总皂苷得率并证实了其具有一定的α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性。     

从猴头菇中提取纯化SOD

研究了从猴头菇中提取并纯化SOD的方法和最佳条件.采用乙醇-氯仿法通过均匀实验获得最佳提取条件为1g猴头菇加入到0.15mol·L-1的NaHCO3 5mL中,加入乙醇-氯仿(2:1,v/v)溶液6mL,在30℃下提取3.5h测得粗酶液活性为321.26U.采用丙酮二级纯化法,纯化所得SOD的酶比活为95.58U·mg-1.     

RP-高效液相色谱法测定胡萝卜中的维生素A原及叶黄素

使用石油醚:丙酮=1:1(v:v)提取胡萝卜中的类胡萝卜素,用RP-高效液相色谱测定成熟期的维生索A原(α-胡萝卜素、β-胡萝卜素)和叶黄素.流动相为甲醇:乙腈=90:10(v:v),流速为0.8mL/min,检测波长为450nm.α-胡萝卜素、β-胡萝卜素和叶黄素的回收率依次为:98.8%、99.3%、99.0%.成熟期胡萝卜中检测到α-胡萝卜素、β-胡萝卜素和叶黄素的含量分别为:190.573、308.930、0.325μg/g.     

β-葡萄糖醛酸酶提取及其活性研究

β-葡萄糖醛酸酶(β-G)是大肠杆菌(E.coli)的特异酶,利用酶-底物法测定β-G活性,确定了β-G的最佳发酵培养基:胰蛋白胨1%、淀粉5%、NaCl 0.5%,、酵母膏0.5%、pH 7.2～7.4;最佳发酵培养条件:通气量50 mL/250 mL三角瓶,转速110 r/min,并用硫酸铵分级沉淀法对β-G进行提取研究。     

复合酶对方便米饭抗回生的研究

淀粉回生是影响方便米饭品质的主要原因。在单因素实验的基础上,通过响应面分析方法优化了复合酶(β-淀粉酶/α-淀粉酶)处理方便米饭抑制其回生的条件。结果表明,当复合酶溶液用量为10mL/20g大米,β-淀粉酶/α-淀粉酶使用比例为9:1(U/U)、作用温度为44℃和作用时间为50min时,方便米饭成品的糊化度达96.20%。与对照组(未加酶的产品)相比,产品糊化度提高了28.22%。因此,采用复合淀粉酶法可有效地改善方便米饭的品质。     

快速酶法制备低聚异麦芽糖工艺建立与优化

对多酶协同制备低聚异麦芽糖(IMOs)生产工艺进行研究,建立了以玉米淀粉为底物,使用耐高温α-淀粉酶进行液化,以α-葡萄糖苷酶、普鲁兰酶和β-淀粉酶同时糖化转苷制备IMOs的基本工艺。通过优化液化程度、糖化转苷过程作用温度和p H、糖化阶段α-葡萄糖转苷酶、普鲁兰酶和β-淀粉酶的添加量,形成了快速酶法制备低聚异麦芽糖的工艺。最优工艺如下:以25%(w/v)玉米淀粉为底物,液化还原糖含量(DE值)为20~30,糖化转苷温度为55℃,p H6.0,α-葡萄糖苷酶添加量为500~1000 U/g、普鲁兰酶添加量为0.9 U/g、β-淀粉酶添加量为500 U/g。结果表明:反应15 h可得到异麦芽二糖、异麦芽三糖和潘糖之和为49.09%的低聚异麦芽糖浆。本研究所建新工艺可以淀粉为原料快速高效制备IMOs,其有效组分明显高于现有生产工艺,制备周期也较现有生产工艺缩短70%以上,研究结果对现有IMOs生产技术的提升具有指导意义。     

雅致放射毛霉壳聚糖提取方法的研究

壳聚糖是甲壳素部分脱乙酰的产物,天然存在于一些真菌细胞壁中,具有良好的生物相容性和生物可降解性,被广泛用于食品、医药等领域。采用稀硫酸法、碱-酸法、碱-酸结合α-淀粉酶法对雅致放射毛霉壳聚糖提取的影响,得出碱-酸结合α-淀粉酶法提取壳聚糖效果最佳。对碱-酸结合α-淀粉酶法进行条件优化,结果表明,最佳提取条件为:1mol/L Na OH在121℃处理30min,4%(v/v)盐酸在95℃处理6h,添加4%(v/v)的α-淀粉酶在90℃处理2h。采用该方法提取壳聚糖,壳聚糖得率可达16.91%,利用茜素红法测得壳聚糖纯度为92.83%。     

酶-碱法提取碎米蛋白工艺研究

以精米加工副产物的碎米为原料,采用酶法富集-碱法浸提工艺对碎米蛋白质进行提取。首先采用α-淀粉酶对碎米进行液化预处理,以利于碎米中蛋白质组分的富集。在酶解温度95℃、pH7.5、固液比1∶15、α-淀粉酶用量20U/g、水解时间150min条件下,碎米原料液化率达到61.4%,经离心分离后的沉淀作为下游碱法提取蛋白质的原料。在单因素实验基础上,以提取率为指标,设计正交实验对碱法提取工艺条件进行了优化。结果表明,最佳浸提工艺参数为:NaOH浓度0.06mol/L、料液比1∶5(w/v,g/mL)、提取时间5h、温度50℃,在此最佳条件下,碎米蛋白提取率达到86.26%。酶-碱复合法集酶法富集与碱法浸提为一体,为碎米蛋白的生产及碎米资源的高值化利用提供了相关依据。     

梨皮多酚的提取工艺优化的研究

研究了梨皮中多酚的提取工艺,通过正交实验确定了最佳提取条件.结果表明:梨皮中多酚的最佳提取工艺条件为温度70℃,固液比1:11(w/v),乙醇浓度60%,浸提时间60min.该条件下的多酚提取率为0.5mg/g.     

响应曲面法优化麦芽中β-淀粉酶提取工艺的研究

通过实验比较大麦发芽前后β-淀粉酶活力的变化及影响麦芽β-淀粉酶提取的主要因素.在单因素实验基础上,采用Box-Behnken设计中的五因素三水平的响应曲面分析法,建立了麦芽中β-淀粉酶提取的二次多项数学模型,考察了各因素对β-淀粉酶提取的影响.结果表明,大麦发芽第3d β-淀粉酶活力最大;β-淀粉酶提取优化工艺条件为:料液比1:17、温度44℃、缓冲液pH6.4、提取时间2.3h,还原剂用量1.64g/L;在此工艺条件下,每克绝干麦芽提取得到的β-淀粉酶酶活为1230.22U.