地参游离酚对CCl4所致肝细胞损伤细胞凋亡、细胞周期及炎症因子的影响

通过体外实验,研究地参游离酚对CCl₄所致肝细胞损伤细胞凋亡、细胞周期及炎症因子的影响。采用流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期的分布,采用试剂盒测定肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素8（IL-8）的含量和天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）活化程度,同时采用免疫组化检测环氧化酶-2（COX-2）、白介素6（IL-6）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的蛋白表达水平。结果表明,与模型组相比,地参游离酚能显著降低CCl₄引起的细胞凋亡,影响细胞周期的分布,能显著降低炎症因子TNF-α、IL-8的含量并阻滞Caspase-3的活化程度（P<0.05）,并不同程度降低COX-2、IL-6和iNOS蛋白表达水平（P<0.05）。地参游离酚通过抑制细胞凋亡、影响细胞周期分布和抑制炎症反应保护CCl₄所致的肝细胞损伤。     

蜂胶对大鼠BRL肝细胞损伤的保护作用

研究中国蜂胶和巴西蜂胶乙醇提取物对过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠BRL肝细胞损伤的保护功效。方法:BRL肝细胞经H2O2预孵1 h后,分别经DMEM培养液、中国蜂胶乙醇提取物(EECP)、巴西蜂胶乙醇提取物(EEBP)处理24 h,分别测定细胞存活率、细胞凋亡率以及细胞培养液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)以及丙二醛(MDA)的变化。与H2O2组相比,EECP和EEBP均显著提高H2O2损伤后BRL肝细胞的存活率,抑制细胞的凋亡;降低细胞培养液中ALT和AST水平;提高SOD的活性。尽管中国蜂胶和巴西蜂胶化学组分不同,但中国蜂胶和巴西蜂胶均具有较好的保肝功效,其机制与提高细胞存活率、抑制细胞凋亡以及降低细胞内AST、ALT水平,升高SOD活性有关。     

草苁蓉多糖对氧化应激所致血管内皮细胞凋亡的抑制作用

目的：研究草苁蓉多糖（Boschniakia rossica polysaccharides,BRPS）对氧化应激所致血管内皮细胞凋亡 的抑制作用。方法：利用叔丁基过氧化氢（tert-butyl hydroperoxide,tBHP）损伤人脐静脉血管内皮细胞制备细胞 氧化应激损伤模型,采用四甲基偶氮唑盐（methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT）比色法检测细胞存 活率,分光光度法检测细胞内丙二醛（malondialdelyde,MDA）水平、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）活力和还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）水平。采用二氯荧光乙酰乙酸盐（dichlorofluorescein diacetate,DCFH-DA）法检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平,采用JC-1荧光染色法观察 细胞线粒体跨膜电位（mitochondrial membrane potentials,ΔΨm）水平,采用Hoechst染色和原位末端标记（TdTmediated dUTP nick end labeling,TUNEL）法观察细胞凋亡情况。Western blot法检测细胞Bax、Bcl-2、细胞色素c （cytochrome c,Cyt c）、Bid片段（truncated Bid,tBid）、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白的表达情况。 结果：BRPS提高tBHP损伤的内皮细胞存活率,降低细胞ROS水平,减少MDA生成,提高SOD活性与GSH水 平,升高ΔΨm水平,抑制细胞凋亡。Western blot结果显示,BRPS降低胞浆Cyt c、线粒体tBid水平,减小细胞 Bax/Bcl-2比值,抑制Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的活化。结论：BRPS对氧化应激所致血管内皮细胞凋亡具有 抑制作用,机制可能与线粒体凋亡途径和死亡受体途径均有关。     

牦牛血低聚肽对缺氧介导的H9c2心肌细胞损伤的保护及其作用机制

体外培养H9c2心肌细胞建立缺氧损伤模型,随机分为5组(n=6):正常对照组、缺氧组、牦牛血低聚肽低、中、高剂量组。结果表明,缺氧组的细胞存活率显著降低(P0.01)、细胞凋亡率显著升高(P0.01)、LDH释放水平显著升高(P0.01),线粒体膜电位极显著降低(P0.01),表明缺氧对H9c2心肌细胞产生了损伤。与缺氧组相比,牦牛血低聚肽干预组的细胞存活率增加,细胞凋亡减少以及细胞中LDH的释放水平下降,并呈良好的剂量依赖关系。同时,牦牛血低聚肽能够抑制线粒体膜电位下降,提高细胞T-AOC水平,降低TNF-α水平,抑制缺氧介导的细胞色素C的释放,上调抗凋亡蛋白(Survivin、p-Akt、Akt)的表达,降低促凋亡蛋白(Caspase-3/9)的活性,且牦牛血低聚肽也影响编码上述蛋白的m RNA水平。以上结果表明;牦牛血低聚肽对H9c2心肌细胞的保护与抑制PI3K-Akt信号转导通路、保护细胞线粒体结构功能完整性有密切关系。     

化香虫茶总黄酮对CCl_4诱导小鼠肝损伤的预防效果

本文对虫茶总黄酮的肝损伤预防效果进行了研究。虫茶黄酮可以使CCl4诱导的肝损伤小鼠血清中的谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和甘油三酯(TG)含量下降,升高血清中的还原型谷胱甘肽(GSH)含量。同时,虫茶黄酮还可以使肝损伤小鼠肝脏中的MDA和TG含量下降,GSH含量上升,且100mg/kg浓度虫茶黄酮的效果更显著,能够接近常用的肝病治疗药物水飞蓟。对小鼠血清中细胞因子的检测也发现灌胃虫茶黄酮小鼠的IL-6、IL-1β、TNF-α和IFN-γ水平低于对照组小鼠,接近正常组和药物水飞蓟组。组织病理切片证明虫茶黄酮可以减轻CCl4对肝组织的破坏,保护肝脏细胞。虫茶黄酮灌胃小鼠相对于对照组小鼠肝脏组织中的炎症相关基因NF-κB被下调,IκB-α被上调。结果表明虫茶黄酮有较好的肝损伤预防效果。     

牛蒡提取物对四氯化碳诱导肝损伤小鼠的保护作用

研究牛蒡提取物对CCl4诱导肝损伤小鼠的保护作用及可能作用机制。以乙醇和水分别提取牛蒡皮和去皮牛蒡根,得牛蒡皮乙醇(LP)、牛蒡皮水(PW)、去皮牛蒡根乙醇(MA)和去皮牛蒡根水(MW)提取物。生化法测定小鼠血清中ALT、AST、ALP、LDH活性、TB含量和肝脏中MDA含量、SOD、GSH活性,蛋白印迹法测定肝组织中XOD、SOD1、SOD2表达量,观察小鼠肝组织病变程度。LP组小鼠血清中ALT、AST、ALP、LDH活力,TB含量显著升高,最高达97%以上;肝脏中MDA含量显著下降,GSH和SOD活力显著升高,最高达45%;肝脏中SOD2表达量升高、XOD表达量下降;肝组织病变程度好于CCl4组。与CCl4组相比较,PW、MA和MW组小鼠血清中ALT和AST活力显著下降,但其他生化指标及肝组织病变程度与CCl4组比较无统计学差异。LP对CCl4诱导肝损伤小鼠的保护机制可能为通过对体内氧自由基的清除,维持肝细胞的稳定性。     

苦荞总黄酮对酒精性脂肪肝细胞的作用

为研究苦荞总黄酮（total flavonoids of tartary buckwheat,TFTB）对体外诱导的酒精性脂肪肝（alcoholic fatty liver,AFL）L-02细胞的影响。采用细胞增殖-毒性检测试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）筛选AFL细胞模型乙醇诱导浓度、TFTB作用浓度,油红O染色观察AFL细胞模型构建情况,用试剂盒方法检测TFTB作用前后细胞上清液中甘油三酯（triglyceride,TG）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate transaminase,AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、游离脂肪酸（nonestesterified fatty acid,NEFA）、总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase,T-SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）水平,酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测 TFTB 作用前后细胞上清液白介素-6（interleukin-6,IL-6）、白介素-8（interleukin-8,IL-8）和肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的水平变化。用含 0.9%乙醇和 0.01%FeSO4的RPMI-1640培养液诱导L-02细胞,诱导至第4代,与空白对照组及阴性对照组相比,模型组经油红O染色后胞浆内出现大量橘红色脂滴且产生明显的TG、AST、ALT堆积。与模型组相比,80 μg/mL TFTB处理组细胞上清液中的TG、AST、ALT、MDA、NEFA水平分别降低 15.00%、61.50%、68.71%、13.83%和47.51%,而 T-SOD、GSH-Px水平分别升高17.44%、101.57%。此外,TFTB处理后体外诱导的AFL细胞上清液中IL-6、IL-8和TNF-α水平分别降低8.31%、32.61%、27.85%,表明TFTB不仅可以抑制肝细胞脂肪积累与变性、减轻乙醇对肝细胞膜及肝细胞的氧化损伤,还可以缓解由于AFL细胞损伤所引起的炎症反应。     

五汁饮对对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的保护作用

目的:探讨五汁饮（Wuzhiyin,WZY）对对乙酰氨基酚（acetaminophen,AP）致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:将小鼠随机分为空白组,模型组及五汁饮低、中、高剂量组,灌胃给药100、200、400 mg/kg,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水。通过计算脏器指数,检测血清中的ALT、AST及肝组织匀浆中的MDA、GSH、TNF-α、IL-6、IL-1β水平,结合肝组织切片来观察病理学变化。结果:五汁饮低、中、高剂量组小鼠肝脏指数较模型组降低（P<0.05或P<0.01）。与模型组相比,五汁饮中、高剂量明显抑制血清中的AST、ALT活力（P<0.05或P<0.01）,显著性降低TNF-α、IL-6、IL-1β的水平（P<0.05或P<0.01）,使肝组织匀浆中MDA水平降低,同时缓解肝组织匀浆中GSH水平的升高;组织病理学HE和Tunel染色显示五汁饮可改善肝组织的坏死与凋亡,并减轻细胞炎性浸润。结论:五汁饮对对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧化作用、减少炎症反应及抑制细胞凋亡有关。     

水飞蓟素对丙烯酰胺所致肝细胞凋亡的抑制作用及其机制

研究水飞蓟素预处理对丙烯酰胺诱导肝细胞凋亡的抑制作用,并探讨其作用机制。以Hep G2细胞为模型细胞,设4个水飞蓟素预处理组(12,24,48,96μg/m L),预处理时间6 h,用8 mol/L丙烯酰胺染毒;同时设1个丙烯酰胺染毒组和1个细胞悬液对照组。分别采用MTT法和Annexin V-FITC双染法检测细胞活力和凋亡情况;采用细胞化学法检测细胞中Caspase-3的活性及ROS和GSH水平。结果表明,丙烯酰胺可显著增加细胞凋亡率,降低细胞存活率(P0.01)。用12~96μg/m L质量浓度范围的水飞蓟素对细胞进行预处理后,细胞凋亡率明显降低,存活率明显提高;同时细胞内ROS水平和Caspase-3的活性显著降低,细胞内GSH含量明显提高(P0.01),且在水飞蓟素质量浓度为96μg/m L时,达到最佳效果。以上说明水飞蓟素可有效抑制丙烯酰胺诱导的肝细胞凋亡,原因可能与其减缓细胞内氧化压力和抑制肝细胞凋亡途径中关键酶Caspase-3活性有密切关系。     

EGCG表没食子儿茶素没食子酸酯对阿霉素所致小鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对阿霉素(DOX)注射引起的小鼠心肌细胞凋亡的影响及其作用机制研究。方法:应用DOX腹腔注射作用于小鼠,建立小鼠体内心肌损伤模型,观察小鼠生理状况,比色法测定细胞乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量,利用流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位及细胞凋亡状况。结果:与对照组相比,DOX组中LDH和CK的活性显著增强;与DOX组相比,EGCG+DOX组中LDH和CK的活性显著减弱,抑制DOX心肌细胞凋亡。同时EGCG显著减轻DOX引起MDA含量的增加,提高细胞中SOD的活性。线粒体膜电位数据显示,与DOX组相比,EGCG显著增加心肌细胞的线粒体膜电位。结论:EGCG对DOX引起的心血管损伤具有显著的保护作用,其保护作用与降低心肌细胞凋亡,提高抗氧化防御和保护线粒体有关。