木醋杆菌合成培养基探索

通过逐一删减法对参考合成培养基进行简化,结果显示2%葡萄糖,0.3%Na2HPO4、0.1%NH4Cl、0.1%柠檬酸、0.025%MgSO4适合木醋杆菌HN001,再进一步对该培养基进行优化,实验结果显示3%蔗糖、0.1%乙酸、0.1%乙酸铵(或柠檬酸铵)、0.1%Na2HPO4、0.025%MgSO4为最佳合成培养基组成,而KCl和烟酰胺对纤维素的产生有抑制作用。     

木醋杆菌合成培养基探索

通过逐一删减法对参考合成培养基进行简化,结果显示2%葡萄糖,0.3%Na2HPO4、0.1%NH4Cl、0.1%柠檬酸、0.025%MgSO4适合木醋杆菌HN001,再进一步对该培养基进行优化,实验结果显示3%蔗糖、0.1%乙酸、0.1%乙酸铵(或柠檬酸铵)、0.1%Na2HPO4、0.025%MgSO4为最佳合成培养基组成,而KCl和烟酰胺对纤维素的产生有抑制作用。      

影响木醋杆菌RF4产酸因素研究

以总酸为指标,研究了基础发酵培养基各组分、磷酸盐、铵盐、有机酸、氨基酸及多肽、培养方式对木醋杆菌RF4产酸的影响。结果表明:基础培养基中,葡萄糖、酵母膏及乙醇最适浓度分别为7.0%(m/v)、1.5%(m/v)和5.0%(v/v);基础培养基中分别添加Na2HPO4、(NH4)2SO4、半胱氨酸的最适用量分别为0.7%(m/v)、0.9%(m/v)、0.1%(m/v),产酸量比对照组分别提高11.2%,15.5%和14.9%;在0.6%～1.0%(m/v)添加范围内,柠檬酸可促进产酸,产酸量比对照组最高提高13.9%;不同培养方式对木醋杆菌RF4的产酸影响较大,静置培养组产酸量显著高于摇床培养,其中静置培养500mL三角瓶200mL装液量产酸量较大。乳酸、组氨酸、红豆多肽对产酸无明显影响。     

问:液态深层发酵酿醋制备液体斜面的技术?

答：在液态深层发酵制醋工艺中，大多采用沪酿1．01醋酸杆菌作为产酸菌种，一般是将固体保藏菌种经固体斜面→原菌→一级（摇床）种子→二级（摇床）种子逐级复壮扩大培养后接入醋酸种子罐用于车间生产。试验研究将固体斜面复壮培养阶段用液体斜面代替[液体斜面→原菌→一级（摇床）种子→二级（摇床）种子]，观察液体斜面工艺的安全性与可行性。     

氨基酸在合成培养基中对木醋杆菌合成纤维素的影响

18种氨基酸被作为唯一氮源添加到木醋杆菌合成培养基中检验其对纤维素产量的影响。根据产纤维素的情况将氨基酸分为产量较多类、产量较少类及不产类,再通过正交试验检验产量较多类及较少类氨基酸的组合效应。结果表明,只有组氨酸适合于作为氮源物质添加到木醋杆菌合成培养基中,但组氨酸的效果不及硫酸铵的效果显著,通过定量测定组氨酸及硫酸铵在培养基中的含量变化,表明二者共同存在时,都被木醋杆菌利用,利用率并不互相影响。     

乙醇在合成培养基中对木醋杆菌HN001合成纤维素的影响

合成培养基中添加2.0%乙醇,乙醇被氧化成乙酸,木醋杆菌HN001得到大量增殖,对葡萄糖消耗率,从没有添加乙醇培养基中的42.0%提高到74.5%,纤维生成量达到5.40g/L,比不添加乙醇的培养基中提高了10倍。     

木醋杆菌发酵培养基优化及发酵方式的探讨

以木醋杆菌（Acetobacter xylinum）为出发菌株，细菌纤维素产量为指标，通过正交试验优化发酵培养基，其最优组成为葡萄糖15g/L、蛋白胨10g／L、酵母膏5g／L、玉米浆40mL/L、磷酸三钠3g／L、柠檬酸钠1g／L、硫酸镁2g／L、氯化钙0．2g／L、硫酸亚铁0．03g／L、乙醇10mL/L。适宜的发酵方式为先130r／min振荡培养10h，后静置培养10d。经验证试验，细菌纤维素产量可达3．81g／L。     

巴氏醋杆菌培养条件优化研究

以细菌纤维素产量为指标,通过正交试验优化发酵培养基的组成,并研究了其产细菌纤维素的适宜发酵方式.试验结果表明,巴氏醋杆菌的优化培养基组成为:葡萄糖15g/L、蛋白胨10 g/L、酵母膏5g/L、玉米浆40mL/L、磷酸三钠3g/L、柠檬酸钠1g/L、硫酸镁2g/L、氯化钙0.2g/L、硫酸亚铁0.03g/L、乙醇10mL/L.适宜的发酵方式为:先以100r/min振荡培养10h,后静止培养10d.经验证试验,细菌纤维素产量可达3.69 g/L.     

木醋杆菌突变株产细菌纤维素发酵条件优化

对一株经紫外诱变手段筛选得到的细菌纤维素高产菌株木醋杆菌C544进行发酵条件和培养基成分研究,确定其产纤维素适宜温度范围为25℃-31℃,30℃时纤维素产量最高;适宜的初始pH值范围为5.5-7.0,在pH6.0时纤维素产量最高。优化出的培养基配方为：葡萄糖5.0%（w/v）、大豆蛋白胨0.9%（w/v）、Na2HPO4·12H2O0.8%（w/v）及柠檬酸0.5%（w/v）,在最佳发酵条件下纤维素最大产量可达7.79g/L,是优化前产量的3.52倍。另研究了甘露醇对此菌株产细菌纤维素的影响,发现当基础培养基中加入10%（w/v）甘露醇作为碳源时,发酵终点的pH值为4.50,对纤维素的合成有利,纤维素产量达到9.33g/L,是优化前产量的4.22倍。     

木醋杆菌ITS序列分析及产纤维素条件的研究

木醋杆菌(Acetobacter xylinum)是合成纤维素能力最强的细菌,设计木醋杆菌16S-23S rDNA转录间隔区(internally transcribed spacer ITS)序列引物,对其扩增.在GenBank上的登陆号为GenBank EU196159.选择到合适的木醋杆菌ITS扩增引物,PCR扩增条件.木醋杆菌最佳培养温度28℃,通过测定纤维素产量发现最佳接种量5%,最佳碳源为葡萄糖,最佳碳源浓度为2.5%.     

胶醋杆菌生产纤维素凝胶的工业化培养基的优化研究

本文研究了胶醋杆菌(Acetobacter xylinum)工业化生产培养基的优化组成.结果表明,影响纤维素凝胶产量的因素依次为椰子水＞醋酸钠＞硫酸铵＞蔗糖＞磷酸二氢钾.影响凝胶中纤维素含量的因素依次为椰子水＞醋酸钠＞蔗糖＞磷酸二氢钾、硫酸铵.最适pH为4.2,最佳培养温度30℃.综合考虑凝胶产量和凝胶纤维素含量对产品质量的影响,确定培养基的最佳组成为椰子水40%～50%,蔗糖4%,硫酸铵0.5%,醋酸钠0.2%,磷酸二氢钾0.05%,pH4.2.     

不同培养方式制备的细菌纤维素性质的比较

分别以静置和振荡培养方式培养木醋杆菌,对静置培养及振荡培养得到的细菌纤维素的纤维丝结构、红外光图谱、持水性、复水性以及灰分含量进行了测试,分析了在静置培养和振荡培养下得到的细菌纤维素的性质和结构差异。结果表明,静置培养所产纤维素成一薄膜,纤维结构较纤细、致密,振荡培养所产纤维素成球状,两者结构有明显差异;两者的红外光图谱基本一致;振荡培养得到的细菌纤维素的吸水性和复水性均比较好,而静置培养得到的细菌纤维素灰分含量较低。     

透明质酸产生菌的诱变及种子培养基组成的优化

利用紫外线和亚硝基胍对透明质酸产生菌进行诱变,对种子培养基的组成进行优化,确定所用碳源、氮源、金属离子等的用量。结果表明:诱变获得无溶血环的变异株,采用2%淀粉的葡萄糖水解液作为碳源,利用2%蛋白胨和酵母粉的混合有机氮源及0.4%硝酸钠为无机氮源,MgSO4.7H2O为0.1%,KH2PO4为0.2%,采用1∶1的碳氮比的培养基作为种子培养基,有利于该菌株的生长。     

葡聚糖酶产生菌的初筛培养基优化

探讨了葡聚糖酶产生菌的初筛培养基组成.通过单因素试验,确定了培养基中碳源的种类、用量及刚果红的用量和使用方法等对初筛效果的影响.结果得到优化后的初筛培养基配方为:葡聚糖O.5%,NaNO30.2%,K2HPO40.1%,KCl0.05%,MgSO40.05%,FeSO40.001%,刚果红0.005%,琼脂2%.此初筛培养基葡聚糖和刚果红的用量少,形成的透明圈大,能够:达到比较好的初筛效果.     

响应面法优化产油圆红冬孢酵母发酵培养基的研究

采用部分因子设计筛选出影响产油圆红冬孢酵母生物量积累的主要因素为葡萄糖、酵母粉和硫酸铵。在此基础上利用响应面实验设计对主要影响因素进行分析,并预测出圆红冬孢酵母生物量产量最优的培养基组成。最后确定的最佳发酵培养基组成为(g/L):葡萄糖71.1,酵母粉2.19,硫酸铵2.83,磷酸二氢钾1,硫酸镁1,此时圆红冬孢酵母生物量为6.67g/L,与预测值6.62g/L非常接近,证实了该模型是合理的。     

SO2在嫩椰子保藏中的应用研究

研究了利用SO2保藏去除外皮嫩椰子的方法.结果表明,硫磺用量为200g/m3,熏硫时间1.5～2.5h,涂膜处理,用0.05mm厚的聚乙烯薄膜单果包装,在22～28℃的室温条件下,可保鲜28d,基本上能保持椰子水原有的品质.     

以丝胶蛋白为细菌培养基主要成分的研究

通过对分子量小于6万的水溶性丝胶肽或者丝胶肽及其水解物以不同比例替代或完全替换普通液体培养基中主要成分蛋白胨进行的3种代表性细菌的培养试验，说明水溶性丝胶肽及其水解物营养非常丰富，是一种新型的液体培养基主要成分。     

富锗蛹虫草菌丝体主要活性成分分析

以空白蛹虫草菌丝体冻干粉为材料,测定富锗蛹虫草菌丝体胞内多糖、有机锗、虫草素、SOD、蛋白质及氨基酸含量。结果显示,锗在200～300μg/mL 质量浓度内,对菌丝体的主要活性成分有促进作用,浓度过大,对相关活性成分有抑制作用,不同的生物学指标所需锗的质量浓度各不相同。本研究表明,培养基中锗浓度对蛹虫草菌丝体主要活性成分有影响,适宜质量浓度的锗对蛹虫草菌丝体主要活性成分有促进作用。     

以糙米为主要培养基延长米曲霉菌种的保藏期

本研究以糙米为主要培养基并结合真空干燥(-0.1 MPa)和冷冻保藏(-80℃)工艺开发出一种米曲霉长期保藏技术。生产实验表明,利用该方法保藏20年的米曲霉菌种直接制备的大曲中中性蛋白酶、酸性蛋白酶、淀粉酶和葡萄糖淀粉酶的酶活分别达到1871、319、256和2110 U/g干曲。利用该大曲所生产的酱油总氮、氨基酸态氮、总糖、还原糖、无盐固形物含量及原料蛋白质利用率分别达到1.53、0.92、5.39、3.52、19.88 g/100 mL和82.20%。上述指标显著优于利用常规冻干管法保藏20年的米曲霉所制备大曲和酱油的相应指标(p0.05),与利用常规冻干管法保藏5年的米曲霉所制备大曲和酱油的相应指标无显著差异(p0.05)。由聚类分析可知,本方法可比冻干管法延长米曲霉保藏时间15年,在实际生产中可减少菌株复壮次数,避免传代过程中米曲霉突变和污染的几率,进而提高酱油质量稳定性。