糖胺聚糖研究新进展

透明质酸、肝素和硫酸软骨素是重要的糖胺聚糖,有许多潜在的药用价值.本文综述了这三种多糖及其衍生物的研究新进展.     

糖胺聚糖研究新进展

透明质酸、肝素和硫酸软骨素是重要的糖胺聚糖,有许多潜在的药用价值。本文综述了这三种多糖及其衍生物的研究新进展。     

离子交换色谱法分级分离阴离子糖胺聚糖

阴离子糖胺聚糖(酸性黏多糖)的分级分离缺少简单、可靠和定量的方法,是制约对其生理学及医学应用进行深入研究的主要原因。Scott发明了一种选择性解离糖胺聚糖十六烷基吡啶复合物的方法,Schiller等人对该方     

硫酸软骨素二糖对疲劳致小鼠肾脏炎症的改善作用

目的:研究硫酸软骨素二糖对疲劳诱发的肾脏炎症的改善作用。方法:24只Balb/c小鼠随机分成四组:正常组(N组)、疲劳应激组(M组)、正常小鼠干预硫酸软骨素二糖组(150 mg/kg·bw)(CS组)和疲劳应激小鼠干预硫酸软骨素二糖的(150 mg/kg·bw)组(S组)。将M组和S组小鼠置于电动轮跑步机上,速度为20r/min,跑步时间为3 h,持续运动2 d后休息5 d。实验周期为16 d,共运动6 d。随后测定各组小鼠肾脏中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量以及转化生长因子(TGF-β1)、核转录因子(NF-κB)、白介-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的mRNA表达量和NF-κB、IL-6、MCP-1的蛋白质表达量。结果:与N组相比,M组小鼠肾脏中SOD活性降低,MDA含量、TGF-β1的mRNA表达量以及NF-κB、IL-6、MCP-1的mRNA和蛋白质的表达量均极显著升高(p<0.01)。与N组相比,CS组小鼠肾脏SOD活性极显著提高(p<0.01)。与M组相比,S组小鼠肾脏SOD活性显著升高(p<0.05),MDA含量、IL-6以及MCP-1的mRNA表达量均极显著降低(p<0.01),IL-6以及MCP-1的蛋白质表达量均显著降低(p<0.05)。结论:硫酸软骨素二糖对疲劳引发的小鼠肾脏炎症具有显著的改善作用,且其机理可能与其改善肾脏氧化应激状态有关。     

HPLC分析大豆磷脂胶囊的磷脂组分

采用Waters高效液相色谱系统,硅胶色谱柱(3．9m×300mm);流动相为异丙醇/正己烷(4/3,v/v)和异丙醇/正己烷/水(8/6/1．5,v/v/v),梯度洗脱。用这种方法能够将磷脂胶囊的磷脂各组分完全分离,根据保留时间可定性确定组分;根据峰面积可以测定各组分的相对含量;根据标准样品中磷脂组分的含量可以测定样品中主要磷脂的绝对含量。     

HPLC分离黄曲霉毒素生防微生物的拮抗物及拮抗效果检测

黄曲霉毒素在世界范围内不仅带来巨大的经济损失,而且严重威胁人们的身体健康。生物防治技术在黄曲霉毒素防治方面具有一定优势。利用课题组从土壤中筛选出的一株黄曲霉毒素生防细菌B05,使用HPLC对其代谢产物进行初步分离,确定了分离条件。将分离物收集后通过微孔板培养,确定了各分离组分对黄曲霉毒素的拮抗效果。     

花蛤中糖胺聚糖的分离与结构鉴定

目的:以花蛤为提取原料,用多酶水解法提取花蛤中糖胺聚糖,利用红外光谱法对提取物中的硫酸软骨素的结构进行分析。采用超高效液相色谱与电喷雾-质谱联用技术对糖胺聚糖类组分进行研究。方法:色谱柱ACQUITY UPLC BEH Amide(2.1 mm×100 mm,1.7μm);保护柱ACQUITY UPLC BEH Amide Van Guard(2.1 mm×5 mm,1.7μm);流动相乙腈-水(体积分数0.2%冰醋酸)的体积比为75∶25;流速0.1 m L/min;进样20μL。结果:超高效液相色谱-电喷雾-质谱法可快速定性分离糖胺聚糖组分。结论:本实验为糖胺聚糖化合物的结构鉴定提供了一种有效的分析方法。     

鮟鱇鱼皮硫酸皮肤素的二糖组成及结构研究

目的:获取鮟鱇鱼皮中硫酸皮肤素的二糖结构信息。方法:以硫酸软骨素ABC酶酶解硫酸皮肤素样品,得到二糖;对酶解时间进行优化,进而以毛细管液相色谱法和毛细管液相-质谱联用法分析二糖结构及含量。结果:鮟鱇鱼皮硫酸皮肤素在硫酸软骨素ABC酶作用下,37℃反应4h,可酶解完全。其糖链是以艾杜糖醛酸-[1→3]-N-乙酰氨基半乳糖-4硫酸(△Di-4S(Ido))为主要二糖重复单位,此外,还含有少量的艾杜糖醛酸-[1→3]-N-乙酰氨基半乳糖-6硫酸(△Di-6S(Ido))和葡萄糖醛酸-[1→3]-N-乙酰氨基半乳糖(△Di-0S)二糖单位。△Di-4S(Ido)、△Di-0S与△Di-6S(Ido)3种不饱和二糖的摩尔比为171∶1∶1。     

红松种鳞中多酚HPLC指纹图谱的建立

建立红松种鳞中多酚HPLC指纹图谱分析方法。色谱条件为:C18反向色谱柱(200mm×4.6mm,5μm),以0.05%三氟乙酸溶液(A)和甲醇(B)作为流动相,洗脱梯度:0~11min,5%→15%B;11~16min,15%→17%B;16~23min,17%→23%B;23~36min,23%→35%B;36~50min,35%→40%B;50~65min,40%→50%B;65~70min,50%→5%B;流速为0.8mL/min,检测波长:280nm,该方法满足指纹图谱方法学考察。通过对8批样品的分析和比对,建立了红松多酚的指纹图谱,标示出14个稳定的共有峰,确定了咖啡酸为指纹图谱的参照峰。结果表明此方法简单、准确、重现性好,为红松多酚的质量控制标准提供了有效的方法。     

红松种鳞中多酚HPLC指纹图谱的建立

建立红松种鳞中多酚HPLC指纹图谱分析方法。色谱条件为:C18反向色谱柱(200mm×4.6mm,5μm),以0.05%三氟乙酸溶液(A)和甲醇(B)作为流动相,洗脱梯度:0~11min,5%→15%B;11~16min,15%→17%B;16~23min,17%→23%B;23~36min,23%→35%B;36~50min,35%→40%B;50~65min,40%→50%B;65~70min,50%→5%B;流速为0.8mL/min,检测波长:280nm,该方法满足指纹图谱方法学考察。通过对8批样品的分析和比对,建立了红松多酚的指纹图谱,标示出14个稳定的共有峰,确定了咖啡酸为指纹图谱的参照峰。结果表明此方法简单、准确、重现性好,为红松多酚的质量控制标准提供了有效的方法。      

刺糖菌素HPLC快速检测方法的建立

对刺糖菌素HPLC检测方法进行了优化,建立起刺糖菌素的快速检测方法。优化后的HPLC检测条件如下:采用AgilentZorbaxXDB-C18色谱柱;流动相为66.7%甲醇(33.3%乙腈;流速1.0mL/min;采用紫外检测器,检测波长250nm;柱温25℃;进样量20μL。该条件下刺糖菌素二组分spinosynA和spinosynD的保留时间分别为5.243min和5.738min,比优化前HPLC条件下各自的保留时间分别缩短了55%和59%。HPLC检测方法线性关系良好,相关系数R2=0.9999;同时该方法具有较高的精确度和准确度,其变异系数为0.17%,平均回收率为100.21%。     

苹果中糖含量的HPLC检测条件研究

利用反相高效液相色谱法测定苹果中的糖含量,针对糖的特殊结构,调整高效液相色谱法的测试条件,获得了适于苹果中糖含量的测试方法。色谱条件:ODS柱,RI检测器,柱温25℃,进样体积10μL,流动相为3∶97的甲醇-水体系,流速1 m L/min,等度洗脱。在选定的检测条件下,可分析出苹果中5种主要的糖,果糖、葡萄糖、蔗糖、阿拉伯糖和D-木糖;在对市场上国光、富士、红玉、黄金4种不同的苹果进行检测时发现各品种间糖成分差异不大。     

我国主产区18种鲜橙中糖的HPLC测定研究

采用30%的乙腈水(体积比)为稀释液,建立了样品直接稀释、高效液相色谱(HPLC)分离、示差折光检测器检测(RID)快速测定鲜橙中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的可靠方法。该方法以保留时间(Rt)定性,外标法定量;在0.05 mg/m L~5 mg/m L的浓度范围内,标准曲线有良好的线性关系,相关系数大于0.999 5;样品在5.0、10.0、25.0 g/kg3个加标水平内的回收率范围为95%~101%(n=10),相对标准偏差小于5.0%;方法的定性检出限(LOD)为0.05 g/kg、定量检出限(LOQ)为0.15 g/kg,该方法具有简便、快速、灵敏的特点。应用本方法对产自四川、云南、湖北、重庆等7个产地的18个不同品种的鲜橙进行了4种糖含量的检测,结果表明4种还原糖含量因品种、产地不同而有差异。     

低糖啤酒发酵过程中糖组分的HPLC动态分析

运用HPLC法对低糖啤酒发酵过程中糖组分进行了动态分析，发现麦芽三糖的利用效率是发酵度提高的关键所在。     

肝素和硫酸乙酰肝素的生物合成与结构

1概述肝素和HS是一类由糖醛酸和D-葡糖胺二糖重复单位以1-4键连接形成的线性多糖。二糖单位的N-硫酸基、O-硫酸基、N-乙酰基等多种可变取代形成了多种复杂的序列。肝素和HS是糖胺聚糖(GAG)家族(包括硫酸软骨素、硫酸皮肤素和硫酸角质素)中结构最复杂的一类成员。肝素由结缔组织型肥大细胞表达,以肝素蛋白聚糖的     

壳二糖、壳三糖单体制备及其结构分析

壳寡糖因自身结构特征而存在多种生物活性,目前对壳寡糖的活性研究大部分是不同聚合度的混合物。为获得单一聚合度壳二糖、壳三糖,采用了专一性壳聚糖酶对壳聚糖进行降解,运用薄层色谱法（TLC）判断酶解反应终点,并采用高效液相色谱法（HPLC）法进行定量分析。结果表明酶解组分主要为壳二糖、壳三糖,含量分别为65.63%,32.48%。将酶解后的混合组分采用实验室自制的阳离子交换树脂QY-H003对酶解产物进行分离,以盐酸浓度为C₁=1.25 mol/L、C₂=1.55 mol/L为洗脱剂进行梯度洗脱得到两个组分。采用TLC、HPLC、红外光谱（FT-IR）及核磁共振氢谱（1HNMR）检测手段对组分进行分析。分离纯化获得的壳二糖、壳三糖组分经HPLC法检测,纯度分别98.06%,96.00%。壳二糖回收率达92.46%、壳三糖回收率达95.53%。该制备工艺放大后可实现高纯度壳二糖、壳三糖单体规模化制备,为壳二糖、壳三糖的生理活性研究及应用提供物质基础。      

肝素的新药研发

糖胺聚糖肝素作为抗凝剂应用于临床已有超过50年的历史。天然肝素中决定抗凝活性的序列结构也已经被完全阐明。然而,作为一个复杂多糖,肝素还有一系列与抗凝作用无关的性质。近期研究越来越了解肝素发挥各种功能所需的特殊结构,从而有可能以肝素为模板进行"裁剪",产生特殊序列结构并分离其特定治疗活性。本研究探讨了针对包括癌症和各种炎症等多种疾病的新型药物治疗的基础依据。     

二次酶解法提取硫酸软骨素的工艺优化研究

以猪喉软骨为原料,在碱液提取的基础上,采用胰酶和中性蛋白酶二次酶解的方法提取硫酸软骨素,并对其中的第二次酶解工艺进行优化研究.结果表明,第二次酶解的最佳工艺组合为,酶浓度1.1％、酶解温度44℃、pH7.0、酶解时间2.0 h.采用上述组合,以氨基葡萄糖含量为纯度指标,硫酸软骨素中氨基葡萄糖含量达33.59％,相对于一次酶解,氨基葡萄糖含量提高了7.65％.研究结果具有工业应用价值.     

菊芋菊糖的超声波提取、纯化及HPLC法纯度检测

重点研究了菊芋菊糖的超声波提取、纯化工艺和利用高效液相色谱技术进行纯度检测。其中,超声波提取菊芋菊糖最佳工艺条件为:超声功率112W,提取温度70℃,提取时间20min,料液比1:20,菊糖得率为57.3%。菊糖提取液经石灰乳法和醇沉法除杂,再经S-8大孔吸附树脂脱色处理后色泽澄清,真空冷冻干燥得白色粉末,经高效液相色谱法检测,其纯度为96.2%。      

HPLC测定消糖灵胶囊中格列本脲的含量

目的　建立测定消糖灵胶囊中格列本脲含量的方法。方法　DiamondC1 8色谱柱,流动相为甲醇-磷酸二氢铵溶液(6 5∶35 ) ,流速1 .0ml·min-1 ,检测波长2 30nm。结果　在0 .2 4～0 .5 6 μg范围内呈线性关系(r =0 .9998) ,平均加样回收率=1 0 0 .4 0 %,RSD =2 .0 6 %。结论　此方法可用于制剂的质量控制。