应用响应面法优化AS1.398中性蛋白酶的双水相萃取条件

选择PEG-柠檬酸钠双水相体系对AS1．398中性蛋白酶粗酶液进行萃取纯化研究，考察粗酶质量浓度、pH值、相比、离子强度等因素对酶分配的影响，并进一步采用响应面分析优化实验条件．结果表明：采用响应面方法可以有效地对系统进行选择和设计，大大方便了研究工作．选择PEG1000-柠檬酸钠体系，在粗酶质量浓度5．2g／L、相比2、pH=7．1夸件下，AS1．398中性蛋白酶的纯化倍数达3．6以上．     

豆天蛾幼虫水解试验研究

以豆天蛾幼虫为原料，用AS1．398中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和复合风味蛋白酶为水解酶，分别研究其水解特性，最后确定复合风味蛋白酶为最优水解酶，其最优水解方案：温度为50℃、pH=6.5、时间为10h、加酶量为40LAPU／g。按此方案进行水解，重复3次，得到平均水解率为32．54％，蛋白质利用率为82．36％，取得较理想的水解效果。     

一种新型脱毛酶糊的应用探索

用酶法脱毛取代灰碱法脱毛是解决制革生产中硫化物污染的重要途径之一。本文对一种新型脱毛酶糊用于猪皮酶脱毛进行了试验，试验考察了脱毛温度与脱毛效果，酶糊浓度和用量与脱毛效果，皮块含水量与脱毛效果、皮块脂肪含量与脱毛效果等关系，并测定了脱毛处理液中蛋白质的含量。实验结果表明：在２６￣３８℃范围内本酶糊用于猪皮酶脱毛较完全可靠。     

碱性蛋白酶No.8的脱毛条件研究

本文对新型碱性蛋白酶No8在制革浸水，脱毛，软化应用中的最佳条件进行了系统研究，结果表明，碱性蛋白酶No8应用的最适pH为10，浸水最适浓度为30－50u/g，脱毛最适浓度为100－150u/g，软化最适浓度为50－100u／g，温度18－38℃，通过对1398酶的脱毛效果，和胰酶的软化效果比较以及酶脱毛对后工序的影响和工艺平衡等方面的研究，确定No8酶应用的最适条件，为该酶今后在制革生产中得到应用，促进清洁化工艺的实施打下了坚实的基础。     

大豆生理活性肽的研究（Ⅰ）——酶法水解的工艺

研究了高水解度大豆多肽的制备和脱盐工艺，采用两种蛋白酶AS1.398和Alcalase水解大豆分离蛋白制得水解度为10%～24%的大豆多肽．结果显示：在等电点沉淀分离多肽时，相同水解度下，Alcalase酶水解产物的水解得率比AS1．398酶水解产物的水解得率高20%．采用DA201-C大孔吸附树脂对水解液进行脱盐，得到了优化的吸附和解吸的条件．该条件下大孔吸附树脂对水解液的吸附率为89．7l%，解吸率为72．30%．     

耐盐脱毛蛋白酶产生菌的研究：Ⅰ.耐盐脱毛蛋白酶产生菌的筛选

从已经开始掉毛的盐腌猪皮上筛选到一株可在８％盐浓度下生长的耐盐菌，该菌产生的蛋白酶具有较好的脱毛性能。经初步鉴定为芽孢杆菌，命名为Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．ｎｏ８１３。     

水解松仁蛋白用酶的最佳工艺条件

为了充分利用松仁中的蛋白质，将其酶解制备活性多肽，分别对7种蛋白酶进行水解实验。用pH-stat法控制水解度，用福林-酚法测定吸光度，计算氮溶指数。通过正交实验得出如下结果：最佳用酶是Asl．398中性蛋白酶。最佳水解条件为：温度50℃，pH=7．0，底物浓度1．2％，酶与底物比4000U／g蛋白。     

用TEM和AFM方法研究猪皮胶原纤维在酶作用下精细结构的变化

通过透射电子显微镜(TEM)和扫描探针显微镜(AFM)相结合对猪皮纤维精细结构在酶作用下的变化进行了研究和定量分析，应用扫描探针显微镜并结合透射电子显微镜对酶处理猪皮的原纤维层次的精细结构进行了深入研究，对原纤维的三维结构信息在酶处理后的变化进行了量化表征，得到关于猪皮组织中原纤维、微纤维精细结构在蛋白水解酶作用下的主要变化特征的信息，并分析了其与酶脱毛工艺制成革力学性能的关系。     

水剂法提取花生油中的破乳研究

对于水剂法提取花生油过程中形成的乳状液,分别采取酶法和化学方法进行破乳研究.结果发现,碱性蛋白酶2709和NaCl都可以有效破乳.碱性蛋白酶2709的最佳破乳条件是:温度55℃,pH 8.5,加酶量1 120 IU/g,时间1 h;NaCl的最佳破乳条件是:温度55℃,添加量5%(W/W),时间1 h.在此条件下,乳状液的破乳率均可达到或超过95%.     

猪皮酶法脱毛新工艺技术开发试制

研究了猪革生产中，以新的酶脱毛法代替灰碱法脱色消除石灰和硫化物的污染。主要研究了与酶脱毛法相配套的猪革生产工艺路线，以及酶脱毛工艺中生成成革松面和粒布面毛孔扩大的主要原因，最终建立了猪皮酶脱毛的新工艺，采用新的酶脱毛工艺，不仅可以完全消除硫化物和石灰的污染，而且可以生产出质量较好的猪革产品。     

中性蛋白酶水解僵蚕工艺研究

采用单因素实验法，对僵蚕酶法水解的工艺条件进行了研究；分别考察了水解时间、温度、溶液的pH值、酶和激活因子CaCl2的加入量等条件对僵蚕水解度的影响．实验结果表明：僵蚕酶法水解较佳的工艺条件为水解时间7h、水解温度为55℃、溶液的pH值为6．5、固液质量（E／S）1z5、酶和CaCl2的加入量分别占底物的6％、和4％．在该工艺条件下，对僵蚕进行酶法水解，僵蚕的水解度为21．90％．     

蛋白酶解液制备脂肽表面活性剂

对酶水解液合成脂肽表面活性剂做了研究 ,中性蛋白酶AS1 .398在pH =7.5、T =50℃、E/S =1 2 0 0 0U/g、S =5%、t =8h时所得水解液合成出脂肽性能较好 ,用SephadexG 50 ,SephadexG 1 5分析了水解液的近似分子量分布情况 .蛋白酶解物与长链脂肪酰氯进行酰化的条件进行比较系统的研究 ,得出较佳的温度 2 5℃ ,酶解物与脂肪酶氯的摩尔比为 0 .7∶1 ,pH值为 9.0 .对由月桂酸、油酸、硬脂酸、菜籽油脂肪酸为原料合成的脂肽性能做了对比研究 .     

鸡肉蛋白水解液的研究

用酶水解鸡肉、通过单因素实验确定胰蛋白酶（1），中性蛋白酶、木瓜蛋白酶，酸性蛋白酶、碱性蛋白酶，胰酶（2），胃蛋白酶水解鸡肉的最适条件。并确定在它们的最适条件下，胰蛋白酶和木瓜蛋白酶是单酶水解较好的酶，在双酶水解中，发现胰蛋白酶（1）与酸性蛋白酶在各自最适条件下组合水解鸡肉水解率最高，进一步确定双酶水解的条件为胰蛋白酶先在50℃，pH8.5，加酶量4000U/g蛋白质，固液比1:4,水解3h，后酸性蛋白酶在45℃，pH2.5，加酶量4000U／g蛋白质水解2h，在这种组合下酶解，水解产物的水解度为40．5％，蛋白回收率为81．0％。     

反胶束中枯草杆菌中性蛋白酶的活力研究

系统地研究了枯草杆菌AS1 398中性蛋白酶在AOT/异辛烷反胶束体系中的催化行为 ,研究底物浓度、表面活性剂浓度、水含量、pH值、温度、盐的浓度及种类对酶活力的影响 .结果表明 :酶在反胶束体系中表现出“超活性” ,且作用于胶束膜 .在AOT/异辛烷浓度为 0 0 8g/mL时 ,影响酶活力大小主次因素为 :pH值 >温度 >盐浓度W0 .最佳酶活力条件 :5 0℃ ,0 2mol/LKCl液 ,pH值 8 0 ,W0 值 1 1 6,此时酶活力为 6 2 6× 1 0 5u/g .     

酶解蚕蛹蛋白工艺的研究及产物分析

报道了酶法水解蚕蛹蛋白工艺的实验研究，并对水解产物进行了分析。实验中选用已确定的中性蛋白酶和动物蛋白酶对蚕蛹蛋白水解。结果表明，最佳酶解条件为：温度50℃，pH7．0，底物蚕蛹蛋白的质量分数1．0％，动物蛋白酶加量150U／g，中性蛋白酶与动物蛋白酶酶活比为4：1．水解时间3h，在此条件下水解度为27．36％，酸溶性肽得率为55．17％，相对分子质量分布于336～638。     

制革前处理助剂Ⅶ.酶制剂

讨论了酶制剂在制革中应用,阐述了制革的浸水、脱毛、脱脂、浸灰、软化和猪皮臀部包酶等工序中酶制剂的应用情况、作用机理和一些典型的酶制剂的应用性能,介绍了一种型的中和“增尺”酶的性能和使用条件,并对酶制剂在制革中应用的发展趋势进行了展望。     

土壤中产碱性蛋白酶细菌的筛选及产酶条件优化

为筛选碱性蛋白酶的高产菌株，利用酪蛋白水解圈作为筛选模型，从沈阳化工学院附近农田土壤中筛选得到了产碱性蛋白酶能力较高的细菌B1．对其产酶条件进行优化，最终得到培养基中最佳碳源为质量浓度60g／L葡萄糖，最佳氮源为质量浓度40g／L NaNO3，最适初始pH值为9．0，最适溶氧量为50mL摇瓶装20mL培养基，最适接种量为质量浓度200g／L，且培养基中添加质量浓度为0．5g／L的K^＋有利于菌株B1产碱性蛋白酶．该方法简便、直观，很适合大量、快速筛选．     

酶法脱毛剖蓝革制造猪皮鞋面革新工艺的研究

本文通过测试试验,揭示了放线菌166中性蛋白酶的又一重要性质:在酸性或碱性介质中活力的失/复性能。利用这一性能,有效地实现了猪皮在天然厚度下的转鼓酶法脱毛。本文对脱毛前后的工艺平衡也进行了试验研究,由此制定出了一套稳定可行的转鼓酶法脱毛剖蓝革制造猪皮鞋面革的新工艺。     

大豆生理活性肽的研究（Ⅱ）——抗氧化性和ACE抑制活性的初步研究

采用ASl．398和Alcalase两种蛋白酶，制备了水解度为10％～24%的大豆多肽，对其抗氧化性、ACE抑制活性和相对分子质量的分布进行了研究，结果表明：采用ASl．398酶水解的DH为12％的产品抗氧化活性最高，添加量为6mg／mL时使亚油酸的氧化诱导期延长2．92倍，其相对分子质量分布在1000以上的组分较多；采用Alcalase酶水解的DH为14％的大豆多肽产品，ACE抑制活性最高，IC50为0．144mg／mL，其相对分子质量分布大多在200～600之间。     

木瓜蛋白酶对蚌肉蛋白质的水解

以三角帆蚌为原料，利用木瓜蛋白酶对蚌肉蛋白质进行水解，正交试验结果表明，酶解最适条件为：温度50℃、pH6．5、时间5h、加酶量0．6％，该条件下蚌肉蛋白质的水解度为48．9％，蛋白质回收率达78．1％。