低温贮藏条件下创伤弧菌和副溶血性弧菌失活模型的建立

为掌握对虾中创伤弧菌和副溶血性弧菌在5℃和一18~C低温贮藏条件下失活动力学特征,分别采用线性模型、Weibull模型、Logistic模型对创伤弧菌和副溶血性弧菌的失活曲线进行拟合。研究结果表明,在5~C条件下,创伤弧茵VvHB09的耐冷力较强;．18℃条件下,副溶血性弧菌ATCC17802和创伤弧菌VvSH09的耐冷力较强。线性模型比weibull模型、Logistic模型更适合拟合创伤弧菌和副溶血性弧菌的失活特征。     

副溶血弧菌在低温贮藏过程中的失活动力学特征

本实验对在4℃和-20℃贮藏温度下接种于带鱼样品中的4株副溶血弧菌的失活动力学特征进行了研究,结果表明：在4℃冷藏过程中,60d贮藏期内带鱼样品中副溶血弧菌的残活细胞数降低了6.55～8.22lgCFU,在起始20d内失活速度缓慢,平均下降速率为0.06～0.1lgCFU/d,在第25～35d内失活速度变快,平均下降速率为0.16～0.2lgCFU/d,而在第35～60d的平均下降速率为0.11～0.12lgCFU/d,不同菌株之间下降速度有所差异,其中菌株Vp06001下降速度显著快于其它3个菌株（p〈0.01）。在-20℃冷冻过程中,在开始5d内下降速度最快（0.39lgCFU/d）,在10～60d下降速度缓慢（0.027lgCFU/d）,菌株之间没有显著差异（p〉0.05）。应用线性模型、Weibull模型和Log-logistic模型对残活曲线进行了拟合,通过拟合方程计算分析预测值与实测值之间的精确因子（Af）、偏差因子（Bf）、均方根差（RMSE）和相关系数平方（R2）4个评价参数,结果表明：在4℃冷藏过程中Log-logistic模型拟合的精确度显著高于线性模型和Weibull模型（p〈0.01）;而在-20℃贮藏温度下Weibull模型可以较好的描述Vp的失活动力学特征。     

传统培养法与荧光PCR法检测弧菌的方法评价

目的 比较标准检测方法与杜邦BAX System Q7快速检测方法检测副溶血性弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌.方法 采用GB 4789.7—2013《食品微生物学检验副溶血性弧菌检验》、SN/T 1022—2010《进出口食品中弧菌霍乱弧菌检验方法》、DBS 13/004—2016《食品安全地方标准创伤弧菌检验》标准和杜邦B...     

副溶血性弧菌与弧菌科易混淆菌的鉴别方法

目的 快速鉴别副溶血性弧菌检测工作中常见的几种易混淆菌。方法 首先筛选出7株在副溶血性弧菌检测工作中的易混淆菌株, 分别通过选择性平板、初步生化筛选和干制生化鉴定试剂盒的方法, 对包括副溶血性弧菌标准菌株在内的8株菌进行鉴别分析。结果 各菌株培养24 h后, 只有创伤弧菌能在改良纤维二糖多粘菌素B多粘菌素E琼脂平板上生长; 硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基对弧菌科菌株鉴别性较强; 结合硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基以及弧显平板上的菌落大小和颜色特征, 可对以上8株菌进行鉴别, 利用各菌株在副溶血性弧菌的典型生化反应上的不同点, 可进一步进行验证。结论 掌握各检测阶段菌株的不同特征, 通过常规检测方法实现快速鉴别, 节省检测时间, 提高检测效率, 及时发现其它可疑致病菌。     

Temperature Effects on the Depuration of Vibrio parahaemolyticus and Vibrio vulnificus from the American Oyster (Crassostrea virginica)

ABSTRACT:  This study investigated temperature effects on depuration for reducing Vibrio parahaemolyticus and Vibrio vulnificus in American oyster ( Crassostrea virginica ). Raw oysters were inoculated with 5-strain cocktail of V. parahaemolyticus or V. vulnificus to levels of 10⁴ to 10⁵ MPN (most probable number)/g and depurated in artificial seawater (ASW) at 22, 15, 10, and 5 °C. Depuration of oysters at 22 °C had limited effects on reducing V. parahaemolyticus or V. vulnificus in the oysters. Populations of V. parahaemolyticus and V. vulnificus were reduced by 1.2 and 2.0 log MPN/g, respectively, after 48 h of depuration at 22 °C. Decreasing water temperature to 15 °C increased the efficacy of depuration in reducing V. parahaemolyticus and V. vulnificus in oysters. Reductions of V. parahaemolyticus and V. vulnificus in oysters increased to 2.1 and 2.9 log MPN/g, respectively, after 48 h of depuration at 15 °C. However, depurations at 10 and 5 °C were less effective than at 15 °C in reducing the Vibrio spp. in oysters. Extended depuration at 15 °C for 96 h increased reductions of V. parahaemolyticus and V. vulnificus in oysters to 2.6 and 3.3 log MPN/g, respectively.     

多重与单一耐药的副溶血性弧菌在纯培养及南美白对虾中生长动力学的参数比较研究

为比较多重与单一耐药的副溶血性弧菌生长动力学差异,并探索"细菌耐药性"与"风险"之间的关联,本研究应用Bioscreen全自动微生物生长曲线分析仪结合梯度稀释法,对不同耐药程度的副溶血性弧菌在纯培养条件(TSB)下的最大比生长速率(μmax)进行了比较分析。进一步选取六重耐药的VPD18菌株与单一耐药的VPD43菌株接种于南美白对虾中,构建不同温度下的生长曲线,采用Baranyi模型进行拟合得出生长动力学参数。结果显示:在纯培养条件下,多重与单一耐药的副溶血性弧菌的μmax间并无显著性差异(P0.05)。而在南美白对虾中,单一耐药的副溶血性弧菌的μmax更大,但六重耐药的菌株却具有更短的延滞期(λ)。基于该现象提出假设:细菌耐药程度的增加可能导致其延滞期缩短,但对其最大比生长速率影响不显著。该结果可为我国开展副溶血性弧菌的定量风险评估提供基础数据。     

Inactivation kinetics of Vibrio vulnificus in phosphate-buffered saline at different freezing and storage temperatures and times

Vibrio vulnificus (Vv) is a pathogen that can be found in raw oysters. Freezing can reduce Vv and increase the shelf life of oysters. The objective of this study was to develop predictive inactivation kinetic models for pure cultures of Vv at different frozen storage temperatures and times. Vv was diluted in phosphate-buffered saline (PBS) to obtain about 10(7) CFU/mL. Samples were frozen at -10, -35, and -80 °C (different freezing rates), and stored at different temperatures. Survival of Vv was followed after freezing and storage at -10 °C (0, 3, 6, and 9 d) and at -35 and -80 °C (every week for 6 wk). For every treatment, time-temperature data was obtained using thermocouples in blank vials. Predictive models were developed using first-order, Weibull and Peleg inactivation kinetics. Different freezing temperatures did not significantly (α = 0.05) affect survival of Vv immediately after freezing. The combined effect of freezing and 1 wk frozen storage resulted in 1.5, 2.6, and 4.9 log10 reductions for samples stored at -80, -35, and -10 °C, respectively. Storage temperature was the critical parameter in survival of Vv. A modified Weibull model successfully predicted Vv survival during frozen storage: log10 Nt = log 10No - 1.22 - ([t/10{-1.163-0.0466T}][0.00025T(2) + 0.049325]). N(o) and N(t) are initial and time t (d) survival counts, T is frozen storage temperature, Celsius degree. PRACTICAL APPLICATION: Vibrio vulnificus can be inactivated by freezing. Models to predict survival of V. vulnificus at different freezing temperatures and times were developed. This is the first step towards the prediction of V. vulnificus related safety of frozen oysters.     

Effect of High-Pressure Processing on Vibrio parahaemolyticus Strains in Pure Culture and Pacific Oysters

Different strains of Vibrio parahaemolyticus (Vp) in broth cultures and Vp‐inoculated live Pacific oysters (Crassostrea gigas) were subjected to high‐pressure processing (HPP) at 241, 276, 310, and 345 MPa. Results showed Vp numbers were reduced by HPP in both pure culture and whole oysters. Vp inactivation was dependent on time and pressure. Optimum conditions for reducing Vp in pure culture and oysters to nondetectable levels were achieved at 345 MPa for 30 and 90 s, respectively. Resistance variations were detected between Vp in pure culture and in oysters. HPP proved to be an efficient means of reducing Vp in oysters.     

Vibrio species involved in seafood-borne outbreaks (Vibrio cholerae,V. parahaemolyticus and V. vulnificus): Review of microbiological versus recent molecular detection methods in seafood products

Seafood products are widely consumed all around the world and play a significant role on the economic market. Bacteria of the Vibrio genus can contaminate seafood and thus pose a risk to human health. Three main Vibrio species, V. cholerae, V. parahaemolyticus and V. vulnificus, are potentially pathogenic to humans. These species are responsible for a dramatic increase of seafood-borne infections worldwide. Hence, early detection of total and pathogenic Vibrio is needed and should rely on quick and effective methods. This review aims to present the standard methods FDA-BAM, ISO/TS 21872–1:2007 and TS 21872–2:2007 and compare them to recent molecular biology methods including endpoint PCR, quantitative real-time PCR (qPCR) and PCR-derived methods with a focus on LAMP (loop-mediated isothermal amplification). The available methods presented here are dedicated to the detection and identification of the Vibrio species of interest in seafood.     

温度驯化对蓝莓冰温贮藏期间生理品质变化的影响

研究不同低温驯化方式结合冰温贮藏对蓝莓采后生理和贮藏品质和保鲜效果的影响。采用10 ℃放置12 h后转入4 ℃放置12 h和在4 ℃放置24 h这两种驯化方式处理蓝莓,然后在冰温库中贮藏70 d,每10 d测一次相关指标。结果表明,与直接冰温贮藏和冷藏相比,低温驯化处理对延缓蓝莓的腐烂、抑制VC和花色苷含量的减少、保护蓝莓果霜均有明显效果,并且抑制了蓝莓的呼吸强度和乙烯释放速率,对过氧化氢酶和脂氧合酶活力也有很明显的抑制效果。其中经10 ℃放置12 h后转入4 ℃放置12 h处理的效果最优。说明经低温驯化后冰温贮藏蓝莓的保鲜效果优于直接冰温和冷藏。     

低温等离子体对南美白对虾冷藏期间品质保持的效果

本研究以南美白对虾为原料,探讨了低温等离子体杀菌技术对其在冷藏期间的品质变化影响。低温等离子体技术是近年来出现的一种综合性新兴杀菌技术,广泛应用于食品、医药、环境等领域。本研究分别采用了20 kV、40 kV、60 kV电压的低温等离子体对南美白对虾处理3 min,通过测定菌落总数、挥发性盐基氮值(Total Volatile Base Nitrogen,TVB-N)、p H值、2-硫代巴比妥酸值(2-Thiobarbituric acid,TBA)、质构特性、色差值、感官评价等指标来研究南美白对虾冷藏期间品质的变化。在实验过程中,三种处理电压均能有效减缓南美白对虾的腐败变质,其中60 k V的处理效果最好,冷藏14 d后的菌落总数为5.21 log(CFU/g),低于对照组的6.21log(CFU/g),TVB-N值也在一定时间内优于对照组。且随着冷藏时间的变化,处理了的南美白对虾质构特性、色泽的保持效果都显著优于对照组,对于p H值的上升和微生物的增殖起到了明显的减缓作用,但显著促进TBA值的上升。总体而言,低温等离子体对南美白对虾处理后在冷藏期间的杀菌效果明显,对其品质具有较好的保持作用。     

猪肉冷藏过程中微生物交互作用模型研究

对猪肉冷藏过程中生长的典型微生物(乳酸菌、大肠菌群、假单胞菌、热死丝环菌、沙门氏菌、酵母菌)间的交互作用进行研究。由改良的Lotka-Volterra模型平衡方程获得每两微生物间拮抗系数,用于描述微生物间的拮抗作用。得出:酵母菌和乳酸菌对大肠菌群,假单胞菌,热死丝环菌和沙门氏菌具有较高的拮抗作用,反之这四种菌对酵母菌和乳酸菌的影响微弱(α12<α21)。酵母菌对乳酸菌具有较高的拮抗作用(α12(0.043)<α21(19.491))。大肠菌群,假单胞菌,热死丝环菌和沙门氏菌均对除自身菌以外的它种菌的生长影响较小。     

不同寡营养条件下副溶血性弧菌的生长异质性

为更准确地探讨副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)菌株在寡营养条件(100％、75％、50％和25％标准TSB+ (3％ NaCl)占比的培养基稀释液)下的生长异质性对食品安全风险的影响,本实验选取20株分离自淡水和海水养殖虾中的Vp菌株,通过对其在不同寡营养条件下的生长数据进行拟合,得...     

副溶血弧菌在玻璃表面生物菌膜的生长特性及超声波法解离作用

本文研究了副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)在玻璃表面生物菌膜(biofilm,BF)的生长特性,生长过程中环境因素的影响及超声波对其的解离作用。采用结晶紫染色法观察生物菌膜在玻璃表面的生长形态;酶标仪在595 nm波长处测量不同培养条件下生物菌膜的生物量;平板菌落计数法衡量超声波对菌膜的解离效果。结果表明:结晶紫染色法可直观清晰观察副溶血弧菌在玻璃表面形成的生物菌膜,且随着培养时间的延长,副溶血弧菌生物菌膜形成的网状结构越来越致密。根据酶标仪测得的生物菌膜生物量的大小可得到在玻璃表面菌膜生长的最佳条件,当培养基盐度为3%,培养时间为24 h,培养时转速为70 r/min得到的副溶血弧菌生物菌膜已经成熟且菌体个数达到2.56×107 CFU/cm2。用50 k Hz超声波,采用间歇式超声波处理方法(每作用30 s间隔30 s)作用总时间4 min在保持菌体活性的同时能达到最佳解离效果。     

2018年广州市水产品中创伤弧菌和河弧菌检测分析

目的 了解为期一年的监测中广州市水产品创伤弧菌和河弧菌污染水平、菌株携带毒力基因和分子分型情况。方法 对广州市水产品中创伤弧菌和河弧菌进行分离鉴定,毒力基因鉴定和肠道细菌基因间重复序列聚合酶链式反应(Eric-PCR)。结果 创伤弧菌阳性率为10.4%(31/298),河弧菌为5.0%(15/298);用PCR法检测创伤弧菌毒力溶血素基因vvhA全部阳性,vcgC/E和16S rRNA A/B分型结果显示,共有CB型、EA型和CA型3种基因型别。河弧菌毒力相关基因vfh、toxR全部阳性,hupO携带率为60.0%(9/15)、vfp携带率为80.0%(12/15);Eric-PCR扩增出8～14条100～2 000 bp之间的条带,将15株河弧菌在相似系数为0.8处分为5个群11个类型。结论 广州市水产品中创伤弧菌和河弧菌污染情况较严重,大部分菌株携带毒力基因,Eric-PCR结果显示15株河弧菌在亲缘关系上具有相关性,应加强防控。     

鲜切雷竹笋冷藏过程中木质化机理的研究

研究鲜切雷竹笋在4℃冷藏条件下苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活力及丙二醛(MDA)、多酚、木质素含量的变化规律,探讨其木质化机理。结果显示：在冷藏过程中,PAL、POD活力、MDA含量呈先上升,后下降的趋势;PPO活力在前6d缓慢上升,第15天开始下降;多酚含量在冷藏前6d急剧下降,后缓慢上升,第12天又开始下降;木质素含量不断增加,基部为5%～26%,中部为3%～24%,尖部为2%～22%。结果表明：在冷藏期内,PAL、POD活力大幅度增加,是导致鲜切雷竹笋木质化的关键酶;酚类物质作为木质素合成的前体物质,参与木质素的合成;MDA可能参与鲜切雷竹笋的木质化进程,但需进一步验证;木质素含量从基部向尖部逐渐降低,木质化进程是从基部向尖部推进的。     

2008~2017年间北京进出口水产品中副溶血性弧菌耐药性分析

目的 了解北京进出口水产品中副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus, VP)的耐药情况。方法 对2008~2017年间北京进出口水产品中分离出的320株副溶血性弧菌应用药敏纸片扩散法(K-B法)进行21种常用抗生素药敏测试。结果 89.1%的实验菌株同时对氨苄西林耐药, 而对环丙沙星、诺氟沙星、庆大霉素、多粘菌素B、亚胺培南全部敏感; 分别有高达94.7%和82.1%的菌株对红霉素和链霉素表现为中介。结论 实验菌株存在大量中介耐药和异质性耐药的情况, 应进一步加强水产品中副溶血性弧菌耐药性的监测工作, 以期指导临床和水产养殖中抗生素的使用。     

珠江三角洲地区副溶血性弧菌遗传多样性和致病性相关研究

副溶血性弧菌(Vibiro parahaemolyticus)是一种常见的食源性致病菌,本文研究了珠江三角洲地区副溶血性弧菌的遗传多样性。从54株副溶血性弧菌出发,研究了它们的API20E生化反应、抗生素耐药性、O抗原血清型,进行了ERIC-PCR分子分型,并检测了两种毒力基因tdh和trh的分布。54株副溶血性弧菌可被分为6个生化反应类群,主要类群为Biochem-A;菌株对萘啶酮酸、环丙沙星、氯霉素均不耐药,而对氨苄青霉素耐药率最高,耐药率0.88;O抗原血清型分别为O1、O2、O3、O4、O5、O6、O8、O10、O11,O2为主要血清型,O3为临床主要血清型;ERIC-PCR分子分型将54株菌分成47个型别,ERIC-PCR图谱相似性大于0.80的类群有12个,没有明显的优势类群;有12株副溶血性弧菌为tdh阳性,阳性率为0.22,其中10株为临床来源菌株;有2株副溶血性弧菌为trh阳性,阳性率为0.04,均为食品分离株。珠三角地区食品和临床来源的副溶血性弧菌具有丰富的遗传多样性。     

冷等离子体对果蔬冷库微生物群落的影响

以0℃果蔬冷库中的空气为研究对象,采用高通量测序技术分析了冷等离子体处理对果蔬冷库细菌和真菌微生物群落组成与多样性的影响,构建了微生物共生网络.结果表明:冷等离子体循环处理30 d后,冷库空气中细菌和真菌总数量由480 CFU/m3降为了44 CFU/m3,细菌和真菌群落的α多样性也显著降低;主坐标分析和多元方差分析表...     

不同保鲜膜包装蟠桃在冷藏和常温货架期间品质的变化

该研究采取不同保鲜膜对蟠桃进行包装,研究其冷藏和常温货架的保鲜效果。以北京平谷蟠桃为试材,采用CK组和3个处理组,CK组为普通保鲜膜,处理组分别为防雾膜、PE膜、PLA膜,每10 d测量一次,在此基础上进行3 d常温货架实验,分析其感官品质、硬度、生理指标、营养物质的变化。结果表明,3个处理组的保鲜膜均具有气调作用,40 d时,CK组的O2含量最高,为20.53%,CO2含量最低,为0.21%,防雾膜组O2含量为19.90%,CO2含量为0.93%,PE膜组O2含量为20.33%,CO2含量为0.63%,PLA膜组O2含量为20.10%,CO2含量为0.98%,在冷藏期和常温货架期内,腐烂指数和褐变指数呈上升趋势,CK组最先出现腐烂和褐变现象,且腐烂指数和褐变指数均为最高,PLA膜处理组感官品质最优,与CK组相比较,其它3组处理均可以延缓果实衰老,减少果实营养物质损失,通过SPSS分析,综合得分CK组<防雾膜组相似文献