榆耳主要活性成分及其生物学功能研究进展

榆耳（Gloeostereum incarnatum,GI）是一种富含多种营养物质和活性成分的食药用真菌,其子实体和发酵产物具有高效的抗菌、抗炎、抗氧化、增强机体免疫力、抑制肿瘤等作用。榆耳提取物含有多糖、倍半萜类化合物和生物碱类、黄酮类、氨基酸等多种具有生物学活性的成分,其中多糖和倍半萜类化合物的生物活性最为显著,也是多种天然药物现代药理研究中最为重要的活性成分。该文对榆耳的主要活性成分及其生物学功能的研究进展进行综述,为榆耳主要活性成分的深入研究和开发利用提供参考。     

采用均匀设计法优化榆耳液态发酵培养基的研究

考察了摇瓶发酵培养中碳源、氮源、无机盐等因素对榆耳发酵生物量和发酵液抑菌活性的影响,通过均匀设计实验对培养基进行了优化。结果表明,在接种量为10%(v/v)、28℃、160 r/min培养8 d的条件下,当培养基组成为蔗糖0.1%、玉米淀粉5.0%、麸皮2.3%、脱脂蛋白粉3.4%、KH_2PO_4 0.35%、MgSO_4 0.23%、V_(B1)微量时,摇瓶发酵生物量可达16.1 g/L;当培养基组成为蔗糖4.5%、玉米淀粉5.0%、麸皮0.1%、脱脂蛋白粉0.1%、KH_2PO_4 0.35%、MgSO_4 0.23%、V_(B1)微量时,发酵液抑菌活性最强,分别相当干490 u/mL青霉素钾、3%苯甲酸钠的抑菌效果。     

榆耳液态发酵培养的优化及多糖的抑菌活性

对榆耳进行液态发酵培养条件的优化,并考察榆耳多糖的抑菌活性.采用响应面中心复合设计方案,确定了麦芽糖(X1)、豆粕(X9及维生素B6(X3)的加入量,运用二阶多项式回归模型进行响应值预测,并进行试验验证.结果表明,榆耳液态培养最优条件为麦芽糖12.96g/L,豆粕11.68g/L,维生素B6 159mg/L,配合无机盐的条件下榆耳菌丝体湿重为11.27g/100mL.多元二次回归模型为:Y=10.50+0.75X1+0.63X2+ 0.20X3+0.044X1X2-0.075X1X3+ 0.088X2X3-0.51X12-0.79X22-0.55X32,因变量的总变化中有92.57％可以由回归曲线解释.利用杯碟法考察榆耳多糖的抑菌活性,结果显示,榆耳胞内和胞外多糖对福氏志贺氏菌、枯草芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌及产气杆菌有较强的抑制效果.以上结果说明,利用麦芽糖、豆粕、维生素B6配合无机盐可获得较高产量的榆耳菌丝体,其胞内多糖和胞外多糖均有一定的抑菌作用.     

榆耳发酵培养基及发酵条件的优化

系统考察了培养基成分及发酵条件对榆耳JX2010菌株液体发酵生物量和发酵液抑菌活性的影响.培养基单因素筛选试验结果表明,玉米淀粉和黄豆粉为最适碳源和氮源;采用均匀设计法对培养基组成优化结果表明,最佳的培养基配方为4.6％玉米淀粉、1.6％黄豆粉、0.03％硫酸镁、0.03％磷酸二氢钾、0.01％磷酸氢二钾、0.001％硫酸锌、0.001％硫酸锰及0.1g/L维生素B1;以此优化的培养基对培养条件研究的结果表明,在10％接种量、20％摇瓶装液量、培养基初始pH5.5的条件下发酵培养时间7d时,发酵效果最好,发酵生物量达到(14.98±0.74) g/L,抑菌直径达到(16.7±0.5)mm.     

10种真菌深层发酵液抑菌活性分析

以灵芝等10种真菌液体发酵液为研究对象,采用管碟法对发酵液进行抑菌作用试验,以抗生素(氯霉素)为参比,结果表明不同真菌发酵液对细菌具有不同的抑菌效果,同种真菌发酵液对不同细菌具有不同的抑菌效果。金针菇、紫芝、雷丸等真菌发酵液对大肠杆菌等革兰氏阴性菌有较强抑菌效果;赤芝的抑菌效果较低。紫芝和茶树菇真菌发酵液对金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌有较强抑菌效果;北虫草的抑菌效果不明显。     

榆耳发酵液多糖对小鼠免疫功能的影响

为了探讨榆耳发酵液多糖对小鼠免疫功能的影响,用1、5和20mg/d的发酵液多糖饲喂小鼠后,测定了脾脏指数、血清溶血素水平、巨噬细胞吞噬率、T淋巴细胞转化率及CD4+/CD8+比值。结果表明,与水对照组相比,低、中、高三个剂量对脾脏指数均无影响;低剂量组可显著提高巨噬细胞吞噬率（p<0.01）和T淋巴细胞转化率（p<0.05）;中、高剂量组对血清溶血素水平、巨噬细胞吞噬率、T淋巴细胞转化率及CD4+/CD8+比值等四项免疫指标有显著（p<0.05）或极显著（p<0.01）增高。说明榆耳发酵上清液多糖对小鼠具有良好的免疫增强功效。      

酸杨桃发酵液抑菌活性及稳定性研究

采用牛津杯法测定酸杨桃发酵液的抑菌活性,同时以原液稀释液为样本,确定其最小抑菌浓度,并对酸杨桃发酵液中的抑菌活性物质的稳定性进行初步研究。结果表明:酸杨桃发酵液对李斯特菌、大肠杆菌、大肠杆菌O157、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌都有良好的抑菌作用,抑菌圈直径分别为20.06、23.49、25.19、22.50、21.56 mm。最小抑菌浓度分别为酸杨桃发酵液原液9～15倍稀释液。酸杨桃发酵液随pH值升高,抑菌活性逐渐降低,调至pH6时抑菌活性消失,温度及蛋白酶对酸杨桃发酵液的抑菌稳定性没有显著影响,可以推断酸杨桃发酵液中的抑菌活性物质可能是一类耐高温的非蛋白类的酸性物质。因此,酸杨桃发酵液可开发利用为用于酸性环境的具有良好耐热性的非蛋白类天然防腐剂。     

核酸发酵液抑菌成分的分离提取

对核酸发酵液的抗菌活性进行了初步研究 ,发现核酸发酵液有一定抗菌活性。将发酵液在 pH 7条件下浓缩后调节到酸性 ,用石油醚萃取 ,分离出一种不易溶于冷水 ,易溶于乙醇、石油醚及碱溶液的结晶 ,该结晶的抗菌活性比发酵原液提高 3 4倍。     

红檵木叶中抑菌活性成分的初步研究

本研究以红檵木叶为材料,对其抑菌活性成分进行提取,将提取液用不同溶剂分步萃取;以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和痢疾杆菌为供试菌种,进行抑菌实验;对抑菌活性较强的萃取液进行薄层层析分离,摸索最佳展开剂,并对薄层层析分离所得抑菌活性成分进行抑菌实验和化学检识,以研究红檵木叶中抑菌活性成分的种类。结果表明:乙酸乙酯为最佳萃取溶剂;氯仿:丙酮:甲酸:水(60:35:5:2)为最佳展开剂;红檵木叶中所含抑菌活性成分主要为鞣质类和香豆素类。     

榆耳菌丝体多糖的体外抗氧化活性研究

利用乙醇分级沉淀法获得50%醇沉榆耳多糖、70%醇沉榆耳多糖及85%醇沉榆耳多糖,比较其抗氧化能力。结果表明:85%醇沉榆耳多糖的还原能力及对DPPH·的清除作用最强。0.5mg/mL85%醇沉榆耳多糖对DPPH·的清除率达到83.0%,IC50=29.94μg/mL。0.3mg/mL70%醇沉榆耳多糖对OH·的清除率达到84.3%,IC50=0.124mg/mL。榆耳菌丝体多糖清除超氧阴离子效果不理想,清除率仅为8.6%。榆耳菌丝体多糖具有较高的抗氧化活性。     

蛹拟青霉发酵液中抑菌活性成分的分离纯化

以大肠杆菌、白色假丝酵母、黑曲霉为指示菌株,对蛹拟青霉xzcs005菌株液体发酵液乙酸乙酯萃取相中的抑菌活性成分进行分离纯化。乙酸乙酯萃取相经硅胶柱色谱分离后得到组分Ⅴ和组分Ⅶ两个抑菌活性组分。组分Ⅴ利用反相柱分离得到抑菌活性纯品PMBA-1,其在质量浓度为1.0mg/mL时对大肠杆菌、白色假丝酵母和黑曲霉的抑菌圈直径分别为(16.21±0.27)、(23.54±0.35)、(27.33±0.54)mm;组分Ⅶ再次经过硅胶柱色谱分离后得到抑菌活性纯品PMBA-2,其在质量浓度为1.0mg/mL时对大肠杆菌、白色假丝酵母和黑曲霉的抑菌圈直径分别为(21.84±0.28)、(16.33±0.54)、(11.54±0.51)mm。     

灵芝——松茸混菌共酵对胞外活性多糖积累的影响因素研究

通过液体摇瓶正交试验研究了灵芝---松茸混菌共酵对胞外活性多糖积累的影响因素及其相关性,优选出最佳培养基配方、接种量、共酵温度、pH、通气量、共酵时间等参数,为研制功能饮料中以胞外活性多糖积累为目的物的工业化生产最佳共酵工艺条件的制定奠定了基础。     

金针菇发酵液的溶栓作用研究

目的：探讨金针菇发酵液的溶栓作用。方法：在体外检测金针菇发酵液水解纤维蛋白的能力和对兔血凝块溶解时间;观察金针菇发酵液对昆明种小鼠体内出血、凝血时间的影响;采用高脂血症小鼠模型,观察对血脂水平的影响。结果：金针菇发酵液可水解纤维蛋白,明显延长小鼠凝血时间及出血时间,明显降低高脂血症小鼠总甘油三酯和总胆固醇含量。结论：金针菇发酵液具有溶栓作用,其机制可能与其抗凝、降脂作用以及水解纤维蛋白作用有关。     

榆干离褶伞发酵液的溶栓与降血脂作用

研究了榆干离褶伞(Lyophyllum ulmarium,L.u)发酵液的体外溶栓作用和降血脂作用。将血凝块与L.u发酵液37℃恒温孵育,测定血凝块溶解时间;观察给予L.u发酵液后对小鼠体内出、凝血时间的影响;采用高脂血症动物模型,观察L.u发酵液对血脂水平的影响。结果显示,L.u发酵液明显延长凝血时间及出血时间,明显降低高脂血症小鼠总甘油三酯和总胆固醇含量。可以证明,L.u发酵液具有溶栓作用,其机制可能与其抗凝作用和降血脂作用有关。     

精制杂木木醋液成分分析及其抑菌活性研究

精制杂木木醋液,探讨木醋液成分和再处理后的抑菌活性。通过静置、活性炭吸附相结合法精制杂木木醋液。采用GC-MS(气相色谱-质谱联用仪)技术对精制木醋液进行成分分析。利用滤纸片法测定精制木醋液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的有效抑菌时间。对精制木醋液进行调pH值、稀释、减压蒸馏、萃取等处理,探讨不同处理方法后木醋液抑制细菌活性的效果。研究结果表明:木醋液对于细菌的有效抑菌时间为24 h;木醋液中的酸性物质影响其抑菌能力;木醋液对细菌的最低抑菌浓度为V精制木醋液:V灭菌水=1:20;60 ℃减压蒸馏抑菌效果最优;萃取木醋液的萃取剂抑菌效果排序为:萃取层>精制木醋液>水层,乙酸乙酯是木醋液的最佳萃取剂。杂木精制木醋液成分主要有酸类、酚类、酮类和醇类等,具有抑菌活性,且再处理后的抑菌活性显著,是一种潜在的生物防腐剂。     

古尼拟青霉小孢变种的主要有效成分分析

对古尼拟青霉小孢变种RCEF0864的深层发酵产物进行了有效成分分析,结果表明,菌丝体和发酵液中氨基酸总量明显高于冬虫夏草生药;菌丝体中粗蛋白、总糖、麦角甾醇、甘露醇及腺苷等多种物质的含量亦高于冬虫夏草生药;RCEF0864深层发酵菌丝体和发酵液中均含有丰富的对人体健康非常重要的Zn、Fe、Ca等元素,尤以Ca的含量最高;用二苯代苦味肼基自由基(DPPH)-TLC法和酶标仪法对RCEF0864菌丝体和发酵液冻干粉甲醇提取物中的清除自由基活性物质进行了分析,发现2种提取物均具有较强的清除自由基活性,在浓度为5.0 mg/mL,37℃下保温10 min时,2种提取物对0.4 mg/mL的DPPH自由基的清除率分别为53.86%和59.66%。     

Mucor sp. JX23发酵液生物催化肉桂酸降解生成苯乙酮

对以Mucor sp. JX23发酵液生物催化肉桂酸降解生成苯乙酮的反应进行了研究。考察了肉桂酸浓度、反应体系pH值、反应温度和反应时间对反应的影响。结果表明:以Mucor sp.JX23为催化剂的反应具有高转化率和高选择性。在肉桂酸浓度为5.0g/L,反应体系pH=6.0,反应温度28-30℃,反应时间2d的条件下,肉桂酸的转化率为89.2%,苯乙酮的产量达3.1g/L,没有发现其他副产物。